תאי SiHa – שופכים אור על המחקר בתחום סרטן צוואר הרחם

תאי SiHa הם תאי סרטן צוואר הרחם הנמצאים בשימוש נרחב במחקר ביו-רפואי. הם מהווים מארחים מצוינים לתעתיק גנטי, ולכן מתאימים למחקרים בתחום ביטוי גנים. בשל מקורם האנושי והקשר שלהם לסרטן צוואר הרחם, תאים אלה משמשים בעיקר במחקרים בתחומי ביולוגיה של הסרטן, וירולוגיה ופיתוח תרופות.

מאפיינים כלליים ומקור תאי SiHa

הבנת מקורו ותכונותיו הכלליות של קו תאים היא חיונית, שכן היא משפיעה על השימוש בו במחקר שלכם. בחלק זה של המאמר תלמדו על מקור קו התאים SiHa, על מאפייניו הייחודיים ועוד: מהו קו התאים הסרטניים SiHa? מהם תאי SiHa HPV? מהו מקור קו התאים SiHa? מהו המורפולוגיה של SiHa?

• SiHa, קו התאים של קרצינומה צוואר הרחם, נגזר משברים של ביופסיה ראשונית של הרחם שנלקחה מאישה אסייתית (בת 55) עם סרטן תאי קשקשיים [1].
• קו התאים SiHa מציג קריוטיפ היפרטריפלואידי. לרוב התאים יש מספר כרומוזומים ממוצע שבין 69 ל-72. עם זאת, לכ-24% מהתאים יש מספר כרומוזומים מודאלי של 71.
• תאי SiHa חיוביים לנגיף הפפילומה האנושי מסוג 16. הם מציגים שילוב של כ-1 עד 2 עותקים של הגנום של נגיף הפפילומה האנושי (HPV) לכל תא [2].
• תאי סרטן צוואר הרחם הללו מציגים מורפולוגיה אפיתלית.

התפשטות תאי סרטן צוואר הרחם מסוג HeLa תחת המיקרוסקופ.

קו תאים SiHa: מידע על גידול

תחזוקת תרבית קו תאים אינה קלה, עד שמכירים את כל הנקודות המרכזיות בגידולו. עליכם לדעת: מהו זמן הכפלה של SiHa? מהו מצע הגידול של תאי SiHa? כיצד מגדלים את קו התאים SiHa?

נקודות מרכזיות לגידול תאי SiHa

זמן הכפלה:

זמן הכפלה של תאי SiHa הוא כ-17 שעות.

תאים דבקים או בתמיסה:

SiHa הוא קו תאים דבק.

יחס תת-תרבית:

יחס התרבית המשנית של תאי SiHa הוא 1:2 עד 1:4. לצורך העברה, שוטפים את התאים הנצמדים ב-PBS 1x. מוסיפים תמיסת Accutase, ומגדלים את התאים במשך 8 עד 10 דקות בטמפרטורת החדר. לאחר מכן, מוסיפים את מצע הגידול, והתאים עוברים צנטריפוגה. משקעי התאים מושעים מחדש, והתאים מועברים לצלחת חדשה לגידול.

מדיום גידול:

לצמיחה אידיאלית של תאי SiHa משתמשים במדיום המינימלי החיוני של איגל (EMEM) המכיל 10% FBS, 2 mM L-גלוטמין, 2.2 g/L NaHCO3, ותמיסת המלח המאוזנת של ארל (EBSS). המדיום מוחלף 2 עד 3 פעמים בשבוע.

תנאי גידול:

תאי SiHa מוחזקים באינקובטור לח בטמפרטורה של 37°C עם אספקת CO₂ של 5%.

אחסון:

מבחנות קו התאים SiHa של סרטן צוואר הרחם הקפואות מאוחסנות בטמפרטורה הנמוכה מ-150°C- במקפיא חשמלי או בשלב האדי של חנקן נוזלי לטווח ארוך יותר.

תהליך ההקפאה והמדיום:

לצורך הקפאת תאי SiHa נעשה שימוש במדיום הקפאה מסוג CM-1 או CM-ACF. התאים מוקפאים בשיטת הקפאה איטית, המאפשרת ירידה של 1 °C בלבד בדקה, כדי לשמור על חיוניות התאים.

תהליך ההפשרה:

התאים הקפואים מוחזקים למשך 40 עד 60 שניות באמבט מים בטמפרטורה של 37°C, עד שנותר גוש קרח קטן. לאחר מכן, מוסיפים מדיום גידול טרי, והתאים עוברים צנטריפוגה כדי להסיר את מרכיבי מדיום ההקפאה. משקע התאים מוערבב מחדש, והתאים מועברים לצלחת תרבית לצורך גידול.

רמת בטיחות ביולוגית:

נדרש מעבדה ברמת בטיחות ביולוגית 1 לטיפול ולתחזוקה של תרבויות תאי SiHa.

שכבת תאי SiHa הנצמדים בהגדלה של 10× ו-20×.

יתרונות וחסרונות של קו התאים SiHa

כמו קווי תאים קרצינומטיים אנושיים אחרים, גם ל-SiHa יש כמה מאפיינים ייחודיים הקשורים ליתרונות וחסרונות מסוימים. במאמר זה, דנו בכמה מהם החשובים ביותר.

יתרונותיו של קו התאים SiHa לסרטן צוואר הרחם

• מודל לסרטן צוואר הרחם
  • מקורו בקרצינומה של תאי קשקש בצוואר הרחם.
  • משמש לחקר המנגנונים, הצמיחה וההתפתחות של סרטן צוואר הרחם.
  • מבטאת את הגנים p53+ ו-pRB+, הקשורים לתיקון ה-DNA, לוויסות מחזור התא ולדיכוי הגידול.
• פוטנציאל גידולי
  • תאי SiHa הם בעלי פוטנציאל גידולי ויכולים לגרום לגידולים אפידרמואידיים בדרגה III בעלי הבחנה נמוכה בעכברי נוד.
  • משמשות למחקר סרטן in vivo ולבדיקת טיפולים נגד סרטן.

חסרונות של תאי SiHa

• קצב התרבות
  • תאי SiHa מתרבים במהירות, מה שמוביל לצמיחה מוגזמת.
  • נדרש מעבר תדיר, מה שמגביר את הסיכון לחוסר יציבות גנטית, אשר עלול להשפיע על התנהגות התאים לאורך זמן.

יישומים מחקריים של תאי SiHa

קו התאים SiHa נמצא בשימוש נרחב במחקר סרטן צוואר הרחם. להלן נדון בכמה יישומים ספציפיים של קו תאים זה.

• מחקרים הקשורים לנגיף הפפילומה האנושי (HPV): תאי SiHa הם חיוביים ל-HPV 16, ולכן הם מהווים משאב חשוב לחקר זיהום בנגיף הפפילומה האנושי, המנגנונים המולקולריים שלו ותפקידו בהתפתחות ובהתקדמות סרטן צוואר הרחם. חוקרים משתמשים בתאים אלה גם כדי לחקור את השכפול והאינטגרציה של הנגיף, וכן את השפעתו על תהליכים בתא המארח. במחקר שנערך בשנת 2020 נעשה שימוש בקו התאים SiHa לבחינת תפקידם של האונקופרוטאינים E6/E7 של נגיף ה-HPV בהתפתחות סרטן צוואר הרחם, באמצעות מיקוד בהם בטכנולוגיית CRISPR. הממצאים העלו כי דיכוי גני E6/E7 גרם לעיכוב צמיחת תאי SiHa ולאפופטוזיס. לפיכך, גנים נגיפיים אלה עשויים לשמש כיעדים תרופתיים מכריעים לפיתוח טיפולים נגד סרטן צוואר הרחם הקשור ל-HPV [3].
• ביולוגיה של הסרטן: תאי SiHa משמשים כמודל בעל ערך רב לחקר הביולוגיה של סרטן צוואר הרחם, לרבות התפתחות הסרטן, התקדמותו, גרורות וחדירה. חוקרים משתמשים בתאים אלה כדי לחקור את המוטציות הגנטיות ואת המסלולים המולקולריים הבסיסיים התורמים להתפתחות ולצמיחה של סרטן צוואר הרחם; לדוגמה, במחקר שבו נעשה שימוש בתאי SiHa נמצא כי ביטוי מוגבר של SEC61G (יחידת משנה גמא של הטרנסלוקון SEC61) מעודד את התרבות תאי סרטן צוואר הרחם באמצעות הפעלת מפל ה-MAPK [4].
• סינון ובדיקת תרופות: SiHa הוא קו תאים של סרטן צוואר הרחם הנמצא בשימוש נרחב להערכת היעילות של תרופות פוטנציאליות נגד סרטן, הספציפיות לסרטן צוואר הרחם הקשור ל-HPV. חוקרים בוחנים את הפוטנציאל האנטי-שגשגי, האפופטוטי והאנטי-גרורתי של תרופות באמצעות תאים אלה. לדוגמה, מחקר שנערך בשנת 2019 בחן את הפוטנציאל הציטוטוקסי של תמציות פרי Vatica diospyroides Symington Type SS על קו התאים SiHa של סרטן צוואר הרחם [5].

תאי SiHa למחקר שלכם!

פרסומים מחקריים העוסקים בתאי SiHa

מספר פרסומים מחקריים חשובים ומצוטטים תדיר עוסקים בקו התאים SiHa של קרצינומה קשקשית של צוואר הרחם.

ההשפעה האנטי-סרטנית של אלו-אמודין על תאי סרטן צוואר הרחם נקשרה לנגיף הפפילומה האנושי E6/E7 ולמטבוליזם של הגלוקוז

פרסום זה בכתב העת OncoTargets and Therapy (2019) הציע כי התרכובת הטבעית אלו-אמודין מפעילה השפעות אפופטוטיות הקשורות ל-HPV E6/E7 ולמטבוליזם הגלוקוז בתאי סרטן צוואר הרחם SiHa.

הערכת הפוטנציאל האנטי-סרטני של תמצית עלי Excoecaria agallocha (L.) על קו תאי סרטן צוואר הרחם האנושי (SiHa) והערכת מנגנון הפעולה הבסיסי

מאמר זה פורסם ב-Future Journal of Pharmaceutical Sciences בשנת 2022. מחקר זה בחן את הפעילות האנטי-גידולית של תמצית עלי הצמח Excoecaria agallocha (L.) בקו התאים SiHa של סרטן צוואר הרחם.

השפעה אנטי-פרוליפרטיבית של 1,10-פננתרולין המשולב עם ננו-חלקיקי ZnO מסולפטים בקו תאי סרטן צוואר הרחם SiHa

מחקר זה, שפורסם ב-Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022), הציע כי מולקולת ה-1,10-פננתרולין, לאחר צימודה לננו-חלקיקי אבץ סולפט, מפעילה השפעות אנטי-פרוליפרטיביות משמעותיות בתאי SiHa.

אסטראגלוסיד IV מעכב את הפלישה והגרורות של תאי סרטן צוואר הרחם מסוג SiHa באמצעות מסלולי PI3K ו-MAPK המתווכים על ידי TGF‑β1

מחקר זה פורסם בכתב העת Oncology Reports בשנת 2019. המחקר גילה כי אסטראגלוסיד IV, תוצר טבעי, מדכא את הנדידה והפלישה של תאי SiHa על ידי ויסות מסלולי האיתות PI3K ו-MAPK המתווכים על ידי TGF‑β1.

IFI16 מקדם את התקדמות סרטן צוואר הרחם על ידי העלאת רמת PD-L1 בסביבה המיקרו-חיסונית באמצעות מסלול STING-TBK1-NF-kB

מחקר זה, שפורסם בכתב העת Biomedicine & Pharmacotherapy (2020), גילה כי IFI16 (חלבון 16 המושרה על ידי אינטרפרון-גאמא) מווסת את הגן PD-L1 באמצעות הפעלת מסלול STING-TBK1-NF-kB כדי לעודד את צמיחתם של תאי סרטן צוואר הרחם מסוג SiHa.

משאבים עבור קו התאים SiHa: פרוטוקולים, סרטונים ועוד

להלן מספר משאבים מקוונים העוסקים בתאי SiHa.

• טרנספקציה של תאי SiHa: מאמר מחקרי זה מכיל פרוטוקול לגידול תאי סרטן צוואר הרחם SiHa ולביצוע טרנספקציה בתאי SiHa.

הקישור הבא מכיל מידע על תרבית תאי SiHa. 

• קו התאים SiHa: אתר זה מכיל נתונים רבים ובעלי ערך אודות קו התאים SiHa. מידע זה כולל פרטים על מצעי גידול, תנאי תרבית, פרוטוקולים לריבוי תאי SiHa וטיפול בתרבויות מתרבות ובתרבויות שהוקפאו.

שאלות נפוצות על תאי סרטן צוואר הרחם SiHa

ביבליוגרפיה

1. Melzer, C., J. von der Ohe, and R. Hass, סקירה תמציתית: האינטראקציה בין תאי סטרומה מזנכימליים/תאים דמויי גזע לבין תאי סרטן מספקת פוטנציאל טיפולי. Stem cells, 2018. 36(7): עמ' 951-968.
2. Ostrowska, K.M., et al., חקירת השפעתו של נגיף הפפילומה האנושי (HPV) מסוג סיכון גבוה על ההרכב הביוכימי של תאי סרטן צוואר הרחם באמצעות ספקטרוסקופיה רטטית. Analyst, 2010. 135(12): עמ' 3087-3093.
3. צ'ן, י., ואח', עיכוב צמיחת תאי סרטן צוואר הרחם האנושי במבחנה ובחיות באמצעות פיצול ה-mRNA של E6/E7 בנגיף הפפילומה האנושי (HPV) על ידי מערכת CRISPR/Cas13a. Antiviral Research, 2020. 178: עמ' 104794.
4. פאן, י., ואח', SEC61G מקדם את התפשטות סרטן צוואר הרחם באמצעות הפעלת מסלול האיתות MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
5. Chothiphirat, A., et al., הפוטנציאל האנטי-סרטני של תמציות פרי מ-Vatica diospyroides מסוג סימינגטון SS והשפעתן על מוות תאי מתוכנן בקווי תאים של סרטן צוואר הרחם. The Scientific World Journal, 2019. 2019.