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Hep-56.1D
Tissue
肝脏
Disease
肝细胞癌
Synonyms
HEP-56.1D, 56.1D, 56.1d

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Hep-56.1D

Cell line · Product number 400204

The Hep-56.1D hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by a no...

US$650.00excl. tax and shipping
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  • CoA
1

01General information

Description

Hep-56.1D 肝瘤细胞系来源于小鼠肝脏肿瘤，特别是 C57BL/6J 小鼠品系。该细胞系的特点是在体外繁殖的不同阶段发现了 p53 基因的显著突变。具体来说，Hep-56.1D 在外显子 5 的密码子 132 处出现了 C:G 到 G:C 的转换，导致氨基酸从半胱氨酸变为色氨酸。这种突变在第 17 代时被检测到，这表明该突变具有选择性生长优势，导致其在细胞群中占主导地位。

Hep-56.1D 细胞系主要呈上皮细胞形态，反映了其肝细胞来源。这与其中间丝蛋白特征一致，其中包括简单角蛋白 K8 和 K18，以及不同程度的波形蛋白和角蛋白 K19。这些蛋白的存在证实了该细胞系的肝细胞性质，并将其归类为肝癌细胞系。

使用 DNA 指纹图谱对 Hep-56.1D 进行进一步分析后发现，虽然随着细胞通过数的增加，特定条带的相对强度发生了一些变化，但并没有发现任何重大的结构异常。这表明基因组在长时间培养后具有一定程度的稳定性和可变性。p53 突变分析和中间丝蛋白表达模式共同确立了 Hep-56.1D 作为研究肝细胞癌和 p53 突变在肝脏肿瘤发生中的作用的宝贵模型的地位。

Tissue
肝脏
Disease
肝细胞癌
Synonyms
  • HEP-56.1D
  • 56.1D
  • 56.1d

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮样
Tumourigenic
是的，在 C57BL/6J 小鼠中。第三周会出现直径约为 5-6 毫米的肿瘤。
Ploidy status
非整倍体
Doubling time
25 至 30 小时

04Identifiers

Citation
Hep-56.1D（Cytion 目录编号 400204）
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_5769

05Expression and susceptibility

Protein expression
角蛋白 8、角蛋白 18 和波形蛋白。
Mutational profile
P53mut，小鼠 p53 第 5 外显子 132 密码子处的 C:G -+ G:C 转换，对应于从半胱氨酸到色氨酸的氨基酸变化。

06Handling and culture

Culture medium
DMEM，w：4.5 克/升葡萄糖，w：4 毫摩尔 L-谷氨酰胺，w：3.7 克/升 NaHCO3，w：1.0 毫摩尔丙酮酸钠（Cytion 编号 820300a）。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 10% FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
Seeding density
常规培养期间为1至2×10⁴个细胞/平方厘米
Fluid renewal
每 3 至 4 天
Post-thaw recovery
>超过 90% 的细胞在 24 至 48 小时内从冷冻过程中恢复过来
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6J
Donor age
成人