Mine otse sisu juurde
CHO
Kude
Munasarjad
Sünonüümid
Chinese Hamster Ovary, CHO-ori

Dokumendid

CHO

Cell line · Toote number 603479

Chinese hamster ovary (CHO) cells are a cornerstone in the field of biotechnology and are heavily utilized in the process of CHO cell line development for...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Hiina hamstermunarakkude (CHO) rakud on biotehnoloogia valdkonna nurgakivi ja neid kasutatakse laialdaselt CHO rakuliinide väljatöötamise protsessis biofarmatseutiliste ravimite tootmiseks. Nende hulka kuuluvad monoklonaalsed antikehad, rekombinantsete antikehade ekspressioon ja vaktsiinid. CHO-rakkude paljud eelised rõhutavad nende populaarsust biotootmises, positsioneerides neid kui tugevat ja mitmekülgset loomset rakuliini, millel on tõestatud edu geneetikas, molekulaarbioloogias, toksilisuse skriiningus, toitumises ja geeniekspressiooni uuringutes.

CHO-rakkude panus biofarmatseutilises tööstuses on tohutu, eriti oluline on nende roll rekombinantsete antikehade ja monoklonaalsete antikehade tootmisel. USAs ja ELis on heaks kiidetud ligi 50 nende rakkude abil väljatöötatud bioteraapiat, mis näitab CHO-rakkude tõhusust ja nende olulist rolli antikehade arendamisel. Nende hamstri päritolu aitab kaasa väiksemale vastuvõtlikkusele viirustele, suurendades bioloogilist ohutust biotootmises ja vähendades partiide vahelist varieeruvust.

CHO rakud sobivad hästi translatsioonijärgselt modifitseeritud valkude tootmiseks, mis on terapeutiliste valkude tootmisel kriitilise tähtsusega. Hiina Hamsteri munarakkude mitmekülgsust rõhutavad ka nende kiire paljunemiskiirus ja kõrge valkude ekspressioonikiirus (1-5 grammi liitri kultuuri kohta). CHO rakkude kasvatamise lihtsus ja nende geneetiline modifitseeritavus teeb CHO rakud optimaalseks valikuks nii mööduvate kui ka stabiilsete ekspressiooniuuringute jaoks.

CHO-K1 rakuliini, mis on Hiina hamstermunarakkude (CHO) derivaat, kasutatakse sageli rekombinantsete valkude ekspresseerimiseks, eriti terapeutiliste valkude ja rekombinantsete antikehade tootmiseks. Nad paistavad silma terapeutiliste valkude ja antikehade tootmisel tänu tõhusale posttranslatiivsele modifikatsioonile, eelkõige glükosüleerimisele. Teadlased modifitseerivad CHO-K1 rakke, et suurendada valkude ekspressiooni ja kohandada glükosüülimist konkreetsete ravimeetodite jaoks, mis on biomeditsiinis ülioluline.

Kokkuvõttes on Hiina hamstri munarakuliin, mis on tuntud oma tähelepanuväärse võime poolest jäljendada inimese translatsioonijärgseid modifikatsioone, hindamatu teaduslik ressurss. Olenemata sellest, kas CHO-rakud on ületanud raskusi keeruliste valkude ekspresseerimisel või monoklonaalsete antikehade tootmisel, on CHO-rakud muutnud rekombinantsete valkudega seotud ravimite väljatöötamise ja tootmise revolutsiooniliseks. Nad on tänapäeva meditsiinis jätkuvalt kesksel kohal, olles biofarmatseutilise tootmise nurgakiviks ja peegeldades biotehnoloogia arengut.

Kude
Munasarjad
Rakendused
See rakuliin on optimaalne valik toksikoloogia, tööstusliku biotehnoloogia ja biotootmise jaoks.
Sünonüümid
  • Chinese Hamster Ovary
  • CHO-ori

02Klassifikatsioon

Organism
Hiina hamster
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
CHO (Cytioni katalooginumber 603479)
NCBI maksukood
10029
Cellosaurus
CVCL_0213

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilne glutamiin, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820600a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
3 x 104 rakku/cm2 moodustavad umbes 4 päeva jooksul konfluentse kihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud

Võib-olla on teil vaja ka