Ir al contenido
CHO-CTLA4
Pañuelo de papel
Ovario
Enfermedad
Ovario de hámster chino, no neoplásico; modificado genéticamente para la expresión de CTLA-4 en la superficie

Documentos

CHO-CTLA4

Cell line · Número de producto 305414

Aviso legal: Los precios que se muestran para las líneas celulares son exclusivamente para clientes del ámbito académico o sin ánimo de lucro. Para las entidades comerciales, el pre...

€1,900.00sin impuestos ni gastos de envío
Hecho por encargo
1

01Información general

Descripción

Aviso legal: Los precios que se muestran para las líneas celulares son exclusivamente para clientes del ámbito académico o sin ánimo de lucro. Para entidades comerciales, el precio es de aproximadamente 6.250 €.
Si representa a una entidad comercial o no está seguro de a qué categoría pertenece, póngase en contacto con nosotros.


La línea celular CHO-CTLA4 es una línea celular CHO (ovario de hámster chino) recombinante estable, diseñada para expresar el receptor CTLA4 a un nivel medio-bajo, de aproximadamente 3.000 moléculas por célula. Esta línea celular se creó utilizando una innovadora tecnología de «plataforma de aterrizaje» que facilita la integración dirigida del gen CTLA4 en un locus genómico específico y previamente validado. CTLA4, también conocido como CD152, es una proteína de punto de control inmunitario fundamental que se encuentra principalmente en las células T. Su función consiste en competir con CD28 por la unión a las moléculas B7 (CD80 y CD86) en las células presentadoras de antígenos, lo que conduce a la regulación a la baja de la activación de las células T. Este mecanismo es vital para mantener la autotolerancia inmunitaria y prevenir la autoinmunidad. El papel de CTLA4 en la modulación de las respuestas inmunitarias lo ha convertido en un objetivo importante en la inmunoterapia contra el cáncer, especialmente en las estrategias de bloqueo de puntos de control inmunológicos.

La expresión de CXCR7 en esta línea celular se confirmó mediante citometría de flujo.

Pañuelo de papel
Ovario
Enfermedad
Ovario de hámster chino, no neoplásico; modificado genéticamente para la expresión de CTLA-4 en la superficie
Aplicaciones
Cribado de anticuerpos; desarrollo de inmunoterapias dirigidas contra el CTLA-4; investigación sobre inhibidores de puntos de control; citometría de flujo; descubrimiento de fármacos

02Clasificación

Organismo
Hámster chino
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente y en suspensión
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This CHO derivative contains a CTLA-4 expression construct enabling checkpoint receptor studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliales
Tiempo de duplicación
aprox. 14-16 horas

04Identificadores

Referencia
CHO-CTLA4 (número de catálogo de Cytion 305414)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_A8V8

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
CTLA4 (CD152)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo

Para cultivos adherentes: DMEM:F12 de Ham (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)

Para cultivos en suspensión: CHO Growth Medium A (de InSCREENeX; número de catálogo de InSCREENeX INS-ME-1039)

Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Para cultivos adherentes: Suplementar el medio con un 5% de FBS. Añadir Geneticina (G418-Sulfat) hasta alcanzar una concentración final de 0,5 mg/mL.
Reactivo de disociación
Para cultivos adherentes: Tripsina-EDTA
Subcultivo
Para el cultivo rutinario de células adherentes: Aspirar el medio de cultivo antiguo de las células adherentes y lavarlas con PBS para eliminar cualquier resto de medio. Después de aspirar el PBS, añadir el volumen apropiado de solución de tripsina/EDTA en función del tamaño del recipiente de cultivo (por ejemplo, 1 ml para un matraz T25, 3 ml para un matraz T75) e incubar a temperatura ambiente o 37°C durante 5-10 minutos, o hasta que las células se desprendan. Controlar el desprendimiento al microscopio y, si es necesario, golpear suavemente el recipiente para liberar las células. Una vez desprendidas, añadir medio completo para inactivar la tripsina/EDTA, resuspender suavemente las células y transferir una alícuota de la suspensión celular a un nuevo recipiente de cultivo que contenga medio fresco. Colocar el recipiente en una incubadora a 37°C con un 5% deCO2 y cambiar el medio cada 2-3 días.
Relación de división
Del 1 al 5
Densidad de siembra
De 2 a 5 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación

Tras la descongelación, dividir las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en matraces T25 y dejar que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran (para cultivos adherentes) durante al menos 24 horas.

Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Adultos