CHO-CTLA4
Cell line · Product number 305414
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01General information
- Description
免责声明：所显示的细胞系价格仅适用于学术/非营利客户。对于商业机构，价格约为 6,250 欧元
。如果您代表商业机构，或不确定自己属于哪一类，请 联系我们。CHO-CTLA4细胞系是一种稳定的重组CHO（中国仓鼠卵巢）细胞系，经工程改造后可表达中低水平的CTLA4受体，每细胞约3,000个分子。该细胞系采用创新的“着陆点”技术构建，该技术可促进CTLA4基因在特定且经过预验证的基因组位点上进行靶向整合。 CTLA4（又称 CD152）是一种关键的免疫检查点蛋白，主要存在于 T 细胞上。其作用机制是与 CD28 竞争结合抗原呈递细胞表面的 B7 分子（CD80 和 CD86），从而导致 T 细胞活化的下调。这一机制对于维持免疫自容忍和预防自身免疫至关重要。 CTLA4在调节免疫应答中的作用使其成为癌症免疫疗法的重要靶点，特别是在免疫检查点阻断策略中。
通过流式细胞术证实了该细胞系中CXCR7的表达。
- Tissue
- 卵巢
- Disease
- 中国仓鼠卵巢细胞，非肿瘤性；经基因工程改造，可在细胞表面表达CTLA-4
- Applications
- 抗体筛选；CTLA-4靶向免疫疗法研发；免疫检查点抑制剂研究；流式细胞术；药物发现
02Classification
- Organism
- Chinese hamster
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent and suspension
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This CHO derivative contains a CTLA-4 expression construct enabling checkpoint receptor studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Cell type
- 上皮细胞
- Doubling time
- 约14-16小时
04Identifiers
- Citation
- CHO-CTLA4（Cytion 目录号 305414）
- NCBI TaxID
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_A8V8
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- CTLA4 (CD152)
06Handling and culture
- Culture medium
用于粘附培养：DMEM:Ham's F12 (1:1)，w: 3.1 g/L 葡萄糖，w: 2.5 mM L-谷氨酰胺，w: 15 mM HEPES，w: 0.5 mM 丙酮酸钠，w: 1.2 g/L NaHCO3（Cytion 商品编号 820400a）。
用于悬浮培养：CHO 生长培养基 A（来自 InSCREENeX；InSCREENeX 目录编号 INS-ME-1039）
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 用于粘附培养：在培养基中添加 5% FBS。加入基因素（G418-硫酸酯），使最终浓度达到 0.5 mg/mL。
- Dissociation reagent
- 用于粘附培养：胰蛋白酶-EDTA
- Subculturing
- 用于常规粘附细胞培养：吸出粘附细胞中的旧培养基，并用 PBS 冲洗以去除残留的培养基。吸出 PBS 后，根据培养皿大小加入适量的胰蛋白酶/EDTA 溶液（如 T25 烧瓶 1 毫升，T75 烧瓶 3 毫升），室温或 37°C 孵育 5-10 分钟，直至细胞分离。在显微镜下观察细胞分离情况，必要时轻轻拍打容器以释放细胞。细胞分离后，加入完全培养基以灭活胰蛋白酶/EDTA，轻轻重悬细胞，然后将等分的细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新培养皿中。将培养皿放入温度为 37°C、二氧化碳浓度为 5%的培养箱中，每 2-3 天更换一次培养基。
- Split ratio
- 1 到 5
- Seeding density
- 2至5×10⁴个细胞/平方厘米
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
解冻后，按 1:2 至 1:3 的比例将细胞分装在 T25 烧瓶中，让细胞从冷冻过程中恢复并粘附（对于粘附培养物）至少 24 小时。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 成人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Third-party agreements apply
- Yes
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