01General information
- Description
קו התאים NRK, שמקורו בכליה של Rattus norvegicus (חולדה), הוא כלי חשוב ביותר במחקר ביולוגי. תאים אלה בעלי מורפולוגיה אפיתלית, כלומר הם יוצרים שכבות המכסות את פני השטח של האיברים ומגנות עליהם מפני חומרים זרים.
תאים אפיתל, כמו תאי NRK, מציגים מאפיינים ספציפיים. הם מכילים כמות נדיבה של ציטופלסמה ומכילים גרנולות רבות. תאים אלה משרתים פונקציות גופניות שונות, כאשר חלקם משמשים כסוכני ספיגה או הגנה, בעוד שאחרים משמשים בעיקר כתאים מפרישים.במקרה של הכליות, תאי האפיתל ממלאים תפקיד מכריע באחסון ובהפרשה של חומרים מופרשים. עובדה זו הופכת את קו התאים NRK למתאים במיוחד לחקר הפיזיולוגיה הכלייתית. באמצעות תאים אלה, חוקרים יכולים לחקור את התהליכים המורכבים הכרוכים בתפקוד הכליות ולהשיג תובנות לגבי היבטים שונים של הפיזיולוגיה הכלייתית.
יתר על כן, קו התאים NRK אינו מוגבל לחקר הפיזיולוגיה של הכליות בלבד. תאים רב-תכליתיים אלה יכולים לשמש גם במחקר הסרטן. המורפולוגיה האפיתלית שלהם ומקורם בכליה רגילה של חולדה הופכים אותם למודל מצוין לחקר התנהגותם ומאפייניהם של תאי סרטן בסביבה מבוקרת.
אחת היישומים המנצלים את התכונות הייחודיות של תאי NRK היא תרבות תאים תלת-ממדית. טכניקה זו כוללת גידול תאים במטריצה תלת-ממדית המדמה את הסביבה התאית הטבעית בצורה מדויקת יותר מאשר תרבות דו-ממדית מסורתית. תאי NRK ניתנים לגידול באופן זה, מה שמאפשר לחוקרים ליצור מודלים רקמתיים מורכבים הדומים מאוד למבנה הטבעי של הכליה. הדבר מקל על חקר התנהגות התאים, האינטראקציות ביניהם והתגובות שלהם בהקשר פיזיולוגי רלוונטי יותר.
קו התאים NRK הוא משאב יקר ערך במחקר ביולוגי, במיוחד בתחום הסרטן ופיזיולוגיה של הכליות. תאים אפיתל אלה, שמקורם בכליות של חולדה ממוצעת, מאפשרים לחוקרים לחקור לעומק את המורכבות של תפקוד הכליות ולחקור תאים סרטניים בסביבה מבוקרת במעבדה. בזכות היישום שלהם בתרבית תאים תלת-ממדית, תאי NRK מאפשרים יצירת מודלים רקמתיים מציאותיים לצורך מחקרים מקיפים על התנהגות ותגובות תאיות.- Tissue
- כליה
- Synonyms
- Normal Rat Kidney
02Classification
- Organism
- Rat
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- אפיתל
04Identifiers
- Citation
- NRK (מספר קטלוג Cytion 305195)
- NCBI TaxID
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_3758
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Breed / subspecies
- אוסבורן-מנדל
- Donor age
- מבוגר
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
