Introdução

Células AML12, também conhecida como AML-12, AML 12 e Alpha Mouse Liver 12, é uma linha celular de hepatócitos murinos bem estabelecida e amplamente utilizada na investigação biomédica. Wu, Merlino e Fausto estabeleceram a linha em 1994 a partir do fígado de um rato transgénico que sobreexpressava o fator de crescimento transformador alfa humano (TGF-α), um potente mitógeno dos hepatócitos. [1] Ao contrário dos hepatócitos primários, as células AML12 mantêm funções-chave da diferenciação — incluindo a expressão de peroxissomas e estruturas semelhantes aos canalículos biliares — ao longo de muitas passagens, sem se tornarem tumorigénicas. Esta combinação de estabilidade e manutenção do fenótipo hepatocitário tornou-as numa plataforma in vitro preferida para a investigação do metabolismo lipídico, da doença hepática gordurosa não alcoólica, da lesão hepática induzida por substâncias químicas e medicamentos, da resistência à insulina e da apoptose dos hepatócitos. A sua origem em ratos facilita a comparação direta com modelos animais transgénicos e knockout, alargando a sua utilidade translacional em diversos contextos de investigação sobre doenças hepáticas.

Pontos-chave

• As células AML12 são hepatócitos murinos diferenciados e não tumorigénicos, derivados de ratos transgénicos para o TGF-α. [1]
• Estas células mantêm características específicas dos hepatócitos, tais como peroxissomas, estruturas semelhantes aos canalículos biliares e níveis elevados de ARNm de proteínas séricas específicas do fígado, embora a expressão de algumas destas características diminua com o aumento do número de passagens. [1]
• Esta linha celular é amplamente utilizada para modelar a doença hepática gordurosa não alcoólica, a lesão hepática induzida por medicamentos e as perturbações do metabolismo lipídico.
• As células AML12 respondem a sinais hepáticos fundamentais, incluindo o TGF-β, o TNF, a insulina e o ácido retinóico.
• O facto de não serem transformadas torna-as particularmente adequadas para o estudo da fisiologia e da toxicologia dos hepatócitos normais.
• São compatíveis com a transfecção adenoviral, oligonucleótidos antisense e abordagens de edição genética baseadas em CRISPR.
• A caracterização molecular revelou um cariótipo aneuploide quase tetraplóide e uma desdiferenciação parcial; por isso, as células AML12 devem ser complementadas com hepatócitos primários ou modelos in vivo para parâmetros que exijam a função de hepatócitos totalmente maduros. [18]

O que é o AML12?

A AML12 foi derivada de hepatócitos de um rato macho com 5 meses de idade (linha MT42 da estirpe CD-1), transgénico para o fator de crescimento transformador alfa humano, sob o controlo do promotor da metalotioneína 1 induzível por zinco. Wu, Merlino e Fausto estabeleceram a linha em 1994 e caracterizaram-na como uma linha de hepatócitos espontaneamente imortalizada e não transformada. [1] As células têm o número de acesso CVCL_0140 da Cellosaurus e são autenticadas em relação a um perfil de referência STR murino de 18 marcadores. A publicação original refere um tempo de duplicação de 37 horas (36–48 horas, de acordo com os dados do fornecedor), e os dados transcriptómicos provenientes de análises por microarray estão disponíveis publicamente. O estudo original produziu duas linhas, AML12 e AML14, ambas mantidas durante mais de 1,5 anos e ao longo de mais de 80 passagens. A AML12 manteve a sua identidade hepatocitária e permaneceu não tumorigénica ao longo de todo o período, embora os níveis de ARNm de algumas proteínas séricas tenham diminuído progressivamente com as passagens e pudessem ser restaurados por cultura em meio sem soro. A AML14, em contrapartida, perdeu a expressão tanto dos marcadores de diferenciação como do ARNm do transgene durante as passagens prolongadas, sendo as características hepatocíticas apenas parcialmente recuperáveis. [1]

Informações sobre a cultura celular AML12

Vantagens das células AML12

Uma vantagem fundamental das células AML12 é a retenção de um fenótipo de hepatócito diferenciado ao longo de uma cultura a longo prazo. Ao contrário de muitas linhas de hepatoma, as células AML12 contêm peroxissomas e estruturas semelhantes aos canalículos biliares, expressam níveis elevados de ARNm de proteínas séricas específicas do fígado, incluindo albumina, alfa-1-antitripsina e transferrina, e secretam albumina. [1] Estas células não crescem em ágar mole e não apresentam potencial tumorigénico em ratos nude, o que confirma que a imortalização ocorreu sem transformação maligna funcional. Este estado não transformado é fundamental para estudos que exigem um comportamento basal fisiologicamente relevante, tais como investigações sobre a sinalização da insulina, o metabolismo lipídico ou a hepatotoxicidade. A nível genómico, no entanto, demonstrou-se entretanto que esta linha apresenta aberrações cromossómicas substanciais, que são discutidas na secção «Limitações». [18]

As células AML12 são altamente versáteis em termos de manipulação genética. Permitem a sobreexpressão de genes com base em vetores adenovirais, tal como demonstrado em estudos sobre as subunidades da activina. [2] [3] Além disso, permitem uma expressão estável do transgene regulada pela tetraciclina, possibilitando modelos induzíveis da atividade da proteína X do vírus da hepatite B. [4] Além disso, a administração de oligonucleótidos antisense tem sido realizada de forma eficiente, tornando as células AML12 adequadas para estudos de direcionamento de RNA, [5] e foram gerados com sucesso derivados com genes inativados com base na tecnologia CRISPR/Cas9. [21] A sua origem murina permite que os resultados experimentais sejam validados de forma cruzada diretamente com dados de ratos transgénicos e knockout, reforçando a ponte translacional entre o in vitro e o in vivo.

De um ponto de vista prático, as células AML12 respondem de forma robusta a uma ampla gama de estímulos fisiológicos. As respostas documentadas incluem a ativação transcricional pelo ácido retinóico, pelos ligantes do PPARα, pelo TGF-β, pelo TNF e pelos moduladores da via da insulina. [6] [7] Esta ampla capacidade de resposta ao sinal torna esta linha útil em vários domínios de investigação em simultâneo, reduzindo a necessidade de alternar entre plataformas consoante os contextos experimentais.

Limitações das células AML12

Apesar do seu fenótipo diferenciado, as células AML12 não são equivalentes aos hepatócitos primários em todos os aspetos funcionais. Um estudo comparativo entre as células AML12, HepG2 e THLE-2, no que diz respeito à sinalização da insulina e à expressão génica das hepatocinas, revelou que a capacidade de resposta à insulina das células AML12 ficava comprometida quando estas eram cultivadas no meio de crescimento recomendado, mas tornava-se comparável à das células HepG2 quando se utilizava um meio sem insulina. [8] Os níveis da proteína do recetor da insulina nas células AML12 foram semelhantes aos observados nas células HepG2, enquanto as células AML12 apresentaram apenas níveis de transcrição baixos ou indetetáveis de várias enzimas gluconeogénicas e hepatocinas. Os autores concluíram que, no que diz respeito à gluconeogénese e à expressão de hepatocinas, as células HepG2 pareciam mais próximas da situação in vivo, apesar da sua origem tumoral. A composição do meio de cultura e a abundância de proteínas de sinalização essenciais devem, portanto, ser cuidadosamente consideradas quando as células AML12 são utilizadas para modelar a resistência à insulina.

A origem murina das células AML12 também introduz diferenças inerentes à espécie em relação aos hepatócitos humanos. As vias de metabolismo dos fármacos, o processamento de lípidos e certas respostas inflamatórias diferem entre as células hepáticas de ratinho e as humanas. Os resultados obtidos nas células AML12 requerem, por conseguinte, uma avaliação cuidadosa antes de serem extrapolados para a fisiologia humana, particularmente em contextos de desenvolvimento de fármacos, onde a atividade específica da espécie do citocromo P450 pode confundir os resultados.

A base transgénica do animal de origem — a sobreexpressão de TGF-α — pode, além disso, influenciar os padrões de expressão génica de base e a sinalização dos fatores de crescimento. Os estudos centrados na biologia dos membros da família TGF devem ter em conta este contexto ao interpretar os dados.

Uma caracterização integrada citogenética e transcriptómica, publicada em 2026, define com maior precisão os limites do modelo. A FISH multicolorida e a banda multicolorida revelaram um cariótipo complexo, quase tetraplóide e altamente aneuploide (81<4n>) com rearranjos estruturais recorrentes, incluindo del(X)(A3)×2, um dicêntrico dic(X;17), del(17)(D1)×2 e um cromossoma derivado der(3)t(2;3), juntamente com múltiplos ganhos e perdas de cromossomas inteiros; ambos os cromossomas Y foram perdidos, apesar da origem masculina da linhagem. [18] Quando os desequilíbrios no número de cópias resultantes foram mapeados para as citobandas ortólogas humanas, 57,5–68 % sobrepunham-se a alterações recorrentemente relatadas no carcinoma hepatocelular humano. O sequenciamento de ARN no mesmo estudo confirmou um programa claro da linhagem dos hepatócitos, mas também documentou uma desdiferenciação parcial: a expressão de albumina foi modesta, enquanto as enzimas do ciclo da ureia e da gluconeogênese, tais como Cps1, Otc, Pck1 e G6pc eram baixos ou inexistentes, e os citocromos-chave responsáveis pela metabolização de ácidos biliares e fármacos, incluindo o Cyp7a1 e a família Cyp3a, eram quase indetetáveis, a par da indução de marcadores ductulares e de progenitores. Ser não tumorigénico no sentido funcional não significa, portanto, ser genomicamente estável. Para parâmetros que exijam metabolismo maduro de xenobióticos, gestão do azoto ou síntese de ácidos biliares, os autores recomendam complementar o AML12 com hepatócitos primários, organóides ou modelos in vivo. O estudo identificou também dois clones relacionados, cujas proporções relativas podem variar com o número de passagens e as condições de cultura, reforçando a necessidade de utilizar lotes-mestre de baixa passagem, janelas de passagem limitadas e autenticação regular em relação ao perfil de referência STR estabelecido. [18]

Ver especificações completas e encomendar

Aplicações

Apoptose e sinalização da morte celular

As células AML12 têm sido amplamente utilizadas para investigar a apoptose dos hepatócitos desencadeada por citocinas e fatores de crescimento. Pierce e colegas demonstraram que as células AML12, tal como os hepatócitos in vivo, não são sensíveis ao TNF isoladamente, mas sofrem apoptose quando o TNF é combinado com uma dose baixa de actinomicina D. [9] O seu trabalho revelou que a apoptose induzida pelo TNF nas células AML12 envolve a perturbação da homeostase redox, com a perda de NAD(P)H e glutationa a preceder os danos mitocondriais, a libertação de citocromo C e a ativação das caspasas. A lesão foi em grande parte determinada pelo teor de glutationa celular, e o antioxidante ácido alfa-lipóico impediu totalmente os danos mitocondriais e a apoptose. Estas descobertas estabeleceram as células AML12 como um modelo viável para os mecanismos oxidativos subjacentes à lesão dos hepatócitos mediada pelo TNF.

O TGF-β1 é outro indutor-chave da apoptose dos hepatócitos estudado neste modelo. Liao e colegas demonstraram que as células AML12 exibem características apoptóticas clássicas — condensação da cromatina, desintegração nuclear e fragmentação do ADN — após tratamento com TGF-β1, e que este processo foi completamente bloqueado pela cicloheximida, o que sugere a participação da síntese proteica ativa na via da morte celular. [10] Dooley e colegas utilizaram ainda culturações de hepatócitos primários e células AML12 em conjunto para caracterizar a transição epitelial-mesenquimal induzida pelo TGF-β, demonstrando que a sobreexpressão de Smad7 nos hepatócitos atenuava a fibrogénese mediada pelo TGF-β e protegia contra danos hepáticos. [11]

A biologia das subunidades da activina também foi caracterizada nas células AML12. Wada e colegas descobriram que a sobreexpressão da subunidade βC da activina promovia a proliferação e a sobrevivência das células AML12, enquanto que a sobreexpressão da subunidade βE reduzia a proliferação e desencadeava a apoptose em condições de baixo soro. [2] [3] Em conjunto, estes estudos sublinham o valor das células AML12 para a análise dos sinais concorrentes pró-sobrevivência e pró-apoptóticos que determinam o destino dos hepatócitos nas doenças hepáticas inflamatórias e fibróticas.

Metabolismo lipídico e sinalização do PPAR

A via do PPARα é um regulador central do metabolismo lipídico hepático, e as células AML12 revelaram-se especialmente úteis para estudar a sua modulação por agentes farmacológicos. Clemenz e colegas utilizaram células AML12 para demonstrar que o telmisartan, um bloqueador do recetor da angiotensina tipo 1, atua como um agonista parcial do PPARα: induziu o gene-alvo do PPARα, o membro 1 da família da acil-CoA sintetase de cadeia longa (ACSL1) nas células AML12 murinas e a carnitina palmitoiltransferase 1A (CPT1A) nas células HepG2 humanas, fornecendo uma base molecular para os seus efeitos redutores dos triglicéridos observados clinicamente. [7] Em ratos com obesidade induzida pela dieta, o telmisartan aumentou a expressão hepática de ACSL1 e CPT1A e reduziu significativamente os triglicéridos hepáticos e séricos. De forma semelhante, Huang e colegas demonstraram que o fenofibrato, um ligando do PPARα, aumentou a expressão hepática do recetor da lipoproteína de baixa densidade nas células AML12 e restaurou a capacidade de ligação do LDL, tendo os resultados sido confirmados in vivo. [12]

A aldose redutase (AR) surgiu como um regulador inesperado da atividade do PPARα nos hepatócitos. Qiu e colegas demonstraram, em células AML12, que a superexpressão da AR suprimia fortemente a atividade do PPARα e regulava negativamente os genes da oxidação de ácidos gordos, efeitos atenuados pelo inibidor seletivo da AR, o zopolrestat. [13] A sobreexpressão da AR também elevou os níveis de PPARα e ERK1/2 fosforilados, e a supressão da atividade do PPARα foi revertida pela inibição da ERK1/2 — estabelecendo uma ligação entre a via dos polióis e a homeostase lipídica através de mecanismos dependentes de quinases. Estas descobertas ilustram como as células AML12 podem revelar interações inesperadas entre vias metabólicas e de sinalização relevantes para a doença hepática gordurosa não alcoólica e as complicações hepáticas da diabetes.

A nicotinamida-N-metiltransferase (NNMT) é outra enzima estudada nas células AML12 no contexto da regulação lipídica hepática. A supressão da Nnmt mediada por RNAi nas células AML12 provocou a acumulação de S-adenosil-metionina (SAM) e S-adenosil-homocisteína, bem como uma redução da 1-metilnicotinamida (MNAM), acompanhada pela regulação negativa de genes lipogénicos, como o Srebf1, e por uma diminuição mensurável dos lípidos neutros totais — estabelecendo uma ligação entre o metabolismo de um carbono e a lipogénese hepática. [19] Por outro lado, a proteína do retículo endoplasmático TXNDC5 foi identificada como um parceiro de interação de PRDX6 e HSPA9 nas células AML12; a deficiência de TXNDC5 reduziu os níveis das proteínas PRDX6 e HSPA9 e diminuiu significativamente a peroxidação lipídica, a glutationa reduzida e a atividade da iPLA2. [20] Com base no mesmo modelo, o esqualeno carregado em nanopartículas de PLGA protegeu as células AML12 contra o stress oxidativo e do retículo endoplasmático de forma dependente da TXNDC5, tendo-se observado uma captação celular rápida e eficiente a 30 µM — resultados relevantes para futuras estratégias terapêuticas da doença hepática gordurosa. [21]

Sinalização da insulina e doenças metabólicas

As células AML12 têm sido utilizadas como ferramenta in vitro para estudar a sinalização da insulina e a sua perturbação patológica. Butler e colegas utilizaram células AML12 para validar uma estratégia de oligonucleótidos antisense direcionada para a PTEN, uma fosfatase lipídica que regula negativamente a via PI3K. A transfecção de oligonucleótidos antisense contra o PTEN nas células AML12 reduziu os níveis de ARNm e de proteína do PTEN e aumentou a fosforilação da Akt estimulada pela insulina, fornecendo uma prova de conceito mecanicista antes de a administração sistémica em ratos db/db e ob/ob ter normalizado as concentrações de glicose no sangue. [14] Este estudo ilustrou o valor das células AML12 como plataforma de triagem de primeira linha para intervenções metabólicas direcionadas à resistência à insulina.

O estudo comparativo realizado por Sefried e colegas avaliou diretamente a adequação das células AML12 para a investigação da sinalização da insulina e da expressão génica das hepatocinas. [8] Ao compararem as células AML12 com as células HepG2 e THLE-2, os autores constataram que a resposta aguda à insulina nas células AML12 dependia fortemente da composição do meio de cultura e que as células AML12 expressavam apenas níveis baixos ou indetetáveis de várias transcrições gluconeogénicas e de hepatocinas. A regulação génica dependente do PPARδ foi comparável entre as células AML12 e HepG2, mas apenas as células HepG2 reproduziram a regulação da gluconeogénese hepática mediada pelo AMPc. Os autores concluíram que, para estes parâmetros específicos, as células HepG2 se assemelhavam mais à situação in vivo, apesar da sua origem tumoral — uma consideração fundamental na seleção de um modelo para a investigação da resistência à insulina ou da diabetes tipo 2.

A tomatina foi avaliada quanto à sua capacidade de melhorar o metabolismo da glicose e a respiração mitocondrial em células AML12 e HepG2 resistentes à insulina, induzidas por níveis elevados de glicose. [22] A tomatina aumentou, de forma dependente da dose, o consumo de glicose, restaurou a expressão do transportador de glicose Glut2 e de genes relacionados com a gluconeogénese, ativou a fosforilação da AMPK e regulou positivamente a PGC1α, além de ter melhorado a taxa de consumo de oxigénio, a produção de ATP e as proteínas do complexo de fosforilação oxidativa mitocondrial. Tanto a inibição genética como a farmacológica da AMPK anularam estes benefícios, confirmando o papel central desta via e posicionando as células AML12 como uma plataforma útil para a triagem de compostos naturais com potencial antidiabético. Estas descobertas reforçam a relevância desta linha celular para o estudo do metabolismo lipídico, da resistência à insulina e dos mecanismos da doença hepática gordurosa.

Investigação sobre o carcinoma hepatocelular e a hepatite viral

O estado não transformado das células AML12 torna-as uma linha de controlo ou parental ideal na investigação do carcinoma hepatocelular (CHC). Lee e colegas criaram derivados das células AML12 que expressam a proteína X (pX) do vírus da hepatite B, regulada por tetraciclina, para criar modelos de transformação mediada pela pX. [4] Ao compararem a sublinha diferenciada e transformante (3pX-1) com a sublinha desdiferenciada e não transformante (4pX-1), os autores identificaram alterações distintas no ciclo celular associadas à ativação sustentada das vias Ras-Raf-MAPK versus JNK, demonstrando como as células parentais AML12 podem servir de contexto controlado para a análise da sinalização oncogénica.

Os agentes anticancerígenos de origem vegetal também foram avaliados em contextos hepatocitários utilizando células AML12. Choedon e colegas testaram frações de látex seco de Calotropis procera contra a linha de hepatoma Huh-7, a linha não hepatomatosa COS-1 e hepatócitos AML12 não transformados. O extrato metanólico e a sua fração 8 induziram morte celular extensiva e fragmentação do ADN nas células Huh-7 e COS-1, enquanto as células AML12 foram poupadas; paralelamente, a administração oral do látex seco protegeu totalmente os ratos transgénicos X15-myc contra a hepatocarcinogénese. [15] Tais ensaios de seletividade, utilizando células AML12 como referência de hepatócitos não malignos, constituem uma estratégia comum para identificar compostos candidatos com toxicidade preferencial para as células tumorais em detrimento do parênquima hepático normal.

A sinalização do ácido retinóico (AR), que está implicada na supressão do CHC, foi mapeada de forma abrangente em células AML12 através da análise por microarray de cDNA de 39 000 genes murinos. Mamoon e colegas identificaram 15 genes com regulação positiva e 3 com regulação negativa de, pelo menos, duas vezes após 3 horas de tratamento com RA todo-trans, com 26 com regulação positiva e 48 com regulação negativa após 24 horas. [6] Um estudo de acompanhamento realizado por Ventura-Holman e colegas utilizou a análise por microarrays de células AML12 transfectadas de forma estável com v-erbA — uma oncoproteína conhecida por exercer um efeito dominante-negativo nos recetores do ácido retinóico — para identificar quais os genes responsivos ao AR que são afetados pela v-erbA, bem como os genes regulados pela v-erbA ao nível da transcrição basal, vários dos quais estão implicados na carcinogénese. [16]

Estresse oxidativo e lesão por isquemia-reperfusão

A lesão por isquemia-reperfusão (I/R) representa um grande desafio clínico na cirurgia e no transplante hepático, e as células AML12 têm sido utilizadas para modelar os mecanismos oxidativos subjacentes. Haga e colegas demonstraram que as células AML12 submetidas a condições de hipóxia/reoxigenação desenvolveram rapidamente stress oxidativo, com muitas células a sofrerem apoptose. [17] A supressão da isoforma p66 da ShcA (p66shc) por RNAi diminuiu significativamente o stress oxidativo celular e a apoptose induzida pela H/R, conferindo resistência ao peróxido de hidrogénio. A proteção deveu-se a uma maior eliminação de ROS, em vez de à inibição da sua geração: as proteínas antioxidantes MnSOD e Ref-1 e a proteína antiapoptótica Bcl-xL foram reguladas positivamente, enquanto a proteína pró-apoptótica FLICE foi regulada negativamente; por outro lado, a expressão da catalase permaneceu inalterada. Estes resultados identificaram a p66shc como um potencial alvo terapêutico na lesão hepática por isquemia-reperfusão.

A tecnologia de oligonucleótidos antisense foi caracterizada em células AML12 no contexto da morte celular mediada por Fas. Thonberg e colegas compararam seis oligonucleótidos fosforotioatos direcionados ao ARNm do Fas em células AML12, revelando que quatro reduziram significativamente os níveis de ARNm e que um produziu um fragmento estável de clivagem do ARNm 3′ que se mapeara para a sequência complementar ao antisense. [5] Este estudo destacou as células AML12 como um modelo adequado para avaliar a eficácia do antisense e para investigar os mecanismos da degradação do ARN mediada pela RNase H nas células hepáticas.

Um perfil citogenético e transcriptómico abrangente confirmou que as células AML12 mantêm um programa de linhagem hepatocitária claro, com expressão robusta de Hnf4a, Foxa2 e Prox1, da proteína nuclear HNF4α e da ausência dos marcadores definidores da linhagem das células estreladas hepáticas, dos colangiócitos e das células de Kupffer. [18] O mesmo conjunto de dados, no entanto, revelou uma assinatura transcricional pronunciada associada ao stress e às células progenitoras, incluindo uma expressão muito elevada de Spp1/osteopontina, Ccl2 e Plscr1, juntamente com marcadores ductulares, tais como Krt19, Sox9, Hnf1b e Jag1. Esta linha de base adaptada à lesão e semelhante a progenitores torna o AML12 um modelo prático para o stress intrínseco aos hepatócitos, a sinalização inflamatória e a plasticidade epitelial, desde que o estado de linha de base seja tido em conta na interpretação dos resultados em estudos de stress oxidativo e toxicológicos.

Conclusão

As células AML12 continuam a ser um dos modelos de hepatócitos murinos mais amplamente utilizados na investigação hepática, oferecendo um equilíbrio único entre a função dos hepatócitos diferenciados e a estabilidade in vitro a longo prazo. Criada por Wu, Merlino e Fausto em 1994, [1] esta linha tem, desde então, apoiado a investigação em áreas como a doença hepática gordurosa não alcoólica, a lesão hepática induzida por fármacos, o metabolismo lipídico, a resistência à insulina, a apoptose, o carcinoma hepatocelular e a lesão por isquemia-reperfusão. O estudo de referência de Sefried e colegas delineou os limites da sua capacidade de sinalização da insulina e demonstrou que, no que diz respeito aos parâmetros de gluconeogênese e hepatocinas, as células HepG2 podem, de facto, ser o modelo mais próximo. [8] Análises citogenéticas e transcriptómicas mais recentes documentaram um cariótipo aneuploide quase tetraplóide e uma desdiferenciação parcial, o que aponta para a necessidade de validação complementar em hepatócitos primários, organóides ou modelos in vivo, sempre que for necessária a função de hepatócitos totalmente maduros. [18] Quando utilizadas tendo em conta estas ressalvas — seja para farmacologia do PPARα, modelação da hepatite viral ou investigação do stress oxidativo — as células AML12 constituem uma plataforma fiável e bem caracterizada para a biologia hepática orientada por hipóteses. Para encomendar células AML12 ou obter informações sobre as especificações, visite cytion.com.

Publicações principais

1. Wu JC, Merlino G, Fausto N (1994) Estabelecimento e caracterização de linhas celulares de hepatócitos diferenciados e não transformados, derivadas de ratos transgénicos para o fator de crescimento transformador alfa. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. PMID: 7904757
2. Wada W, Maeshima A, Zhang YQ (2004) Avaliação da função da subunidade betaC da ativina em hepatócitos em cultura. American Journal of Physiology. Endocrinologia e metabolismo. PMID: 15039147
3. Wada W, Medina JJ, Kuwano H (2005) Comparação da função das subunidades beta(C) e beta(E) da activina em hepatócitos AML12. Endocrine Journal. PMID: 15863943
4. Lee S, Tarn C, Wang WH (2002) A proteína X do vírus da hepatite B regula de forma diferenciada a progressão do ciclo celular em linhas celulares de hepatócitos transformadores por X (AML12) em comparação com as não transformadoras. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 11756437
5. Thonberg H, Dahlgren C, Wahlestedt C (2004) A degradação do ARNm de Fas induzida por antisense produz um fragmento estável e específico do local no extremo 3' do ARNm, por clivagem da exonuclease na sequência complementar. Oligonucleotides. PMID: 15625917
6. Mamoon A, Ventura-Holman T, Maher JF (2008) Genes responsivos ao ácido retinóico na linha celular de hepatócitos murinos AML 12. *Gene*. PMID: 18006250
7. Clemenz M, Frost N, Schupp M (2008) Regulação de genes-alvo do receptor alfa ativado pelo proliferador de peroxissomas (PPAR-α) específico do fígado pelo bloqueador do receptor da angiotensina tipo 1, telmisartan. Diabetes. PMID: 18184928
8. Sefried S, Häring HU, Weigert C (2018) Adequação das linhas celulares de hepatócitos HepG2, AML12 e THLE-2 para a investigação da sinalização da insulina e da expressão génica das hepatocinas. Open biology. PMID: 30355754
9. Pierce RH, Campbell JS, Stephenson AB (2000) Perturbação da homeostase redox na apoptose induzida pelo fator de necrose tumoral numa linha celular de hepatócitos murinos. The American Journal of Pathology. PMID: 10880392
10. Liao JH, Zhou BH, Chai MQ (2001) A cicloheximida bloqueia a apoptose induzida pelo TGF-beta1 em hepatócitos murinos. Acta pharmacologica Sinica. PMID: 11741524
11. Dooley S, Hamzavi J, Ciuclan L (2008) A expressão de Smad7 específica dos hepatócitos atenua a fibrogénese mediada pelo TGF-beta e protege contra danos hepáticos. Gastroenterology. PMID: 18602923
12. Huang Z, Zhou X, Nicholson AC (2008) A ativação do recetor alfa ativado por proliferadores de peroxissomas em ratos induz a expressão do recetor hepático da lipoproteína de baixa densidade. British Journal of Pharmacology. PMID: 18852694
13. Qiu L, Wu X, Chau JF (2008) A aldose redutase regula a fosforilação e a atividade do receptor alfa ativado por proliferadores de peroxissomas no fígado, influenciando a homeostase lipídica. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 18445591
14. Butler M, McKay RA, Popoff IJ (2002) A inibição específica da expressão de PTEN reverte a hiperglicemia em ratos diabéticos. Diabetes. PMID: 11916922
15. Choedon T, Mathan G, Arya S (2006) Propriedades anticancerígenas e citotóxicas do látex de Calotropis procera num modelo de rato transgénico com carcinoma hepatocelular. World Journal of Gastroenterology. PMID: 16688796
16. Ventura-Holman T, Mamoon A, Subauste JS (2008) Modulação da expressão de genes regulados pelo RA pela oncoproteína v-erbA. Gene. PMID: 18775481
17. Haga S, Terui K, Fukai M (2008) Prevenção dos danos causados pela hipóxia/reoxigenação nos hepatócitos através da ablação de p66(shc): regulação positiva de proteínas antioxidantes e antiapoptóticas. Journal of Hepatology. PMID: 18191273
18. Asar DY, Kankel S, Keller DT (2026) Perfil citogenético e genómico abrangente da linha celular de hepatócitos murinos AML12 (Alpha Mouse Liver 12). Cells. PMID: 41827824
19. Yoda M, Mizuno R, Izumi Y (2023) A nicotinamida-N-metiltransferase regula o metabolismo lipídico através da SAM e da 1-metilnicotinamida na linha celular de hepatócitos AML12. Journal of Biochemistry. PMID: 37014628
20. Bidooki SH, Sánchez-Marco J, Martínez-Beamonte R (2023) A proteína TXNDC5 do retículo endoplasmático interage com PRDX6 e HSPA9 para regular o metabolismo da glutationa e a peroxidação lipídica na linha celular hepática AML12. International Journal of Molecular Sciences. PMID: 38138960
21. Bidooki SH, Alejo T, Sánchez-Marco J (2022) As nanopartículas carregadas com esqualeno protegem eficazmente as linhas celulares hepáticas AML12 contra o stress oxidativo e do retículo endoplasmático de forma dependente da TXNDC5. Antioxidants. PMID: 35326231
22. Lee YG, Kim D (2025) A tomatina melhora o metabolismo da glicose e a respiração mitocondrial nas linhas celulares de hepatócitos resistentes à insulina AML12 e HepG2 através de uma via dependente da proteína quinase ativada por AMP. Cells. PMID: 40072058