บทนำ

เซลล์ AML12, หรือที่รู้จักกันในชื่อ AML-12, AML 12 และ Alpha Mouse Liver 12 เป็นสายเซลล์ตับของหนูที่ได้รับการพัฒนาอย่างสมบูรณ์และถูกใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยทางชีวการแพทย์ Wu, Merlino และ Fausto ได้สร้างสายเซลล์นี้ขึ้นในปี 1994 จากตับของหนูทรานส์เจนิกที่มีการแสดงออกเกินของปัจจัยการเจริญเติบโตที่เปลี่ยนรูปของมนุษย์ (TGF-α) ซึ่งเป็นสารกระตุ้นการแบ่งตัวของเซลล์ตับที่มีประสิทธิภาพสูง [1] ต่างจากเซลล์ตับปฐมภูมิ เซลล์ AML12 ยังคงรักษาหน้าที่สำคัญของการแยกตัว — รวมถึงการแสดงออกของเพอร์ออกซิโซมและโครงสร้างที่คล้ายกับท่อน้ำดี — ผ่านการเพาะเลี้ยงหลายครั้งโดยไม่ก่อให้เกิดมะเร็ง การผสมผสานระหว่างความเสถียรภาพและการรักษาลักษณะฟีโนไทป์ของเซลล์ตับนี้ ทำให้เซลล์ AML12 กลายเป็นแพลตฟอร์มในหลอดทดลองที่ได้รับความนิยมสำหรับการศึกษาการเผาผลาญไขมัน โรคตับไขมันที่ไม่เกี่ยวข้องกับแอลกอฮอล์ ความเสียหายของตับที่เกิดจากสารเคมีและยา ความต้านทานต่ออินซูลิน และการตายแบบอะพอพโทซิสของเซลล์ตับ นอกจากนี้ เนื่องจากเซลล์ AML12 มีต้นกำเนิดจากหนู จึงสามารถเปรียบเทียบกับแบบจำลองสัตว์ทรานส์เจนิกและแบบจำลองสัตว์น็อกเอาต์ได้โดยตรง ซึ่งช่วยขยายประโยชน์ในการประยุกต์ใช้ในบริบทการวิจัยโรคตับที่หลากหลาย

จุดสำคัญที่ควรจดจำ

• เซลล์ AML12 เป็นเซลล์ตับของหนูที่ได้รับการแยกตัวแล้ว และไม่ก่อให้เกิดมะเร็ง ซึ่งได้มาจากหนูทรานส์เจนิก TGF-α [1]
• พวกมันยังคงรักษาลักษณะเฉพาะของเซลล์ตับ เช่น เพอร์ออกซิโซม โครงสร้างคล้ายท่อน้ำดี และระดับ mRNA ที่สูงของโปรตีนในเลือดที่เฉพาะกับตับ แม้ว่าการแสดงออกของบางชนิดจะลดลงเมื่อผ่านกระบวนการเพาะเลี้ยงหลายครั้ง [1]
• สายพันธุ์นี้ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการสร้างแบบจำลองโรคตับไขมันที่ไม่เกี่ยวข้องกับแอลกอฮอล์ การบาดเจ็บของตับที่เกิดจากยา และความผิดปกติในการเผาผลาญไขมัน
• เซลล์ AML12 ตอบสนองต่อสัญญาณสำคัญจากตับ เช่น TGF-β, TNF, อินซูลิน และกรดเรติโนอิก
• เนื่องจากเซลล์เหล่านี้ยังไม่ผ่านกระบวนการเปลี่ยนแปลง จึงทำให้เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาสรีรวิทยาและพิษวิทยาของเซลล์ตับปกติ
• พวกมันสามารถใช้งานร่วมกับวิธีการถ่ายโอนยีนด้วยไวรัสเอเดโนไวรัส โอลิโกนิวคลีโอไทด์แอนติเซนส์ และวิธีการแก้ไขยีนแบบ CRISPR ได้
• การวิเคราะห์ลักษณะโมเลกุลได้เปิดเผยว่าเซลล์ AML12 มีแบบโครโมโซมที่เกือบเป็นเตตระพลอยด์และมีความผิดปกติของจำนวนโครโมโซม (aneuploid) รวมถึงการสูญเสียการแยกตัวบางส่วน ดังนั้น เซลล์ AML12 จึงควรได้รับการเสริมด้วยเซลล์ตับปฐมภูมิหรือแบบจำลองในร่างกายจริง สำหรับจุดสิ้นสุดที่ต้องการการทำงานของเซลล์ตับที่พัฒนาเต็มที่ [18]

AML12 คืออะไร?

AML12 ได้มาจากเซลล์ตับของหนูตัวผู้อายุ 5 เดือน (สายพันธุ์ CD-1, สาย MT42) ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรมให้มีปัจจัยการเจริญเติบโตแบบแปลงสภาพอัลฟาของมนุษย์ (human transforming growth factor alpha) ภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์เมทัลโลไทโอนีน 1 ที่ถูกกระตุ้นด้วยสังกะสี Wu, Merlino และ Fausto ได้ก่อตั้งสายเซลล์นี้ขึ้นในปี 1994 และกำหนดลักษณะของมันว่าเป็นสายเซลล์ตับที่กลายเป็นอมตะโดยธรรมชาติและไม่ถูกแปลงสภาพ [1] เซลล์เหล่านี้มีรหัส Cellosaurus CVCL_0140 และได้รับการยืนยันความถูกต้องโดยใช้โปรไฟล์อ้างอิง STR ของหนูที่มี 18 มาร์เกอร์ การศึกษาต้นฉบับรายงานว่าเวลาเพิ่มเป็นสองเท่าคือ 37 ชั่วโมง (36–48 ชั่วโมง ตามข้อมูลจากผู้จัดจำหน่าย) และข้อมูลทรานสคริปโตมิกจากการวิเคราะห์ไมโครอาร์เรย์สามารถเข้าถึงได้สาธารณะ การศึกษาต้นฉบับได้สร้างสายเซลล์สองสาย คือ AML12 และ AML14 ซึ่งทั้งสองสายได้รับการรักษาไว้เป็นเวลามากกว่า 1.5 ปี และผ่านการเพาะเลี้ยงมากกว่า 80 ครั้ง AML12 ยังคงรักษาลักษณะของเซลล์ตับไว้และไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกตลอดระยะเวลาการเพาะเลี้ยง แม้ว่าระดับ mRNA ของโปรตีนในซีรั่มบางชนิดจะลดลงอย่างค่อยเป็นค่อยไปตามจำนวนครั้งของการเพาะเลี้ยง และสามารถฟื้นคืนได้โดยการเพาะเลี้ยงในสื่อปราศจากซีรั่ม ในทางตรงกันข้าม AML14 สูญเสียการแสดงออกของทั้งตัวบ่งชี้การแยกตัวและ mRNA ของยีนที่แทรกเข้าในระหว่างการเพาะเลี้ยงซ้ำหลายครั้ง โดยลักษณะของเซลล์ตับสามารถฟื้นคืนได้เพียงบางส่วนเท่านั้น [1]

ข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์ AML12

ข้อดีของเซลล์ AML12

ข้อได้เปรียบหลักของเซลล์ AML12 คือการรักษาลักษณะของเซลล์ตับที่พัฒนาแล้วไว้ได้ตลอดการเพาะเลี้ยงในระยะยาว ต่างจากสายเซลล์มะเร็งตับหลายชนิด เซลล์ AML12 มีเพอร์ออกซิโซมและโครงสร้างที่คล้ายกับท่อน้ำดี แสดงระดับ mRNA ที่สูงของโปรตีนในเลือดที่เฉพาะต่อตับ เช่น อัลบูมิน อัลฟา-1-แอนติทริปซิน และทรานสเฟอร์ริน และหลั่งอัลบูมินออกมา [1] พวกมันไม่เจริญเติบโตในอาการ์นุ่ม และไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกในหนูนู้ด ซึ่งยืนยันว่ากระบวนการทำให้เซลล์เป็นอมตะเกิดขึ้นโดยไม่มีการเปลี่ยนแปลงเป็นมะเร็งที่ทำงานได้ สถานะที่ไม่มีการเปลี่ยนแปลงนี้เป็นสิ่งสำคัญอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาที่ต้องการพฤติกรรมพื้นฐานที่เกี่ยวข้องกับสรีรวิทยา เช่น การศึกษาเกี่ยวกับสัญญาณอินซูลิน การเผาผลาญไขมัน หรือความเป็นพิษต่อตับ อย่างไรก็ตาม ในระดับจีโนม สายพันธุ์นี้ได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีความผิดปกติของโครโมโซมอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งได้กล่าวถึงในส่วนข้อจำกัด [18]

เซลล์ AML12 มีความยืดหยุ่นสูงในการปรับเปลี่ยนทางพันธุกรรม เซลล์เหล่านี้สามารถรองรับการแสดงออกของยีนในระดับสูงโดยใช้เวกเตอร์อะดีโนไวรัส ซึ่งได้รับการพิสูจน์แล้วในการศึกษาเกี่ยวกับหน่วยย่อยของแอคทิวิน [2] [3] นอกจากนี้ยังช่วยให้การแสดงออกของยีนที่แทรกซ้อนซึ่งถูกควบคุมโดยเตตราไซคลินเป็นไปอย่างเสถียร ซึ่งทำให้สามารถสร้างแบบจำลองที่สามารถกระตุ้นกิจกรรมของโปรตีน X ของไวรัสตับอักเสบบีได้ [4] นอกจากนี้ การส่งมอบโอลิโกนิวคลีโอไทด์แอนติเซนส์ได้สำเร็จอย่างมีประสิทธิภาพ ทำให้เซลล์ AML12 เหมาะสำหรับการศึกษาที่มุ่งเป้าไปที่ RNA, [5] และได้สร้างสายพันธุ์ที่ขาดยีนโดยใช้เทคโนโลยี CRISPR/Cas9 ได้สำเร็จแล้ว [21] เนื่องจากมีต้นกำเนิดจากหนู จึงสามารถตรวจสอบความถูกต้องของผลการทดลองได้โดยตรงกับข้อมูลจากหนูทรานส์เจนิกและหนูที่ขาดยีน ซึ่งช่วยเสริมความแข็งแกร่งให้กับสะพานการแปลผลจาก in vitro ไปยัง in vivo

จากมุมมองทางปฏิบัติ เซลล์ AML12 มีปฏิกิริยาตอบสนองอย่างชัดเจนต่อสิ่งกระตุ้นทางสรีรวิทยาที่หลากหลาย ปฏิกิริยาที่ได้รับการบันทึกไว้ ได้แก่ การกระตุ้นการถอดรหัสโดยกรดเรติโนอิก ลิแกนด์ของ PPARα TGF-β TNF และสารปรับการทำงานของเส้นทางอินซูลิน [6] [7] ความกว้างของช่วงการตอบสนองต่อสัญญาณนี้ทำให้ระบบนี้สามารถนำไปใช้ประโยชน์ได้ในหลายสาขาการวิจัยพร้อมกัน ซึ่งช่วยลดความจำเป็นในการเปลี่ยนแพลตฟอร์มระหว่างบริบทการทดลองต่าง ๆ

ข้อจำกัดของเซลล์ AML12

แม้จะมีลักษณะทางฟีโนไทป์ที่แตกต่างกัน แต่เซลล์ AML12 ก็ไม่ได้เทียบเท่ากับเซลล์ตับปฐมภูมิในทุกด้านของการทำงาน การศึกษาเปรียบเทียบมาตรฐานระหว่างเซลล์ AML12, HepG2 และ THLE-2 ในด้านสัญญาณอินซูลินและการแสดงออกของยีนเฮปาโทไคน์ พบว่า ความไวต่ออินซูลินของเซลล์ AML12 ถูกลดทอนลงเมื่อเซลล์ถูกเพาะเลี้ยงในสื่อการเจริญเติบโตที่แนะนำ แต่กลับมีระดับความไวเทียบเท่ากับเซลล์ HepG2 เมื่อใช้สื่อการเจริญเติบโตที่ขาดอินซูลิน [8] ระดับโปรตีนรับอินซูลินในเซลล์ AML12 คล้ายกับในเซลล์ HepG2 ในขณะที่เซลล์ AML12 แสดงระดับการถอดรหัสของเอนไซม์กลูโคเนโอเจเนซิสและเฮปาโตไคน์หลายชนิดที่ต่ำหรือตรวจไม่พบ ผู้เขียนสรุปว่า ในด้านกลูโคเนโอเจเนซิสและการแสดงออกของเฮปาโตไคน์ เซลล์ HepG2 ดูเหมือนจะใกล้เคียงกับสถานการณ์ในร่างกายจริงมากขึ้น แม้จะมีต้นกำเนิดจากเซลล์ก่อมะเร็ง ดังนั้น จึงควรพิจารณาอย่างรอบคอบถึงองค์ประกอบของสื่อเลี้ยงเซลล์และปริมาณของโปรตีนส่งสัญญาณหลัก เมื่อใช้เซลล์ AML12 เป็นแบบจำลองความต้านทานต่ออินซูลิน

ต้นกำเนิดจากหนูของเซลล์ AML12 ยังก่อให้เกิดความแตกต่างที่ติดตัวมาตามชนิดสัตว์เมื่อเทียบกับเซลล์ตับของมนุษย์ เส้นทางการเผาผลาญยา การจัดการไขมัน และปฏิกิริยาการอักเสบบางชนิดมีความแตกต่างกันระหว่างเซลล์ตับของหนูและมนุษย์ ดังนั้น ผลลัพธ์ที่ได้จากเซลล์ AML12 จึงจำเป็นต้องได้รับการประเมินอย่างระมัดระวังก่อนที่จะนำไปประยุกต์ใช้กับสรีรวิทยาของมนุษย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในบริบทของการพัฒนายา ซึ่งกิจกรรมของไซโตโครม P450 ที่เฉพาะต่อชนิดสัตว์อาจทำให้ผลการวิจัยเกิดความคลาดเคลื่อน

พื้นหลังทางพันธุกรรมของสัตว์ต้นแบบ — การแสดงออกของ TGF-α มากเกินไป — อาจมีอิทธิพลเพิ่มเติมต่อรูปแบบการแสดงออกของยีนพื้นฐานและกระบวนการส่งสัญญาณของปัจจัยการเจริญเติบโต การศึกษาที่มุ่งเน้นไปที่ชีววิทยาของสมาชิกในครอบครัว TGF ควรพิจารณาบริบทนี้เมื่อตีความข้อมูล

การศึกษาลักษณะทางไซโตเจเนติกและทรานสคริปโตมิกแบบบูรณาการที่เผยแพร่ในปี 2026 ได้กำหนดขอบเขตของโมเดลนี้ให้ชัดเจนยิ่งขึ้น เทคนิค FISH หลายสีและการทำแถบสีหลายสีได้เปิดเผยรูปแบบโครโมโซมที่ซับซ้อน ใกล้เป็นเตตระพลอยด์ และมีภาวะแอนยูพลอยด์สูง (81<4n>) พร้อมด้วยการจัดเรียงโครงสร้างซ้ำๆ ซึ่งรวมถึง del(X)(A3)×2, dicentric dic(X;17), del(17)(D1)×2 และโครโมโซมอนุพันธ์ der(3)t(2;3) พร้อมกับการเพิ่มและสูญเสียโครโมโซมทั้งตัวหลายครั้ง; โครโมโซม Y ทั้งสองตัวได้สูญเสียไป แม้สายพันธุ์นี้จะมีต้นกำเนิดจากเพศชาย [18] เมื่อนำความไม่สมดุลของจำนวนสำเนาที่เกิดขึ้นไปจับคู่กับไซโตแบนด์ของมนุษย์ที่เทียบเท่ากัน พบว่า 57.5–68 % มีส่วนทับซ้อนกับการเปลี่ยนแปลงที่รายงานซ้ำๆ ในมะเร็งเซลล์ตับของมนุษย์ การวิเคราะห์ลำดับ RNA ในการศึกษาเดียวกันได้ยืนยันโปรแกรมการพัฒนาสายพันธุ์เซลล์ตับที่ชัดเจน แต่ยังบันทึกการลดการแยกตัวบางส่วนด้วย: การแสดงออกของอัลบูมินอยู่ในระดับปานกลาง ส่วนเอนไซม์ในวงจรยูเรียและกระบวนการสร้างกลูโคส เช่น Cps1, Otc, Pck1 และ G6pc มีระดับต่ำหรือแทบไม่มีเลย และไซโตโครมสำคัญที่รับผิดชอบการเผาผลาญกรดน้ำดีและยา รวมถึง Cyp7a1 และตระกูล Cyp3a แทบไม่สามารถตรวจพบได้ พร้อมทั้งการกระตุ้นการแสดงออกของมาร์กเกอร์เซลล์ท่อน้ำดีและเซลล์ต้นกำเนิด ดังนั้น การไม่เป็นเนื้องอกในเชิงหน้าที่ จึงไม่ได้หมายความว่าเป็นเซลล์ที่มีความเสถียรทางจีโนม สำหรับจุดสิ้นสุดที่ต้องการการเผาผลาญสารแปลกปลอมที่สมบูรณ์ การจัดการไนโตรเจน หรือการสังเคราะห์กรดน้ำดี ผู้เขียนแนะนำให้เสริม AML12 ด้วยเซลล์ตับปฐมภูมิ ออร์กาโนอยด์ หรือแบบจำลองในร่างกายจริง การศึกษานี้ยังระบุได้สองโคลนที่เกี่ยวข้องกัน ซึ่งสัดส่วนสัมพัทธ์ของทั้งสองอาจเปลี่ยนแปลงไปตามจำนวนการเพาะเลี้ยงและเงื่อนไขการเพาะเลี้ยง ซึ่งสนับสนุนความจำเป็นในการใช้สต็อกหลักที่มีการเพาะเลี้ยงน้อย ช่วงเวลาการเพาะเลี้ยงที่จำกัด และการตรวจสอบความถูกต้องอย่างสม่ำเสมอเทียบกับโปรไฟล์อ้างอิง STR ที่กำหนดไว้ [18]

ดูข้อมูลจำเพาะทั้งหมดและสั่งซื้อ

การใช้งาน

การตายแบบอะพอพโทซิสและสัญญาณการตายของเซลล์

เซลล์ AML12 ได้ถูกใช้อย่างกว้างขวางในการศึกษาการตายแบบอะพอพโทซิสของเซลล์ตับที่ถูกกระตุ้นโดยไซโตไคน์และปัจจัยการเจริญเติบโต Pierce และคณะได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ AML12 เช่นเดียวกับเซลล์ตับในร่างกายจริง ไม่ไวต่อ TNF เพียงอย่างเดียว แต่จะเกิดการตายแบบอะพอพโทซิสเมื่อ TNF ถูกใช้ร่วมกับแอคติโนไมซิน D ในปริมาณต่ำ [9] งานวิจัยของพวกเขาเปิดเผยว่า อพอพโทซิสที่เกิดจาก TNF ในเซลล์ AML12 เกี่ยวข้องกับการถูกรบกวนสมดุลออกซิเดชัน-รีดักชัน (redox homeostasis) โดยมีการสูญเสีย NAD(P)H และกลูตาไธโอน ก่อนที่จะเกิดความเสียหายต่อไมโทคอนเดรีย การปล่อยไซโตโครม C และการกระตุ้นแคสเพส ความเสียหายนี้ขึ้นอยู่กับปริมาณกลูตาไธโอนในเซลล์เป็นหลัก และสารต้านอนุมูลอิสระอย่างกรดอัลฟา-ไลโปอิกสามารถป้องกันความเสียหายของไมโทคอนเดรียและกระบวนการอะพอพโทซิสได้อย่างสมบูรณ์ ผลการศึกษาเหล่านี้ได้ยืนยันว่าเซลล์ AML12 เป็นแบบจำลองที่ใช้งานได้ดีสำหรับกลไกออกซิเดทีฟที่อยู่เบื้องหลังความเสียหายของเซลล์ตับที่เกิดจาก TNF

TGF-β1 เป็นตัวกระตุ้นสำคัญอีกตัวหนึ่งของกระบวนการอะพอพโทซิสของเซลล์ตับที่ได้รับการศึกษาในแบบจำลองนี้ Liao และคณะได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ AML12 แสดงลักษณะการตายแบบอะพอพโทซิสแบบคลาสสิก — การบีบตัวของโครมาติน การสลายตัวของนิวเคลียส และการแตกตัวของ DNA — เมื่อได้รับการรักษาด้วย TGF-β1 และกระบวนการนี้ถูกยับยั้งอย่างสมบูรณ์โดยไซโคลเฮกซิมิด ซึ่งชี้ให้เห็นว่าการสังเคราะห์โปรตีนที่ทำงานอยู่มีส่วนเกี่ยวข้องในเส้นทางความตายของเซลล์ [10] Dooley และคณะได้ใช้เซลล์ตับปฐมภูมิที่เพาะเลี้ยงและเซลล์ AML12 ร่วมกันเพื่อศึกษาการเปลี่ยนผ่านจากเซลล์เยื่อบุสู่เซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (epithelial-to-mesenchymal transition) ที่ถูกกระตุ้นโดย TGF-β โดยแสดงให้เห็นว่าการแสดงออกเกินของ Smad7 ในเซลล์ตับช่วยลดการสร้างพังผืดที่เกิดจาก TGF-β และป้องกันความเสียหายของตับ [11]

ชีววิทยาของหน่วยย่อยแอคทิวินก็ได้รับการศึกษาในเซลล์ AML12 เช่นกัน Wada และคณะพบว่า การแสดงออกมากเกินไปของหน่วยย่อย βC ของแอคทิวิน ส่งเสริมการเพิ่มจำนวนและการอยู่รอดของเซลล์ AML12 ในขณะที่การแสดงออกมากเกินไปของหน่วยย่อย βE ลดการเพิ่มจำนวนและกระตุ้นการตายแบบอะพอพโทซิสในสภาวะที่มีซีรั่มต่ำ [2] [3] โดยรวมแล้ว การศึกษาเหล่านี้เน้นย้ำถึงความสำคัญของเซลล์ AML12 ในการวิเคราะห์สัญญาณที่ขัดแย้งกันระหว่างการส่งเสริมการอยู่รอดและการกระตุ้นการตายแบบอะพอพโทซิส ซึ่งควบคุมชะตากรรมของเซลล์ตับในโรคตับอักเสบและโรคตับไฟโบรติก

การเผาผลาญไขมันและสัญญาณ PPAR

เส้นทาง PPARα เป็นตัวควบคุมหลักของการเผาผลาญไขมันในตับ และเซลล์ AML12 ได้พิสูจน์แล้วว่ามีประโยชน์อย่างยิ่งในการศึกษาการปรับเปลี่ยนของเส้นทางนี้โดยสารทางเภสัชวิทยา Clemenz และเพื่อนร่วมงานได้ใช้เซลล์ AML12 เพื่อแสดงให้เห็นว่า telmisartan ซึ่งเป็นสารยับยั้งตัวรับแองจิโอเทนซินชนิดที่ 1 ทำหน้าที่เป็นสารกระตุ้น PPARα แบบบางส่วน: มันกระตุ้นการแสดงออกของยีนเป้าหมาย PPARα คือ acyl-CoA synthetase long-chain family member 1 (ACSL1) ในเซลล์ AML12 ของหนู และ carnitine palmitoyl transferase 1A (CPT1A) ในเซลล์ HepG2 ของมนุษย์ ซึ่งให้พื้นฐานทางโมเลกุลสำหรับผลลดไตรกลีเซอไรด์ที่สังเกตได้ทางคลินิก [7] ในหนูที่มีภาวะอ้วนจากอาหาร เทลมิซาร์แทนเพิ่มการแสดงออกของ ACSL1 และ CPT1A ในตับ และลดระดับไตรกลีเซอไรด์ในตับและในซีรั่มได้อย่างชัดเจน ในทำนองเดียวกัน Huang และคณะได้แสดงให้เห็นว่า เฟโนไฟเบรต ซึ่งเป็นลิแกนด์ของ PPARα เพิ่มการแสดงออกของตัวรับไลโปโปรตีนความหนาแน่นต่ำ (LDL) ในเซลล์ AML12 และฟื้นฟูความสามารถในการจับกับ LDL โดยผลการศึกษานี้ได้รับการยืนยันในสัตว์ทดลอง [12]

อัลโดส เรดักเทส (AR) ได้ปรากฏตัวเป็นผู้ควบคุมกิจกรรมของ PPARα ในเซลล์ตับอย่างไม่คาดคิด Qiu และคณะได้แสดงให้เห็นในเซลล์ AML12 ว่า การแสดงออกเกินของ AR ยับยั้งกิจกรรมของ PPARα อย่างรุนแรง และลดการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการออกซิเดชันของกรดไขมัน ซึ่งผลดังกล่าวถูกลดทอนลงโดย zopolrestat ซึ่งเป็นสารยับยั้ง AR แบบเลือกสรร [13] การแสดงออกเกินของ AR ยังทำให้ระดับ PPARα ที่ถูกฟอสโฟรีเลตและ ERK1/2 เพิ่มขึ้น และการยับยั้งกิจกรรมของ PPARα สามารถกลับคืนได้ด้วยการยับยั้ง ERK1/2 — ซึ่งเชื่อมโยงเส้นทางโพลีออลกับการรักษาสมดุลของลิพิดผ่านกลไกที่ขึ้นอยู่กับไคเนส ผลการวิจัยเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ AML12 สามารถเปิดเผยการสื่อสารข้ามทางที่ไม่คาดคิดระหว่างเส้นทางเมแทบอลิซึมและเส้นทางสัญญาณ ซึ่งเกี่ยวข้องกับโรคตับไขมันที่ไม่เกี่ยวข้องกับแอลกอฮอล์และภาวะแทรกซ้อนของตับจากโรคเบาหวาน

นิโคตินามิด-เอ็น-เมทิลทรานสเฟอเรส (NNMT) เป็นเอนไซม์อีกชนิดหนึ่งที่ได้รับการศึกษาในเซลล์ AML12 ในบริบทของการควบคุมไขมันในตับ การลดการแสดงออกของ Nnmt ในเซลล์ AML12 ด้วยวิธี RNAi ทำให้เกิดการสะสมของ S-adenosyl-methionine (SAM) และ S-adenosyl-homocysteine พร้อมทั้งการลดลงของ 1-methylnicotinamide (MNAM) พร้อมกับการลดการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการสร้างไขมัน เช่น Srebf1 และการลดลงที่วัดได้ของไขมันนิวทรัลรวม — ซึ่งเชื่อมโยงการเผาผลาญคาร์บอนหนึ่งหน่วยกับการสร้างไขมันในตับ [19] นอกจากนี้ โปรตีน TXNDC5 ในเรติคูลัมเอนโดพลาสมิก (ER) ได้รับการระบุว่าเป็นคู่ปฏิสัมพันธ์ของ PRDX6 และ HSPA9 ในเซลล์ AML12; การขาด TXNDC5 ทำให้ระดับโปรตีน PRDX6 และ HSPA9 ลดลง และลดการออกซิเดชันของลิปิดอย่างมีนัยสำคัญ รวมถึงลดระดับกลูตาไธโอนและกิจกรรมของ iPLA2 [20] โดยอาศัยโมเดลเดียวกัน สควาลีนที่ถูกบรรจุในอนุภาคนาโน PLGA ได้ปกป้องเซลล์ AML12 จากความเครียดออกซิเดทีฟและความเครียดของเรติคูลัมเอนโดพลาสมิกในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับ TXNDC5 โดยสังเกตเห็นการดูดซึมเข้าสู่เซลล์อย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพที่ความเข้มข้น 30 µM — ผลการวิจัยนี้มีความสำคัญต่อกลยุทธ์การรักษาโรคตับไขมันในอนาคต [21]

การส่งสัญญาณอินซูลินและโรคเมตาบอลิก

เซลล์ AML12 ได้ถูกนำมาใช้เป็นเครื่องมือในหลอดทดลองเพื่อศึกษาการส่งสัญญาณอินซูลินและการรบกวนทางพยาธิวิทยาของมัน Butler และคณะได้ใช้เซลล์ AML12 เพื่อตรวจสอบกลยุทธ์โอลิโกนิวคลีโอไทด์แอนติเซนส์ที่มุ่งเป้าไปที่ PTEN ซึ่งเป็นลิปิดฟอสฟาเทสที่ควบคุมทางลบต่อเส้นทาง PI3K การถ่ายโอนโอลิโกนิวคลีโอไทด์แอนติเซนส์ PTEN เข้าสู่เซลล์ AML12 ได้ลดระดับ mRNA และโปรตีนของ PTEN และเพิ่มการฟอสโฟรีเลชันของ Akt ที่ถูกกระตุ้นโดยอินซูลิน ซึ่งให้หลักฐานเชิงกลไกของแนวคิดก่อนที่จะมีการให้ยาแบบระบบในหนู db/db และ ob/ob จนทำให้ระดับน้ำตาลในเลือดกลับสู่ภาวะปกติ [14] การศึกษานี้แสดงให้เห็นถึงคุณค่าของเซลล์ AML12 ในฐานะแพลตฟอร์มการคัดกรองขั้นต้นสำหรับการแทรกแซงทางเมแทบอลิซึมที่มุ่งเป้าไปที่ภาวะดื้อต่ออินซูลิน

การศึกษาเปรียบเทียบมาตรฐานโดย Sefried และคณะ ได้ประเมินโดยตรงถึงความเหมาะสมของเซลล์ AML12 สำหรับการวิจัยเกี่ยวกับสัญญาณอินซูลินและการแสดงออกของยีนเฮปาโทไคน์ [8] เมื่อเปรียบเทียบเซลล์ AML12 กับเซลล์ HepG2 และ THLE-2 ผู้วิจัยพบว่า ความตอบสนองต่ออินซูลินแบบเฉียบพลันในเซลล์ AML12 ขึ้นอยู่กับองค์ประกอบของสื่อเพาะเลี้ยงอย่างมาก และเซลล์ AML12 แสดงระดับการแสดงออกของทรานสคริปต์หลายชนิดที่เกี่ยวข้องกับการสร้างกลูโคสจากสารอื่น (gluconeogenesis) และเฮปาโทไคน์ (hepatokine) ในระดับต่ำหรือตรวจไม่พบ การควบคุมยีนที่ขึ้นอยู่กับ PPARδ มีความคล้ายคลึงกันระหว่างเซลล์ AML12 และ HepG2 แต่มีเพียงเซลล์ HepG2 เท่านั้นที่สามารถจำลองการควบคุมการสร้างกลูโคสในตับที่ผ่าน cAMP ได้ ผู้วิจัยสรุปว่า สำหรับจุดวัดผลเฉพาะเหล่านี้ เซลล์ HepG2 คล้ายกับสถานการณ์ในร่างกายจริงมากขึ้น แม้จะมีต้นกำเนิดจากเซลล์ก่อมะเร็ง — ซึ่งเป็นปัจจัยสำคัญที่ควรพิจารณาเมื่อเลือกแบบจำลองสำหรับการวิจัยเกี่ยวกับภาวะต้านอินซูลินหรือโรคเบาหวานชนิดที่ 2

Tomatine ได้ถูกประเมินความสามารถในการปรับปรุงการเผาผลาญกลูโคสและการหายใจของไมโทคอนเดรียในเซลล์ AML12 และ HepG2 ที่เกิดภาวะต้านอินซูลินจากการได้รับกลูโคสสูง [22] Tomatine เพิ่มการบริโภคกลูโคสอย่างขึ้นอยู่กับขนาดยา ฟื้นฟูการแสดงออกของตัวขนส่งกลูโคส Glut2 และยีนที่เกี่ยวข้องกับการสร้างกลูโคสจากสารอื่น (gluconeogenesis) กระตุ้นการฟอสโฟรีเลชันของ AMPK และเพิ่มการแสดงออกของ PGC1α รวมถึงปรับปรุงอัตราการบริโภคออกซิเจน การผลิต ATP และโปรตีนในคอมเพล็กซ์การฟอสโฟรีเลชันออกซิเดทีฟของไมโทคอนเดรีย การยับยั้ง AMPK ทั้งทางพันธุกรรมและทางเภสัชวิทยาได้ทำให้ประโยชน์เหล่านี้หายไป ซึ่งยืนยันบทบาทสำคัญของเส้นทางนี้ และทำให้เซลล์ AML12 กลายเป็นแพลตฟอร์มที่มีประโยชน์สำหรับการคัดกรองสารธรรมชาติที่มีศักยภาพในการต้านโรคเบาหวาน ผลการศึกษาเหล่านี้เสริมความสำคัญของสายพันธุ์นี้ต่อการศึกษาเกี่ยวกับกลไกการเผาผลาญไขมัน ความต้านทานต่ออินซูลิน และโรคตับไขมัน

การวิจัยเกี่ยวกับมะเร็งเซลล์ตับและโรคตับอักเสบจากไวรัส

สถานะที่ไม่ถูกแปลงของเซลล์ AML12 ทำให้พวกมันเป็นสายควบคุมหรือสายต้นแบบที่เหมาะสำหรับการวิจัยมะเร็งเซลล์ตับ (HCC) Lee และเพื่อนร่วมงานได้ออกแบบเซลล์ AML12 ที่แสดงโปรตีน X ของไวรัสตับอักเสบบี (pX) ซึ่งถูกควบคุมด้วยเตตราไซคลิน เพื่อสร้างแบบจำลองการแปลงที่ถูกควบคุมโดย pX [4] โดยการเปรียบเทียบสายย่อยที่แตกต่างและเกิดการแปลงสภาพ (3pX-1) กับสายย่อยที่กลับสู่สภาพเดิมและไม่เกิดการแปลงสภาพ (4pX-1), ผู้วิจัยได้กำหนดการเปลี่ยนแปลงวงจรเซลล์ที่ชัดเจน ซึ่งเกี่ยวข้องกับการกระตุ้นทางเดินสัญญาณ Ras-Raf-MAPK ที่ต่อเนื่อง เทียบกับการกระตุ้นทางเดินสัญญาณ JNK ที่ไม่ต่อเนื่อง โดยแสดงให้เห็นว่าเซลล์ต้นแบบ AML12 สามารถทำหน้าที่เป็นพื้นหลังที่ควบคุมได้สำหรับการวิเคราะห์สัญญาณก่อมะเร็ง

สารต้านมะเร็งที่สกัดจากพืชยังได้รับการประเมินในบริบทของเซลล์ตับโดยใช้เซลล์ AML12 Choedon และคณะได้ทดสอบส่วนต่าง ๆ ของน้ำยางแห้งจาก Calotropis procera ต่อสายพันธุ์มะเร็งตับ Huh-7 สายพันธุ์ที่ไม่ใช่มะเร็งตับ COS-1 และเซลล์ตับ AML12 ที่ไม่ถูกแปลงสภาพ สารสกัดเมทานอลและส่วนที่ 8 ของมันก่อให้เกิดการตายของเซลล์อย่างกว้างขวางและการแตกตัวของ DNA ในเซลล์ Huh-7 และ COS-1 ในขณะที่เซลล์ AML12 ไม่ได้รับผลกระทบ; ในเวลาเดียวกัน การให้ลาเท็กซ์แห้งทางปากได้ปกป้องหนูทรานส์เจนิก X15-myc อย่างสมบูรณ์จากการเกิดมะเร็งตับ [15] การทดสอบความเลือกสรรดังกล่าว ซึ่งใช้เซลล์ AML12 เป็นเซลล์ตับที่ไม่เป็นมะเร็งเพื่อเป็นข้อมูลอ้างอิง เป็นกลยุทธ์ทั่วไปในการระบุสารประกอบที่เป็นผู้สมัครซึ่งมีความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งมากกว่าเนื้อตับปกติ

การส่งสัญญาณของกรดเรติโนอิก (RA) ซึ่งเกี่ยวข้องกับการยับยั้ง HCC ได้ถูกวิเคราะห์อย่างละเอียดในเซลล์ AML12 โดยใช้การวิเคราะห์ไมโครอาร์เรย์ cDNA ของยีนหนู 39,000 ยีน Mamoon และคณะได้ระบุยีน 15 ตัวที่มีการแสดงออกเพิ่มขึ้น และ 3 ตัวที่มีการแสดงออกลดลง อย่างน้อยสองเท่า หลังจากได้รับการรักษาด้วย all-trans RA เป็นเวลา 3 ชั่วโมง โดยมียีน 26 ตัวที่มีการแสดงออกเพิ่มขึ้น และ 48 ตัวที่มีการแสดงออกลดลง หลังจาก 24 ชั่วโมง [6] การศึกษาต่อโดย Ventura-Holman และคณะ ได้ใช้การวิเคราะห์ไมโครอาร์เรย์ของเซลล์ AML12 ที่ถูกทรานส์เฟกต์อย่างคงที่ด้วย v-erbA — โปรตีนก่อมะเร็งที่ทราบว่ามีผลเชิงลบแบบเด่นต่อตัวรับเรติโนอิกแอซิด — เพื่อระบุยีนที่ตอบสนองต่อ RA ใดที่ได้รับผลกระทบจาก v-erbA รวมถึงยีนที่ถูกควบคุมโดย v-erbA ในระดับการถอดรหัสพื้นฐาน ซึ่งหลายยีนในจำนวนนี้มีส่วนเกี่ยวข้องกับการเกิดมะเร็ง [16]

ความเครียดออกซิเดทีฟและความเสียหายจากภาวะขาดเลือด-การไหลเวียนเลือดกลับ

การบาดเจ็บจากภาวะขาดเลือด-การไหลเวียนเลือดกลับ (I/R) เป็นความท้าทายทางคลินิกหลักในการผ่าตัดและปลูกถ่ายตับ และเซลล์ AML12 ได้ถูกนำมาใช้เป็นแบบจำลองกลไกออกซิเดทีฟที่อยู่เบื้องหลัง Haga และคณะได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ AML12 ที่ถูกวางไว้ในสภาพขาดออกซิเจน/การกลับสู่สภาพมีออกซิเจนจะเกิดภาวะความเครียดออกซิเดทีฟอย่างรวดเร็ว โดยมีเซลล์จำนวนมากเข้าสู่กระบวนการอะพอพโทซิส [17] การลดการแสดงออกของไอโซฟอร์ม p66 ของ ShcA (p66shc) โดย RNAi ได้ลดความเครียดออกซิเดทีฟของเซลล์และกระบวนการอะพอพโทซิสที่เกิดจากภาวะขาดออกซิเจน/การคืนออกซิเจน (H/R) อย่างมีนัยสำคัญ และทำให้เซลล์มีความต้านทานต่อไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ การป้องกันนี้เกิดจากความสามารถในการกำจัด ROS ที่เพิ่มขึ้นมากกว่าการยับยั้งการสร้าง ROS: โปรตีนต้านอนุมูลอิสระ MnSOD และ Ref-1 รวมถึงโปรตีนต้านการตายของเซลล์ Bcl-xL ถูกปรับให้เพิ่มขึ้น ในขณะที่ FLICE ซึ่งเป็นโปรตีนที่ส่งเสริมการตายของเซลล์ถูกปรับให้ลดลง ส่วนการแสดงออกของคาตาเลสยังคงไม่เปลี่ยนแปลง ผลการวิจัยนี้ชี้ให้เห็นว่า p66shc เป็นเป้าหมายการรักษาที่มีศักยภาพในการบาดเจ็บจากภาวะขาดเลือดและขาดออกซิเจน (I/R) ของตับ

เทคโนโลยีโอลิโกนิวคลีโอไทด์แอนติเซนส์ได้รับการศึกษาในเซลล์ AML12 ในบริบทของการตายของเซลล์ที่สื่อผ่าน Fas Thonberg และเพื่อนร่วมงานได้เปรียบเทียบโอลิโกนิวคลีโอไทด์ฟอสโฟโรไทโอเอต 6 ชนิดที่มุ่งเป้าไปที่ mRNA ของ Fas ในเซลล์ AML12 โดยพบว่า 4 ชนิดลดระดับ mRNA ลงอย่างมีนัยสำคัญ และ 1 ชนิดสร้างชิ้นส่วนการตัด 3′-mRNA ที่เสถียร ซึ่งตรงกับลำดับที่เสริมกันของแอนติเซนส์ [5] การศึกษานี้ได้เน้นย้ำว่าเซลล์ AML12 เป็นแบบจำลองที่เหมาะสมสำหรับการประเมินประสิทธิภาพของแอนติเซนส์ และสำหรับการศึกษากลไกการสลาย RNA ที่ถูกควบคุมโดย RNase H ในเซลล์ตับ

การวิเคราะห์โปรไฟล์ทางไซโตเจเนติกส์และทรานสคริปโตมิกส์อย่างละเอียดได้ยืนยันว่าเซลล์ AML12 รักษาโปรแกรมสายพันธุ์เซลล์ตับที่ชัดเจนไว้ ด้วยการแสดงออกที่แข็งแกร่งของ Hnf4a, Foxa2 และ Prox1, โปรตีน HNF4α ในนิวเคลียส, และไม่มีการปรากฏของมาร์เกอร์ที่กำหนดสายพันธุ์ของเซลล์ดาวตับ, เซลล์ท่อน้ำดี และเซลล์คูปเฟอร์. [18] อย่างไรก็ตาม ชุดข้อมูลเดียวกันนี้ยังเปิดเผยลายเซ็นการถอดรหัสที่เกี่ยวข้องกับความเครียดและเซลล์ต้นกำเนิดอย่างชัดเจน ซึ่งรวมถึงการแสดงออกของ Spp1/osteopontin, Ccl2 และ Plscr1 ในระดับสูงมาก พร้อมด้วยตัวบ่งชี้ของท่อเล็ก เช่น Krt19, Sox9, Hnf1b และ Jag1. พื้นฐานที่ปรับตัวต่อความเสียหายและคล้ายเซลล์ต้นกำเนิดนี้ ทำให้ AML12 เป็นแบบจำลองที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาความเครียดภายในเซลล์ตับ การส่งสัญญาณการอักเสบ และความยืดหยุ่นของเซลล์เยื่อบุผิว โดยต้องคำนึงถึงสภาพพื้นฐานนี้เมื่อตีความผลการวิจัยเกี่ยวกับความเครียดออกซิเดทีฟและพิษวิทยา

สรุป

เซลล์ AML12 ยังคงเป็นหนึ่งในแบบจำลองเซลล์ตับของหนูที่ใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุดในการวิจัยเกี่ยวกับตับ โดยให้ความสมดุลที่เป็นเอกลักษณ์ระหว่างการทำงานของเซลล์ตับที่แยกตัวแล้วและความเสถียรในหลอดทดลองในระยะยาว สายเซลล์นี้ถูกพัฒนาขึ้นโดย Wu, Merlino และ Fausto ในปี 1994 [1] และตั้งแต่นั้นมาได้สนับสนุนการวิจัยในหลายด้าน เช่น โรคตับไขมันที่ไม่เกี่ยวข้องกับแอลกอฮอล์ (NAFLD), การบาดเจ็บของตับที่เกิดจากยา, การเผาผลาญไขมัน, ความต้านทานต่ออินซูลิน, การตายแบบอะพอพโทซิส, มะเร็งเซลล์ตับ (hepatocellular carcinoma), และการบาดเจ็บจากภาวะขาดเลือดและฟื้นฟูเลือด (ischemia-reperfusion injury) การศึกษาอ้างอิงโดย Sefried และคณะ ได้กำหนดขอบเขตของความสามารถในการส่งสัญญาณอินซูลินของเซลล์เหล่านี้ และแสดงให้เห็นว่า สำหรับจุดสิ้นสุดที่เกี่ยวข้องกับการสร้างกลูโคสจากสารอื่น (gluconeogenesis) และฮีปาโตไคน์ (hepatokine) เซลล์ HepG2 อาจเป็นแบบจำลองที่ใกล้เคียงกว่า [8] การวิเคราะห์โปรไฟล์ทางไซโตเจเนติกส์และทรานสคริปโตมิกส์ล่าสุดได้บันทึกไว้ว่ามีคาริโอไทป์แบบแอนยูพลอยด์ที่ใกล้เคียงกับเตตระพลอยด์ และมีการลดการแยกตัวบางส่วน ซึ่งสนับสนุนการตรวจสอบยืนยันแบบเสริมในเซลล์ตับปฐมภูมิ ออร์กาโนอยด์ หรือแบบจำลองใน vivo ทุกกรณีที่ต้องการการทำงานของเซลล์ตับที่เจริญเต็มที่ [18] เมื่อใช้เซลล์ AML12 โดยคำนึงถึงข้อจำกัดดังกล่าว — ไม่ว่าจะเพื่อการศึกษาเภสัชวิทยาของ PPARα การสร้างแบบจำลองโรคตับอักเสบจากไวรัส หรือการวิจัยความเครียดออกซิเดทีฟ — เซลล์ AML12 จึงเป็นแพลตฟอร์มที่เชื่อถือได้และได้รับการศึกษาอย่างละเอียด สำหรับการศึกษาชีววิทยาของตับที่ขับเคลื่อนด้วยสมมติฐาน หากต้องการสั่งซื้อเซลล์ AML12 หรือสอบถามเกี่ยวกับข้อมูลจำเพาะ โปรดเยี่ยมชม cytion.com.

บทความสำคัญ

1. Wu JC, Merlino G, Fausto N (1994) การสร้างและวิเคราะห์ลักษณะของสายเซลล์ตับที่แยกตัวและไม่ถูกแปลงสภาพ ซึ่งได้มาจากหนูทรานส์เจนิกที่มีปัจจัยการเจริญเติบโตแบบแปลงสภาพอัลฟา (TGF-α) Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. PMID: 7904757
2. Wada W, Maeshima A, Zhang YQ (2004) การประเมินหน้าที่ของหน่วยย่อยเบตาซี (betaC) ของแอคทิวินในเซลล์ตับที่เพาะเลี้ยง American Journal of Physiology: Endocrinology and Metabolism. PMID: 15039147
3. Wada W, Medina JJ, Kuwano H (2005) การเปรียบเทียบหน้าที่ของซับยูนิตเบตา(C) และเบตา(E) ของแอคทิวินในเซลล์ตับ AML12. Endocrine journal. PMID: 15863943
4. Lee S, Tarn C, Wang WH (2002) โปรตีน X ของไวรัสตับอักเสบบีควบคุมการดำเนินของวงจรเซลล์อย่างแตกต่างกันในสายเซลล์ตับ (AML12) ที่เกิดการแปลง X และที่ไม่เกิดการแปลง X. The Journal of biological chemistry. PMID: 11756437
5. Thonberg H, Dahlgren C, Wahlestedt C (2004) การสลาย mRNA ของ Fas ที่เกิดจากแอนติเซนส์ สร้างชิ้นส่วน mRNA 3'- ที่เสถียรและเฉพาะตำแหน่ง โดยการตัดด้วยเอ็กโซนิวคลีเอสที่ลำดับคู่กัน Oligonucleotides. PMID: 15625917
6. Mamoon A, Ventura-Holman T, Maher JF (2008) ยีนที่ตอบสนองต่อกรดเรติโนอิกในสายเซลล์ตับหนู AML 12. Gene. PMID: 18006250
7. Clemenz M, Frost N, Schupp M (2008) การควบคุมการแสดงออกของยีนเป้าหมายเฉพาะตับของตัวรับแอลฟาที่กระตุ้นโดยตัวเพิ่มจำนวนเพอร์ออกซิโซม (PPARα) โดยตัวยับยั้งตัวรับแองจิโอเทนซินชนิดที่ 1 (AT1) เทลมิซาร์แทน Diabetes. PMID: 18184928
8. Sefried S, Häring HU, Weigert C (2018) ความเหมาะสมของสายเซลล์ตับ HepG2, AML12 และ THLE-2 สำหรับการศึกษาสัญญาณอินซูลินและการแสดงออกของยีนเฮปาโทไคน์. Open biology. PMID: 30355754
9. Pierce RH, Campbell JS, Stephenson AB (2000) การรบกวนสมดุลออกซิเดชัน-รีดักชันในกระบวนการอะพอพโทซิสที่เกิดจากปัจจัยเนโครซิสของเนื้องอก (TNF) ในสายเซลล์ตับของหนู. The American journal of pathology. PMID: 10880392
10. Liao JH, Zhou BH, Chai MQ (2001) Cycloheximide ยับยั้งการตายแบบอะพอพโทซิสที่ถูกกระตุ้นโดย TGF-beta1 ในเซลล์ตับของหนู. Acta pharmacologica Sinica. PMID: 11741524
11. Dooley S, Hamzavi J, Ciuclan L (2008) การแสดงออกของ Smad7 ที่เฉพาะเจาะจงในเซลล์ตับช่วยลดการสร้างเนื้อพังผืดที่เกิดจาก TGF-beta และป้องกันความเสียหายของตับ. Gastroenterology. PMID: 18602923
12. Huang Z, Zhou X, Nicholson AC (2008) การกระตุ้นตัวรับที่กระตุ้นโดยสารเพิ่มจำนวนเพอร์ออกซิโซม (PPAR-α) ในหนูทดลอง ทำให้เกิดการแสดงออกของตัวรับไลโปโปรตีนความหนาแน่นต่ำในตับ British journal of pharmacology. PMID: 18852694
13. Qiu L, Wu X, Chau JF (2008) Aldose reductase ควบคุมการฟอสโฟรีเลชันและกิจกรรมของตัวรับที่กระตุ้นโดยสารเพิ่มจำนวนเพอร์ออกซิโซม (PPAR-α) ในตับ เพื่อส่งผลต่อสมดุลไขมัน. The Journal of biological chemistry. PMID: 18445591
14. Butler M, McKay RA, Popoff IJ (2002) การยับยั้งการแสดงออกของ PTEN อย่างเฉพาะเจาะจงช่วยกลับภาวะน้ำตาลในเลือดสูงในหนูที่เป็นโรคเบาหวาน. Diabetes. PMID: 11916922
15. Choedon T, Mathan G, Arya S (2006) คุณสมบัติต้านมะเร็งและทำลายเซลล์ของน้ำยาง Calotropis procera ในแบบจำลองหนูทรานส์เจนิกของมะเร็งเซลล์ตับ World journal of gastroenterology. PMID: 16688796
16. Ventura-Holman T, Mamoon A, Subauste JS (2008) การปรับระดับการแสดงออกของยีนที่ควบคุมโดย RA โดยโปรตีนก่อมะเร็ง v-erbA. Gene. PMID: 18775481
17. Haga S, Terui K, Fukai M (2008) การป้องกันความเสียหายจากภาวะขาดออกซิเจน/การกลับสู่ภาวะมีออกซิเจนต่อเซลล์ตับโดยการกำจัด p66(shc): การเพิ่มการแสดงออกของโปรตีนต้านอนุมูลอิสระและต้านการตายของเซลล์. Journal of hepatology. PMID: 18191273
18. Asar DY, Kankel S, Keller DT (2026) การวิเคราะห์โปรไฟล์ทางไซโตจีเนติกและจีโนมอย่างละเอียดของสายเซลล์ตับ AML12 (Alpha Mouse Liver 12) ของหนู. Cells. PMID: 41827824
19. Yoda M, Mizuno R, Izumi Y (2023) นิโคตินามิด-เอ็น-เมทิลทรานสเฟอเรส ควบคุมการเผาผลาญไขมันผ่าน SAM และ 1-เมทิลนิโคตินามิด ในสายเซลล์ตับ AML12 Journal of biochemistry. PMID: 37014628
20. Bidooki SH, Sánchez-Marco J, Martínez-Beamonte R (2023) โปรตีน TXNDC5 ในเรติคูลัมเอนโดพลาสมิกมีปฏิสัมพันธ์กับ PRDX6 และ HSPA9 เพื่อควบคุมการเผาผลาญกลูตาไธโอนและการออกซิเดชันของลิพิดในสายเซลล์ตับ AML12. International journal of molecular sciences. PMID: 38138960
21. Bidooki SH, Alejo T, Sánchez-Marco J (2022) นาโนพาร์ติเคิลที่บรรจุสควาลีนช่วยปกป้องเซลล์ไลน์ AML12 ของตับได้อย่างมีประสิทธิภาพจากความเครียดออกซิเดทีฟและความเครียดของเรติคูลัมเอนโดพลาสมิก โดยขึ้นอยู่กับ TXNDC5. Antioxidants. PMID: 35326231
22. Lee YG, Kim D (2025) โทมาตินช่วยปรับปรุงการเผาผลาญกลูโคสและการหายใจของไมโทคอนเดรียในสายเซลล์ตับที่ต้านทานอินซูลิน AML12 และ HepG2 ผ่านทางที่ขึ้นอยู่กับ AMP-activated protein kinase. Cells. PMID: 40072058