Pendahuluan

Sel AML12, yang juga dikenal sebagai AML-12, AML 12, dan Alpha Mouse Liver 12, merupakan lini sel hepatosit tikus yang telah mapan dan banyak digunakan dalam penelitian biomedis. Wu, Merlino, dan Fausto mengembangkan garis sel ini pada tahun 1994 dari hati seekor tikus transgenik yang mengekspresikan secara berlebihan faktor pertumbuhan transformasi alfa manusia (TGF-α), suatu mitogen hepatosit yang kuat. [1] Berbeda dengan hepatosit primer, sel AML12 mempertahankan fungsi-fungsi diferensiasi utama — termasuk ekspresi peroksisom dan struktur mirip kanalikel empedu — selama banyak kali pemindahan kultur tanpa menjadi tumorigenik. Kombinasi stabilitas dan fenotipe hepatosit yang tetap terjaga ini menjadikan sel-sel tersebut sebagai platform in vitro yang disukai untuk meneliti metabolisme lipid, penyakit hati berlemak non-alkoholik, kerusakan hati akibat bahan kimia dan obat-obatan, resistensi insulin, serta apoptosis hepatosit. Asal usulnya dari tikus memudahkan perbandingan langsung dengan model hewan transgenik dan knockout, sehingga memperluas kegunaannya dalam konteks penelitian berbagai penyakit hati.

Poin-Poin Penting

• Sel AML12 adalah hepatosit tikus yang telah mengalami diferensiasi dan tidak bersifat tumorigenik, yang berasal dari tikus transgenik TGF-α. [1]
• Sel-sel tersebut tetap mempertahankan ciri-ciri khas hepatosit, seperti peroksisom, struktur mirip kanalikel empedu, dan tingkat mRNA yang tinggi dari protein serum khas hati, meskipun ekspresi beberapa di antaranya menurun seiring dengan bertambahnya jumlah kali pemindahan sel. [1]
• Sel ini banyak digunakan untuk memodelkan penyakit hati berlemak non-alkoholik, kerusakan hati akibat obat, dan gangguan metabolisme lipid.
• Sel AML12 merespons sinyal-sinyal utama dari hati, termasuk TGF-β, TNF, insulin, dan asam retinoat.
• Statusnya yang belum mengalami transformasi membuatnya sangat cocok untuk mempelajari fisiologi dan toksikologi hepatosit normal.
• Semua metode tersebut kompatibel dengan transfeksi adenovirus, oligonukleotida antisense, dan pendekatan pengeditan gen berbasis CRISPR.
• Karakterisasi molekuler telah mengungkap kariotipe aneuploid yang hampir tetraploid serta dediferensiasi parsial; oleh karena itu, sel AML12 perlu dilengkapi dengan hepatosit primer atau model in vivo untuk titik akhir yang memerlukan fungsi hepatosit yang sepenuhnya matang. [18]

Apa itu AML12?

AML12 berasal dari hepatosit tikus jantan berusia 5 bulan (strain CD-1, garis MT42) yang transgenik untuk faktor pertumbuhan transformasi alfa manusia di bawah kendali promotor metallothionein 1 yang dapat diinduksi oleh seng. Wu, Merlino, dan Fausto mengembangkan garis sel tersebut pada tahun 1994 dan mengkarakterisasikannya sebagai garis sel hepatosit yang diimortalkan secara spontan dan tidak mengalami transformasi. [1] Sel-sel tersebut memiliki nomor akses Cellosaurus CVCL_0140 dan keasliannya telah diverifikasi berdasarkan profil referensi STR tikus dengan 18 penanda. Publikasi asli melaporkan waktu penggandaan sebesar 37 jam (36–48 jam menurut data pemasok), dan data transkriptomik dari analisis microarray tersedia untuk umum. Penelitian asli menghasilkan dua garis sel, AML12 dan AML14, yang keduanya dipelihara selama lebih dari 1,5 tahun dan melalui lebih dari 80 kali pemindahan (passage). AML12 mempertahankan identitas hepatositnya dan tetap tidak tumorigenik sepanjang waktu, meskipun tingkat mRNA untuk beberapa protein serum menurun secara progresif seiring dengan passaging dan dapat dipulihkan melalui kultur dalam medium bebas serum. Sebaliknya, AML14 kehilangan ekspresi penanda diferensiasi dan mRNA transgen selama pemindahan sel yang berkepanjangan, dengan sifat hepatositik yang hanya dapat dipulihkan sebagian. [1]

Informasi Kultur Sel AML12

Keunggulan Sel AML12

Salah satu keunggulan utama sel AML12 adalah kemampuannya mempertahankan fenotipe hepatosit yang terdiferensiasi selama kultur jangka panjang. Tidak seperti banyak garis sel hepatoma lainnya, sel AML12 mengandung peroksisom dan struktur mirip kanalikel empedu, mengekspresikan tingkat mRNA yang tinggi dari protein serum spesifik hati termasuk albumin, alfa-1-antitripsin, dan transferrin, serta mengeluarkan albumin. [1] Strain ini tidak tumbuh di agar lunak dan tetap tidak bersifat tumorigenik pada tikus nude, yang menegaskan bahwa proses imortalisasi terjadi tanpa transformasi ganas yang fungsional. Status non-transformasi ini sangat penting bagi penelitian yang memerlukan perilaku dasar yang relevan secara fisiologis, seperti penyelidikan mengenai sinyal insulin, metabolisme lipid, atau hepatotoksisitas. Namun, pada tingkat genomik, garis sel ini telah terbukti memiliki kelainan kromosom yang signifikan, yang dibahas pada bagian Keterbatasan. [18]

Sel AML12 sangat serbaguna dalam hal manipulasi genetik. Sel-sel ini mendukung ekspresi berlebih gen berbasis vektor adenovirus, sebagaimana ditunjukkan dalam penelitian mengenai subunit aktivin. [2] [3] Gen-gen tersebut juga memungkinkan ekspresi transgen yang stabil dan diatur oleh tetrasiklin, sehingga memungkinkan pengembangan model aktivitas protein X virus hepatitis B yang dapat diinduksi. [4] Selain itu, pemberian oligonukleotida antisense telah berhasil dilakukan secara efisien, sehingga sel AML12 cocok untuk penelitian yang menargetkan RNA, [5] dan turunan knockout berbasis CRISPR/Cas9 telah berhasil dihasilkan. [21] Asal-usul murin dari sel-sel tersebut memungkinkan hasil eksperimen divalidasi silang secara langsung dengan data tikus transgenik dan tikus knockout, sehingga memperkuat jembatan translasi antara in vitro dan in vivo.

Dari sudut pandang praktis, sel AML12 menunjukkan respons yang kuat terhadap berbagai rangsangan fisiologis. Respons yang telah didokumentasikan meliputi aktivasi transkripsi oleh asam retinoat, ligan PPARα, TGF-β, TNF, dan modulator jalur insulin. [6] [7] Luasnya rentang respons sinyal ini menjadikan rangkaian tersebut berguna di berbagai bidang penelitian secara bersamaan, sehingga mengurangi kebutuhan untuk berpindah platform antar konteks eksperimental.

Keterbatasan Sel AML12

Meskipun memiliki fenotipe yang berbeda, sel AML12 tidak setara dengan hepatosit primer dalam segala aspek fungsional. Sebuah studi perbandingan yang membandingkan sel AML12, HepG2, dan THLE-2 dalam hal sinyal insulin dan ekspresi gen hepatokin menemukan bahwa respons sel AML12 terhadap insulin terganggu ketika sel-sel tersebut dibudidayakan dalam media pertumbuhan yang direkomendasikan, tetapi menjadi sebanding dengan sel HepG2 ketika menggunakan media yang kekurangan insulin. [8] Kadar protein reseptor insulin pada AML12 serupa dengan yang terdapat pada HepG2, sedangkan AML12 hanya menunjukkan kadar transkrip yang rendah atau tidak terdeteksi untuk beberapa enzim glukoneogenik dan hepatokin. Para penulis menyimpulkan bahwa, terkait glukoneogenesis dan ekspresi hepatokin, sel HepG2 tampak lebih mirip dengan kondisi in vivo meskipun berasal dari sel tumor. Oleh karena itu, komposisi medium dan kelimpahan protein pensinyalan kunci harus dipertimbangkan dengan cermat ketika sel AML12 digunakan untuk memodelkan resistensi insulin.

Asal usul sel AML12 dari tikus juga menimbulkan perbedaan inheren yang terkait dengan spesies dibandingkan dengan hepatosit manusia. Jalur metabolisme obat, pengelolaan lipid, dan respons inflamasi tertentu berbeda antara sel hati tikus dan manusia. Oleh karena itu, hasil yang diperoleh pada sel AML12 perlu dievaluasi dengan cermat sebelum diekstrapolasi ke fisiologi manusia, terutama dalam konteks pengembangan obat di mana aktivitas sitokrom P450 yang spesifik spesies dapat membingungkan temuan.

Latar belakang transgenik hewan sumber — ekspresi berlebih TGF-α — mungkin juga memengaruhi pola ekspresi gen dasar dan pensinyalan faktor pertumbuhan. Penelitian yang berfokus pada biologi anggota keluarga TGF sebaiknya mempertimbangkan konteks ini saat menafsirkan data.

Sebuah karakterisasi sitogenetik dan transkriptomik terpadu yang diterbitkan pada tahun 2026 semakin memperjelas batasan-batasan model tersebut. FISH multicolor dan pewarnaan multicolor mengungkapkan kariotipe yang kompleks, hampir tetraploid, dan sangat aneuploid (81<4n>) dengan pengaturan ulang struktural berulang, termasuk del(X)(A3)×2, kromosom dikentrik dic(X;17), del(17)(D1)×2, serta kromosom turunan der(3)t(2;3), disertai dengan penambahan dan kehilangan kromosom utuh yang berulang; kedua kromosom Y telah hilang meskipun garis keturunan tersebut berasal dari individu jantan. [18] Ketika ketidakseimbangan jumlah salinan yang dihasilkan dipetakan ke pada pita sitogenetik ortolog manusia, 57,5–68 % di antaranya tumpang tindih dengan perubahan yang berulang kali dilaporkan pada karsinoma hepatoseluler manusia. Sequencing RNA dalam studi yang sama mengonfirmasi adanya program garis keturunan hepatosit yang jelas, namun juga mendokumentasikan de-diferensiasi parsial: ekspresi albumin rendah, enzim siklus urea dan glukoneogenesis seperti Cps1, Otc, Pck1, dan G6pc berada pada tingkat rendah hingga tidak ada, serta sitokrom kunci yang memetabolisme asam empedu dan obat—termasuk Cyp7a1 dan keluarga Cyp3a—hampir tidak terdeteksi, bersamaan dengan induksi penanda duktular dan progenitor. Oleh karena itu, tidak bersifat tumorigenik dalam arti fungsional tidak berarti stabil secara genomik. Untuk parameter yang memerlukan metabolisme xenobiotik yang matang, penanganan nitrogen, atau sintesis asam empedu, para penulis merekomendasikan untuk melengkapi AML12 dengan hepatosit primer, organoid, atau model in vivo. Studi ini juga mengidentifikasi dua klon terkait yang proporsi relatifnya dapat berubah seiring dengan jumlah passase dan kondisi kultur, yang memperkuat argumen untuk penggunaan stok induk dengan passase rendah, jendela passase yang terbatas, serta otentikasi rutin berdasarkan profil referensi STR yang telah ditetapkan. [18]

Lihat spesifikasi lengkap dan pesan

Aplikasi

Apoptosis dan Sinyal Kematian Sel

Sel AML12 telah banyak digunakan untuk menyelidiki apoptosis hepatosit yang dipicu oleh sitokin dan faktor pertumbuhan. Pierce dan rekan-rekannya menunjukkan bahwa sel AML12, seperti hepatosit in vivo, tidak sensitif terhadap TNF saja tetapi mengalami apoptosis ketika TNF dikombinasikan dengan dosis rendah aktinomisin D. [9] Penelitian mereka mengungkapkan bahwa apoptosis yang diinduksi TNF pada sel AML12 melibatkan gangguan homeostasis redoks, dengan hilangnya NAD(P)H dan glutathione yang mendahului kerusakan mitokondria, pelepasan sitokrom C, dan aktivasi kaspase. Kerusakan tersebut sebagian besar dipengaruhi oleh kandungan glutathione seluler, dan antioksidan asam alfa-lipoat sepenuhnya mencegah kerusakan mitokondria dan apoptosis. Temuan ini menetapkan sel AML12 sebagai model yang dapat diandalkan untuk mekanisme oksidatif yang mendasari kerusakan hepatosit yang dimediasi oleh TNF.

TGF-β1 merupakan induktor utama lain dari apoptosis hepatosit yang diteliti dalam model ini. Liao dan rekan-rekannya menunjukkan bahwa sel AML12 menunjukkan ciri-ciri apoptosis klasik — kondensasi kromatin, disintegrasi nukleus, dan fragmentasi DNA — setelah perlakuan TGF-β1, dan bahwa proses ini sepenuhnya dihambat oleh sikloheksimida, yang mengindikasikan keterlibatan sintesis protein aktif dalam jalur kematian sel. [10] Dooley dan rekan-rekannya selanjutnya menggunakan kultur sel hepatosit primer dan sel AML12 secara bersamaan untuk mengkarakterisasi transisi epitel-ke-mesenkim yang diinduksi TGF-β, menunjukkan bahwa ekspresi berlebih Smad7 pada hepatosit meredam fibrogenesis yang dimediasi TGF-β dan melindungi terhadap kerusakan hati. [11]

Biologi subunit activin juga telah dikarakterisasi pada sel AML12. Wada dan rekan-rekannya menemukan bahwa ekspresi berlebih subunit βC activin mendorong proliferasi dan kelangsungan hidup sel AML12, sedangkan ekspresi berlebih subunit βE mengurangi proliferasi dan memicu apoptosis pada kondisi serum rendah. [2] [3] Secara keseluruhan, penelitian ini menggarisbawahi nilai sel AML12 dalam menganalisis sinyal pro-kelangsungan hidup dan pro-apoptosis yang saling bersaing, yang mengatur nasib hepatosit pada penyakit hati inflamasi dan fibrotik.

Metabolisme Lipid dan Sinyal PPAR

Jalur PPARα merupakan pengatur utama metabolisme lipid hati, dan sel AML12 terbukti sangat berguna untuk mempelajari modulasi jalur ini oleh agen farmakologis. Clemenz dan rekan-rekannya menggunakan sel AML12 untuk menunjukkan bahwa telmisartan, penghambat reseptor angiotensin tipe 1, bertindak sebagai agonis parsial PPARα: obat ini menginduksi gen target PPARα, yaitu acyl-CoA synthetase long-chain family member 1 (ACSL1) pada sel AML12 tikus dan carnitine palmitoyl transferase 1A (CPT1A) pada sel HepG2 manusia, sehingga memberikan dasar molekuler bagi efek penurun trigliserida yang diamati secara klinis. [7] Pada tikus dengan obesitas akibat pola makan, telmisartan meningkatkan ekspresi ACSL1 dan CPT1A di hati serta secara signifikan menurunkan trigliserida di hati dan serum. Demikian pula, Huang dan rekan-rekannya menunjukkan bahwa fenofibrat, suatu ligan PPARα, meningkatkan ekspresi reseptor lipoprotein densitas rendah (LDL) di hati pada sel AML12 dan memulihkan kapasitas pengikatan LDL, dengan hasil yang dikonfirmasi in vivo. [12]

Aldose reduktase (AR) telah muncul sebagai pengatur aktivitas PPARα yang tidak terduga pada hepatosit. Qiu dan rekan-rekannya menunjukkan pada sel AML12 bahwa ekspresi berlebih AR secara kuat menekan aktivitas PPARα dan menurunkan ekspresi gen-gen oksidasi asam lemak, efek yang berkurang dengan penggunaan penghambat AR selektif zopolrestat. [13] Ekspresi berlebih AR juga meningkatkan tingkat PPARα yang terfosforilasi dan ERK1/2, dan penekanan aktivitas PPARα dapat dibalikkan melalui penghambatan ERK1/2 — yang menghubungkan jalur poliol dengan homeostasis lipid melalui mekanisme yang bergantung pada kinase. Temuan ini menggambarkan bagaimana sel AML12 dapat mengungkap interaksi tak terduga antara jalur metabolik dan jalur pensinyalan yang relevan dengan penyakit hati berlemak non-alkoholik dan komplikasi hati akibat diabetes.

Nicotinamide-N-methyltransferase (NNMT) adalah enzim lain yang diteliti pada sel AML12 dalam konteks regulasi lipid hati. Penurunan ekspresi Nnmt yang dimediasi RNAi pada sel AML12 menyebabkan akumulasi S-adenosil-metionin (SAM) dan S-adenosil-homosistein serta penurunan kadar 1-metilnikotinamida (MNAM), disertai dengan penurunan regulasi gen-gen lipogenik seperti Srebf1 dan penurunan yang terukur pada total lipid netral — yang menghubungkan metabolisme satu karbon dengan lipogenesis hati. [19] Secara terpisah, protein retikulum endoplasma TXNDC5 diidentifikasi sebagai mitra interaksi PRDX6 dan HSPA9 pada sel AML12; defisiensi TXNDC5 menurunkan kadar protein PRDX6 dan HSPA9 serta secara signifikan mengurangi peroksidasi lipid, glutathione tereduksi, dan aktivitas iPLA2. [20] Berdasarkan model yang sama, skualen yang dimuat ke dalam nanopartikel PLGA melindungi sel AML12 dari stres oksidatif dan retikulum endoplasma secara bergantung pada TXNDC5, dengan penyerapan seluler yang cepat dan efisien teramati pada konsentrasi 30 µM — temuan yang relevan bagi strategi terapi masa depan untuk penyakit hati berlemak. [21]

Sinyal Insulin dan Penyakit Metabolik

Sel AML12 telah digunakan sebagai alat in vitro untuk menyelidiki sinyal insulin dan gangguan patologisnya. Butler dan rekan-rekannya menggunakan sel AML12 untuk memvalidasi strategi oligonukleotida antisense yang menargetkan PTEN, sebuah fosfatase lipid yang secara negatif mengatur jalur PI3K. Transfeksi oligonukleotida antisense PTEN ke dalam sel AML12 menurunkan kadar mRNA dan protein PTEN serta meningkatkan fosforilasi Akt yang dirangsang oleh insulin, memberikan bukti konsep mekanistik sebelum pemberian sistemik pada tikus db/db dan ob/ob menormalkan konsentrasi glukosa darah. [14] Studi ini menggambarkan nilai sel AML12 sebagai platform skrining tahap awal untuk intervensi metabolik yang menargetkan resistensi insulin.

Studi perbandingan oleh Sefried dan rekan-rekannya secara langsung menilai kesesuaian sel AML12 untuk penelitian sinyal insulin dan ekspresi gen hepatokin. [8] Dengan membandingkan sel AML12 dengan sel HepG2 dan THLE-2, para penulis menemukan bahwa responsivitas akut terhadap insulin pada sel AML12 sangat bergantung pada komposisi media kultur, dan bahwa sel AML12 hanya mengekspresikan tingkat transkrip glukoneogenik dan hepatokin yang rendah atau tidak terdeteksi. Regulasi gen yang bergantung pada PPARδ sebanding antara AML12 dan HepG2, namun hanya sel HepG2 yang mampu mereproduksi regulasi glukoneogenesis hati yang dimediasi oleh cAMP. Para penulis menyimpulkan bahwa, untuk titik akhir penelitian ini, sel HepG2 lebih mirip dengan situasi in vivo meskipun berasal dari sel tumor — sebuah pertimbangan penting saat memilih model untuk penelitian resistensi insulin atau diabetes tipe 2.

Tomatine telah dievaluasi untuk kemampuannya meningkatkan metabolisme glukosa dan respirasi mitokondria pada sel AML12 dan HepG2 yang resisten insulin akibat paparan glukosa tinggi. [22] Tomatine secara dosis-tergantung meningkatkan konsumsi glukosa, memulihkan ekspresi transporter glukosa Glut2 dan gen-gen terkait glukoneogenesis, mengaktifkan fosforilasi AMPK dan meningkatkan ekspresi PGC1α, serta meningkatkan laju konsumsi oksigen, produksi ATP, dan protein kompleks fosforilasi oksidatif mitokondria. Baik penghambatan genetik maupun farmakologis terhadap AMPK menghilangkan manfaat-manfaat ini, yang menegaskan peran sentral jalur tersebut dan menempatkan sel AML12 sebagai platform yang berguna untuk menyaring senyawa alami dengan potensi antidiabetes. Temuan ini memperkuat relevansi garis sel tersebut terhadap studi tentang metabolisme lipid, resistensi insulin, dan mekanisme penyakit hati berlemak.

Penelitian Karsinoma Hepatoseluler dan Hepatitis Virus

Status sel AML12 yang tidak mengalami transformasi menjadikannya garis sel kontrol atau induk yang ideal dalam penelitian karsinoma hepatoseluler (HCC). Lee dan rekan-rekannya merekayasa turunan sel AML12 yang mengekspresikan protein X virus hepatitis B (pX) yang diatur oleh tetrasiklin untuk menciptakan model transformasi yang dimediasi pX. [4] Dengan membandingkan subgaris sel yang telah berdiferensiasi dan mengalami transformasi (3pX-1) dengan subgaris sel yang telah mengalami dediferensiasi dan tidak mengalami transformasi (4pX-1), para penulis mengidentifikasi perubahan siklus sel yang berbeda terkait dengan aktivasi berkelanjutan jalur Ras-Raf-MAPK versus JNK, yang menunjukkan bagaimana sel induk AML12 dapat berfungsi sebagai latar belakang terkontrol untuk menganalisis sinyal onkogenik.

Agen antikanker yang berasal dari tumbuhan juga telah dievaluasi dalam konteks hepatosit menggunakan sel AML12. Choedon dan rekan-rekannya menguji fraksi lateks kering dari Calotropis procera terhadap garis sel hepatoma Huh-7, garis sel non-hepatoma COS-1, dan hepatosit AML12 yang tidak mengalami transformasi. Ekstrak metanol dan fraksi 8-nya menyebabkan kematian sel yang luas serta fragmentasi DNA pada sel Huh-7 dan COS-1, sementara sel AML12 terhindar dari efek tersebut; secara paralel, pemberian oral lateks kering sepenuhnya melindungi tikus transgenik X15-myc dari hepatokarsinogenesis. [15] Uji selektivitas semacam itu, yang menggunakan sel AML12 sebagai referensi hepatosit non-ganas, merupakan strategi umum untuk mengidentifikasi senyawa kandidat dengan toksisitas preferensial terhadap sel tumor dibandingkan parenkim hati normal.

Sinyal asam retinoat (RA), yang terlibat dalam penekanan HCC, telah dipetakan secara komprehensif pada sel AML12 menggunakan analisis microarray cDNA terhadap 39.000 gen murin. Mamoon dan rekan-rekannya mengidentifikasi 15 gen yang mengalami regulasi naik dan 3 gen yang mengalami regulasi turun setidaknya dua kali lipat setelah 3 jam perlakuan all-trans RA, dengan 26 gen mengalami regulasi naik dan 48 gen mengalami regulasi turun setelah 24 jam. [6] Sebuah studi lanjutan oleh Ventura-Holman dan rekan-rekannya menggunakan analisis mikroarray pada sel AML12 yang ditransfeksi secara stabil dengan v-erbA — suatu onkoprotein yang diketahui memberikan efek dominan-negatif pada reseptor asam retinoat — untuk mengidentifikasi gen-gen yang responsif terhadap RA yang dipengaruhi oleh v-erbA, serta gen-gen yang diregulasi oleh v-erbA pada tingkat transkripsi basal, beberapa di antaranya terlibat dalam karsinogenesis. [16]

Stres Oksidatif dan Cedera Iskemia-Reperfusi

Cedera iskemia-reperfusi (I/R) merupakan tantangan klinis utama dalam bedah dan transplantasi hati, dan sel AML12 telah digunakan untuk memodelkan mekanisme oksidatif yang mendasarinya. Haga dan rekan-rekannya menunjukkan bahwa sel AML12 yang ditempatkan dalam kondisi hipoksia/reoksigenasi dengan cepat mengalami stres oksidatif, dengan banyak sel mengalami apoptosis. [17] Penekanan isoform p66 dari ShcA (p66shc) melalui RNAi secara signifikan mengurangi stres oksidatif seluler dan apoptosis yang diinduksi H/R serta memberikan ketahanan terhadap hidrogen peroksida. Perlindungan tersebut disebabkan oleh peningkatan penangkapan ROS, bukan karena penghambatan pembentukan ROS: protein antioksidan MnSOD dan Ref-1 serta protein anti-apoptosis Bcl-xL mengalami peningkatan ekspresi, sementara protein pro-apoptosis FLICE mengalami penurunan ekspresi, sedangkan ekspresi katalase tetap tidak berubah. Temuan ini mengidentifikasi p66shc sebagai target terapi potensial pada cedera I/R hati.

Teknologi oligonukleotida antisense telah dikarakterisasi dalam sel AML12 dalam konteks kematian sel yang dimediasi oleh Fas. Thonberg dan rekan-rekannya membandingkan enam oligonukleotida fosforotioat yang menargetkan mRNA Fas pada sel AML12, dan menemukan bahwa empat di antaranya secara signifikan menurunkan tingkat mRNA, sedangkan satu lainnya menghasilkan fragmen pemotongan 3′-mRNA yang stabil yang dipetakan ke urutan komplementer antisense. [5] Penelitian ini menyoroti sel AML12 sebagai model yang sesuai untuk mengevaluasi efisiensi antisense dan untuk menyelidiki mekanisme degradasi RNA yang dimediasi oleh RNase H pada sel hati.

Profil sitogenetik dan transkriptomik yang komprehensif telah mengonfirmasi bahwa sel AML12 mempertahankan program garis keturunan hepatosit yang jelas, dengan ekspresi yang kuat dari Hnf4a, Foxa2 dan Prox1, protein HNF4α nuklear, serta tidak adanya penanda yang mendefinisikan garis keturunan sel stellata hati, kolangiosit, dan sel Kupffer. [18] Namun, dataset yang sama mengungkapkan tanda transkripsional yang terkait dengan stres dan sel progenitor, termasuk ekspresi Spp1/osteopontin, Ccl2, dan Plscr1 yang sangat tinggi, bersama dengan penanda duktular seperti Krt19, Sox9, Hnf1b, dan Jag1. Kondisi dasar yang beradaptasi dengan cedera dan mirip sel progenitor ini menjadikan AML12 sebagai model praktis untuk stres intrinsik hepatosit, sinyal inflamasi, dan plastisitas epitel, asalkan kondisi dasar tersebut diperhitungkan saat menafsirkan hasil dalam studi stres oksidatif dan toksikologi.

Kesimpulan

Sel AML12 tetap menjadi salah satu model hepatosit murin yang paling banyak digunakan dalam penelitian hati, menawarkan keseimbangan unik antara fungsi hepatosit yang terdiferensiasi dan stabilitas in vitro jangka panjang. Dibuat oleh Wu, Merlino, dan Fausto pada tahun 1994, [1] garis sel ini sejak itu telah mendukung penelitian di berbagai bidang, termasuk penyakit hati berlemak non-alkoholik, cedera hati akibat obat, metabolisme lipid, resistensi insulin, apoptosis, karsinoma hepatoseluler, dan cedera iskemia-reperfusi. Studi acuan oleh Sefried dan rekan-rekannya menggambarkan batasan kapasitas pensinyalan insulin sel-sel tersebut dan menunjukkan bahwa, untuk titik akhir glukoneogenik dan hepatokin, sel HepG2 mungkin justru merupakan model yang lebih mendekati kondisi sebenarnya. [8] Profil sitogenetik dan transkriptomik yang lebih baru telah mendokumentasikan kariotipe aneuploid yang hampir tetraploid serta dediferensiasi parsial, sehingga mengharuskan validasi komplementer pada hepatosit primer, organoid, atau model in vivo di mana pun fungsi hepatosit yang sepenuhnya matang diperlukan. [18] Dengan mempertimbangkan batasan-batasan tersebut — baik untuk farmakologi PPARα, pemodelan hepatitis virus, maupun penelitian stres oksidatif — sel AML12 menyediakan platform yang andal dan terkarakterisasi dengan baik untuk penelitian biologi hati berbasis hipotesis. Untuk memesan sel AML12 atau menanyakan spesifikasinya, kunjungi cytion.com.

Publikasi Utama

1. Wu JC, Merlino G, Fausto N (1994) Pembentukan dan karakterisasi garis sel hepatosit yang terdiferensiasi dan tidak mengalami transformasi, yang berasal dari tikus transgenik untuk faktor pertumbuhan transformasi alfa. Prosiding Akademi Ilmu Pengetahuan Nasional Amerika Serikat. PMID: 7904757
2. Wada W, Maeshima A, Zhang YQ (2004) Penilaian fungsi subunit betaC aktivin pada hepatosit yang dibudidayakan. American Journal of Physiology: Endocrinology and Metabolism. PMID: 15039147
3. Wada W, Medina JJ, Kuwano H (2005) Perbandingan fungsi subunit beta(C) dan beta(E) aktivin pada hepatosit AML12. Jurnal Endokrinologi. PMID: 15863943
4. Lee S, Tarn C, Wang WH (2002) Protein X virus hepatitis B secara berbeda mengatur progres siklus sel pada garis sel hepatosit yang mengalami transformasi X dibandingkan yang tidak (AML12). Jurnal Kimia Biologi. PMID: 11756437
5. Thonberg H, Dahlgren C, Wahlestedt C (2004) Degradasi mRNA Fas yang diinduksi antisense menghasilkan fragmen 3'-mRNA yang stabil dan spesifik lokasi melalui pemotongan eksonuklease pada urutan komplementer. Oligonucleotides. PMID: 15625917
6. Mamoon A, Ventura-Holman T, Maher JF (2008) Gen-gen yang merespons asam retinoat pada garis sel hepatosit tikus AML 12. *Gene*. PMID: 18006250
7. Clemenz M, Frost N, Schupp M (2008) Regulasi gen target reseptor alfa peroksisom proliferator-activated (PPAR-α) spesifik hati oleh telmisartan, penghambat reseptor angiotensin tipe 1. Diabetes. PMID: 18184928
8. Sefried S, Häring HU, Weigert C (2018) Kesesuaian garis sel hepatosit HepG2, AML12, dan THLE-2 untuk penyelidikan sinyal insulin dan ekspresi gen hepatokin. Open Biology. PMID: 30355754
9. Pierce RH, Campbell JS, Stephenson AB (2000) Gangguan homeostasis redoks pada apoptosis yang diinduksi faktor nekrosis tumor (TNF) pada garis sel hepatosit tikus. The American Journal of Pathology. PMID: 10880392
10. Liao JH, Zhou BH, Chai MQ (2001) Sikloheksimida menghambat apoptosis yang diinduksi TGF-beta1 pada hepatosit tikus. Acta Pharmacologica Sinica. PMID: 11741524
11. Dooley S, Hamzavi J, Ciuclan L (2008) Ekspresi Smad7 yang spesifik pada hepatosit meredam fibrogenesis yang dimediasi TGF-beta dan melindungi dari kerusakan hati. *Gastroenterology*. PMID: 18602923
12. Huang Z, Zhou X, Nicholson AC (2008) Aktivasi reseptor alfa yang diaktifkan oleh proliferator peroksisom pada tikus menginduksi ekspresi reseptor lipoprotein densitas rendah hati. British Journal of Pharmacology. PMID: 18852694
13. Qiu L, Wu X, Chau JF (2008) Aldose reduktase mengatur fosforilasi dan aktivitas reseptor alfa yang diaktifkan oleh proliferator peroksisom (PPAR-alpha) di hati untuk memengaruhi homeostasis lipid. Jurnal Kimia Biologi. PMID: 18445591
14. Butler M, McKay RA, Popoff IJ (2002) Penghambatan spesifik ekspresi PTEN membalikkan hiperglikemia pada tikus diabetes. Diabetes. PMID: 11916922
15. Choedon T, Mathan G, Arya S (2006) Sifat antikanker dan sitotoksik dari getah Calotropis procera pada model tikus transgenik karsinoma hepatoseluler. *World Journal of Gastroenterology*. PMID: 16688796
16. Ventura-Holman T, Mamoon A, Subauste JS (2008) Modulasi ekspresi gen yang diatur oleh RA oleh onkoprotein v-erbA. Gene. PMID: 18775481
17. Haga S, Terui K, Fukai M (2008) Pencegahan kerusakan hipoksia/reoksigenasi pada hepatosit melalui penghapusan p66(shc): peningkatan ekspresi protein antioksidan dan antiapoptosis. Journal of Hepatology. PMID: 18191273
18. Asar DY, Kankel S, Keller DT (2026) Profil Sitogenetik dan Genomik Komprehensif dari Garis Sel Hepatosit Murine AML12 (Alpha Mouse Liver 12). Cells. PMID: 41827824
19. Yoda M, Mizuno R, Izumi Y (2023) Nikotinamida-N-metiltransferase mengatur metabolisme lipid melalui SAM dan 1-metilnikotinamida pada garis sel hepatosit AML12. Journal of Biochemistry. PMID: 37014628
20. Bidooki SH, Sánchez-Marco J, Martínez-Beamonte R (2023) Protein retikulum endoplasma TXNDC5 berinteraksi dengan PRDX6 dan HSPA9 untuk mengatur metabolisme glutathione dan peroksidasi lipid pada garis sel hepatosit AML12. International Journal of Molecular Sciences. PMID: 38138960
21. Bidooki SH, Alejo T, Sánchez-Marco J (2022) Nanopartikel yang dimuat skualen secara efektif melindungi garis sel hati AML12 dari stres oksidatif dan stres retikulum endoplasma melalui mekanisme yang bergantung pada TXNDC5. Antioxidants. PMID: 35326231
22. Lee YG, Kim D (2025) Tomatine meningkatkan metabolisme glukosa dan respirasi mitokondria pada garis sel hepatosit resisten insulin AML12 dan HepG2 melalui jalur yang bergantung pada protein kinase yang diaktifkan oleh AMP. Cells. PMID: 40072058