Μετάβαση στο περιεχόμενο
CHO
Ιστός
Ωοθήκη
Συνώνυμα
Chinese Hamster Ovary, CHO-ori

Έγγραφα

CHO

Cell line · Αριθμός προϊόντος 603479

Chinese hamster ovary (CHO) cells are a cornerstone in the field of biotechnology and are heavily utilized in the process of CHO cell line development for...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα ωοθήκης κινέζικου χάμστερ (CHO) αποτελούν ακρογωνιαίο λίθο στον τομέα της βιοτεχνολογίας και χρησιμοποιούνται σε μεγάλο βαθμό στη διαδικασία ανάπτυξης κυτταρικών σειρών CHO για την παρασκευή βιοφαρμακευτικών προϊόντων. Σε αυτά περιλαμβάνονται τα μονοκλωνικά αντισώματα, η έκφραση ανασυνδυασμένων αντισωμάτων και τα εμβόλια. Τα πολλά πλεονεκτήματα των κυττάρων CHO υπογραμμίζουν τη δημοτικότητά τους στη βιοπαραγωγή, τοποθετώντας τα ως μια ισχυρή και ευέλικτη ζωική κυτταρική σειρά με αποδεδειγμένο ιστορικό στη γενετική, τη μοριακή βιολογία, τον έλεγχο τοξικότητας, τη διατροφή και τις μελέτες γονιδιακής έκφρασης.

Η συμβολή των κυττάρων CHO στη βιοφαρμακευτική βιομηχανία είναι τεράστια, με το ρόλο τους στην ανάπτυξη ανασυνδυασμένων αντισωμάτων και στην παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων να είναι ιδιαίτερα σημαντικός. Σχεδόν 50 βιοθεραπείες που αναπτύχθηκαν με τη χρήση αυτών των κυττάρων έχουν εγκριθεί στις ΗΠΑ και την ΕΕ, γεγονός που αποδεικνύει την αποτελεσματικότητα των κυττάρων CHO και τον αναπόσπαστο ρόλο τους στην ανάπτυξη αντισωμάτων. Η προέλευσή τους από χάμστερ συμβάλλει στη χαμηλότερη ευαισθησία σε ιούς, ενισχύοντας τη βιοασφάλεια σε περιβάλλοντα βιοπαραγωγής και μειώνοντας τις διακυμάνσεις από παρτίδα σε παρτίδα.

Τα κύτταρα CHO είναι κατάλληλα για την παραγωγή πρωτεϊνών που υφίστανται μετα-μεταφραστικές τροποποιήσεις, κάτι που είναι κρίσιμο για την παραγωγή θεραπευτικών πρωτεϊνών. Η ευελιξία των κυττάρων που προέρχονται από την ωοθήκη κινεζικού χάμστερ αναδεικνύεται περαιτέρω από τους γρήγορους ρυθμούς πολλαπλασιασμού τους και τους υψηλούς ρυθμούς έκφρασης πρωτεϊνών 1-5 γραμμάρια ανά λίτρο καλλιέργειας. Η ευκολία καλλιέργειας των κυττάρων CHO και η ικανότητά τους να τροποποιούνται γενετικά καθιστούν τα κύτταρα CHO βέλτιστη επιλογή τόσο για μελέτες παροδικής όσο και σταθερής έκφρασης.

Η κυτταρική σειρά CHO-K1, παράγωγο των αρχικών κυττάρων ωοθήκης κινεζικού χάμστερ (CHO), χρησιμοποιείται συχνά για την έκφραση ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών, ιδίως για την παραγωγή θεραπευτικών πρωτεϊνών και ανασυνδυασμένων αντισωμάτων. Υπερέχουν στην παραγωγή θεραπευτικών πρωτεϊνών και αντισωμάτων λόγω της αποτελεσματικής μετα-μεταφραστικής τροποποίησης, ιδίως της γλυκοζυλίωσης. Οι ερευνητές τροποποιούν τα κύτταρα CHO-K1 για να ενισχύσουν την έκφραση των πρωτεϊνών και να προσαρμόσουν τη γλυκοζυλίωση για συγκεκριμένες θεραπείες, ζωτικής σημασίας στη βιοϊατρική.

Συμπερασματικά, η κυτταρική σειρά ωοθηκών κινεζικού χάμστερ, γνωστή για την αξιοσημείωτη ικανότητά της να μιμείται τις ανθρώπινες μετα-μεταφραστικές τροποποιήσεις, αποτελεί ανεκτίμητη επιστημονική πηγή. Είτε ξεπερνώντας τη δυσκολία έκφρασης δύσκολων πρωτεϊνών είτε την παραγωγή μονοκλωνικών αντισωμάτων, τα κύτταρα CHO έχουν φέρει επανάσταση στην ανάπτυξη και παραγωγή ανασυνδυασμένων πρωτεϊνικών θεραπευτικών ουσιών. Παραμένουν κομβικής σημασίας στη σύγχρονη ιατρική, χρησιμεύοντας ως ακρογωνιαίος λίθος για τη βιοφαρμακευτική παραγωγή και αντικατοπτρίζοντας τις εξελίξεις στη βιοτεχνολογία.

Ιστός
Ωοθήκη
Εφαρμογές
Αυτή η κυτταρική σειρά αποτελεί βέλτιστη επιλογή για την τοξικολογία, τη βιομηχανική βιοτεχνολογία και τη βιοπαραγωγή.
Συνώνυμα
  • Chinese Hamster Ovary
  • CHO-ori

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Κινέζικο χάμστερ
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
CHO (αριθμός καταλόγου Cytion 603479)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10029
Κελλοσαύρος
CVCL_0213

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
Ham's F12, w: 1,0 mM σταθερή γλουταμίνη, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,1 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820600a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
3 x 104 κύτταρα/cm2 θα αποδώσουν ένα συνεκτικό στρώμα σε περίπου 4 ημέρες.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Ενηλίκων

Ίσως χρειαστείτε επίσης