Премини към съдържанието
CHO-CTLA4
Тъкан
Яйчник
Заболяване
Яйчници на китайски хамстер, ненеопластични; генетично модифицирани за повърхностна експресия на CTLA-4

Документи

CHO-CTLA4

Cell line · Номер на продукта 305414

Забележка: Показаните цени за клетъчните линии са предназначени изключително за академични/нестопански клиенти. За търговски субекти цените...

€1,900.00без ДДС и доставка
Изработва се по поръчка
1

01Обща информация

Описание

Забележка: Посочените цени за клетъчните линии са валидни единствено за академични/нестопански клиенти. За търговски субекти цената е приблизително 6 250 евро.
Ако представлявате търговски субект или не сте сигурни в коя категория попадате, моля свържете се с нас.


Клетъчната линия CHO-CTLA4 е стабилна рекомбинантна клетъчна линия CHO (Chinese Hamster Ovary), създадена да експресира рецептора CTLA4 на средно-ниско ниво, приблизително 3000 молекули на клетка. Тази клетъчна линия е създадена с помощта на иновативна технология за „кацане“, която улеснява целевата интеграция на гена CTLA4 в специфичен, предварително валидиран геномни локус. CTLA4, известен също като CD152, е критичен имунен контролен пункт, който се намира предимно върху Т-клетките. Той функционира, като се конкурира с CD28 за свързване с B7 молекули (CD80 и CD86) върху антиген-представящите клетки, което води до потискане на активацията на Т-клетките. Този механизъм е жизненоважен за поддържането на имунната самотолерантност и предотвратяването на автоимунитета. Ролята на CTLA4 в модулирането на имунните реакции го е превърнала в значима мишена в имунотерапията на рака, особено в стратегиите за блокиране на имунните контролни точки.

Експресията на CXCR7 в тази клетъчна линия беше потвърдена чрез проточна цитометрия.

Тъкан
Яйчник
Заболяване
Яйчници на китайски хамстер, ненеопластични; генетично модифицирани за повърхностна експресия на CTLA-4
Приложения
Скрининг за антитела; разработване на имунотерапия, насочена към CTLA-4; изследвания в областта на инхибиторите на контролните точки; проточна цитометрия; откриване на лекарства

02Класификация

Организъм
Китайски хамстер
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Адхезивен и суспензионен
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This CHO derivative contains a CTLA-4 expression construct enabling checkpoint receptor studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителни клетки
Време за удвояване
около 14–16 часа

04Идентификатори

Източник
CHO-CTLA4 (каталожен номер 305414 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10029
Целозавър
CVCL_A8V8

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
CTLA4 (CD152)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда

За адхезивни култури: DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)

За суспензионни култури: CHO Growth Medium A (от InSCREENeX; каталожен номер INS-ME-1039 на InSCREENeX)

Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
За адхезивни култури: Допълнете средата с 5% FBS. Добавете Geneticin (G418-Sulfat), за да достигнете крайна концентрация от 0,5 mg/ml.
Реагент за дисоциация
За адхезивни култури: Трипсин-EDTA
Пресаждане
За рутинни адхезивни клетъчни култури: Аспирирайте старата хранителна среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, за да отстраните останалата среда. След като аспирирате PBS, добавете подходящия обем разтвор на трипсин/EDTA в зависимост от размера на съда за култивиране (напр. 1 ml за колба Т25, 3 ml за колба Т75) и инкубирайте при стайна температура или 37 °C за 5-10 минути или докато клетките се отделят. Наблюдавайте отделянето под микроскоп и ако е необходимо, леко потупайте съда, за да освободите клетките. След отделянето им добавете пълна среда, за да инактивирате трипсина/EDTA, внимателно ресуспендирайте клетките и прехвърлете аликвотна част от клетъчната суспензия в нов съд за култивиране, съдържащ прясна среда. Поставете съда в инкубатор, настроен на 37 °C с 5 %CO2, и сменяйте средата на всеки 2-3 дни.
Коефициент на разделяне
от 1 до 5
Плътност на засяването
2 до 5 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване

След размразяването разделете клетките в съотношение 1:2 до 1:3 в колби Т25 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да залепнат (за залепнали култури) за най-малко 24 часа.

Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Възрастни

Може да ви е необходимо също