Skip to content
Hep-56.1D
Tissue
כבד
Disease
קרצינומה הפטוצלולרית
Synonyms
HEP-56.1D, 56.1D, 56.1d

Documents

Hep-56.1D

Cell line · Product number 400204

The Hep-56.1D hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by a no...

US$650.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו תאי הכבד Hep-56.1D נגזר מגידול בכבד עכבר, באופן ספציפי מזן העכברים C57BL/6J. קו תאים זה מאופיין במוטציה בולטת בגן p53, שזוהתה במעברים שונים במהלך התרבות במבחנה. באופן ספציפי, Hep-56.1D מציג טרנסוורסיה מ-C:G ל-G:C בקודון 132 של אקסון 5, מה שמביא לשינוי בחומצת אמינו מסיסטאין לטריפטופן. מוטציה זו זוהתה במעבר מספר 17, מה שמרמז על יתרון גדילה סלקטיבי המוענק על ידי המוטציה, מה שמביא לדומיננטיות שלה באוכלוסיית התאים.

קו התאים Hep-56.1D מציג מורפולוגיה אפיתלית בעיקר, המשקפת את מקורו ההפטוציטי. הדבר עולה בקנה אחד עם פרופיל חלבוני הסיבים הבינוניים שלו, הכולל את הקרטין הפשוט K8 ו-K18, וכן וימנטין וקרטין K19 בדרגות שונות. נוכחותם של חלבונים אלה מאשרת את האופי ההפטוציטי של קו התאים ואת סיווגו כקו הפטומה.

ניתוח נוסף של Hep-56.1D באמצעות טביעת אצבעות DNA לא גילה כל חריגות מבניות משמעותיות, אם כי נצפו שינויים מסוימים בעוצמות היחסיות של פסים ספציפיים עם עליית מספר המעברים. הדבר מעיד על יציבות גנומית עם מידה מסוימת של שונות לאורך תקופות תרבית ממושכות. ניתוח המוטציה p53 ודפוסי הביטוי של חלבון הסיבים הבינוניים יחד קובעים את Hep-56.1D כמודל חשוב לחקר קרצינומה הפטוצלולרית ותפקידן של מוטציות p53 בגידול גידולים בכבד.

Tissue
כבד
Disease
קרצינומה הפטוצלולרית
Synonyms
  • HEP-56.1D
  • 56.1D
  • 56.1d

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברי C57BL/6J. בשבוע השלישי יתפתחו גידולים בקוטר של כ-5-6 מ"מ.
Ploidy status
אנאופלואידי
Doubling time
25 עד 30 שעות

04Identifiers

Citation
Hep-56.1D (מספר קטלוגי Cytion 400204)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5769

05Expression and susceptibility

Protein expression
קרטין 8, קרטין 18, וימנטין.
Mutational profile
P53mut, C:G -+ G:C טרנסוורסיה בקודון 132 של אקסון 5 של p53 בעכבר, המתאימה לשינוי חומצת אמינו מסיסטאין לטריפטופן.

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 עד 2 x 104 תאים/סמ"ר במהלך תרבית שגרתית
Fluid renewal
כל 3 עד 4 ימים
Post-thaw recovery
>90% מהתאים התאוששו מתהליך ההקפאה תוך 24 עד 48 שעות
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6J
Donor age
מבוגר