קו התאים KG-1

מאפיינים כלליים ומקור קו התאים KG-1

מקורו ומאפייניו הכלליים של קו תאים מסייעים לחוקר להחליט על השימוש בו בעבודתו. ניתן לבדוק מידע זה לפני שמתחילים לעבוד עמו. חלק זה של המאמר עוסק כולו במקור ובמאפיינים של מקרופאגים מסוג KG-1. כאן תוכלו ללמוד: מהן תאי KG-1? מהו קו התאים KG-1a? מהו מקור קו התאים KG-1? מהי המורפולוגיה של KG-1?

• KG-1 הוא קו תאים דמוי לימפובלסט שמקורו בשאיבת מח עצם של גבר לבן (בן 59) הסובל מלוקמיה מיאלואידית חריפה. הקו הוקם על ידי Koeffler ו-Golde בשנת 1978. תאים אלה נמצאים בעיקר בשלב ההתבגרות של פרומיאלוציט או מיאלובלסט [1].
• לתאי KG-1 יש מורפולוגיה דמוית לימפובלסט.
• הקריוטיפ של קו התאים KG-1 מציג מספר כרומוזומים מודאלי פסאודו-דיפלואידי.

KG-1 ו-KG-1a

KG-1a הוא תת-קו של תאי KG-1 ההוריים. הוא פותח לאחר 35 מעברים של קו התאים KG-1. הוא פחות מובחן בהשוואה לקו התאים KG-1. יתרה מכך, תת-קו זה פחות בוגר מבחינה ציטוכימית, מורפולוגית ותפקודית בהשוואה לקו התאים ההורי (KG-1).

ניתוח בזמן אמת של תאי דם אדומים בדם אנושי תחת המיקרוסקופ במחקר מעבדה ביולוגי.

מידע על גידול קו התאים KG-1

חלק זה של המאמר יסקור את כל המידע החיוני על גידול תאי KG-1, אשר עשוי להקל על עבודתכם. כאן תלמדו: מהו זמן הכפלה של קו התאים KG-1? מהן תנאי הגידול של מקרופאגים מסוג KG-1? כיצד מגדלים תאי KG-1?

נקודות מרכזיות לגידול תאי KG-1

זמן הכפלה:

זמן הכפלה של KG-1 הוא כ-45 שעות. עם זאת, הוא עשוי להשתנות בהתאם לתנאי התרבית.

הדבקה או בתמיסה:

תאי KG-1 גדלים בתמיסה.

צפיפות תאים:

צפיפות התאים האופטימלית עבור קו התאים KG-1 היא בין 1 ל-3 x 10^⁵ תאים/מ"ל. לצורך תרבית משנה, מעבירים את תאי התרחיף למבחנה סטרילית ומבצעים צנטריפוגה. לאחר מכן, מוסיפים לתאים שנאספו מצע גידול טרי ומערבבים אותם בזהירות. לאחר מכן, התאים מועברים לצלחות חדשות ומגודלים בצפיפות תאים אופטימלית. ניתן לחלק את התאים כאשר הם מגיעים לצפיפות תאים מקסימלית של 1 - 2 x 10⁶ תאים/מ"ל.

מדיום גידול:

IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) המכיל 10% FBS, 4.5 גרם/ליטר גלוקוז, 4 מ"מ L-גלוטמין, 1.0 מ"מ פירובט נתרן ו-3.0 גרם/ליטר NaHCO3 משמש לגידול תאי KG-1. יש להחליף את התווך לאחר שלושה ימים.

תנאי גידול:

קו התאים KG1 AML מתורבת באינקובטור לח בטמפרטורה של 37°C ובאספקת CO₂ של 5%.

אחסון:

תאים קפואים נשמרים בשלב האדים של חנקן נוזלי או בטמפרטורה הנמוכה מ-150 °C במקפיא חשמלי בטמפרטורה נמוכה במיוחד, כדי לשמור על חיוניות התאים.

תהליך ההקפאה והמדיום:

CM-1 או CM-ACF מתאימים להקפאת תאי KG-1. התאים מוקפאים בתהליך הקפאה איטי כדי להגן עליהם מפני הלם. שיטה זו מאפשרת ירידה הדרגתית של 1 °C בטמפרטורה בכל דקה.

תהליך ההפשרה:

התאים מופשרים באמבט מים שחומם מראש לטמפרטורה של 37 °C, עד שנותר גוש קרח קטן. לתאים המופשרים מוסיפים את המדיום הטרי ומבצעים צנטריפוגה כדי להסיר את מרכיבי מדיום ההקפאה. משקע התאים מושעה מחדש בזהירות ומוזג לתוך צלוחיות חדשות המכילות מדיום גידול.

רמת בטיחות ביולוגית:

מעבדה ברמת בטיחות ביולוגית 1 היא חיונית לשמירה על תרבויות תאי KG-1.

 

תאי KG-1 המראים היווצרות אשכולות תאים קטנים בתרבית בתמיסה בהגדלה של 20x ו-10x.

פורסם: 2023 | נבדק לאחרונה: מאי 2026

קו התאים KG-1: יתרונות ומגבלות

כמו קווי תאים אחרים, גם לקו התאים KG-1 של לוקמיה מיאלואידית יש יתרונות ומגבלות רבים. בסעיף זה נלמד על כמה מהם הבולטים, שעשויים להיות מכריעים בהחלטה על השימוש בו במחקר שלכם.

יתרונות

היתרונות העיקריים של תאי KG-1 הם:

• קלות התרבית

  תאי KG-1 ניתנים לגידול בקלות במעבדות מחקר, הודות לדרישות גידול פשוטות. תנאי הגידול והתחזוקה הקלים שלהם מאפשרים נגישות למגוון רחב של חוקרים בעלי מתקני גידול תאים בסיסיים.

• מודל של לוקמיה מיאלואידית חריפה (AML)

  קו התאים KG-1 AML, שמקורו בחולה זכר הסובל מלוקמיה מיאלואידית חריפה (AML), משמש ככלי חשוב לחקר הביולוגיה של AML ולביצוע מחקרים על טיפולים פוטנציאליים, ומספק תובנות לגבי המנגנונים הבסיסיים של מחלה זו ואסטרטגיות הטיפול בה.

 מגבלות

המגבלות הקשורות לקו התאים KG1 הן:

• מודל במבחנה

  תאי KG-1 מהווים מודל in vitro חשוב למחקר על AML; עם זאת, חשוב לציין כי ייתכן שהם אינם משקפים באופן מלא את המורכבות של המחלה in vivo, ומשמשים כמודל תאי מפושט שאינו מכסה בהכרח את כל ההיבטים הביולוגיים של AML.

 

יישומים של תאי KG-1 במחקר

ל-KG-1 יש מספר יישומים מבטיחים במחקר הביו-רפואי. בין המחקרים החשובים שבהם נעשה שימוש במקרופאגים מסוג KG1 נכללים:

• מחקר הסרטן: תאי KG-1 נגזרו מחולה בלוקמיה מיאלואידית חריפה (AML) ולכן נחשבים לכלי מחקר חשוב לחקר הביולוגיה של AML. חוקרים משתמשים בתאים אלה כדי לחקור את המנגנונים התאיים והמולקולריים המניעים את התפתחות ה-AML, את צמיחתה ואת עמידותה לתרופות. תהליך זה כרוך גם בזיהוי ובגילוי סמנים ביולוגיים חדשים, מוטציות גנטיות ומסלולי איתות הקשורים ל-AML. לדוגמה, מחקר שנערך בשנת 2019 בדק כי ה-RNA הארוך הלא-מקודד linc00239 תורם לעמידות לדוקסורוביצין ולהתנהגות ממאירה בתאי לוקמיה מיאלואידית חריפה (KG-1). מחקר נוסף גילה כי ה-lncRNA מפעיל את מסלול האיתות PI3K/Akt/mTOR כדי להפעיל השפעות אלו בתאי AML [2].
• טוקסיקולוגיה: קו התאים KG1 נמצא בשימוש נרחב במחקר טוקסיקולוגי. חוקרים בודקים את הרעילות והיעילות של חומרים טיפוליים פוטנציאליים, לרבות תרופות כימותרפיות וטיפולים ממוקדים, על תאי לוקמיה מיאלואידית מסוג KG1, כדי לזהות מועמדים מבטיחים לתרופות לקראת הערכות פרה-קליניות וקליניות עתידיות. מחקר שנערך בשנת 2018 ניתח את הרעילות של ננו-ניוזומים המכילים דוקסורוביצין על קו התאים KG1 של לוקמיה מיאלואידית חריפה (AML). המחקר הציע כי ננו-ניוזום מהווה נשא מתאים להעברת תרופות, שכן הוא משפר את יעילות הטיפול [3]. במחקר אחר, החוקרים בחנו את ההשפעות הטיפוליות של תה סרפד שהוכן מעלי הצמח Urtica dioica. המחקר גילה שתמצית מימית זו של עלי הצמח מפעילה השפעות אנטי-גידוליות בתאי לוקמיה מיאלואידית חריפה, KG-1 ו-U937 [4].

פרסומים בנושא תאי KG-1

חלק זה של המאמר מפרט מספר פרסומים מחקריים מעניינים בנושא תאי KG-1.

קוורצטין מגביר את הרגישות של תאי KG-1 של לוקמיה מיאלואידית אנושית לאפופטוזיס המושרה על ידי TRAIL

מאמר זה פורסם בכתב העת Journal of Cellular Physiology (2019). המחקר הציע כי תרכובת הקוורצטין מגבירה את הרגישות של קו התאים KG1 של לוקמיה מיאלואידית חריפה (AML) כלפי הליגנד המשרה אפופטוזיס הקשור ל-TNF (TRAIL) ועשויה להגביר את השפעת הציטוטוקסיות המושרה על ידי TRAIL בתאים.

KLF8 מגביר את צמיחת תאי לוקמיה מיאלואידית חריפה ואת הגליקוליזה באמצעות מסלול AKT/mTOR

מאמר זה, שפורסם ב-Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022), הציע כי דיכוי של גורם השעתוק krüppel-like 8 מדכא את התרבות תאי ה-AML ואת הגליקוליזה, ומעורר אפופטוזיס באמצעות ויסות מסלול האיתות AKT/mTOR.

השפעות הסורפניב ותלת-חמצן הארסן על קווי התאים U937 ו-KG-1: אפופטוזיס או אוטופגיה?

מחקר זה, שפורסם ב-Cell Journal (Yakhteh) (2020), בחן את ההשפעות הפוטנציאליות של תלת-חמצן ארסן וסורפניב על תאי U937 ו-KG-1.

רגישות לוקמיה מיאלואידית חריפה למעכבי חילוף חומרים: הגליקוליזה הוכחה כיעד טיפולי טוב יותר

מחקר זה, שפורסם בכתב העת Medical Oncology (2020), העריך את ה-OXPHOS והגליקוליזה כיעדים טיפוליים בקו התאים של לוקמיה מיאלואידית חריפה (AML), KG-1.

כורכומין בשילוב עם תלידומיד מפחית את הביטוי של STAT3 ו-Bcl-xL, מה שמוביל לאפופטוזיס בקווי תאים של לוקמיה מיאלואידית חריפה

פרסום זה בכתב העת "Drug Design, Development, and Therapy" משנת 2020 הציע כי תרכובות כורכומין ותלידומיד מפעילות באופן סינרגטי השפעות אפופטוטיות בתאי KG-1 באמצעות הפחתת הביטוי של STAT3 ו-Bcl-xL.

6. משאבים עבור קו התאים KG-1: פרוטוקולים, סרטונים ועוד

להלן מספר משאבים מקוונים הזמינים בנושא תאי KG-1.

• התרבות משנה של תאים בתמיסה: סרטון זה מתאר את הפרוטוקול להפקת תרבית משנה של תרבויות תאים בתמיסה כגון KG-1.

הקישור הבא מכיל את הפרוטוקול לגידול תאי KG-1:

• קו התאים KG-1: אתר זה מכיל מידע בסיסי רב על תרבית תאים בקו התאים KG-1. הוא כולל מידע על מצעי גידול לקו התאים ופרוטוקולים לריבוי ולטיפול בתרבויות שהוקפאו ובתרבויות מתרבות.

מקורות

1. Pelliccia, F., V. Ubertini, ו-N. Bosco, חשיבותו של ניתוח ציטוגנטי מולקולרי לפני השימוש בקווי תאים במחקר: המקרה של קו התאים הלוקמי KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): עמ' 237-240.
2. Yang, Y., et al., ה-RNA הארוך הלא-מקודד linc00239 מקדם התנהגויות ממאירות ועמידות לכימותרפיה כנגד דוקסורוביצין, בין השאר באמצעות הפעלת מסלול ה-PI3K/Akt/mTOR בתאי לוקמיה מיאלואידית חריפה. Oncology Reports, 2019. 41(4): עמ' 2311-2320.
3. Bahrami-Banan, F., et al., הכנה ומחקר של ננו-ניוזומים המכילים דוקסורוביצין והערכת הרעילות שלהם על קו תאי לוקמיה מיאלובלסטית חריפה KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): עמ' 309-323.
4. Hodroj, M.H., et al., תה סרפד מעכב את צמיחתם של תאי לוקמיה מיאלואידית חריפה במבחנה על ידי עידוד אפופטוזיס. Nutrients, 2020. 12(9): עמ' 2629.