Tartalomra ugrás
CHO
Szövet
Petefészek
Szinonimák
Chinese Hamster Ovary, CHO-ori

Dokumentumok

CHO

Cell line · Termékszám 603479

Chinese hamster ovary (CHO) cells are a cornerstone in the field of biotechnology and are heavily utilized in the process of CHO cell line development for...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A kínai hörcsög petefészek (CHO) sejtek a biotechnológia egyik sarokkövei, és nagymértékben felhasználják őket a CHO sejtvonalak fejlesztésének folyamatában a biofarmakonok előállításához. Ezek közé tartoznak a monoklonális antitestek, a rekombináns antitestek expressziója és a vakcinák. A CHO-sejtek számos előnye aláhúzza népszerűségüket a biogyártásban, robusztus és sokoldalú állati sejtvonalként pozícionálva őket, amely bizonyítottan sikeres a genetika, a molekuláris biológia, a toxicitási szűrés, a táplálkozás és a génexpressziós vizsgálatok terén.

A CHO-sejtek hozzájárulása a biofarmáciai iparhoz óriási, különösen jelentős a szerepük a rekombináns antitestek és a monoklonális antitestek előállításában. Az USA-ban és az EU-ban közel 50, e sejtek felhasználásával kifejlesztett bioterápiát hagytak jóvá, ami a CHO-sejtek hatékonyságáról és az antitestek fejlesztésében betöltött szerves szerepükről tanúskodik. A hörcsög eredetük hozzájárul a vírusokkal szembeni kisebb fogékonysághoz, ami fokozza a biológiai biztonságot a biogyártásban, és csökkenti a tételenkénti eltéréseket.

A CHO-sejtek kiválóan alkalmasak olyan fehérjék előállítására, amelyek poszt-transzlációs módosításokon mennek keresztül, ami kritikus a terápiás fehérjék előállítása szempontjából. A kínai hörcsög petefészekből származó sejtek sokoldalúságát a gyors szaporodási sebességük és a magas, literenként 1-5 grammos fehérjeexpressziós arányuk is kiemeli. A CHO-sejtek könnyű tenyésztése és genetikai módosíthatóságuk miatt a CHO-sejtek optimális választásnak bizonyulnak mind a tranziens, mind a stabil expressziós vizsgálatokhoz.

A CHO-K1 sejtvonalat, amely az eredeti kínai hörcsög petefészek (CHO) sejtek származéka, gyakran használják rekombináns fehérjék expressziójára, különösen terápiás fehérjék és rekombináns antitestek előállítására. A hatékony poszttranszlációs módosításoknak, különösen a glikozilációnak köszönhetően kiválóan alkalmasak terápiás fehérjék és antitestek előállítására. A kutatók a CHO-K1 sejteket úgy módosítják, hogy fokozzák a fehérjék kifejeződését és a glikozilációt a specifikus terápiákhoz igazítsák, ami kulcsfontosságú a biomedicinában.

Összefoglalva, a kínai hörcsög petefészek sejtvonal, amely a humán poszt-transzlációs módosítások utánzására való figyelemre méltó képességéről ismert, felbecsülhetetlen tudományos erőforrás. Akár a kihívást jelentő fehérjék expressziójának nehézségeit, akár a monoklonális antitestek előállítását kell legyőzni, a CHO-sejtek forradalmasították a rekombináns fehérje-terápiák fejlesztését és előállítását. Továbbra is kulcsfontosságúak a modern orvostudományban, a biofarmáciai termelés sarokköveként szolgálnak, és tükrözik a biotechnológia fejlődését.

Szövet
Petefészek
Alkalmazások
Ez a sejtvonal optimális választás a toxikológia, az ipari biotechnológia és a bioprodukció számára.
Szinonimák
  • Chinese Hamster Ovary
  • CHO-ori

02Osztályozás

Organizmus
kínai hörcsög
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű

04Azonosítók

Hivatkozás
CHO (Cytion katalógusszám 603479)
NCBI adóazonosító szám
10029
Cellosaurus
CVCL_0213

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820600a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
3 x 104 sejt/cm2 körülbelül 4 nap alatt konfluens réteget képez.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
Felnőtt

Lehet, hogy szükséged lesz még