Mine otse sisu juurde
NRK
Kude
Neerud
Sünonüümid
Normal Rat Kidney

Dokumendid

NRK

Cell line · Toote number 305195

The NRK cell line, derived from a Rattus norvegicus (rat) kidney, is an invaluable tool in biological research. These cells possess an epithelial morpholo...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Rattus norvegicus'e (roti) neerudest saadud NRK rakuliin on hindamatu väärtusega vahend bioloogilistes uuringutes. Neil rakkudel on epiteeli morfoloogia, mis tähendab, et nad moodustavad organite pindu katvaid ja võõraste ainete eest kaitsvaid plaate.
Epiteelirakkudel, nagu NRK rakkudel, on spetsiifilised omadused. Neil on rohkesti tsütoplasmat ja nad sisaldavad arvukalt graanuleid. Need rakud täidavad mitmesuguseid kehafunktsioone, kusjuures mõned neist toimivad absorbeerivate või kaitsvate, teised aga peamiselt sekretoriliste rakkudena.

Neerude puhul mängivad epiteelirakud olulist rolli erituvate ainete ladustamisel ja hilisemal sekretsioonil. See muudab NRK rakuliini eriti sobivaks neerufüsioloogia uurimiseks. Neid rakke kasutades saavad teadlased uurida neerufunktsiooniga seotud keerulisi protsesse ja saada ülevaate neerufüsioloogia erinevatest aspektidest.

Lisaks sellele ei ole NRK rakuliin piiratud ainult neerufüsioloogia uurimisega. Neid mitmekülgseid rakke saab kasutada ka vähiuuringutes. Nende epiteeli morfoloogia ja päritolu normaalsest roti neerust teevad neist suurepärase mudeli vähirakkude käitumise ja omaduste uurimiseks kontrollitud keskkonnas.

Üks rakendus, mis kasutab NRK rakkude ainulaadseid omadusi, on 3D rakukultuur. See meetod hõlmab rakkude kasvatamist kolmemõõtmelises maatriksis, mis jäljendab loomulikku rakukeskkonda paremini kui traditsiooniline kahemõõtmeline kultuur. NRK rakke saab sel viisil kasvatada, mis võimaldab teadlastel luua keerulisi koemudeleid, mis sarnanevad väga täpselt neeru loomulikule struktuurile. See hõlbustab rakkude käitumise, interaktsioonide ja vastuste uurimist füsioloogiliselt asjakohasemas kontekstis.
NRK rakuliin on väärtuslik ressurss bioloogilistes uuringutes, eriti vähi ja neerufüsioloogia valdkonnas. Need epiteelirakud, mis on saadud keskmise roti neerust, pakuvad teadlastele võimalust uurida neerufunktsiooni keerukust ja uurida vähirakke kontrollitud laboratoorsetes tingimustes. NRK rakud võimaldavad tänu oma rakendatavusele 3D rakukultuuris luua realistlikke koemudeleid rakkude käitumise ja reaktsioonide põhjalikuks uurimiseks.

Kude
Neerud
Sünonüümid
  • Normal Rat Kidney

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
NRK (Cytioni katalooginumber 305195)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_3758

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
Osborne-Mendel
Doonori vanus
Täiskasvanud