บทนำ

สายเซลล์ MC38 — ซึ่งยังเป็นที่รู้จักในชื่อ MCA-38, MCA 38, MCA38, MC-38, MC-38 B/6, Mouse Colon 38, Colon 38, Colon-38, Colon38, Murine Carcinoma-38 และ C38 (Cellosaurus accession CVCL_B288) — เป็นหนึ่งในแบบจำลองหนูที่ใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุดในการวิจัยโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่และลำไส้ตรง รวมถึงการวิจัยด้านภูมิคุ้มกันมะเร็ง ก้อนมะเร็งต้นแบบถูกสร้างขึ้นโดยใช้สารก่อมะเร็ง 1,2-dimethylhydrazine (DMH) ในหนู C57BL/6 และได้รับการรายงานโดย Corbett และคณะในปี 1975 [1]; ต่อมา สายเซลล์ดังกล่าวได้ถูกสร้างขึ้นในระบบเพาะเลี้ยงเซลล์โดย Tan, Holyoke และ Goldrosen ในปี 1976 [2]. ความเข้ากันได้ทางพันธุกรรมกับหนู C57BL/6, ภาระการกลายพันธุ์ที่สูง และความตอบสนองต่อสารยับยั้งจุดตรวจภูมิคุ้มกัน ได้ทำให้เซลล์ MC38 กลายเป็นเครื่องมือที่ขาดไม่ได้ในการศึกษาเนื้องอกในลำไส้ใหญ่, วัคซีนมะเร็ง, การตอบสนองของเซลล์ลิมโฟไซต์ T CD8-บวก, แมคโครฟาจที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอก และชีววิทยาของเส้นทางตัวรับ PD-1 (Programmed Cell Death 1 receptor) โมเดลนี้ยังคงเป็นพื้นฐานสำคัญในการพัฒนาการรักษาด้วยภูมิคุ้มกันต่อโรคมะเร็ง การรักษาด้วยยีน และการค้นพบนีโอแอนติเจน

จุดสำคัญที่ควรจำ

• MC38 เป็นสายเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองในลำไส้ใหญ่ของหนู ซึ่งเป็นสายเซลล์ที่เข้ากันได้ทางพันธุกรรมกับสายพันธุ์หนู C57BL/6 และได้มาจากก้อนมะเร็งที่เกิดจากการกระตุ้นด้วย DMH
• สายเซลล์นี้มีภาระการกลายพันธุ์สูง และแสดงออกของนีโอแอนติเจนที่ถูกรับรู้โดยเซลล์ลิมโฟไซต์ที CD8-บวก — แต่ชนิดของนีโอแอนติเจนที่มีอยู่นั้นขึ้นอยู่กับสายย่อย (ดูด้านล่าง)
• MC38 มีความไวต่อสารยับยั้งจุดตรวจสอบระบบภูมิคุ้มกัน ทำให้มันกลายเป็นแบบจำลองที่นิยมใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยเกี่ยวกับเส้นทาง PD-1/PD-L1
• แบบจำลองนี้ได้รับการใช้อย่างกว้างขวางในการพัฒนาวัคซีนป้องกันมะเร็ง การรักษาด้วยยีนไซโตไคน์ และการศึกษาด้านภูมิคุ้มกันวิทยาของก้อนมะเร็ง
• มีความแตกต่างทางจีโนมและทรานสคริปโตมิกที่ชัดเจนระหว่างสายย่อย MC38 จากแหล่งเก็บรักษาต่าง ๆ neoepitope ที่เป็นที่รู้จักดีอย่าง Rpl18 และ Adpgk มีอยู่ในสายย่อย Leiden (MC38-L) แต่ไม่มีอยู่ในสายย่อย Kerafast/NCI (MC38-K) ซึ่งทำให้เซลล์ T ที่เกี่ยวข้องไม่สามารถรับรู้ได้ ดังนั้น การเลือกแหล่งที่มาอย่างระมัดระวังและการบันทึกข้อมูลแหล่งที่มาอย่างละเอียดจึงเป็นสิ่งจำเป็น [3]
• มีสายพันธุ์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมหลายชนิด (knockout, reporter, overexpression) ซึ่งช่วยเพิ่มความหลากหลายในการทดลองของโมเดลนี้

MC38 คืออะไร?

MC38 เป็นสายเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองในลำไส้ใหญ่ที่สามารถปลูกถ่ายได้ ซึ่งมีต้นกำเนิดจากหนู และถูกจัดประเภทเป็นสายเซลล์มะเร็งในฐานข้อมูล Cellosaurus (CVCL_B288) สายเซลล์นี้ถูกแยกจากหนูตัวเมียพันธุ์ C57BL/6 ที่อายุไม่ระบุ ซึ่งมีมะเร็งต่อมน้ำเหลืองลำไส้ใหญ่ (มะเร็งต่อมน้ำเหลืองลำไส้ใหญ่ของหนู, NCIt C120044) Corbett และเพื่อนร่วมงานได้สร้างก้อนมะเร็งลำไส้ใหญ่ 82 ก้อนในหนูพันธุ์ในสายเลือด 4 สายพันธุ์ เป็นส่วนหนึ่งของความพยายามอย่างเป็นระบบในการสร้างแบบจำลองก้อนมะเร็งลำไส้ใหญ่ที่สามารถปลูกถ่ายได้ เพื่อใช้ในการทดสอบเคมีบำบัด; ก้อนมะเร็ง 4 ก้อนรอดจากการปลูกถ่ายครั้งแรกและเข้าสู่ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงต่อเนื่อง [1]. Tan, Holyoke และ Goldrosen ได้อธิบายวิธีการเพาะเลี้ยงสายพันธุ์ MCA-38 แบบเลือกสรรในหลอดทดลอง โดยระบุว่าสามารถกำจัดเซลล์ที่มีลักษณะคล้ายไฟโบรบลาสต์ได้ด้วยการรักษาด้วยทริปซิน เพื่อให้ได้ประชากรเซลล์เยื่อบุผิวที่เสถียร [2]. Cellosaurus ระบุเวลาเพิ่มเป็นสองเท่าของ MC38 เป็น 24.3 ชั่วโมง [4], และสายเซลล์นี้ถูกรักษาไว้ในรูปแบบการเพาะเลี้ยงแบบติดผนัง การวิเคราะห์ด้วยเทคนิคโอมิกส์ได้รวมถึงการหาลำดับจีโนมเอ็กโซมทั้งหมด (whole exome sequencing), การวิเคราะห์ทรานสคริปโตมิกส์ด้วยไมโครอาร์เรย์และ RNA-seq, การวิเคราะห์โปรตีโอมิกส์ของเปปทิโดม MHC คลาส I, การวิเคราะห์ SNP อาร์เรย์, และการหาลำดับจีโนมไมโทคอนเดรีย (Cellosaurus บันทึกข้อมูลเปปติโดมภายใต้ชื่อทั่วไปว่า "HLA class I peptidome"; เซลล์หนูแสดงเปปติดบนโมเลกุล H-2 ไม่ใช่โมเลกุล HLA.)

ข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์ MC38

หมายเหตุเกี่ยวกับเงื่อนไขเฉพาะของสายย่อย: สารเลี้ยงเซลล์ข้างต้นสอดคล้องกับเงื่อนไขการเพาะเลี้ยงที่รายงานไว้สำหรับสายย่อยที่มาจาก Kerafast/NCI (MC38-K) สายย่อย Leiden (MC38-L) ได้รับการเลี้ยงใน IMDM ที่มี FBS 8%, L-glutamine 2 mM และ 2-mercaptoethanol 50 µM [3]. ผู้ใช้ควรปฏิบัติตามเงื่อนไขที่ผู้จัดหาได้กำหนดไว้

ข้อดีของเซลล์ MC38

หนึ่งในจุดแข็งหลักของ เซลล์ MC38 คือความเข้ากันได้ทางพันธุกรรมกับสายพันธุ์หนู C57BL/6 ที่มีอยู่อย่างแพร่หลาย ความเข้ากันได้นี้ทำให้นักวิจัยสามารถศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างเนื้องอกกับระบบภูมิคุ้มกันในโฮสต์ที่มีระบบภูมิคุ้มกันสมบูรณ์ได้ โดยหลีกเลี่ยงปัญหาจากภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่อง ซึ่งจำกัดคุณค่าในการประยุกต์ใช้ของแบบจำลองการปลูกถ่ายเนื้องอกจากสัตว์ต่างชนิด ระบบภูมิคุ้มกันที่สมบูรณ์ช่วยให้สามารถประเมินอย่างละเอียดได้ทั้งการตอบสนองของเซลล์ลิมโฟไซต์ T CD8-บวก ชีววิทยาของแมคโครฟาจที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอก กิจกรรมของเซลล์นักฆ่าธรรมชาติ (NK) และสเปกตรัมทั้งหมดของภูมิคุ้มกันต่อต้านเนื้องอกทั้งแบบปรับตัวและแบบธรรมชาติ

เนื่องจากก้อนมะเร็งต้นแบบถูกกระตุ้นทางเคมีด้วย DMH จึงทำให้ MC38 มีภาระการกลายพันธุ์ของก้อนมะเร็งสูง และแสดงออกของนีโอแอนติเจนที่มีคุณสมบัติกระตุ้นระบบภูมิคุ้มกัน ซึ่งได้รับการยืนยันผ่านการวิเคราะห์ลำดับจีโนมเอ็กโซมทั้งหมด (whole exome sequencing) และการวิเคราะห์เปปทิโดม MHC คลาส I [5]. พื้นหลังที่อุดมด้วยนีโอแอนติเจนนี้ทำให้โมเดลนี้ตอบสนองต่อสารยับยั้งจุดตรวจสอบระบบภูมิคุ้มกันที่มุ่งเป้าไปที่เส้นทางรับสัญญาณ PD-1 [3], ซึ่งถือเป็นหนึ่งในเหตุผลที่มันมักถูกใช้เป็นแบบจำลองสำหรับกลุ่มย่อยของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักในมนุษย์ที่มีการกลายพันธุ์สูง ซึ่งตอบสนองต่อการรักษาดังกล่าว ความตอบสนองของสายเซลล์นี้ต่อการรักษาด้วยภูมิคุ้มกัน ทำให้มันกลายเป็นหนึ่งในเครื่องมือมาตรฐานในระยะก่อนคลินิก สำหรับการประเมินการผสมผสานของตัวยับยั้งจุดตรวจภูมิคุ้มกันแบบใหม่และวัคซีนมะเร็ง โปรดทราบว่านีโอแอนติเจนเฉพาะที่มีอยู่ขึ้นอยู่กับสายเซลล์ย่อยที่ใช้ [3].

ระบบนิเวศที่กว้างขวางของสายพันธุ์ MC38 ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม ช่วยขยายประโยชน์ของแบบจำลองนี้ให้กว้างขึ้น สายเซลล์ Knockout ที่มุ่งเป้าไปที่ตัวควบคุมระบบภูมิคุ้มกัน เช่น PD-L1 (Cd274), B2m และ CD47 รวมถึงสายเซลล์รีพอร์ตเตอร์ที่แสดงออกลูซิเฟอเรสหรือโปรตีนเรืองแสง ได้รับการจัดหมวดหมู่ใน Cellosaurus เป็นสายเซลล์อนุพันธ์ของ CVCL_B288 และให้เครื่องมือที่พร้อมใช้งานสำหรับการศึกษาเชิงกลไกและการถ่ายภาพในร่างกาย (in vivo) เวลาเพิ่มตัวประมาณ 24 ชั่วโมง [4] ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในการดำเนินการทดลอง และทำให้สายเซลล์สามารถปรับเปลี่ยนทางพันธุกรรมได้ง่าย — โดยใช้เลนติไวรัส [12], เรโทรไวรัส [10], และวิธีการอิเล็กโทรโพเรชัน [3] — ได้ถูกพิสูจน์แล้วในหลายงานวิจัยที่เผยแพร่แล้ว

ข้อจำกัดของเซลล์ MC38

ข้อจำกัดสำคัญของแบบจำลอง MC38 คือความไม่สม่ำเสมอที่ได้รับการบันทึกไว้ระหว่างสายย่อยที่มีแหล่งกำเนิดต่างกัน การศึกษาในปี 2023 โดย Schrörs และคณะ ได้ดำเนินการวิเคราะห์ลำดับจีโนมเอ็กโซมและทรานสคริปโตมแบบเปรียบเทียบของเซลล์ MC38 จาก Kerafast (แหล่งกำเนิด NCI/NIH, MC38-K) และจากคอลเลกชันของศูนย์การแพทย์มหาวิทยาลัยไลเดน (MC38-L) และพบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในโปรไฟล์การกลายพันธุ์ จำนวนโครโมโซม และการแสดงออกของนีโอแอนติเจน [3]. MC38-L มีตัวแปรนิวคลีโอไทด์เดี่ยว (SNV) และการแทรกและลบขนาดเล็กมากกว่า MC38-K ประมาณ 1.3 เท่า, มีเพียง 35.3% ของความแปรผันที่ไม่ก่อให้เกิดการเปลี่ยนกรดอะมิโน และ 5.4% ของเหตุการณ์ยีนฟิวชันที่เหมือนกัน และจำนวนโครโมโซมที่คาดการณ์ได้คือ 2 สำหรับ MC38-K เทียบกับ 5 สำหรับ MC38-L. ที่สำคัญคือ neoepitopes Rpl18 และ Adpgk ที่ได้รับการศึกษาอย่างละเอียดนั้นไม่ปรากฏใน MC38-K ดังนั้น เซลล์ T ที่ถูกสร้างขึ้นเพื่อต่อต้าน neoepitopes ดังกล่าวจึงสามารถระบุและทำลาย MC38-L ได้ แต่ไม่สามารถทำลาย MC38-K ได้ ดังนั้น ผลลัพธ์ที่ได้จากสายย่อย MC38 หนึ่งสายอาจไม่สามารถทำซ้ำได้กับเซลล์จากแหล่งที่มาที่ต่างกัน

ในภาพรวม การวิเคราะห์ด้วย SNP array ได้ชี้ให้เห็นปัญหาเรื่องความผิดปกติของจำนวนโครโมโซม (aneuploidy) และการปนเปื้อนข้ามสายพันธุ์ในสายเซลล์หนูที่ใช้กันทั่วไป; MC38 เป็นหนึ่งใน 99 สายเซลล์ที่รวมอยู่ในชุดวิเคราะห์นั้น โดยในจำนวนนั้น มี 15 สายเซลล์ที่แตกต่างไปอย่างมีนัยสำคัญจากพื้นหลังทางพันธุกรรมที่รายงานไว้ [6]. การศึกษานี้ไม่รายงานการล้มเหลวในการตรวจสอบความถูกต้องของ MC38 อย่างเฉพาะเจาะจง แต่แสดงให้เห็นว่า การวิเคราะห์โปรไฟล์ STR เพียงอย่างเดียวอาจไม่สามารถแยกแยะสายย่อยที่มาจากสายพันธุ์ในbred เดียวกันได้ และไม่เปิดเผยการเปลี่ยนแปลงของโครโมโซม นักวิจัยที่ทำงานกับ MC38 ควรใช้วิธีการตรวจสอบความถูกต้องที่เข้มงวด และบันทึกแหล่งที่มาที่แม่นยำของเซลล์ที่ใช้ในแต่ละการศึกษา

การใช้คำศัพท์ที่เกี่ยวข้องกับคุณสมบัติภูมิคุ้มกันของ MC38 ต้องระมัดระวัง บทความวิจัยจากทศวรรษ 1990 และต้นทศวรรษ 2000 มักอธิบาย MC38 เป็นเนื้องอกที่มี "ความสามารถในการสร้างภูมิคุ้มกันต่ำ" หรือ "อ่อนแอ" เนื่องจากเซลล์ที่ไม่ผ่านการดัดแปลงจะเติบโตอย่างต่อเนื่องในหนู C57BL/6 ที่มีระบบภูมิคุ้มกันทำงานปกติ [10] [11] [19]. วรรณกรรมด้านภูมิคุ้มกันวิทยาโรคมะเร็งสมัยใหม่กลับเน้นย้ำถึงภาระการกลายพันธุ์ที่สูงและความไวต่อสารยับยั้งจุดตรวจสอบ [3]. คำอธิบายทั้งสองนั้นถูกต้องในบริบทของแต่ละคำ และผู้อ่านไม่ควรถือว่าทั้งสองคำนั้นขัดแย้งกัน

ในฐานะเป็นเนื้องอกในหนูที่ถูกเหนี่ยวนำด้วยสารเคมี MC38 ไม่แสดงลำดับการกลายพันธุ์ตัวขับเคลื่อนที่เป็นลักษณะเฉพาะของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักในมนุษย์ Cellosaurus ไม่มีข้อมูลการแปรผันลำดับพันธุกรรมที่ได้รับการตรวจสอบสำหรับสายพันธุ์นี้ แต่การขาดคำอธิบายไม่ได้เป็นหลักฐานว่าไม่มีการเปลี่ยนแปลงของยีนขับเคลื่อน: ตัวอย่างเช่น Schrörs และคณะ ได้ตรวจพบการกลายพันธุ์ของ Smad4 ใน MC38-L ซึ่งไม่ปรากฏใน MC38-K [3]. เนื่องจากสองสายย่อยนี้มีความแตกต่างกันอย่างมาก จึงควรหลีกเลี่ยงการให้คำกล่าวทั่วไปเกี่ยวกับ "ภาพรวม" ของการกลายพันธุ์ใน MC38 และนักวิจัยควรตรวจสอบจีโนไทป์ของสายพันธุ์ที่ตนเองใช้ สุดท้ายนี้ รายการใน Cellosaurus มีคำเตือนเกี่ยวกับจีโนมไมโทคอนเดรียของ MCA38 ที่ได้รับการเผยแพร่: ลำดับที่เก็บไว้ (KM820832.1) เป็นลำดับของหนูที่ถูกระบุว่ามีต้นกำเนิดจาก "rat isolate 406" ทั้งที่ MC38 มีต้นกำเนิดจากหนู [7], ซึ่งแสดงให้เห็นถึงความสำคัญของการตรวจสอบข้อมูลลำดับที่ได้รับการเผยแพร่ที่เกี่ยวข้องกับสายพันธุ์นี้

ดูข้อมูลจำเพาะทั้งหมดและสั่งซื้อ

การประยุกต์ใช้เซลล์ MC38

การรักษาโรคมะเร็งด้วยภูมิคุ้มกันและการวิจัยจุดตรวจสอบภูมิคุ้มกัน

โมเดล MC38 ได้กลายเป็นพื้นฐานสำคัญในการวิจัยสารยับยั้งจุดตรวจสอบภูมิคุ้มกัน เนื่องจากมีภาระการกลายพันธุ์สูงและมีความไวต่อการปิดกั้น PD-1/PD-L1 Yadav และคณะได้ใช้ MC38 ร่วมกับโมเดลหนูทดลองอีกตัวหนึ่ง เพื่อพัฒนาและตรวจสอบความถูกต้องของกระบวนการวิเคราะห์ด้วยสเปกโตรเมตรีมวลร่วมกับการจัดลำดับเอ็กโซม เพื่อทำนายการกลายพันธุ์ของเนื้องอกที่มีศักยภาพในการกระตุ้นภูมิคุ้มกัน จากความเปลี่ยนแปลงของกรดอะมิโนกว่า 1,300 จุดที่ระบุได้ ประมาณ 13% ถูกคาดการณ์ว่าจะจับกับ MHC class I ซึ่งส่วนน้อยในจำนวนนั้นได้รับการยืนยันด้วยเทคนิคสเปกโตรเมตรีมวล; การสร้างแบบจำลองโครงสร้างชี้ให้เห็นว่า การกลายพันธุ์ที่สัมผัสกับตัวทำละลายเป็นชนิดที่ก่อให้เกิดภูมิคุ้มกัน และการฉีดวัคซีนให้หนูได้ยืนยันว่า เปปไทด์ที่คาดการณ์ไว้แต่ละชนิดก่อให้เกิดการตอบสนองของเซลล์ T ที่มีประสิทธิภาพในการรักษา [5] การศึกษาสำคัญนี้ได้กำหนดให้ MC38 เป็นระบบมาตรฐานสำหรับการค้นพบนีโอแอนติเจน และช่วยกำหนดหลักการที่ปัจจุบันถูกนำไปใช้ในการพัฒนาวัคซีนมะเร็งแบบเฉพาะบุคคล

การวิจัยเกี่ยวกับการควบคุมระบบภูมิคุ้มกันผ่านกลัยแคนก็พึ่งพา MC38 เช่นกัน Cornelissen และคณะได้ใช้ CRISPR/Cas9 เพื่อปิดการทำงานของยีน CMAS ซึ่งเข้ารหัสเอนไซม์สำคัญในเส้นทางไซอะลิเลชัน และทำให้การแสดงออกของกรดไซอะลิกบนผิวเซลล์ถูกยกเลิกอย่างสมบูรณ์ [8]. ขัดกับความคาดหมาย เซลล์ MC38 ที่ถูกกำจัดไซอาลิกแอซิดอย่างสมบูรณ์เหล่านี้เติบโตเร็วกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญในร่างกาย แสดงความถี่ของเซลล์ T CD8-บวกภายในก้อนมะเร็งที่ลดลง และก่อให้เกิดการตายแบบอะพอพโทซิสของเซลล์ T CD8-บวกในลักษณะที่ไม่ขึ้นกับแอนติเจน การแสดงออกของ CMAS ที่ต่ำยังมีความสัมพันธ์กับระยะเวลาการรอดชีวิตโดยไม่มีโรคกำเริบที่สั้นลง ในกลุ่มผู้ป่วยมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักของมนุษย์ ดังนั้น งานวิจัยนี้จึงเป็นคำเตือนสำหรับกลยุทธ์การรักษาที่มุ่งกำจัดกระบวนการไซอะลิเลชันของเนื้องอก และทำให้ MC38 เป็นระบบที่มีค่าสำหรับการวิเคราะห์ปฏิสัมพันธ์ระหว่างไกลแคนกับระบบภูมิคุ้มกัน

การถ่ายภาพ PD-L1 ด้วยสารติดตาม PET แบบใหม่เป็นอีกหนึ่งการประยุกต์ใช้งานที่กำลังพัฒนา สารติดตามรังสีแบบเปปไทด์เชิงเส้นสองชนิด ได้แก่ [^64Cu]/[^68Ga]HKP2201 และไดเมอร์ของมัน HKP2202 ได้รับการตรวจสอบความถูกต้องในแบบจำลองหนูที่มีออลโลกราฟต์มะเร็งลำไส้ใหญ่ MC38 และมะเร็งเมลาโนมา B16F10 โดยการแสดงออกของ PD-L1 ได้รับการยืนยันด้วยวิธีอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์และอิมมูโนฮิสโตเคมีในทั้งสายเซลล์และก้อนมะเร็งของพวกมัน [9]. การศึกษาการจับตัวแบบแข่งขันและการบล็อกยืนยันความจำเพาะของเป้าหมาย และการถ่ายภาพ PET ร่วมกับการกระจายตัวในสิ่งมีชีวิตแบบ ex vivo แสดงให้เห็นการดูดซึมของเนื้องอกที่เด่นชัด พร้อมกับการกำจัดออกจากเลือดและอวัยวะหลักอย่างรวดเร็ว ดังนั้น การปลูกถ่ายเนื้องอก MC38 จึงเป็นหนึ่งในแพลตฟอร์มอ้างอิงสำหรับการประเมินความจำเพาะของสารติดตามในการพัฒนาเชิงแปลของการถ่ายภาพจุดตรวจภูมิคุ้มกันแบบไม่รุกล้ำ

การรักษาด้วยยีนไซโตไคน์และเวสิเคิลนอกเซลล์ที่ถูกดัดแปลง

เซลล์ MC38 ได้ถูกใช้อย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองที่มีภูมิคุ้มกันต่ำ เพื่อทดสอบกลยุทธ์การรักษาด้วยยีนที่อาศัยไซโตไคน์ Hiroishi และคณะได้แสดงให้เห็นว่า การถ่ายโอนยีนอินเตอร์เฟอรอน-อัลฟา (IFN-α) เข้าสู่เซลล์ MC38 ทำให้เกิดการปฏิเสธเซลล์ที่ถูกดัดแปลงในหนูที่มีระบบภูมิคุ้มกันสมบูรณ์ 13 ตัว จากทั้งหมด 15 ตัว, และว่าการผสมเซลล์ที่ได้รับการถ่ายโอนยีน IFN-α และ CD80 เข้าด้วยกันก่อให้เกิดผลต้านมะเร็งแบบเสริมฤทธิ์ โดยมีการปฏิเสธเซลล์ในสัตว์ทดลอง 14 ตัวจากทั้งหมด 15 ตัว [10]. Eguchi และคณะได้ขยายงานวิจัยนี้โดยการเปรียบเทียบโดยตรงระหว่างการบำบัดด้วยยีน IFN-α และ interleukin-12 (IL-12) ในเซลล์ MC38 และพบว่า IFN-α กระตุ้นการตอบสนองของเซลล์ T ไซโตท็อกซิกที่จำเพาะต่อเนื้องอกและภูมิคุ้มกันที่คงอยู่ยาวนาน ในขณะที่ IL-12 กระตุ้นการฆ่าเซลล์แบบไม่จำเพาะเป็นหลัก ซึ่งเกี่ยวข้องกับทั้งเซลล์ T CD8-บวกและเซลล์นักฆ่าธรรมชาติ [11].

Rossowska และคณะได้ให้ส่วนร่วมสำคัญต่อสาขานี้โดยการดัดแปลงเซลล์ MC38 ให้ปล่อยเวสิเคิลนอกเซลล์ (EVs) ที่บรรจุสารกระตุ้นระบบภูมิคุ้มกัน [12]. โดยใช้เวกเตอร์เลนติไวรัส ผู้วิจัยได้สร้างสายลูกของ MC38 ที่แสดงออก IL-12 ของหนูอย่างเกินระดับปกติ หรือแสดงออก shRNA ที่มุ่งเป้าไปที่ TGF-β1 หรือทั้งสองอย่าง และแสดงให้เห็นว่าการดัดแปลงทางพันธุกรรมของเซลล์ต้นแบบเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพในการบรรจุโมเลกุลที่สนใจเข้าไปในทั้งเอ็กโซโซมและไมโครเวสิเคิลที่มาจากเนื้องอก เอ็กโซโซมที่ถูกดัดแปลงยับยั้งการเติบโตของเนื้องอกในหนูที่มีเนื้องอก MC38 ใต้ผิวหนัง ในขณะที่เอ็กโซโซมจากเซลล์ที่ไม่ถูกดัดแปลงไม่สามารถทำได้ ผลลัพธ์ที่คงทนที่สุดจำเป็นต้องใช้ร่วมกับวัคซีนที่ใช้เซลล์เดนดริติก ซึ่งช่วยฟื้นฟูภูมิคุ้มกันต่อต้านเนื้องอกและกระตุ้นการตอบสนอง Th1 แบบระบบ [12]. การศึกษานี้ได้ยืนยันว่า เอ็กโซโซมที่ดัดแปลงจาก MC38 เป็นสารเสริมฤทธิ์ที่สามารถสนับสนุนการตอบสนองต่อต้านเนื้องอกแบบเฉพาะเจาะจงได้ แทนที่จะเป็นวัคซีนแบบเดี่ยว

เอ็กโซโซมที่สกัดจากเซลล์สโตรมาเมเซนไคมาลก็ได้รับการศึกษาในบริบทของ MC38 เช่นกัน Xing และเพื่อนร่วมงานได้ลดการแสดงออกของ GARP ในเซลล์สโตรมาเมเซนไคมาล และแสดงให้เห็นว่าเอ็กโซโซมจากเซลล์เหล่านี้ (siGARP-MSC) ยับยั้งการเพิ่มจำนวน การเคลื่อนที่ และการรุกรานของ MC38 ในหลอดทดลอง ลดการหลั่ง IL-6 และทำให้เส้นทาง JAK1/STAT3 ไม่ทำงานบางส่วน [13]. สิ่งนี้ชี้ให้เห็นถึงแกนพาราครีนระหว่างเซลล์สโตรมาและเซลล์มะเร็ง ซึ่งสามารถเป็นเป้าหมายในการรักษาได้ แม้ว่าผลการวิจัยจนถึงขณะนี้ยังจำกัดอยู่เพียงการเพาะเลี้ยงเซลล์เท่านั้น โดยรวมแล้ว การศึกษาเหล่านี้แสดงให้เห็นถึงความหลากหลายของแบบจำลอง MC38 ในการประเมินกลยุทธ์การรักษาด้วยภูมิคุ้มกันทั้งแบบไม่มีเซลล์และแบบใช้เวสิเคิล

ภูมิคุ้มกันวิทยาของเนื้องอก การยึดติด และการหลบเลี่ยงระบบภูมิคุ้มกัน

การปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์ลิมโฟไซต์ T และเซลล์มะเร็ง MC38 ได้เป็นหัวข้อของการศึกษาเชิงกลไกอย่างละเอียด MacKenzie, Hoskin และ Blay เป็นผู้รายงานเป็นครั้งแรกว่า การยึดติดของเซลล์ T ที่ถูกกระตุ้นด้วยแอนติบอดีต่อ CD3 กับเซลล์ MCA-38 ได้รับการสื่อกลางหลักผ่านอินทิกริน VLA-4 (α4β1), และว่ากระบวนการนี้ได้รับการส่งเสริมจากสัญญาณของโปรตีนไทโรซีนไคเนสและโปรตีนไคเนสซี ในขณะที่ถูกยับยั้งโดยเส้นทางที่ขึ้นอยู่กับ cAMP โดยกลไกการควบคุมตั้งอยู่เป็นหลักในเซลล์ผู้ส่งสัญญาณ [14]. การศึกษาต่อมาโดยกลุ่มนักวิจัยเดียวกันได้ทำให้ภาพรวมชัดเจนขึ้น: แอนติบอดีต่อ α4 หรือ β7 หรือต่อ VCAM-1 บนเซลล์มะเร็ง ยับยั้งการยึดติด ในขณะที่แอนติบอดีต่อ β1 ไม่ยับยั้ง ซึ่งระบุให้ α4β7–VCAM-1 เป็นแกนหลัก งานวิจัยดังกล่าวยังแสดงให้เห็นว่า อะดีโนซีน ซึ่งเป็นนิวคลีโอไซด์ที่มีอยู่มากในสภาพแวดล้อมจุลภาคของเนื้องอกที่มีภาวะขาดออกซิเจน จะยับยั้งการยึดเกาะของเซลล์ที โดยเฉพาะโดยการปิดกั้นการทำงานของ α4β7 [15] ผู้อ่านควรทราบว่าบทความทั้งสองฉบับกำหนดหน่วยย่อย β ที่ต่างกันให้กับปฏิสัมพันธ์เดียวกัน

บทบาทของเซลล์นักฆ่าธรรมชาติ (natural killer cells) ในการควบคุมการแพร่กระจายของ MC38 ไปยังตับได้ถูกศึกษาทั้งในสัตว์ทดลองที่มีระบบภูมิคุ้มกันสมบูรณ์และสัตว์ทดลองที่ขาดระบบภูมิคุ้มกัน Cohen และคณะได้ฉีดเซลล์ MCA-38 (LD-MCA-38) ที่ได้จากตับเข้าสู่หลอดเลือด ileocolic และพบว่าหนู C57BL/6 แบบปกติเก็บรักษาเซลล์มะเร็งไว้ในตับและเกิดจุดมะเร็งในตับ ในขณะที่หนู nude ที่ไม่มีต่อมไทมัสสามารถกำจัดเซลล์ที่ถูกติดฉลากได้ประมาณ 60% ภายใน 24 ชั่วโมง และไม่เกิดรอยโรคในตับ [16]. เซลล์ตับที่ไม่ใช่เซลล์เนื้อตับจากหนูเปลือยหรือหนูที่ได้รับการรักษาด้วย poly(I:C) — แต่ไม่ใช่จากหนูทั่วไปที่ยังไม่ได้รับการรักษา — มีฤทธิ์ทำลาย LD-MCA-38 และกลุ่มเซลล์ที่รับผิดชอบเป็นเซลล์ที่ไม่ติดผนังและมีผลบวกต่อ asialo-GM1 (AsGM1); การรักษาด้วยแอนติบอดีต่อ AsGM1 ได้ทำให้การป้องกันนี้หายไป Volpe และเพื่อนร่วมงานได้ขยายผลการค้นพบนี้ โดยแสดงให้เห็นว่าการลดจำนวนเซลล์ด้วยแอนติบอดีต่อ AsGM1 หรือต่อ-NK1.1 ได้เพิ่มจำนวนจุดแพร่กระจายในตับอย่างชัดเจนและทำให้ระยะเวลาการอยู่รอดสั้นลง ในขณะที่การลดจำนวนเซลล์ T ด้วยแอนติบอดีต่อ Thy1.2 ได้ลดจำนวนจุดแพร่กระจายอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งชี้ให้เห็นว่าเซลล์ NK ไม่ใช่เซลล์ T เป็นตัวหลักที่ป้องกันการแพร่กระจายไปยังตับของ LD-MCA-38 [17]. Johnkoski และเพื่อนร่วมงานได้แสดงให้เห็นเพิ่มเติมว่า จุดแพร่กระจายในตับเพียงจุดเดียวของ LD-MCA-38 ซึ่งสร้างขึ้นโดยการฉีดใต้แคปซูลตับ ได้เพิ่มประสิทธิภาพการทำลายเซลล์และการเพิ่มจำนวนของเซลล์ที่ไม่ใช่เซลล์พารันไคมาในตับ เพิ่มสัดส่วนของเซลล์ T CD8-บวกและเซลล์ T γδ รวมถึงเพิ่มระดับอินเตอร์ลิวคิน-6 และปัจจัยทำลายเนื้องอก [18].

วัคซีนมะเร็งและการระบุแอนติเจน

เซลล์ MC38 ได้ทำหน้าที่เป็นแพลตฟอร์มที่เชื่อถือได้สำหรับการพัฒนาและเปรียบเทียบกลยุทธ์วัคซีนเซลล์มะเร็งทั้งตัว Hodge และ Schlom ได้เปรียบเทียบเวกเตอร์เรโทรไวรัสและเวกเตอร์พอกซ์ไวรัส (วัคซีนเนีย) สำหรับการส่งโมเลกุลร่วมกระตุ้น B7-1 ไปยังเซลล์ MC38 [19]. ทั้งสองเวกเตอร์ต่างกระตุ้นการแสดงออกของ B7-1 บนผิวเซลล์ในระดับที่เท่ากัน และให้การป้องกันที่เท่ากันต่อการท้าทายด้วยเซลล์ MC38 ดั้งเดิม 14 วันต่อมา อย่างไรก็ตาม เมื่อทำการท้าทายซ้ำในวันที่ 40 วัน วัคซีนเรโทรไวรัสมีประสิทธิภาพต่ำกว่า และเมื่อเทียบกับภาวะแพร่กระจายไปยังปอดที่ก่อตัวแล้ว วัคซีนที่ใช้เวกเตอร์วัคซีนเนียมีประสิทธิภาพเหนือกว่าอย่างมีนัยสำคัญ (P = 0.0351; P = 0.024 ในหนูที่มีภูมิคุ้มกันต่อวัคซีนวัคซีเนีย; P = 0.0014 ในการวิเคราะห์รวม). การศึกษานี้สรุปว่าวัคซีนเซลล์มะเร็งทั้งตัวที่ใช้ไวรัสพอกซ์เป็นเวกเตอร์มีประสิทธิภาพอย่างน้อยเท่ากับ และบางครั้งมีประสิทธิภาพมากกว่า วัคซีนเรโทรไวรัส — ผลค้นพบนี้ได้เป็นพื้นฐานสำหรับการพัฒนาวัคซีนมะเร็งที่ใช้ไวรัสพอกซ์เป็นเวกเตอร์สู่การประยุกต์ใช้ทางคลินิกในขั้นต่อไป Lorenz และเพื่อนร่วมงานได้ใช้เซลล์ MC38 ที่ติดเชื้อไวรัสวัคซีนิอาแบบรีคอมบิแนนท์ ซึ่งเข้ารหัสโปรตีน LFA-3 ของหนู (CD48) เพื่อแสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของ LFA-3 ที่ถูกบังคับเพิ่มช่วยเพิ่มการเพิ่มจำนวน การยึดติด และความทำลายเซลล์ของเซลล์ T ในหลอดทดลอง และป้องกันการเติบโตของก้อนมะเร็งได้อย่างสมบูรณ์ในหนู C57BL/6 ที่มีสายพันธุ์เดียวกัน พร้อมทั้งให้การป้องกันบางส่วนต่อการท้าทายในภายหลังด้วยเซลล์พ่อแม่ที่ยังไม่ติดเชื้อ [20].

การระบุแอนติเจนของเนื้องอกโดยใช้วิธีการ SEREX ได้ถูกนำไปใช้กับเซลล์ MC38 โดย Hampton และคณะ ซึ่งได้ทำการสร้างภูมิคุ้มกันให้กับหนู C57BL/6 ด้วยเซลล์ MC38 และคัดกรองไลบรารีการแสดงออกที่สกัดจาก MC38 ด้วยซีรั่มภูมิคุ้มกัน [21]. วิธีการนี้ระบุโปรตีนเอนเวลอป (env) ของไวรัสลิวคีเมียแบบเอโคโทรปิกที่สร้างขึ้นในร่างกายเอง และโปรตีน ATRX ของหนู เป็นแอนติเจนเนื้องอกที่เป็นไปได้ ซึ่งช่วยขยายชุดแอนติเจนที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอกในหนูที่รู้จักกันอยู่แล้ว และให้เครื่องมือสำหรับการศึกษาวัคซีนเชิงกลไก Takeda และเพื่อนร่วมงานได้สร้างเซลล์ฟิวชันจากเซลล์มะเร็ง MC38 และเซลล์เดนดริติก รวมถึงเซลล์เดนดริติกที่แยกได้จากสัตว์ทดลองที่มีมะเร็ง และแสดงให้เห็นว่าการฉีดวัคซีนด้วยทั้งสองสูตรสามารถกระตุ้นกิจกรรมไซโตไลติกของเซลล์สเปเลโนไซต์ต่อ MC38 ได้ในระดับสูงเท่ากัน และยับยั้งการแพร่กระจายของ MC38 ไปยังปอดอย่างมีนัยสำคัญ [22].

วิธีการรักษาด้วยยีนที่แตกต่างออกไปได้ใช้ประโยชน์จากระบบภูมิคุ้มกันต่อเอพิโทป α(1,3)galactosyl (αGal) Unfer และเพื่อนร่วมงานได้นำเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ MC38 ที่แสดง αGal มาท้าทายหนูที่ถูกตัดยีน α(1,3)galactosyltransferase (αGT) ซึ่งเช่นเดียวกับมนุษย์ที่ขาดเอพิโทปนี้และสามารถสร้างแอนติบอดีต่อ Gal ได้ [23]. หนูที่ได้รับการสร้างภูมิคุ้มกันด้วยเม็ดเลือดแดงของกระต่าย ได้พัฒนาความเข้มข้นของแอนติบอดีต่อ αGal ที่ใกล้เคียงกับที่พบในซีรั่มของมนุษย์ โดยส่วนใหญ่เป็น IgG1 และ IgG3 และแสดงให้เห็นถึงการรอดชีวิตที่ดีขึ้นและการพัฒนาของก้อนมะเร็งที่ช้าลง เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมที่ไม่ได้สร้างภูมิคุ้มกัน ทั้งกลุ่มหนู knockout และกลุ่ม wild-type การศึกษานี้ให้หลักฐานเชิงแนวคิดใน vivo ว่า αGT เป็นยีนฆ่าตัวตายในการรักษาด้วยยีนสำหรับมะเร็งลำไส้ใหญ่; การแตกสลายของเซลล์ที่ถูกถ่ายทอด αGal โดยระบบคอมพลีเมนต์ได้ถูกแสดงให้เห็นก่อนหน้านี้ใน vitro โดยใช้ซีรั่มมนุษย์

กลยุทธ์การรักษาใหม่และการทดสอบยา

เซลล์ MC38 ได้ถูกนำมาใช้เพื่อประเมินวิธีการรักษาทางเภสัชวิทยาและทางกายภาพต่าง ๆ สำหรับโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก Kuriyama และเพื่อนร่วมงานได้แสดงให้เห็นว่า การทำให้เซลล์ผ่านไฟฟ้า (electropermeabilization) เพิ่มความไวของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ในหนู รวมถึง MC38 ต่อเบโลไมซิน (bleomycin) ในหลอดทดลองอย่างชัดเจน แต่ไม่เพิ่มต่อ 5-fluorouracil หรือ cisplatin [24] ในทดลอง in vivo ที่ดำเนินการควบคู่กัน การรักษาด้วยเคมีบำบัดไฟฟ้าโดยใช้เบโลไมซินหรือซิสพลาติน ทำให้ก้อนมะเร็งลำไส้ใหญ่ใต้ผิวหนังลดลงอย่างสมบูรณ์ในสัตว์ทดลอง 5 ตัวและ 4 ตัว จากทั้งหมด 8 ตัว ตามลำดับ ซึ่งผลดังกล่าวเกิดจากการสะสมของยาภายในก้อนมะเร็งที่เพิ่มขึ้น; รายงานที่เผยแพร่ไม่ได้ระบุอย่างชัดเจนว่าใช้สายเซลล์ใดในสองสายเซลล์ดังกล่าวสำหรับการปลูกถ่ายนี้ Manome และเพื่อนร่วมงานได้ใช้เซลล์ MC38 เพื่อแสดงให้เห็นว่า การส่งยีนด้วยคลื่นเสียงอัลตราซาวนด์สามารถนำ DNA พลาสมิดแบบเปลือยเข้าสู่เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ได้ทั้งในหลอดทดลองและในก้อนมะเร็ง MC38 ที่เติบโตในหนูซินเจเนอิก ซึ่งแสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ของการใช้คลื่นเสียงอัลตราซาวนด์เป็นเทคนิคการส่งยีนแบบไม่ใช้ไวรัส [25].

โปรดรักของไดโคลฟีแนคที่ถูกแทนที่ด้วยคาร์โบแรนได้รับการประเมินใหม่โดยใช้แบบจำลอง MC38 ในชุดที่ออกแบบใหม่ อะมิดีนแบบซวิทเทอร์ไอออนที่มีกลุ่มนิโด-คลัสเตอร์ได้ทำให้เซลล์ MC38 เสียชีวิตในช่วงความเข้มข้นไมโครโมลาร์ต่ำ โดยทำงานหลักผ่านการยับยั้งการแบ่งเซลล์อย่างรุนแรงและการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสในระดับปานกลาง พร้อมกับการลดลงของสารออกซิเจนและไนโตรเจนที่มีปฏิกิริยา ในขณะที่ไดโคลฟีแนคเองและออกซินโดลที่ถูกแทนที่ด้วยคาร์โบแรนไม่ก่อให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลล์ [26]. วิธีการออปโตเจเนติกส์ยังได้ใช้เซลล์ MC38 ด้วย: เซลล์ MC38 และ B16F10 ที่แสดงออกโปรตีนปั๊มโปรตอนแบบออกสู่ภายนอกที่ขับเคลื่อนด้วยแสง archaerhodopsin-3 (AR3) ได้เกิดการตายแบบอะพอพโทซิสเมื่อได้รับแสงสีเขียว และก้อนมะเร็งที่แสดงออก AR3 ซึ่งปลูกถ่ายเข้าสู่หนู C57BL/6 แสดงการหดตัวที่ชัดเจนหรือการยับยั้งการเติบโตหลังการฉายแสง [27]. Park และคณะได้ใช้เซลล์ MC38 เป็นกลุ่มควบคุมสำหรับมะเร็งลำไส้ใหญ่ในการศึกษาการรักษาด้วยยีนที่มุ่งเป้าไปที่มะเร็งเมลาโนมา โดยใช้โครงสร้างโปรโมเตอร์/เอนแฮนเซอร์ที่จำเพาะต่อเมลาโนไซต์ ซึ่งเชื่อมโยงกับยีน purine nucleoside phosphorylase ของ Escherichia coli; 96% ของเซลล์ MC38 ยังคงมีชีวิตอยู่หลังการรักษาด้วยโปรดรัก ซึ่งยืนยันการแสดงออกที่จำกัดเฉพาะในเนื้อเยื่อ [28].

สรุป

เซลล์ MC38 มีบทบาทสำคัญในการวิจัยโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่และลำไส้ตรง รวมถึงการวิจัยด้านภูมิคุ้มกันมะเร็ง ความเข้ากันได้ทางพันธุกรรมกับหนู C57BL/6 ภาระการกลายพันธุ์ที่สูง ภูมิทัศน์นีโอแอนติเจนที่หลากหลาย และความไวต่อตัวยับยั้งจุดตรวจภูมิคุ้มกัน ล้วนทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นหนึ่งในแบบจำลองก่อนคลินิกที่ให้ข้อมูลมากที่สุดสำหรับการศึกษาเนื้องอกในลำไส้ใหญ่, การตอบสนองของเซลล์ลิมโฟไซต์ T CD8-บวก, แมคโครฟาจที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอก, วัคซีนมะเร็ง และชีววิทยาของเส้นทางตัวรับโปรแกรมเซลล์ตาย 1 (PD-1) งานวิจัยที่เผยแพร่มาหลายทศวรรษได้ยืนยันความน่าเชื่อถือของโมเดลนี้ในด้านการบำบัดด้วยยีน ชีววิทยาการยึดติด การแพร่กระจายไปยังตับ และการประเมินยาใหม่ ในขณะที่การศึกษาล่าสุดที่ใช้ประโยชน์จากเวสิเคิลนอกเซลล์ การถ่ายภาพ PET และออปโตเจเนติกส์ ยังคงขยายความเกี่ยวข้องในการประยุกต์ใช้ทางคลินิกต่อไป เนื่องจากมีความแตกต่างที่ได้รับการบันทึกไว้ระหว่างสายย่อย จึงควรบันทึกแหล่งที่มาและตรวจสอบจีโนไทป์สำหรับทุกการศึกษา นักวิจัยที่ต้องการแบบจำลองมะเร็งลำไส้ใหญ่ในหนูที่เชื่อถือได้และได้รับการศึกษาอย่างละเอียด สามารถสั่งซื้อหรือสอบถามเกี่ยวกับเซลล์ MC38 ได้โดยตรงที่ cytion.com.

บทความสำคัญ

1. Corbett TH, Griswold DP Jr, Roberts BJ, et al. (1975) ความสัมพันธ์ในการก่อให้เกิดเนื้องอกในการพัฒนาโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่ที่สามารถปลูกถ่ายได้ในหนูสำหรับการทดสอบเคมีบำบัด พร้อมหมายเหตุเกี่ยวกับโครงสร้างของสารก่อมะเร็ง Cancer Research 35:2434–2439. PMID: 1149045
2. Tan MH, Holyoke ED, Goldrosen MH (1976) มะเร็งต่อมน้ำเหลืองลำไส้ใหญ่ในหนู: วิธีการเพาะเลี้ยงแบบเลือกในหลอดทดลอง Journal of the National Cancer Institute 56:871–873. PMID: 1255804 · DOI: 10.1093/jnci/56.4.871
3. Schrörs B, Hos BJ, Yildiz IG, et al. (2023) สายเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ MC38 จากสองแหล่งที่มาต่างกัน แสดงความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในทรานสคริปโตม มูตาโนม และการแสดงออกของนีโอแอนติเจน Frontiers in Immunology 14:1102282. PMID: 36969213 · DOI: 10.3389/fimmu.2023.1102282
4. Morimoto-Tomita M, Ohashi Y, Matsubara A, et al. (2005) เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของหนูที่ถูกสร้างขึ้นเพื่อมีอัตราการเกิดการแพร่กระจายไปยังตับในการทดลองสูง แสดงการเติบโตที่เร่งขึ้นและไม่ขึ้นอยู่กับการยึดติด Clinical & Experimental Metastasis 22:513–521. PMID: 16320114 · DOI: 10.1007/s10585-005-3585-0
5. Yadav M, Jhunjhunwala S, Phung QT, et al. (2014) การคาดการณ์การกลายพันธุ์ของเนื้องอกที่มีคุณสมบัติสร้างภูมิคุ้มกัน โดยการรวมเทคนิคสเปกโตรเมตรีมวลและการหาลำดับเอ็กโซม Nature 515:572–576. PMID: 25428506 · DOI: 10.1038/nature14001
6. Didion JP, Buus RJ, Naghashfar Z, et al. (2014) การวิเคราะห์โปรไฟล์ SNP array ของสายเซลล์หนูช่วยระบุสายพันธุ์ต้นกำเนิดของพวกมัน และเปิดเผยการปนเปื้อนข้ามสายพันธุ์และภาวะแอนูพลอยดีที่แพร่หลาย BMC Genomics 15:847. PMID: 25277546 · DOI: 10.1186/1471-2164-15-847
7. Zhang CF, Yu XJ, Wang BY, et al. (2016) ลำดับจีโนมไมโทคอนเดรียทั้งหมดของสายเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก MCA38 ของหนูทดลอง. Mitochondrial DNA Part A 27:2034–2035. PMID: 25434994 · DOI: 10.3109/19401736.2014.974176 — ดูหมายเหตุในรายการ Cellosaurus CVCL_B288.
8. Cornelissen LAM, Blanas A, van der Horst JC, et al. (2019) การรบกวนกระบวนการเมแทบอลิซึมของกรดไซอาลิก ส่งเสริมการเติบโตของเนื้องอกโดยการเพิ่มการตายแบบอะพอพโทซิสของเซลล์ T CD8+ International Journal of Cancer 144:2290–2302. PMID: 30578646 · DOI: 10.1002/ijc.32084
9. Zhang L, Zhang S, Wu J, et al. (2023) สารติดตาม PET แบบเปปไทด์เชิงเส้นสำหรับการถ่ายภาพ PD-L1 ในเนื้องอก. Molecular Pharmaceutics 20:4256–4267. PMID: 37368947 · DOI: 10.1021/acs.molpharmaceut.3c00382
10. Hiroishi K, Tüting T, Tahara H, Lotze MT (1999) การรักษาด้วยยีนอินเตอร์เฟอรอน-อัลฟา ร่วมกับการถ่ายทอดยีน CD80 ช่วยลดความสามารถในการก่อตัวเป็นเนื้องอกและการเติบโตของเนื้องอกที่ก่อตัวแล้วในแบบจำลองเนื้องอกที่มีภูมิคุ้มกันต่ำ Gene Therapy 6:1988–1994. PMID: 10637450 · DOI: 10.1038/sj.gt.3301034
11. Eguchi J, Hiroishi K, Ishii S, Mitamura K (2003) การรักษาด้วยยีนอินเตอร์เฟอรอน-อัลฟาและอินเตอร์ลิวคิน-12 สำหรับโรคมะเร็ง: อินเตอร์เฟอรอน-อัลฟา กระตุ้นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันที่เฉพาะเจาะจงต่อเนื้องอก ในขณะที่อินเตอร์ลิวคิน-12 กระตุ้นการฆ่าเซลล์ที่ไม่เฉพาะเจาะจง. Cancer Immunology, Immunotherapy 52:378–386. PMID: 12739068 · DOI: 10.1007/s00262-002-0367-2
12. Rossowska J, Anger N, Wegierek K, et al. (2019) ศักยภาพต้านมะเร็งของเวสิเคิลนอกเซลล์ที่ถูกปล่อยออกมาจากเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของหนูที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรม ซึ่งมีการแสดงออกเกินของอินเตอร์ลิวคิน-12 และ shRNA สำหรับ TGF-β1. Frontiers in Immunology 10:211. PMID: 30814999 · DOI: 10.3389/fimmu.2019.00211
13. Xing H, Liang C, Xu X, et al. (2020) เซลล์สโตรมาเมเซนไคมัล/เซลล์คล้ายเซลล์ต้นกำเนิดที่มีการลดการแสดงออกของ GARP ยับยั้งการเพิ่มจำนวนและการรุกรานของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของหนู (MC38) ผ่านทางเอ็กโซโซม. Journal of Cellular and Molecular Medicine 24:13984–13990. PMID: 33155413 · DOI: 10.1111/jcmm.16008
14. MacKenzie WM, Hoskin DW, Blay J (1999) การยึดติดของเซลล์ T ของหนูที่ถูกกระตุ้นด้วยแอนติบอดีต่อ CD3 กับเซลล์อะดีโนคาร์ซิโนมาของลำไส้ใหญ่ในหนูชนิดเดียวกัน ถูกควบคุมอย่างแตกต่างกันโดยทางสัญญาณที่ขึ้นอยู่กับโปรตีนไทโรซีนไคเนส, โปรตีนไคเนส C และ cAMP ในเซลล์ผู้ส่งสัญญาณ Biochemical and Biophysical Research Communications 255:460–465. PMID: 10049731 · DOI: 10.1006/bbrc.1999.0232
15. MacKenzie WM, Hoskin DW, Blay J (2002) อะดีโนซีนยับยั้งการยึดติดของเซลล์ลิมโฟไซต์ T กับเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองลำไส้ใหญ่แบบอะดีโนคาร์ซิโนมา ที่ถูกสื่อกลางโดยอินทิกริน alpha(4)beta(7). Experimental Cell Research 276:90–100. PMID: 11978011 · DOI: 10.1006/excr.2002.5514
16. Cohen SA, Tzung SP, Doerr RJ, Goldrosen MH (1990) บทบาทของเซลล์ตับที่แสดง asialo-GM1 จากหนูไร้ต่อมไทมัส (athymic nude) หรือหนูที่ได้รับการรักษาด้วยกรดโพลีอิโนซินิก-โพลีไซทิไดลิก (polyinosinic-polycytidylic acid) ในการยับยั้งการแพร่กระจายไปยังตับจากการทดลองที่ต้นกำเนิดจากลำไส้ใหญ่. Cancer Research 50:1834–1840. PMID: 2306736
17. Volpe CM, Mehta N, Kim U, et al. (1999) เซลล์ NK ที่แสดงผลบวกต่อ AsGM1+ ช่วยป้องกันการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็ง LD-MCA-38 ที่บุกรุกในหนูไร้ต่อมไทมัส The Journal of Surgical Research 84:157–161. PMID: 10357913 · DOI: 10.1006/jsre.1999.5631
18. Johnkoski JA, Tzung SP, Doerr RJ, Cohen SA (1992) การแพร่กระจายไปยังตับทำให้การทำงานของระบบภูมิคุ้มกันของเซลล์ที่ไม่ใช่เซลล์เนื้อตับในหนูเปลี่ยนแปลงไป. Archives of Surgery 127:1325–1329. PMID: 1444795 · DOI: 10.1001/archsurg.1992.01420110073015
19. Hodge JW, Schlom J (1999) การศึกษาเปรียบเทียบระหว่างเวกเตอร์เรโทรไวรัสกับเวกเตอร์พอกซ์ไวรัสในวัคซีนเซลล์มะเร็งทั้งตัว Cancer Research 59:5106–5111. PMID: 10537283
20. Lorenz MG, Kantor JA, Schlom J, Hodge JW (1999) การกระตุ้นภูมิคุ้มกันต้านมะเร็งที่เกิดจากเซลล์มะเร็งที่แสดงแอนะล็อก LFA-3 ของหนูผ่านไวรัสวัคซีนิอาที่ดัดแปลงพันธุกรรม Human Gene Therapy 10:623–631. PMID: 10094205 · DOI: 10.1089/10430349950018698
21. Hampton TA, Conry RM, Khazaeli MB, et al. (2000) การวิเคราะห์ SEREX เพื่อระบุแอนติเจนของเนื้องอกในแบบจำลองหนูของมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา. Cancer Gene Therapy 7:446–455. PMID: 10766351 · DOI: 10.1038/sj.cgt.7700124
22. Takeda A, Homma S, Okamoto T, et al. (2003) การรวมตัวของเซลล์เดนดริติกที่ยังไม่สุกกับเซลล์มะเร็งก่อให้เกิดภูมิคุ้มกันต้านมะเร็งที่มีประสิทธิภาพสูง European Journal of Clinical Investigation 33:897–904. PMID: 14511362 · DOI: 10.1046/j.1365-2362.2003.01194.x
23. Unfer RC, Hellrung D, Link CJ Jr (2003) ระบบภูมิคุ้มกันต่อเอพิโทป alpha(1,3)galactosyl ให้การป้องกันในหนูทดลองที่ถูกท้าทายด้วยเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ที่แสดงออก alpha(1,3)galactosyl-transferase: ยีนฆ่าตัวตายแบบใหม่สำหรับการรักษาด้วยยีนมะเร็ง. Cancer Research 63:987–993. PMID: 12615713
24. Kuriyama S, Matsumoto M, Mitoro A, et al. (2000) การรักษาด้วยเคมีบำบัดทางไฟฟ้าสำหรับมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักโดยใช้สารเคมีบำบัดที่ใช้กันทั่วไปในแบบจำลองหนูทดลอง. Digestive Diseases and Sciences 45:1568–1577. PMID: 11007108 · DOI: 10.1023/a:1005565027969
25. Manome Y, Nakamura M, Ohno T, Furuhata H (2000) คลื่นเสียงช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการนำ DNA plasmide ที่ไม่ถูกหุ้มเข้าสู่เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ทั้งในหลอดทดลองและในร่างกายจริง Human Gene Therapy 11:1521–1528. PMID: 10945766 · DOI: 10.1089/10430340050083252
26. Selg C, Gordić V, Krajnović T, et al. (2024) การออกแบบใหม่และการประเมินผลของยาต้นแบบที่มีกลุ่มคาร์โบแรนแทนที่บนพื้นฐานของไดโคลฟีแนค และศักยภาพในการต้านมะเร็งของพวกมัน. Scientific Reports 14:30488. PMID: 39681576 · DOI: 10.1038/s41598-024-81414-x
27. Nakao S, Kojima K, Sato K, et al. (2025) การรักษาโรคมะเร็งด้วยวิธีออปโตเจเนติกส์ โดยใช้โรโดปซินอาร์คีโรโดปซิน-3 (AR3) ซึ่งเป็นปั๊มโปรตอนที่ขับเคลื่อนด้วยแสง Journal of the American Chemical Society 147:44131–44140. PMID: 41186408 · DOI: 10.1021/jacs.5c13053
28. Park BJ, Brown CK, Hu Y, et al. (1999) การเพิ่มการแสดงออกของยีนเฉพาะมะเร็งเมลาโนมาโดยใช้ตัวเสริมการแสดงออกแบบแทนเด็มที่เฉพาะกับเซลล์เมลาโนไซต์ ส่งผลให้เพิ่มความเป็นพิษต่อเซลล์ของยีน purine nucleoside phosphorylase ในมะเร็งเมลาโนมา. Human Gene Therapy 10:889–898. PMID: 10223723 · DOI: 10.1089/10430349950018292

ข้อมูลบรรณานุกรมและบทคัดย่อที่นำมาจาก PubMed ข้อมูลเมตาดาต้าของสายเซลล์จากข้อมูล Cellosaurus สำหรับ MC-38 (RRID:CVCL_B288)