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CHO-K1
Cell line · Product number 603480
CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...
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01General information
- Description
CHO-K1 细胞是从 CHO 细胞系中衍生出来的一个亚系，而 CHO 细胞系最初是在 20 世纪 50 年代初从中国仓鼠卵巢中培育出来的。CHO-K1 细胞被广泛用于生产治疗性单克隆抗体和其他生物制药。CHO-K1 细胞之所以被广泛用于生物制药蛋白质的生产和疫苗接种，是因为它们具有真核细胞的特性，可以进行适当的折叠、组装和翻译后修饰（如糖基化），从而影响所生产蛋白质的稳定性、有效性和安全性。
在重组蛋白质生产领域，CHO-K1 细胞系可用于表达各种蛋白质，包括单克隆抗体、生长因子、细胞因子和酶。这些蛋白质可用于治疗、诊断检测和疫苗制剂。
CHO-K1 细胞生长速度快，能适应各种培养条件，包括悬浮培养和粘附培养，因此在大规模生物生产过程中具有很高的价值。CHO-K1 细胞具有高度的遗传稳定性，可有效扩增和表达外源基因，这对于生产高产量的重组蛋白质至关重要，因此可用于稳定细胞系的开发。
CHO-K1 中国仓鼠细胞可以很容易地转染各种载体进行基因表达，促进基因编辑或基因敲除。这种灵活性使研究人员能够在 CHO-K1 宿主细胞中引入特定基因、沉默基因，甚至使用 CRISPR-Cas9 等技术进行靶向基因编辑。
总之，中国仓鼠 CHO-K1 细胞和 CHO 细胞在生物技术研究和生物制药生产中举足轻重，为研究基因功能和大规模生产重组蛋白提供了一个多功能平台。
- Tissue
- 卵巢
- Applications
- 这种细胞系是毒理学、工业生物技术和生物生产的最佳选择。
- Synonyms
- CHO K1
- CHOK1
- CHO cell clone K1
- GM15452
02Classification
- Organism
- Chinese hamster
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Karyotype
- 染色体频率分布 50 个细胞：2n = 22。干系数为低二倍体
- Doubling time
- 22 小时
04Identifiers
- Citation
- CHO-K1（Cytion 目录号 603480）
- NCBI TaxID
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_0214
05Expression and susceptibility
- Virus susceptibility
- 水泡性口炎（印第安纳）、Getah 病毒 抗病毒物：脊髓灰质炎病毒 2、莫多克病毒、扣柳病毒
- Reverse transcriptase
- 阴性
06Handling and culture
- Culture medium
- Ham's F12，w：1.0 mM 稳定谷氨酰胺，w：1.0 mM 丙酮酸钠，w：1.1 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820600a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Seeding density
- 1×10⁴个细胞/平方厘米将在约6天内形成融合细胞层。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解冻后，将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中，使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 成人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Disclaimer
- 我们提供的细胞仅用于体外实验室研究目的，不用于临床或诊断用途，也不得用于人类或兽医目的。用户必须遵守在研究环境中处理和使用这些细胞的所有适用准则和法规。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
