เซลล์ SiHa - ส่องแสงสู่การวิจัยมะเร็งปากมดลูก

เซลล์ SiHa เป็นเซลล์มะเร็งปากมดลูกที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีวการแพทย์ พวกมันเป็นโฮสต์ที่ดีสำหรับการถ่ายโอนยีนและจึงเหมาะสำหรับการศึกษาการแสดงออกของยีน เนื่องจากมีต้นกำเนิดจากมนุษย์และมีความเกี่ยวข้องกับมะเร็งปากมดลูก เซลล์เหล่านี้จึงถูกนำมาใช้เป็นหลักในงานชีววิทยามะเร็ง ไวรัสวิทยา และการพัฒนายา

ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ SiHa

การเข้าใจถึงต้นกำเนิดและลักษณะทั่วไปของสายเซลล์เป็นสิ่งสำคัญ เนื่องจากมีอิทธิพลต่อการนำไปใช้ในงานวิจัยของคุณ ในส่วนของบทความนี้ คุณจะได้เรียนรู้เกี่ยวกับต้นกำเนิดของสายเซลล์ SiHa ลักษณะเด่น และอื่น ๆ อีกมากมาย: สายเซลล์มะเร็ง SiHa คืออะไร? เซลล์ SiHa HPV คืออะไร? ต้นกำเนิดของสายพันธุ์เซลล์ SiHa คืออะไร? ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์ SiHa เป็นอย่างไร?

• SiHa, สายเซลล์มะเร็งปากมดลูก ถูกแยกได้จากชิ้นส่วนของการตัดชิ้นเนื้อครั้งแรกของมดลูกจากผู้หญิงเอเชีย (อายุ 55 ปี) ที่เป็นมะเร็งเซลล์สความัส [1]
• เซลล์ไลน์ SiHa แสดงลักษณะโครโมโซมแบบไฮเปอร์ทริปพลอยด์ โดยเซลล์ส่วนใหญ่มีจำนวนโครโมโซมเฉลี่ยอยู่ระหว่าง 69 ถึง 72 อย่างไรก็ตาม ประมาณ 24% ของเซลล์มีจำนวนโครโมโซมที่เป็นค่าโมดอลเท่ากับ 71
• เซลล์ SiHa เป็นบวกต่อเชื้อไวรัสฮิวแมนแพปิลโลมา 16 แสดงให้เห็นถึงการรวมตัวของจีโนม HPV ประมาณ 1 ถึง 2 ชุดต่อเซลล์ [2]
• เซลล์มะเร็งปากมดลูกเหล่านี้แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิว

การแบ่งตัวของเซลล์มะเร็งปากมดลูก HeLa ภายใต้กล้องจุลทรรศน์

เซลล์ไลน์ SiHa: ข้อมูลการเพาะเลี้ยง

การดูแลรักษาเซลล์ไลน์ให้คงอยู่ไม่ใช่เรื่องง่ายจนกว่าคุณจะทราบจุดสำคัญทั้งหมดในการเพาะเลี้ยงเซลล์ไลน์นี้ คุณควรทราบ: เวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าของเซลล์ SiHa คืออะไร? สื่อเลี้ยงเซลล์ SiHa คืออะไร? วิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ไลน์ SiHa ทำอย่างไร?

จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ SiHa

เวลาสองเท่า:

เวลาสองเท่าของเซลล์ SiHa คือประมาณ 17 ชั่วโมง

ติดกันหรือแขวนลอย:

SiHa เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติด

อัตราส่วนการเพาะปลูกย่อย:

อัตราส่วนการเพาะเลี้ยงย่อยสำหรับเซลล์ SiHa คือ 1:2 ถึง 1:4 สำหรับการผ่านรุ่น ให้ล้างเซลล์ที่เกาะติดด้วย 1x PBS จากนั้นเติมสารละลาย Accutase และบ่มเซลล์ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8 ถึง 10 นาที จากนั้นเติมอาหารเลี้ยงเชื้อ และทำการปั่นเหวี่ยง เซลล์ที่ตกตะกอนจะถูกแขวนลอยใหม่ และเทเซลล์ลงในขวดเลี้ยงเชื้อใหม่เพื่อเพาะเลี้ยง

อาหารเลี้ยงเชื้อ:

มีเดียขั้นต่ำที่จำเป็นของนกอินทรี (EMEM) ที่มี 10% FBS, 2 mM L-Glutamine, 2.2 g/L NaHCO3 และ Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) ใช้สำหรับการเจริญเติบโตที่เหมาะสมของเซลล์ SiHa สื่อจะถูกเปลี่ยน 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์

เงื่อนไขการเจริญเติบโต:

เซลล์ SiHa ถูกเก็บรักษาไว้ในตู้เพาะเลี้ยงที่มีอุณหภูมิ 37°C และมีความชื้น พร้อมด้วยก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5%

การเก็บรักษา:

หลอดเซลล์มะเร็งปากมดลูกสายพันธุ์ SiHa ที่ถูกแช่แข็งถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150°C ในตู้แช่แข็งไฟฟ้าหรือในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวสำหรับการเก็บรักษาระยะยาว

กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง:

CM-1 หรือ CM-ACF freezing medium ใช้สำหรับการแช่แข็งเซลล์ SiHa. เซลล์ถูกแช่แข็งโดยใช้วิธีการแช่แข็งแบบช้า ๆ ที่อนุญาตให้ลดอุณหภูมิได้เพียง 1 °C ต่อนาทีเพื่อปกป้องความมีชีวิตของเซลล์.

กระบวนการละลาย

เซลล์ที่ถูกแช่แข็งจะถูกเก็บไว้ในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที จนกระทั่งเหลือเป็นก้อนน้ำแข็งขนาดเล็ก หลังจากนั้นเติมอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ และทำการปั่นเหวี่ยงเพื่อกำจัดส่วนประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อที่ใช้ในการแช่แข็ง เซลล์ที่ตกตะกอนจะถูกแขวนลอยใหม่ และนำไปแบ่งใส่ขวดเลี้ยงเชื้อสำหรับการเจริญเติบโต

ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ:

ห้องปฏิบัติการระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ 1 จำเป็นต้องใช้ในการจัดการและดูแลรักษาเซลล์เพาะเลี้ยง SiHa

ชั้นเซลล์ SiHa ที่เกาะติดกันที่กำลังขยาย 10 เท่า และ 20 เท่า

ข้อดีและข้อเสียของเซลล์ไลน์ SiHa

เช่นเดียวกับเซลล์มะเร็งชนิดอื่น ๆ ของมนุษย์ สายพันธุ์เซลล์ SiHa ก็มีลักษณะเฉพาะบางประการที่เกี่ยวข้องกับข้อได้เปรียบและข้อเสียบางประการเช่นกัน ในที่นี้ เราได้กล่าวถึงลักษณะสำคัญบางประการ

ข้อดีของเซลล์ไลน์มะเร็งปากมดลูก SiHa

• แบบจำลองมะเร็งปากมดลูก
  • เกิดจากมะเร็งเซลล์สความัสของปากมดลูก
  • ใช้เพื่อศึกษาเกี่ยวกับกลไก การเจริญเติบโต และการพัฒนาของมะเร็งปากมดลูก
  • แสดงออกของยีน p53+ และ pRB+ ซึ่งเกี่ยวข้องกับการซ่อมแซมดีเอ็นเอ การควบคุมวัฏจักรเซลล์ และการยับยั้งการเกิดเนื้องอก
• ศักยภาพในการก่อให้เกิดเนื้องอก
  • เซลล์ SiHa เป็นเซลล์ก่อเนื้องอกและสามารถกระตุ้นให้เกิดเนื้องอกชนิดเอพิเดอร์โมอิดระดับความแตกต่างต่ำ (grade III) ในหนูเมาส์ชนิดไม่มีขนได้
  • ใช้สำหรับการวิจัยมะเร็งในร่างกายและการทดสอบการรักษาต้านมะเร็ง

ข้อเสียของเซลล์ SiHa

• อัตราการเพิ่มจำนวน
  • เซลล์ SiHa แพร่กระจายอย่างรวดเร็ว ทำให้เกิดการเจริญเติบโตเกินขนาด
  • ต้องการการผ่านบ่อยครั้ง ซึ่งเพิ่มความเสี่ยงของความไม่เสถียรทางพันธุกรรม ซึ่งอาจส่งผลกระทบต่อพฤติกรรมของเซลล์ในระยะยาว

การวิจัยการประยุกต์ใช้เซลล์ SiHa

เซลล์ไลน์ SiHa ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็งปากมดลูก การประยุกต์ใช้งานบางประการของเซลล์ไลน์นี้จะถูกกล่าวถึงในที่นี้

• การศึกษาที่เกี่ยวข้องกับไวรัสฮิวแมนแพปพิลโลมา (HPV): เซลล์ SiHa เป็นเซลล์ที่มีเชื้อ HPV 16 เป็นบวก ดังนั้นเซลล์เหล่านี้จึงมีคุณค่าในการศึกษาการติดเชื้อไวรัสฮิวแมนแพปพิลโลมา, กลไกทางโมเลกุลของมัน, และบทบาทของมันในการเกิดและก้าวหน้าของมะเร็งปากมดลูก นักวิจัยยังใช้เซลล์เหล่านี้เพื่อศึกษาการจำลองตัวของไวรัส, การรวมตัวของไวรัสกับดีเอ็นเอของเซลล์เจ้าบ้าน, และผลกระทบของมันต่อกระบวนการของเซลล์เจ้าบ้าน การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2020 ใช้สายพันธุ์เซลล์ SiHa เพื่อตรวจสอบบทบาทของโปรตีนก่อมะเร็ง HPV E6/E7 ในการพัฒนาของมะเร็งปากมดลูกโดยใช้เทคโนโลยี CRISPR ผลการศึกษาพบว่า การยับยั้งยีน E6/E7 ทำให้การเจริญเติบโตของเซลล์ SiHa ลดลงและเกิดการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส ดังนั้น ยีนไวรัสเหล่านี้อาจทำหน้าที่เป็นเป้าหมายสำคัญสำหรับยาในการพัฒนาการรักษาโรคมะเร็งปากมดลูกที่เกี่ยวข้องกับ HPV [3]
• ชีววิทยาของมะเร็ง: เซลล์ SiHa เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งปากมดลูก รวมถึงการพัฒนาของมะเร็ง การลุกลาม การแพร่กระจาย และการรุกราน นักวิจัยใช้เซลล์เหล่านี้เพื่อศึกษาการกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมและเส้นทางโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังซึ่งมีส่วนทำให้เกิดการพัฒนาและการเติบโตของมะเร็งปากมดลูก เช่น การศึกษาหนึ่งใช้เซลล์ SiHa และพบว่า SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) ที่เพิ่มขึ้นส่งเสริมการเพิ่มจำนวนของเซลล์มะเร็งปากมดลูกผ่านการกระตุ้นของ MAPK cascade [4]
• การคัดกรองและทดสอบยา: SiHa เป็นสายพันธุ์เซลล์ปากมดลูกที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการประเมินประสิทธิภาพของยาต้านมะเร็งที่อาจใช้ได้กับมะเร็งปากมดลูกที่เกี่ยวข้องกับเชื้อ HPV นักวิจัยสำรวจศักยภาพในการยับยั้งการเพิ่มจำนวนเซลล์ การเหนี่ยวนำให้เกิดการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส และการต้านการแพร่กระจายของยาโดยใช้เซลล์เหล่านี้ เช่น การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2019 ซึ่งได้ตรวจสอบศักยภาพในการเป็นพิษต่อเซลล์ของสารสกัดจากผล Vatica diospyroides Symington Type SS ต่อเซลล์มะเร็งปากมดลูกสายพันธุ์ SiHa [5]

เซลล์ SiHa สำหรับงานวิจัยของคุณ!

การตีพิมพ์งานวิจัยที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ SiHa

งานวิจัยที่ได้รับการอ้างอิงบ่อยครั้งและมีนัยสำคัญบางฉบับกำลังนำเสนอสายพันธุ์เซลล์มะเร็งปากมดลูกชนิดสความัสของ SiHa

ผลต้านเนื้องอกของอะโล-เอโมดินต่อเซลล์มะเร็งปากมดลูกมีความเกี่ยวข้องกับไวรัสฮิวแมนแพปิลโลมาไวรัส E6/E7 และการเผาผลาญกลูโคส

การตีพิมพ์ใน OncoTargets and Therapy (2019) เสนอว่าสารประกอบธรรมชาติ aloe-emodin มีผลต่อการตายของเซลล์มะเร็งปากมดลูกชนิด SiHa ที่เกี่ยวข้องกับ HPV E6/E7 และการเผาผลาญกลูโคส

การประเมินศักยภาพต้านมะเร็งของสารสกัดจากใบ Excoecaria agallocha (L.) ต่อเซลล์มะเร็งปากมดลูกมนุษย์ (SiHa) และการประเมินกลไกการออกฤทธิ์ที่อยู่เบื้องหลัง

บทความนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Future Journal of Pharmaceutical Sciences ในปี 2022 การศึกษานี้ได้ตรวจสอบฤทธิ์ต้านเนื้องอกของสารสกัดจากใบพืช Excoecaria agallocha (L.) ในเซลล์มะเร็งปากมดลูกสายพันธุ์ SiHa

ฤทธิ์ต้านการเพิ่มจำนวนเซลล์ของ 1, 10-ฟีแนนธโรลีนที่จับกับอนุภาคนาโนซิงค์ออกไซด์ที่ถูกกำมะถันในเซลล์มะเร็งปากมดลูกสายพันธุ์ SiHa

งานวิจัยนี้ซึ่งตีพิมพ์ในวารสาร Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) ได้เสนอว่า โมเลกุลของ 1, 10-ฟีแนนธโรลีน เมื่อจับคู่กับอนุภาคนาโนซิงค์ซัลเฟต จะแสดงฤทธิ์ต้านการเพิ่มจำนวนเซลล์อย่างมีนัยสำคัญในเซลล์ SiHa

แอสตราแกโลไซด์ IV ยับยั้งการรุกรานและการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งปากมดลูก SiHa ผ่านทางเส้นทาง PI3K และ MAPK ที่ถูกกระตุ้นโดย TGF-β1

งานวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Oncology Reports ในปี 2019 การศึกษาพบว่า Astragaloside IV ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ธรรมชาติ สามารถยับยั้งการเคลื่อนที่และการรุกรานของเซลล์ SiHa ได้โดยการปรับวิถีการส่งสัญญาณ PI3K และ MAPK ที่ถูกควบคุมโดย TGF‑β1

IFI16 ส่งเสริมการลุกลามของมะเร็งปากมดลูกโดยการเพิ่มการแสดงออกของ PD-L1 ในสภาพแวดล้อมภูมิคุ้มกันผ่านเส้นทาง STING-TBK1-NF-kB

การศึกษาในวารสาร Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) พบว่า IFI16 (interferon-gamma inducible protein 16) ควบคุมยีน PD-L1 ผ่านการกระตุ้นเส้นทาง STING-TBK1-NF-kB เพื่อส่งเสริมการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งปากมดลูกชนิด SiHa

ทรัพยากรสำหรับเซลล์ไลน์ SiHa: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ

นี่คือแหล่งข้อมูลออนไลน์ที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ SiHa

• การถ่ายยีนในเซลล์ SiHa: บทความวิจัยนี้ประกอบด้วยวิธีการสำหรับการเลี้ยงเซลล์มะเร็งปากมดลูก SiHa และการถ่ายยีนในเซลล์ SiHa

ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์สำหรับเซลล์ SiHa 

• สายเซลล์ SiHa: เว็บไซต์นี้มีข้อมูลที่มีค่ามากมายเกี่ยวกับสายเซลล์ SiHa ซึ่งรวมถึงข้อมูลเกี่ยวกับอาหารเลี้ยงเซลล์ สภาพการเพาะเลี้ยง ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงต่อรุ่นของเซลล์ SiHa และการจัดการกับการเพาะเลี้ยงที่เพิ่มจำนวนและการแช่แข็งเซลล์

คำถามที่พบบ่อยเกี่ยวกับเซลล์มะเร็งปากมดลูก SiHa

เอกสารอ้างอิง

1. Melzer, C., J. von der Ohe, และ R. Hass, บทวิจารณ์โดยย่อ: การสื่อสารข้ามระหว่างเซลล์สเต็มเซลล์/เซลล์สเต็มเซลล์กับเซลล์มะเร็งมีศักยภาพในการรักษา. เซลล์ต้นกำเนิด, 2018. 36(7): หน้า 951-968.
2. Ostrowska, K.M., et al., การศึกษาอิทธิพลของเชื้อไวรัสฮิวแมนแพปพิลโลมาไวรัสที่มีความเสี่ยงสูงต่อองค์ประกอบทางชีวเคมีของเซลล์มะเร็งปากมดลูกโดยใช้สเปกโทรสโกปีการสั่นสะเทือน. Analyst, 2010. 135(12): หน้า 3087-3093.
3. เฉิน, ย., และคณะ, การยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งปากมดลูกมนุษย์ทั้งในหลอดทดลองและในร่างกายผ่านการตัด mRNA ของ human papillomavirus E6/E7 โดยระบบ CRISPR/Cas13a. Antiviral Research, 2020. 178: หน้า 104794.
4. Fan, Y., และคณะ, SEC61G ส่งเสริมการเพิ่มจำนวนของมะเร็งปากมดลูกโดยการกระตุ้นเส้นทางสัญญาณ MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
5. โชติพิรัตน์, อ., และคณะ, ศักยภาพในการต้านมะเร็งของสารสกัดจากผลไม้ของ Vatica diospyroides ประเภท Symington SS และผลต่อการตายของเซลล์ตามโปรแกรมในเซลล์มะเร็งปากมดลูก. วารสารวิทยาศาสตร์โลก, 2019. 2019.