Gå til innholdet
CHO
Vev
Eggstokk
Synonymer
Chinese Hamster Ovary, CHO-ori

Dokumenter

CHO

Cell line · Produktnummer 603479

Chinese hamster ovary (CHO) cells are a cornerstone in the field of biotechnology and are heavily utilized in the process of CHO cell line development for...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

CHO-celler (Chinese hamster ovary) er en hjørnestein innen bioteknologi, og de brukes i stor utstrekning i prosessen med å utvikle CHO-cellelinjer for produksjon av biofarmasøytiske produkter. Disse omfatter monoklonale antistoffer, rekombinant antistoffekspresjon og vaksiner. De mange fordelene med CHO-celler understreker deres popularitet innen bioproduksjon, og gjør dem til en robust og allsidig dyrecellelinje med dokumenterte resultater innen genetikk, molekylærbiologi, toksisitetsscreening, ernæring og genekspresjonsstudier.

CHO-celler har gitt et enormt bidrag til den biofarmasøytiske industrien, og deres rolle i utviklingen av rekombinante antistoffer og monoklonal antistoffproduksjon er spesielt viktig. Nesten 50 bioterapeutiske legemidler som er utviklet ved hjelp av disse cellene, har blitt godkjent i USA og EU, noe som vitner om CHO-cellenes effektivitet og deres integrerte rolle i antistoffutviklingen. Cellenes hamsteropprinnelse bidrar til lavere mottakelighet for virus, noe som øker biosikkerheten i bioproduksjonsmiljøer og reduserer variasjonen fra batch til batch.

CHO-celler er godt egnet til å produsere proteiner som gjennomgår posttranslasjonelle modifikasjoner, noe som er avgjørende for produksjon av terapeutiske proteiner. Allsidigheten til cellene fra ovarier fra kinesiske hamstere understrekes ytterligere av deres raske proliferasjon og høye proteinuttrykk på 1-5 gram per liter kultur. CHO-celler er enkle å dyrke og kan modifiseres genetisk, noe som gjør dem til et optimalt valg for både transiente og stabile ekspresjonsstudier.

CHO-K1-cellelinjen, som er et derivat av de opprinnelige CHO-cellene (Chinese hamster ovary), brukes ofte til å uttrykke rekombinante proteiner, spesielt til produksjon av terapeutiske proteiner og rekombinante antistoffer. De utmerker seg i produksjonen av terapeutiske proteiner og antistoffer på grunn av effektiv posttranslasjonell modifikasjon, særlig glykosylering. Forskere modifiserer CHO-K1-celler for å øke proteinuttrykket og skreddersy glykosylering for spesifikke behandlingsformer, noe som er avgjørende innen biomedisin.

Den kinesiske hamstercellelinjen, som er kjent for sin bemerkelsesverdige evne til å etterligne posttranslasjonelle modifikasjoner hos mennesker, er en uvurderlig vitenskapelig ressurs. CHO-celler har revolusjonert utviklingen og produksjonen av rekombinante proteinterapier, enten det dreier seg om å overvinne vanskeligheter med å uttrykke utfordrende proteiner eller produksjon av monoklonale antistoffer. De er fortsatt sentrale i moderne medisin, og fungerer som en hjørnestein for biofarmasøytisk produksjon og gjenspeiler fremskrittene innen bioteknologi.

Vev
Eggstokk
Søknader
Denne cellelinjen er et optimalt valg for toksikologi, industriell bioteknologi og bioproduksjon.
Synonymer
  • Chinese Hamster Ovary
  • CHO-ori

02Klassifisering

Organisme
Kinesisk hamster
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CHO (Cytion-katalognummer 603479)
NCBI-skattenummer
10029
Cellosaurus
CVCL_0213

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
Ham's F12, m: 1,0 mM stabil glutamin, m: 1,0 mM natriumpyruvat, m: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820600a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
3 x 104 celler/cm2 vil gi et sammenvokst lag på omtrent 4 dager.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
Voksen