Μετάβαση στο περιεχόμενο
CHO-CTLA4
Ιστός
Ωοθήκη
Ασθένεια
Ωοθήκη κινέζικου χάμστερ, μη νεοπλασματική· γενετικά τροποποιημένη για επιφανειακή έκφραση του CTLA-4

Έγγραφα

CHO-CTLA4

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305414

Δήλωση αποποίησης ευθύνης: Οι τιμές που εμφανίζονται για τις κυτταρικές σειρές αφορούν αποκλειστικά πελάτες του ακαδημαϊκού τομέα ή μη κερδοσκοπικού χαρακτήρα. Για εμπορικές οντότητες, οι τιμές...

€1,900.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Κατασκευάζεται κατόπιν παραγγελίας
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Σημείωση: Οι τιμές που εμφανίζονται για τις κυτταρικές σειρές ισχύουν αποκλειστικά για πελάτες του ακαδημαϊκού τομέα ή μη κερδοσκοπικού χαρακτήρα. Για εμπορικές οντότητες, η τιμή ανέρχεται σε περίπου 6.250 €.
Εάν εκπροσωπείτε εμπορική οντότητα ή δεν είστε σίγουροι για την κατηγορία στην οποία ανήκετε, παρακαλούμε επικοινωνήστε μαζί μας.


Η κυτταρική σειρά CHO-CTLA4 είναι μια σταθερή ανασυνδυασμένη κυτταρική σειρά CHO (Chinese Hamster Ovary) που έχει σχεδιαστεί για να εκφράζει τον υποδοχέα CTLA4 σε μέτριο-χαμηλό επίπεδο, περίπου 3.000 μόρια ανά κύτταρο. Αυτή η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε χρησιμοποιώντας μια καινοτόμο τεχνολογία «landing pad» που διευκολύνει την στοχευμένη ενσωμάτωση του γονιδίου CTLA4 σε έναν συγκεκριμένο, προ-επικυρωμένο γονιδιωματικό τόπο. Το CTLA4, επίσης γνωστό ως CD152, είναι μια κρίσιμη πρωτεΐνη ανοσολογικού σημείου ελέγχου που βρίσκεται κυρίως στα Τ-κύτταρα. Λειτουργεί ανταγωνιζόμενο το CD28 για τη σύνδεση με μόρια B7 (CD80 και CD86) σε κύτταρα που παρουσιάζουν αντιγόνο, οδηγώντας στην καταστολή της ενεργοποίησης των Τ-κυττάρων. Αυτός ο μηχανισμός είναι ζωτικής σημασίας για τη διατήρηση της ανοσολογικής αυτοανοχής και την πρόληψη της αυτοανοσίας. Ο ρόλος του CTLA4 στη ρύθμιση των ανοσολογικών αποκρίσεων το έχει καταστήσει σημαντικό στόχο στην ανοσοθεραπεία του καρκίνου, ιδίως στις στρατηγικές αποκλεισμού των ανοσολογικών σημείων ελέγχου.

Η έκφραση του CXCR7 σε αυτή την κυτταρική σειρά επιβεβαιώθηκε με τη χρήση κυτταρομετρίας ροής.

Ιστός
Ωοθήκη
Ασθένεια
Ωοθήκη κινέζικου χάμστερ, μη νεοπλασματική· γενετικά τροποποιημένη για επιφανειακή έκφραση του CTLA-4
Εφαρμογές
Διαγνωστικός έλεγχος αντισωμάτων· ανάπτυξη ανοσοθεραπείας με στόχο το CTLA-4· έρευνα σχετικά με τους αναστολείς σημείων ελέγχου· κυτταρομετρία ροής· ανακάλυψη φαρμάκων

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Κινέζικο χάμστερ
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Σε επαφή με την επιφάνεια και σε εναιώρημα
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This CHO derivative contains a CTLA-4 expression construct enabling checkpoint receptor studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Τύπος κυττάρου
Επιθηλιακά κύτταρα
Χρόνος διπλασιασμού
περίπου 14-16 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
CHO-CTLA4 (αριθμός καταλόγου Cytion 305414)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10029
Κελλοσαύρος
CVCL_A8V8

05Έκφραση και ευαισθησία

Υποδοχείς που εκφράζονται
CTLA4 (CD152)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο

Για προσκολλημένες καλλιέργειες: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)

Για καλλιέργειες εναιωρήματος: CHO Growth Medium A (από την InSCREENeX- αριθμός καταλόγου της InSCREENeX INS-ME-1039)

Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Για προσκολλημένες καλλιέργειες: Συμπληρώστε το μέσο με 5% FBS. Προσθέστε Geneticin (G418-Sulfat) για να επιτευχθεί τελική συγκέντρωση 0,5 mg/ml.
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Για προσκολλημένες καλλιέργειες: Τρυψίνη-EDTA
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Για συνήθη καλλιέργεια προσκολλημένων κυττάρων: Αναρροφήστε το παλιό μέσο καλλιέργειας από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS για να απομακρύνετε τυχόν εναπομείναν μέσο. Αφού αναρροφήσετε το PBS, προσθέστε τον κατάλληλο όγκο διαλύματος Trypsin/EDTA με βάση το μέγεθος του δοχείου καλλιέργειας (π.χ. 1 ml για φιάλη T25, 3 ml για φιάλη T75) και επωάστε σε θερμοκρασία δωματίου ή 37°C για 5-10 λεπτά ή μέχρι να αποκολληθούν τα κύτταρα. Παρακολουθήστε την αποκόλληση στο μικροσκόπιο και χτυπήστε απαλά το δοχείο εάν είναι απαραίτητο για να απελευθερώσετε τα κύτταρα. Αφού αποκολληθούν, προσθέστε πλήρες μέσο για να αδρανοποιήσετε την Τρυψίνη/EDTA, ανασυσσωματώστε απαλά τα κύτταρα και μεταφέρετε μια εκατοστιαία ποσότητα του εναιωρήματος των κυττάρων σε ένα νέο δοχείο καλλιέργειας που περιέχει φρέσκο μέσο. Τοποθετήστε το δοχείο σε επωαστήρα ρυθμισμένο στους 37°C με 5%CO2 και αλλάζετε το μέσο κάθε 2-3 ημέρες.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 5
Πυκνότητα σποράς
2 έως 5 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη

Μετά την απόψυξη, χωρίστε τα κύτταρα σε αναλογία 1:2 έως 1:3 σε φιάλες Τ25 και αφήστε τα κύτταρα να ανακάμψουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν (για προσκολλημένες καλλιέργειες) για τουλάχιστον 24 ώρες.

Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Ενηλίκων

Ίσως χρειαστείτε επίσης