Hep-56.1D

Dòng tế bào ung thư gan Hep-56.1D được phân lập từ một khối u gan của chuột, cụ thể là từ dòng chuột C57BL/6J. Dòng tế bào này có đặc điểm là mang một đột biến đáng chú ý trong gen p53, được phát hiện ở các thế hệ khác nhau trong quá trình nuôi cấy in vitro. Cụ thể, Hep-56.1D có sự chuyển đổi C:G thành G:C tại codon 132 của exon 5, dẫn đến sự thay đổi axit amin từ cysteine sang tryptophan. Đột biến này được phát hiện ở lần truyền thứ 17, cho thấy lợi thế tăng trưởng chọn lọc do đột biến mang lại, dẫn đến sự chiếm ưu thế của nó trong quần thể tế bào.

Dòng tế bào Hep-56.1D có hình thái chủ yếu là biểu mô, phản ánh nguồn gốc tế bào gan của nó. Điều này phù hợp với hồ sơ protein sợi trung gian của nó, bao gồm các keratin đơn giản K8 và K18, cũng như vimentin và keratin K19 ở các mức độ khác nhau. Sự hiện diện của các protein này xác nhận bản chất tế bào gan của dòng tế bào và phân loại nó là dòng tế bào ung thư gan.

Phân tích thêm về Hep-56.1D bằng phương pháp in dấu vân tay DNA không phát hiện ra bất kỳ bất thường cấu trúc lớn nào, mặc dù một số thay đổi về cường độ tương đối của các dải cụ thể được quan sát thấy khi số lần truyền tăng lên. Điều này cho thấy tính ổn định của bộ gen với một mức độ biến đổi nhất định trong thời gian nuôi cấy kéo dài. Phân tích đột biến p53 và mô hình biểu hiện protein sợi trung gian cùng nhau xác lập Hep-56.1D là một mô hình quý giá để nghiên cứu ung thư tế bào gan và vai trò của đột biến p53 trong quá trình hình thành khối u gan.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.