Introduction

Cellules AML12, également connue sous les noms d’AML-12, AML 12 et Alpha Mouse Liver 12, est une lignée cellulaire hépatocytaire murine bien établie, largement utilisée dans la recherche biomédicale. Wu, Merlino et Fausto ont établi cette lignée en 1994 à partir du foie d'une souris transgénique surexprimant le facteur de croissance transformant alpha humain (TGF-α), un puissant mitogène hépatocytaire. [1] Contrairement aux hépatocytes primaires, les cellules AML12 conservent des fonctions clés liées à leur différenciation — notamment l’expression des peroxysomes et la présence de structures de type canaliculaire biliaire — au fil de nombreux passages sans devenir tumorigènes. Cette combinaison de stabilité et de conservation du phénotype hépatocytaire en a fait une plateforme in vitro de choix pour l’étude du métabolisme lipidique, de la stéatose hépatique non alcoolique, des lésions hépatiques d’origine chimique ou médicamenteuse, de la résistance à l’insuline et de l’apoptose hépatocytaire. Leur origine murine facilite la comparaison directe avec des modèles animaux transgéniques et knock-out, élargissant ainsi leur utilité translationnelle dans divers contextes de recherche sur les maladies hépatiques.

Points clés à retenir

• Les cellules AML12 sont des hépatocytes murins différenciés et non tumorigènes issus de souris transgéniques exprimant le TGF-α. [1]
• Elles conservent des caractéristiques spécifiques aux hépatocytes, telles que les peroxysomes, des structures de type canaliculaire biliaire et des taux élevés d’ARNm codant pour des protéines sériques spécifiques au foie, bien que l’expression de certaines d’entre elles diminue au fur et à mesure des passages successifs. [1]
• Cette lignée est largement utilisée pour modéliser la stéatose hépatique non alcoolique, les lésions hépatiques d'origine médicamenteuse et les troubles du métabolisme lipidique.
• Les cellules AML12 réagissent à des signaux hépatiques clés, notamment le TGF-β, le TNF, l'insuline et l'acide rétinoïque.
• Le fait qu'ils ne soient pas transformés les rend particulièrement adaptés à l'étude de la physiologie et de la toxicologie des hépatocytes normaux.
• Ils sont compatibles avec la transfection adénovirale, les oligonucléotides antisens et les techniques d'édition génétique basées sur CRISPR.
• La caractérisation moléculaire a mis en évidence un caryotype aneuploïde quasi tétraploïde et une dédifférenciation partielle ; par conséquent, les cellules AML12 doivent être associées à des hépatocytes primaires ou à des modèles in vivo pour les critères d'évaluation nécessitant une fonction hépatocytaire pleinement mature. [18]

Qu'est-ce que l'AML12 ?

La lignée AML12 a été dérivée d'hépatocytes d'une souris mâle âgée de 5 mois (souche CD-1, lignée MT42), transgénique pour le facteur de croissance transformant alpha humain sous le contrôle du promoteur de la métallothionéine 1 inductible par le zinc. Wu, Merlino et Fausto ont établi cette lignée en 1994 et l'ont caractérisée comme une lignée d'hépatocytes spontanément immortalisée et non transformée. [1] Ces cellules portent le numéro d'accès Cellosaurus CVCL_0140 et sont authentifiées par rapport à un profil de référence STR murin à 18 marqueurs. La publication originale fait état d'un temps de doublement de 37 heures (36 à 48 heures selon les données du fournisseur), et les données transcriptomiques issues d'analyses par micropuces sont accessibles au public. L'étude originale a permis d'obtenir deux lignées, AML12 et AML14, qui ont toutes deux été maintenues pendant plus d'un an et demi et ont subi plus de 80 passages. La lignée AML12 a conservé son identité hépatocytaire et est restée non tumorigène tout au long de la période d’étude, bien que les niveaux d’ARNm de certaines protéines sériques aient diminué progressivement au fil des passages et aient pu être rétablis par culture dans un milieu sans sérum. AML14, en revanche, a perdu l’expression tant des marqueurs de différenciation que de l’ARNm du transgène au cours de passages prolongés, les caractéristiques hépatocytaires n’étant que partiellement récupérables. [1]

Informations sur la culture cellulaire AML12

Avantages des cellules AML12

L'un des principaux avantages des cellules AML12 réside dans le fait qu'elles conservent un phénotype d'hépatocytes différenciés au cours d'une culture à long terme. Contrairement à de nombreuses lignées d'hépatomes, les cellules AML12 contiennent des peroxysomes et des structures de type canaliculaire biliaire, expriment des niveaux élevés d'ARNm de protéines sériques spécifiques du foie, notamment l'albumine, l'alpha-1-antitrypsine et la transferrine, et sécrètent de l'albumine. [1] Elles ne se développent pas sur une gélose molle et ne présentent pas de potentiel tumorigène chez les souris nues, ce qui confirme que l’immortalisation s’est produite sans transformation maligne fonctionnelle. Ce statut non transformé est essentiel pour les études nécessitant un comportement de base physiologiquement pertinent, telles que les recherches sur la signalisation de l’insuline, le métabolisme lipidique ou l’hépatotoxicité. Au niveau génomique, cependant, il a depuis été démontré que cette lignée présente des aberrations chromosomiques importantes, qui sont abordées dans la section « Limites ». [18]

Les cellules AML12 offrent une grande polyvalence en matière de manipulation génétique. Elles permettent la surexpression génique à l'aide de vecteurs adénoviraux, comme l'ont démontré des études portant sur les sous-unités de l'activine. [2] [3] Ils permettent également une expression stable du transgène régulée par la tétracycline, ce qui permet de mettre au point des modèles inductibles de l'activité de la protéine X du virus de l'hépatite B. [4] De plus, l'administration d'oligonucléotides antisens a été réalisée efficacement, ce qui rend les cellules AML12 adaptées aux études portant sur le ciblage de l'ARN, [5] et des dérivés knock-out basés sur la technologie CRISPR/Cas9 ont été générés avec succès. [21] Leur origine murine permet de valider directement les résultats expérimentaux par recoupement avec les données issues de souris transgéniques et knock-out, renforçant ainsi le lien de transposition entre l'in vitro et l'in vivo.

D'un point de vue pratique, les cellules AML12 réagissent fortement à un large éventail de stimuli physiologiques. Parmi les réponses observées figurent l'activation transcriptionnelle induite par l'acide rétinoïque, les ligands du PPARα, le TGF-β, le TNF et les modulateurs de la voie de l'insuline. [6] [7] Grâce à cette grande réactivité aux signaux, cette lignée s'avère utile simultanément dans plusieurs domaines de recherche, ce qui évite d'avoir à changer de plateforme d'une expérience à l'autre.

Limites des cellules AML12

Malgré leur phénotype différencié, les cellules AML12 ne sont pas équivalentes aux hépatocytes primaires sur tous les plans fonctionnels. Une étude de référence comparant les cellules AML12, HepG2 et THLE-2 en termes de signalisation de l'insuline et d'expression génique des hépatokines a révélé que la réactivité à l'insuline des cellules AML12 était altérée lorsque celles-ci étaient cultivées dans le milieu de croissance recommandé, mais qu'elle devenait comparable à celle des cellules HepG2 lorsqu'on utilisait un milieu dépourvu d'insuline. [8] Les taux de protéine du récepteur de l'insuline dans les cellules AML12 étaient similaires à ceux observés dans les cellules HepG2, tandis que les cellules AML12 ne présentaient que des taux de transcription faibles, voire indétectables, pour plusieurs enzymes glucogéniques et hépatokines. Les auteurs ont conclu qu'en ce qui concerne la gluconéogenèse et l'expression des hépatokines, les cellules HepG2 semblaient plus proches de la situation in vivo malgré leur origine tumorale. La composition du milieu de culture et l'abondance des protéines de signalisation clés doivent donc être soigneusement prises en compte lorsque les cellules AML12 sont utilisées pour modéliser la résistance à l'insuline.

L'origine murine des cellules AML12 entraîne également des différences intrinsèques liées à l'espèce par rapport aux hépatocytes humains. Les voies métaboliques des médicaments, le métabolisme des lipides et certaines réponses inflammatoires diffèrent entre les cellules hépatiques murines et humaines. Les résultats obtenus sur les cellules AML12 doivent donc faire l'objet d'une évaluation minutieuse avant d'être extrapolés à la physiologie humaine, en particulier dans le cadre du développement de médicaments où l'activité spécifique au cytochrome P450 de chaque espèce peut fausser les résultats.

Le profil transgénique de l'animal source — la surexpression du TGF-α — peut également influencer les profils d'expression génique de base et la signalisation des facteurs de croissance. Les études portant sur la biologie des membres de la famille des TGF devraient tenir compte de ce contexte lors de l'interprétation des données.

Une caractérisation intégrée sur le plan cytogénétique et transcriptomique, publiée en 2026, précise davantage les limites de ce modèle. La FISH multicolore et le bandage multicolore ont révélé un caryotype complexe, quasi-tétraploïde et fortement aneuploïde (81<4n>), présentant des réarrangements structurels récurrents, notamment del(X)(A3)×2, un dicentrique dic(X;17), del(17)(D1)×2 et un chromosome dérivé der(3)t(2;3), ainsi que de multiples gains et pertes de chromosomes entiers ; les deux chromosomes Y ont été perdus malgré l’origine masculine de la lignée. [18] Lorsque les déséquilibres du nombre de copies ainsi mis en évidence ont été cartographiés sur des bandes cytogénétiques humaines orthologues, 57,5 à 68 % d’entre eux se recoupaient avec des altérations régulièrement rapportées dans le carcinome hépatocellulaire humain. Le séquençage de l’ARN réalisé dans le cadre de cette même étude a confirmé l’existence d’un programme de lignée hépatocytaire bien défini, mais a également mis en évidence une dédifférenciation partielle : l’expression de l’albumine était modeste, tandis que celle des enzymes du cycle de l’urée et de la gluconéogenèse, telles que Cps1, Otc, Pck1 et G6pc étaient faibles, voire absentes, et les cytochromes clés impliqués dans le métabolisme des acides biliaires et des médicaments, notamment le Cyp7a1 et la famille Cyp3a, étaient à peine détectables, parallèlement à l’induction de marqueurs des cellules ductulaires et des cellules progénitrices. Le fait d’être non tumorigène au sens fonctionnel ne signifie donc pas que la lignée soit génomiquement stable. Pour les critères d’évaluation nécessitant un métabolisme xénobiotique mature, une gestion de l’azote ou une synthèse d’acides biliaires, les auteurs recommandent de compléter l’AML12 par des hépatocytes primaires, des organoïdes ou des modèles in vivo. L’étude a également identifié deux clones apparentés dont les proportions relatives peuvent varier en fonction du nombre de passages et des conditions de culture, ce qui renforce l’intérêt d’utiliser des souches mères à faible nombre de passages, de limiter la durée des passages et de procéder à une authentification régulière par rapport au profil de référence STR établi. [18]

Consulter les caractéristiques techniques complètes et passer commande

Applications

Apoptose et signalisation de la mort cellulaire

Les cellules AML12 ont été largement utilisées pour étudier l’apoptose des hépatocytes déclenchée par les cytokines et les facteurs de croissance. Pierce et ses collègues ont démontré que les cellules AML12, à l’instar des hépatocytes in vivo, ne sont pas sensibles au TNF seul, mais subissent une apoptose lorsque le TNF est associé à une faible dose d’actinomycine D. [9] Leurs travaux ont révélé que l’apoptose induite par le TNF dans les cellules AML12 implique une perturbation de l’homéostasie redox, la perte de NAD(P)H et de glutathion précédant les lésions mitochondriales, la libération de cytochrome C et l’activation des caspases. La lésion dépendait en grande partie de la teneur en glutathion cellulaire, et l’acide alpha-lipoïque, un antioxydant, a entièrement empêché les lésions mitochondriales et l’apoptose. Ces résultats ont permis d’établir que les cellules AML12 constituent un modèle pratique pour l’étude des mécanismes oxydatifs sous-jacents à la lésion hépatocytaire médiée par le TNF.

Le TGF-β1 est un autre inducteur clé de l’apoptose hépatocytaire étudié dans ce modèle. Liao et ses collègues ont montré que les cellules AML12 présentaient des caractéristiques apoptotiques classiques — condensation de la chromatine, désintégration nucléaire et fragmentation de l’ADN — après un traitement au TGF-β1, et que ce processus était complètement bloqué par la cycloheximide, ce qui implique une synthèse protéique active dans la voie de la mort cellulaire. [10] Dooley et ses collègues ont en outre utilisé conjointement des cultures d’hépatocytes primaires et des cellules AML12 pour caractériser la transition épithélio-mésenchymateuse induite par le TGF-β, montrant que la surexpression de Smad7 dans les hépatocytes atténuait la fibrogénèse médiée par le TGF-β et protégeait contre les lésions hépatiques. [11]

La biologie des sous-unités de l’activine a également été caractérisée dans les cellules AML12. Wada et ses collègues ont découvert que la surexpression de la sous-unité βC de l’activine favorisait la prolifération et la survie des cellules AML12, tandis que la surexpression de la sous-unité βE réduisait la prolifération et déclenchait l’apoptose dans des conditions de faible concentration sérique. [2] [3] Ensemble, ces études soulignent l’intérêt des cellules AML12 pour l’analyse des signaux concurrents favorisant la survie et l’apoptose qui régissent le destin des hépatocytes dans les maladies hépatiques inflammatoires et fibrotiques.

Métabolisme lipidique et voie de signalisation PPAR

La voie PPARα est un régulateur central du métabolisme lipidique hépatique, et les cellules AML12 se sont révélées particulièrement utiles pour étudier sa modulation par des agents pharmacologiques. Clemenz et ses collègues ont utilisé des cellules AML12 pour montrer que le telmisartan, un antagoniste des récepteurs de l’angiotensine de type 1, agit comme un agoniste partiel du PPARα : il a induit l’expression du gène cible du PPARα, l’acyl-CoA synthétase de la famille à longue chaîne 1 (ACSL1) dans les cellules AML12 murines et la carnitine palmitoyltransférase 1A (CPT1A) dans les cellules HepG2 humaines, fournissant ainsi une base moléculaire à ses effets hypolipidémiants cliniquement observés. [7] Chez des souris présentant une obésité d'origine alimentaire, le telmisartan a augmenté l'expression hépatique de l'ACSL1 et de la CPT1A et a considérablement réduit les triglycérides hépatiques et sériques. De même, Huang et ses collègues ont montré que le fénofibrate, un ligand du PPARα, augmentait l’expression hépatique du récepteur des lipoprotéines de basse densité dans les cellules AML12 et rétablissait la capacité de liaison des LDL, ces résultats ayant été confirmés in vivo. [12]

L’aldose réductase (AR) s’est révélée être un régulateur inattendu de l’activité du PPARα dans les hépatocytes. Qiu et ses collaborateurs ont démontré, dans des cellules AML12, que la surexpression de l’AR inhibait fortement l’activité du PPARα et réduisait l’expression des gènes impliqués dans l’oxydation des acides gras, effets atténués par le zopolrestat, un inhibiteur sélectif de l’AR. [13] La surexpression de l'AR a également entraîné une augmentation des niveaux de PPARα et d'ERK1/2 phosphorylés, et la suppression de l'activité du PPARα a été inversée par l'inhibition de l'ERK1/2 — établissant ainsi un lien entre la voie des polyols et l'homéostasie lipidique par le biais de mécanismes dépendants des kinases. Ces résultats illustrent comment les cellules AML12 peuvent mettre en évidence des interactions inattendues entre les voies métaboliques et de signalisation impliquées dans la stéatose hépatique non alcoolique et les complications hépatiques du diabète.

La nicotinamide-N-méthyltransférase (NNMT) est une autre enzyme étudiée dans les cellules AML12 dans le contexte de la régulation des lipides hépatiques. L'inhibition de Nnmt par ARNi dans les cellules AML12 a entraîné une accumulation de S-adénosyl-méthionine (SAM) et de S-adénosyl-homocystéine, ainsi qu'une réduction du 1-méthylnicotinamide (MNAM), accompagnées d’une régulation à la baisse de gènes lipogéniques tels que Srebf1 et d’une diminution mesurable des lipides neutres totaux — établissant ainsi un lien entre le métabolisme du carbone unique et la lipogenèse hépatique. [19] Par ailleurs, la protéine TXNDC5 du réticulum endoplasmique a été identifiée comme un partenaire d’interaction de PRDX6 et HSPA9 dans les cellules AML12 ; une déficience en TXNDC5 a entraîné une baisse des taux protéiques de PRDX6 et HSPA9, ainsi qu’une diminution significative de la peroxydation lipidique, du glutathion réduit et de l’activité de l’iPLA2. [20] En s’appuyant sur ce même modèle, le squalène incorporé dans des nanoparticules de PLGA a protégé les cellules AML12 contre le stress oxydatif et le stress du réticulum endoplasmique de manière dépendante de TXNDC5, avec une absorption cellulaire rapide et efficace observée à 30 µM — des résultats pertinents pour les futures stratégies thérapeutiques de la stéatose hépatique. [21]

Signalisation de l’insuline et maladies métaboliques

Les cellules AML12 ont été utilisées comme outil in vitro pour étudier la signalisation de l’insuline et ses perturbations pathologiques. Butler et ses collègues ont utilisé des cellules AML12 pour valider une stratégie basée sur des oligonucléotides antisens ciblant la PTEN, une phosphatase lipidique qui régule négativement la voie PI3K. La transfection d’oligonucléotides antisens anti-PTEN dans les cellules AML12 a réduit les niveaux d’ARNm et de protéine PTEN et augmenté la phosphorylation de l’Akt stimulée par l’insuline, apportant ainsi une preuve de concept mécanistique avant que l’administration systémique chez des souris db/db et ob/ob ne normalise les concentrations de glucose sanguin. [14] Cette étude a illustré l’intérêt des cellules AML12 en tant que plateforme de criblage de première ligne pour les interventions métaboliques ciblant la résistance à l’insuline.

L’étude comparative menée par Sefried et ses collègues a directement évalué l’adéquation des cellules AML12 pour la recherche sur la signalisation de l’insuline et l’expression des gènes des hépatokines. [8] En comparant les cellules AML12 aux cellules HepG2 et THLE-2, les auteurs ont constaté que la réactivité aiguë à l’insuline des cellules AML12 dépendait fortement de la composition du milieu de culture, et que ces cellules n’exprimaient que des niveaux faibles, voire indétectables, de plusieurs transcrits gluconéogéniques et d’hépatokines. La régulation génique dépendante du PPARδ était comparable entre les cellules AML12 et HepG2, mais seules les cellules HepG2 reproduisaient la régulation de la gluconéogenèse hépatique médiée par l’AMPc. Les auteurs ont conclu que, pour ces critères d’évaluation particuliers, les cellules HepG2 se rapprochaient davantage de la situation in vivo malgré leur origine tumorale — un élément clé à prendre en compte lors du choix d’un modèle pour la recherche sur l’insulinorésistance ou le diabète de type 2.

La tomatine a été évaluée pour sa capacité à améliorer le métabolisme du glucose et la respiration mitochondriale dans des cellules AML12 et HepG2 insulinorésistantes induites par une concentration élevée de glucose. [22] La tomatine a augmenté de manière dose-dépendante la consommation de glucose, a rétabli l’expression du transporteur de glucose Glut2 et des gènes liés à la néoglucogenèse, a activé la phosphorylation de l’AMPK et régulé à la hausse l’expression de PGC1α, et a amélioré le taux de consommation d’oxygène, la production d’ATP et les protéines du complexe de phosphorylation oxydative mitochondriale. L’inhibition tant génétique que pharmacologique de l’AMPK a annulé ces effets bénéfiques, confirmant ainsi le rôle central de cette voie et faisant des cellules AML12 une plateforme utile pour le criblage de composés naturels présentant un potentiel antidiabétique. Ces résultats renforcent la pertinence de cette lignée cellulaire pour l’étude du métabolisme lipidique, de la résistance à l’insuline et des mécanismes de la stéatose hépatique.

Recherche sur le carcinome hépatocellulaire et l’hépatite virale

Le statut non transformé des cellules AML12 en fait une lignée témoin ou parentale idéale pour la recherche sur le carcinome hépatocellulaire (CHC). Lee et ses collègues ont mis au point des dérivés des cellules AML12 exprimant la protéine X (pX) du virus de l’hépatite B, régulée par la tétracycline, afin de créer des modèles de transformation médiée par la pX. [4] En comparant la sous-lignée différenciée et transformante (3pX-1) à la sous-lignée dédifférenciée et non transformante (4pX-1), les auteurs ont mis en évidence des altérations distinctes du cycle cellulaire liées à l’activation soutenue de la voie Ras-Raf-MAPK par opposition à celle de la voie JNK, démontrant ainsi comment les cellules parentales AML12 peuvent servir de fond contrôlé pour analyser les signaux oncogéniques.

Des agents anticancéreux d'origine végétale ont également été évalués dans des contextes hépatocytaires à l'aide de cellules AML12. Choedon et ses collègues ont testé des fractions de latex séché issu de Calotropis procera sur la lignée d'hépatome Huh-7, la lignée non hépatomique COS-1 et des hépatocytes AML12 non transformés. L’extrait méthanolique et sa fraction 8 ont induit une mort cellulaire massive et une fragmentation de l’ADN dans les cellules Huh-7 et COS-1, tandis que les cellules AML12 ont été épargnées ; parallèlement, l’administration par voie orale du latex séché a entièrement protégé les souris transgéniques X15-myc contre l’hépatocarcinogenèse. [15] De tels tests de sélectivité, utilisant les cellules AML12 comme référence d’hépatocytes non malins, constituent une stratégie courante pour identifier des composés candidats présentant une toxicité préférentielle pour les cellules tumorales par rapport au parenchyme hépatique normal.

La voie de signalisation de l’acide rétinoïque (RA), impliquée dans la suppression du CHC, a été cartographiée de manière exhaustive dans les cellules AML12 à l’aide d’une analyse par puce à ADNc portant sur 39 000 gènes murins. Mamoon et ses collègues ont identifié 15 gènes surexprimés et 3 sous-exprimés d’au moins deux fois après 3 heures de traitement par l’AR tout-trans, avec 26 gènes surexprimés et 48 sous-exprimés après 24 heures. [6] Une étude complémentaire menée par Ventura-Holman et ses collègues a utilisé l’analyse par micropuces de cellules AML12 transfectées de manière stable avec le gène v-erbA — une oncoprotéine connue pour exercer un effet dominant-négatif sur les récepteurs de l’acide rétinoïque — afin d’identifier les gènes sensibles à l’AR affectés par le v-erbA, ainsi que les gènes régulés par le v-erbA au niveau de la transcription basale, dont plusieurs sont impliqués dans la carcinogenèse. [16]

Stress oxydatif et lésion d’ischémie-reperfusion

Les lésions d’ischémie-reperfusion (I/R) constituent un défi clinique majeur en chirurgie et en transplantation hépatiques, et les cellules AML12 ont été utilisées pour modéliser les mécanismes oxydatifs sous-jacents. Haga et ses collègues ont démontré que les cellules AML12 soumises à des conditions d’hypoxie/réoxygénation développaient rapidement un stress oxydatif, de nombreuses cellules subissant alors une apoptose. [17] L’inhibition de l’isoforme p66 de ShcA (p66shc) par ARNi a considérablement réduit le stress oxydatif cellulaire et l’apoptose induite par l’I/R, tout en conférant une résistance au peroxyde d’hydrogène. Cette protection était attribuable à une élimination accrue des ROS plutôt qu’à une inhibition de leur production : les protéines antioxydantes MnSOD et Ref-1 ainsi que la protéine anti-apoptotique Bcl-xL ont été surexprimées, tandis que la protéine pro-apoptotique FLICE a été sous-exprimée, l’expression de la catalase restant quant à elle inchangée. Ces résultats ont permis d’identifier p66shc comme une cible thérapeutique potentielle dans les lésions hépatiques d’ischémie-réperfusion.

La technologie des oligonucléotides antisens a été caractérisée dans des cellules AML12 dans le contexte de la mort cellulaire médiée par Fas. Thonberg et ses collègues ont comparé six oligonucléotides phosphorothioates ciblant l’ARNm de Fas dans des cellules AML12, révélant que quatre d’entre eux réduisaient significativement les niveaux d’ARNm et qu’un produisait un fragment de clivage stable de l’ARNm 3′ correspondant à la séquence antisens complémentaire. [5] Cette étude a mis en évidence que les cellules AML12 constituent un modèle approprié pour évaluer l’efficacité des oligonucléotides antisens et pour étudier les mécanismes de dégradation de l’ARN médiée par la RNase H dans les cellules hépatiques.

Un profilage cytogénétique et transcriptomique complet a confirmé que les cellules AML12 conservent un programme de lignée hépatocytaire bien défini, avec une expression robuste de Hnf4a, Foxa2 et Prox1, de la protéine HNF4α nucléaire, ainsi que l’absence des marqueurs définissant la lignée des cellules stellaires hépatiques, des cholangiocytes et des cellules de Kupffer. [18] Ce même ensemble de données a toutefois révélé une signature transcriptionnelle prononcée associée au stress et aux cellules progénitrices, comprenant une expression très élevée de Spp1/ostéopontine, Ccl2 et Plscr1, ainsi que des marqueurs ductulaires tels que Krt19, Sox9, Hnf1b et Jag1. Cette base de référence de type progéniteur, adaptée à la lésion, fait de l’AML12 un modèle pratique pour étudier le stress intrinsèque des hépatocytes, la signalisation inflammatoire et la plasticité épithéliale, à condition que cet état de base soit pris en compte lors de l’interprétation des résultats dans les études sur le stress oxydatif et la toxicologie.

Conclusion

Les cellules AML12 restent l’un des modèles d’hépatocytes murins les plus largement utilisés dans la recherche sur le foie, offrant un équilibre unique entre la fonction des hépatocytes différenciés et la stabilité in vitro à long terme. Créée par Wu, Merlino et Fausto en 1994 [1], cette lignée a depuis soutenu la recherche dans les domaines de la stéatose hépatique non alcoolique, des lésions hépatiques d’origine médicamenteuse, du métabolisme lipidique, de la résistance à l’insuline, de l’apoptose, du carcinome hépatocellulaire et des lésions d’ischémie-reperfusion. L’étude de référence menée par Sefried et ses collègues a délimité les limites de leur capacité de signalisation de l’insuline et a montré que, pour les paramètres glucogéniques et les hépatokines, les cellules HepG2 pourraient en réalité constituer le modèle le plus proche. [8] Des analyses cytogénétiques et transcriptomiques plus récentes ont mis en évidence un caryotype aneuploïde quasi tétraploïde et une dédifférenciation partielle, ce qui plaide en faveur d’une validation complémentaire dans des hépatocytes primaires, des organoïdes ou des modèles in vivo chaque fois qu’une fonction hépatocytaire pleinement mature est requise. [18] Utilisées en tenant compte de ces réserves — que ce soit pour la pharmacologie du PPARα, la modélisation de l’hépatite virale ou l’étude du stress oxydatif —, les cellules AML12 constituent une plateforme fiable et bien caractérisée pour la biologie hépatique fondée sur des hypothèses. Pour commander des cellules AML12 ou obtenir des informations sur leurs spécifications, rendez-vous sur cytion.com.

Publications clés

1. Wu JC, Merlino G, Fausto N (1994) Mise en place et caractérisation de lignées cellulaires d'hépatocytes différenciés et non transformés dérivées de souris transgéniques pour le facteur de croissance transformant alpha. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. PMID : 7904757
2. Wada W, Maeshima A, Zhang YQ (2004) Évaluation de la fonction de la sous-unité bêta-C de l’activine dans des hépatocytes en culture. American Journal of Physiology. Endocrinology and Metabolism. PMID : 15039147
3. Wada W, Medina JJ, Kuwano H (2005) Comparaison de la fonction des sous-unités bêta(C) et bêta(E) de l’activine dans les hépatocytes AML12. Endocrine Journal. PMID : 15863943
4. Lee S, Tarn C, Wang WH (2002) La protéine X du virus de l'hépatite B régule de manière différentielle la progression du cycle cellulaire dans les lignées cellulaires d'hépatocytes X-transformantes par rapport aux lignées non transformantes (AML12). The Journal of Biological Chemistry. PMID : 11756437
5. Thonberg H, Dahlgren C, Wahlestedt C (2004) La dégradation de l'ARNm de Fas induite par un oligonucléotide antisens produit un fragment d'ARNm 3' stable et spécifique d'un site par clivage exonucléasique au niveau de la séquence complémentaire. *Oligonucleotides*. PMID : 15625917
6. Mamoon A, Ventura-Holman T, Maher JF (2008) Gènes sensibles à l’acide rétinoïque dans la lignée cellulaire d’hépatocytes murins AML 12. *Gene*. PMID : 18006250
7. Clemenz M, Frost N, Schupp M (2008) Régulation des gènes cibles du récepteur alpha activé par les proliférateurs de peroxysomes (PPAR-α), spécifique au foie, par le telmisartan, un antagoniste du récepteur de l'angiotensine de type 1. Diabetes. PMID : 18184928
8. Sefried S, Häring HU, Weigert C (2018) Adéquation des lignées cellulaires hépatocytaires HepG2, AML12 et THLE-2 pour l'étude de la signalisation de l'insuline et de l'expression génique des hépatokines. Open biology. PMID : 30355754
9. Pierce RH, Campbell JS, Stephenson AB (2000) Perturbation de l’homéostasie redox dans l’apoptose induite par le facteur de nécrose tumorale dans une lignée cellulaire d’hépatocytes murins. The American Journal of Pathology. PMID : 10880392
10. Liao JH, Zhou BH, Chai MQ (2001) La cycloheximide bloque l’apoptose induite par le TGF-bêta-1 dans les hépatocytes murins. *Acta pharmacologica Sinica*. PMID : 11741524
11. Dooley S, Hamzavi J, Ciuclan L (2008) L'expression de Smad7 spécifique aux hépatocytes atténue la fibrogénèse médiée par le TGF-bêta et protège contre les lésions hépatiques. *Gastroenterology*. PMID : 18602923
12. Huang Z, Zhou X, Nicholson AC (2008) L'activation du récepteur alpha des proliférateurs de peroxysomes chez la souris induit l'expression du récepteur hépatique des lipoprotéines de basse densité. British journal of pharmacology. PMID : 18852694
13. Qiu L, Wu X, Chau JF (2008) L'aldose réductase régule la phosphorylation et l'activité du récepteur alpha activé par les proliférateurs de peroxysomes hépatiques, influençant ainsi l'homéostasie lipidique. The Journal of biological chemistry. PMID : 18445591
14. Butler M, McKay RA, Popoff IJ (2002) L'inhibition spécifique de l'expression du PTEN inverse l'hyperglycémie chez la souris diabétique. *Diabetes*. PMID : 11916922
15. Choedon T, Mathan G, Arya S (2006) Propriétés anticancéreuses et cytotoxiques du latex de Calotropis procera dans un modèle murin transgénique de carcinome hépatocellulaire. World Journal of Gastroenterology. PMID : 16688796
16. Ventura-Holman T, Mamoon A, Subauste JS (2008) Modulation de l’expression des gènes régulés par le RA par l’oncoprotéine v-erbA. Gene. PMID : 18775481
17. Haga S, Terui K, Fukai M (2008) Prévention des lésions hépatocytaires liées à l’hypoxie/réoxygénation par l’ablation de p66(shc) : régulation à la hausse des protéines antioxydantes et anti-apoptotiques. Journal of hepatology. PMID : 18191273
18. Asar DY, Kankel S, Keller DT (2026) Profilage cytogénétique et génomique complet de la lignée cellulaire hépatocytaire murine AML12 (Alpha Mouse Liver 12). Cells. PMID : 41827824
19. Yoda M, Mizuno R, Izumi Y (2023) La nicotinamide-N-méthyltransférase régule le métabolisme lipidique via la SAM et la 1-méthylnicotinamide dans la lignée cellulaire hépatocytaire AML12. Journal of Biochemistry. PMID : 37014628
20. Bidooki SH, Sánchez-Marco J, Martínez-Beamonte R (2023) La protéine TXNDC5 du réticulum endoplasmique interagit avec PRDX6 et HSPA9 pour réguler le métabolisme du glutathion et la peroxydation lipidique dans la lignée cellulaire hépatique AML12. International Journal of Molecular Sciences. PMID : 38138960
21. Bidooki SH, Alejo T, Sánchez-Marco J (2022) Les nanoparticules chargées en squalène protègent efficacement les lignées cellulaires hépatiques AML12 contre le stress oxydatif et le stress du réticulum endoplasmique de manière dépendante de TXNDC5. Antioxidants. PMID : 35326231
22. Lee YG, Kim D (2025) La tomatine améliore le métabolisme du glucose et la respiration mitochondriale dans les lignées cellulaires d’hépatocytes résistantes à l’insuline AML12 et HepG2 via une voie dépendante de la protéine kinase activée par l’AMP. Cells. PMID : 40072058