Pendahuluan

Yang Sel 3T3-Swiss albino Lini sel ini — yang juga dikenal dengan nama lain Swiss 3T3, Swiss-3T3, 3T3 Swiss Albino, dan Swiss3T3 — merupakan salah satu lini sel yang paling tahan lama dan paling banyak digunakan dalam penelitian biomedis. Dibentuk pada tahun 1962 oleh George Todaro dan Howard Green dari embrio tikus Swiss albino yang telah dipisahkan, dan dijelaskan dalam makalah mereka tahun 1963, garis sel ini berasal dari protokol transfer berurutan di mana hampir semua kultur embrio pada akhirnya menghasilkan garis sel yang mapan dan terimortalisasi secara spontan. [1]. Selama enam dekade berikutnya, sel albino 3T3-Swiss menjadi model yang tak tergantikan dalam studi regulasi siklus sel, sinyalisasi faktor pertumbuhan, dinamika sitoskeleton, dan biologi penyembuhan luka. Perilaku penghambatan kontak yang jelas, responsivitas terhadap mitogen seperti faktor pertumbuhan yang berasal dari trombosit (PDGF) dan bradikinin, serta kemudahan manipulasi genetiknya telah menjadikan sel ini sebagai model acuan utama dalam berbagai penelitian jalur sinyal dan uji skrining obat.

Poin-Poin Penting

• 3T3-Swiss albino adalah garis sel fibroblast embrio tikus yang diimortalkan secara spontan, yang dikembangkan pada tahun 1962 oleh Todaro dan Green (nomor akses Cellosaurus CVCL_0120, donor jantan, embrio utuh) [25].
• Garis sel ini menunjukkan fenomena penghambatan pertumbuhan akibat kontak, sehingga menjadikannya model yang sangat berguna untuk mempelajari transisi antara fase istirahat dan proliferasi — meskipun intensitas fenotipe ini bergantung pada kondisi kultur, bukan merupakan sifat tetap dari garis sel tersebut [22] [23].
• Zat ini sangat responsif terhadap berbagai mitogen, termasuk faktor pertumbuhan yang berasal dari trombosit, bombesin, bradikinin, dan faktor pertumbuhan mirip insulin-I.
• Sel albino 3T3 asal Swiss telah memainkan peran penting dalam mengkaji organisasi sitoskeleton, sinyal GTPase keluarga Rho, dan dinamika adhesi fokal.
• Garis sel tersebut telah melahirkan sekelompok besar subgaris sel turunan — termasuk 3T3-L1, 3T3-L2, 3T3-C2, dan subgaris sel lapisan pengumpan 3T3-J2 — yang digunakan dalam penelitian adipogenesis, onkologi, dan aplikasi kultur campuran [25].
• Uji STR multiplex yang telah divalidasi antarlaboratorium (19 penanda tikus ditambah dua penanda manusia untuk skrining antarspesies; 18 dari 19 penanda tikus tersebut terbukti cocok untuk pembedaan intraspesies) kini memungkinkan otentikasi yang andal terhadap garis sel tikus, termasuk 3T3-Swiss albino [2].

Apa itu 3T3-Swiss albino?

3T3-Swiss albino diperoleh dari jaringan embrio utuh seekor tikus jantan Swiss albino pada tahap embrio, tanpa adanya penyakit yang terkait dengan donor tersebut [25]. Nama "3T3" merujuk pada protokol transfer aslinya: sel-sel tersebut dipindahkan ke wadah baru setiap tiga hari dengan dosis inokulum sebesar 3 × 10⁵ sel per 20 cm² cawan. Todaro dan Green menunjukkan bahwa kultur embrio tikus mengalami penurunan laju pertumbuhan setelah pemindahan berulang — laju penurunan tersebut bergantung sebagian pada kepadatan inokulasi — sebelum hampir semua kultur berkembang menjadi garis sel yang mapan dalam waktu tiga bulan, dan bahwa kondisi kultur yang digunakan menentukan sifat-sifat apa yang diperoleh garis sel hasilnya; regimen 3T3 menghasilkan garis sel yang sangat sensitif terhadap penghambatan kontak [1]. Garis sel yang dihasilkan menunjukkan morfologi fibroblastik, tumbuh sebagai lapisan tunggal yang melekat, dan mengalami penghambatan proliferasi akibat kontak saat mencapai konfluensi — suatu sifat yang membedakannya dari garis sel yang mengalami transformasi dan menjadikannya model yang ideal untuk mempelajari transisi dari keadaan tidak aktif ke proliferasi.

3T3-Swiss albino termasuk di antara garis keturunan tikus yang dimasukkan dalam survei array SNP berskala besar yang dirancang untuk memverifikasi latar belakang strain yang dilaporkan serta mendeteksi perubahan jumlah salinan kromosom yang tidak dapat diidentifikasi melalui profil STR; dari 99 garis keturunan yang diperiksa, 98 di antaranya sesuai dengan latar belakang genetik yang dilaporkan untuk masing-masing garis keturunan tersebut [3] [25]. Untuk mengatasi masalah otentikasi pada tingkat praktik rutin, sebuah konsorsium antarlaboratorium yang terdiri dari dua belas laboratorium telah memvalidasi uji profil STR multiplex untuk identifikasi intraspesies pada garis sel tikus, berdasarkan 50 garis sel tikus yang paling umum digunakan, dengan profil yang dihasilkan akan dipublikasikan dalam basis data NCBI BioSample; profil STR yang kini terdaftar untuk 3T3-Swiss albino di Cellosaurus berasal dari studi tersebut [2] [25]. Kemajuan-kemajuan ini telah secara signifikan meningkatkan reproduktibilitas penelitian yang dilakukan menggunakan galur yang tersebar luas ini.

Informasi tentang Kultur Sel

Keunggulan Sel Albino 3T3-Swiss

Salah satu keunggulan paling menonjol dari sel albino 3T3-Swiss adalah responsnya yang telah dikarakterisasi dengan baik terhadap stimulasi faktor pertumbuhan setelah penarikan serum. Dengan membuat sel-sel tersebut berada dalam keadaan tidak aktif melalui penarikan serum, kemudian menstimulasi kembali menggunakan mitogen yang telah ditentukan, para peneliti dapat mempelajari peristiwa-peristiwa pensinyalan terpisah dengan resolusi temporal yang tinggi. Paradigma eksperimental ini telah dimanfaatkan untuk menyelidiki respons terhadap faktor pertumbuhan yang berasal dari trombosit, bombesin, bradikinin, faktor pertumbuhan mirip insulin-I, dan faktor pertumbuhan fibroblast basa — yang mencakup rentang kelas reseptor dan jalur hilir yang sangat luas dalam satu latar belakang seluler yang konsisten [4] [5] [6].

Keunggulan utama kedua adalah fenotipe penghambatan kontak pada garis sel ini. Tidak seperti banyak garis sel kanker yang telah mengalami transformasi, sel albino 3T3-Swiss mengalami penghentian pertumbuhan saat mencapai konfluensi, alih-alih terus tumbuh berlebihan. Hal ini menjadikannya model referensi yang sangat baik untuk uji goresan (scratch assay) penyembuhan luka, di mana migrasi ke zona yang terkelupas dapat diukur secara kuantitatif dalam kondisi yang telah ditentukan. Namun, yang terpenting, fenotipe ini bergantung pada cara sel-sel tersebut ditanam, bukan merupakan karakteristik tetap dari garis sel tersebut. Aaronson dan Todaro menunjukkan bahwa garis keturunan embrio tikus yang dipelihara dalam kondisi yang meminimalkan kontak antar sel tetap tidak bersifat tumorigenik selama lebih dari 200 generasi, sedangkan garis keturunan yang dipelihara dalam kondisi kontak sel yang ekstensif menjadi penghasil tumor dalam waktu 30 generasi — dan bahwa sifat kultur yang paling erat berkorelasi dengan kemampuan menimbulkan tumor adalah tepatnya hilangnya penghambatan pembelahan sel akibat kontak [22]. Penelitian selanjutnya mengidentifikasi variabel-variabel spesifik yang berperan: fokus-fokus yang mengalami transformasi spontan muncul pada kultur sel tipe 3T3 yang dibiarkan mencapai konfluen selama lebih dari sepuluh hari, dan frekuensinya bergantung pada jenis dan konsentrasi serum yang digunakan serta riwayat pemindahan kultur tersebut [23]. Efeknya bisa sangat cepat — sebuah klon yang tidak menghasilkan fokus apa pun dalam lima puluh uji berturut-turut selama 21 minggu mulai membentuk fokus tersebut hanya dalam waktu dua hari di dalam medium dengan kadar serum rendah [24]. Eksperimen-eksperimen ini dilakukan pada garis sel 3T3 yang berasal dari BALB/c dan NIH, bukan pada 3T3-Swiss albino itu sendiri, namun eksperimen tersebut menggambarkan ketergantungan pada kondisi kultur yang umum ditemukan pada garis sel fibroblast tipe 3T3, dan memiliki implikasi praktis yang konkret: laboratorium yang secara khusus mengandalkan penghambatan kontak sebaiknya bekerja pada jumlah generasi yang rendah dan tercatat dengan baik di bawah kondisi serum yang terdefinisi, menghindari mempertahankan kultur pada kondisi konfluen lebih lama dari yang diperlukan oleh uji tersebut, serta memverifikasi fenotipe tersebut secara mandiri.

Asal-usul fibroblastik dari garis sel ini juga memiliki keterkaitan langsung dengan penelitian mengenai remodeling matriks ekstraseluler, pensinyalan integrin, dan perbaikan dermis — sehingga memberikan konteks fisiologis yang tidak dapat ditawarkan oleh garis sel epitel murni atau garis sel kanker. Selain itu, katalog yang luas dari subgaris sel turunan yang dihasilkan dari 3T3-Swiss albino memperluas perangkat eksperimental yang tersedia bagi para peneliti di bidang adipogenesis, onkologi, dan aplikasi kultur bersama sel punca. [25].

Keterbatasan Sel 3T3-Swiss Albino

Terlepas dari kegunaannya, sel albino 3T3-Swiss memiliki keterbatasan bawaan yang berasal dari sifatnya sebagai sel tikus dan sifatnya yang secara spontan menjadi abadi. Perubahan kariotipe telah didokumentasikan dalam studi awal, di mana populasi sel tersebut bergeser dari rentang diploid ke rentang tetraploid — seringkali dengan sangat cepat — sebelum munculnya kromosom penanda [1]. Ketidakstabilan tersebut bukanlah hal yang khas pada lini sel ini: Profilasi menggunakan SNP array pada 99 lini sel tikus yang umum digunakan menemukan bukti adanya perubahan jumlah salinan pada 42% di antaranya, termasuk 24% lini sel yang berasal dari jaringan normal, bukan jaringan tumor, sehingga membuktikan bahwa aneuploidi merupakan ciri yang umum ditemui dalam kultur sel tikus, bukan ciri yang spesifik pada kanker [3]. Ketidakstabilan genomik semacam itu berarti bahwa hasil yang diperoleh pada jumlah passase yang tinggi mungkin tidak secara akurat mencerminkan sifat-sifat sel pada passase awal, dan perbandingan antarlaboratorium dapat terganggu oleh penyimpangan yang tidak terdeteksi. Oleh karena itu, para peneliti sebaiknya memverifikasi stok sel mereka menggunakan metode STR yang telah divalidasi serta menjaga catatan passase yang konsisten [2].

Keterbatasan terkait lainnya adalah prevalensi historis stok sel yang salah diidentifikasi atau terkontaminasi silang di kalangan peneliti, sebuah masalah yang telah didokumentasikan secara luas pada garis sel tikus [3]. Salah satu kendala khusus yang sering terlewatkan berkaitan dengan penamaan: 3T3-Swiss albino (CVCL_0120, diterbitkan pada tahun 1963) dan NIH 3T3 (CVCL_0594, yang berasal dari tikus Swiss NIH dan diterbitkan pada tahun 1969) keduanya sering disingkat menjadi "3T3" atau "Swiss 3T3" dalam literatur. Apabila sebuah makalah tidak melaporkan nomor katalog koleksi asal sel-sel tersebut, kedua garis sel tersebut seringkali sama sekali tidak dapat dibedakan tanpa menghubungi penulis secara langsung [26]. Ketidakjelasan ini juga meluas ke sebagian besar literatur klasik mengenai sinyalisasi yang dirangkum di bawah ini: laporan yang menggambarkan penelitian pada "Swiss 3T3" jarang menyebutkan garis sel mana yang dimaksud, sehingga temuan-temuan tersebut sebaiknya ditafsirkan berlaku untuk fibroblas tikus tipe 3T3 kecuali jika sumbernya secara eksplisit menyebutkan garis sel tersebut. Selain itu, karena 3T3-Swiss albino bukanlah isolat klonal melainkan populasi poliklonal, heterogenitas fungsional antar stok dari sumber yang berbeda juga dapat memengaruhi hasil eksperimen. Terakhir, sebagai garis sel fibroblast tikus, 3T3-Swiss albino mungkin tidak dapat mereplikasi nuansa pensinyalan yang relevan dengan biologi manusia tanpa validasi yang cermat, dan hasil dari model ini harus dikonfirmasi pada sel primer yang sesuai dengan spesies atau sistem in vivo sebelum kesimpulan translasi dapat ditarik.

Lihat spesifikasi lengkap dan pesan

Aplikasi

Sinyal Faktor Pertumbuhan dan Proliferasi Sel

Sel 3T3-Swiss albino telah menjadi model utama untuk menganalisis rangkaian sinyal mitogenik yang dipicu oleh berbagai faktor pertumbuhan dan neuropeptida. Dalam penelitian awal oleh Davies dan Ross, sel Swiss 3T3 digunakan bersama dengan sel otot polos aorta monyet dan sel endotel aorta sapi untuk menunjukkan bahwa mengganti serum yang berasal dari plasma dengan serum darah utuh atau faktor pertumbuhan yang berasal dari trombosit yang dimurnikan sebagian secara nyata merangsang pinositosis serta proliferasi dalam kultur yang tidak aktif — sebuah hubungan awal antara lalu lintas membran yang diinduksi faktor pertumbuhan dan masuknya sel ke dalam siklus sel, yang terutama ditetapkan dalam sistem sel otot polos [7]. Penelitian selanjutnya memanfaatkan paradigma penarikan serum/restimulasi untuk menempatkan molekul pensinyalan individu ke dalam jalur teratur di bagian hilir aktivasi reseptor.

Fosfatidilinositol 3-kinase (PI3K) muncul sebagai simpul sentral dalam respons yang dirangsang oleh faktor pertumbuhan. Johanson dan rekan-rekannya menunjukkan bahwa kumpulan p110α PI3K yang tidak bergantung pada subunit p85 berkolokalisasi dengan p70 S6 kinase pada serat stres aktin, dan bahwa aktivitas PI3K diperlukan untuk pembentukan serat stres yang diinduksi trombin pada sel Swiss 3T3 [8]. Peran serupa PI3K dalam penyerapan nutrisi dijelaskan oleh Higaki dan Shimokado, yang menunjukkan bahwa inhibitor PI3K menghambat penyerapan asam amino yang dirangsang oleh faktor pertumbuhan yang berasal dari trombosit pada sel otot polos vaskular dan melaporkan efek penghambatan serupa pada sel Swiss 3T3 [9].

Protein kinase D (PKD) diaktifkan pada sel Swiss 3T3 utuh oleh ester forbol, diacylglycerol yang dapat menembus sel, bryostatin, neuropeptida, dan faktor pertumbuhan melalui mekanisme yang bergantung pada fosforilasi dan memerlukan protein kinase C. Sebagaimana ditinjau oleh Waldron, Iglesias, dan Rozengurt, mutagenesis residu serin 744 dan serin 748 pada loop aktivasi dalam konstruksi PKD yang diekspresikan dalam sel COS-7 secara langsung menunjukkan bahwa fosforilasi yang dimediasi PKC pada kedua residu ini mendasari aktivasi PKD [10]. Secara paralel, Lim dan rekan-rekannya menunjukkan bahwa isoform PKC atipikal, yaitu PKCλ dan PKCζ, berasosiasi dengan protein pengikat FRS2 pada sel Swiss 3T3 yang distimulasi dengan faktor pertumbuhan fibroblast basa, sehingga menempatkan PKC atipikal dalam kompleks pensinyalan reseptor faktor pertumbuhan fibroblast [6].

Dinamika Sitokeleton dan Sinyal GTPase Keluarga Rho

Respons sitoskeletal sel 3T3-Swiss albino terhadap rangsangan tertentu telah menjadikannya model utama untuk penelitian GTPase keluarga Rho. Ohta dan rekan-rekannya menunjukkan bahwa GTPase kecil terkait Ras, RalA, berikatan dengan filamin secara spesifik terhadap GTP dan memicu pembentukan filopodia yang kaya akan aktin pada permukaan sel Swiss 3T3 dengan merekrut filamin ke dalam sitoskeleton filopodia [11]. Yang penting, RalA dominan-negatif atau domain pengikat RalA pada filamin menghambat pembentukan filopodia yang diinduksi Cdc42, sehingga menempatkan RalA sebagai perantara hilir dalam reorganisasi sitoskeleton yang dimediasi Cdc42. Demikian pula, Granés dan rekan-rekannya menunjukkan dalam studi transfeksi pada sel COS-1 dan Swiss 3T3 bahwa ekspresi berlebih dari proteoglikan heparan sulfat transmembran syndecan-2 menginduksi struktur mirip filopodia panjang melalui mekanisme yang bergantung pada Cdc42 aktif [12].

Bombesin dan faktor pertumbuhan yang berasal dari trombosit (PDGF) keduanya terbukti menginduksi interaksi antara fokus adhesi kinase (FAK) dan anggota keluarga Src pada sel Swiss 3T3, namun melalui jalur yang berbeda. Respons terhadap bombesin dapat dideteksi dalam waktu satu menit setelah stimulasi, mencapai puncaknya setelah sepuluh menit, dan berlangsung secara independen dari ^Ca²⁺ dan fosfatidilinositol 3'-kinase (PI3K), sedangkan respons terhadap konsentrasi rendah faktor pertumbuhan yang berasal dari trombosit memerlukan PI3K; keduanya bergantung pada integritas jaringan filamen aktin [4]. Hotchin dan rekan-rekannya menggunakan sel Swiss 3T3 bersama dengan fibroblas BHK untuk menganalisis kontribusi yang berbeda dari domain kesembilan dan kesepuluh fibronektin tipe III (FIII) terhadap fosforilasi FAK dan aktivasi Rho/Rac, yang menunjukkan bahwa FIII10 mendukung pelekatan sel tanpa memicu fosforilasi FAK [13]. Li dan rekan-rekannya memetakan daerah-daerah pada Cdc42 yang spesifik untuk PAK1, WASP, dan IQGAP1 secara biokimia, kemudian melakukan mikroinjeksi Cdc42/RhoA yang aktif secara konstitutif ke dalam sel Swiss 3T3 yang telah dipuasakan serum, sehingga terungkap bahwa domain switch I menyediakan penentu esensial untuk pengikatan efektor, sementara setiap efektor dikenali melalui mekanisme yang berbeda [14].

Tingkat fosforilasi WAVE, protein keluarga WASP yang memediasi pembentukan lipatan membran di hilir Rac, ditemukan meningkat pada sel Swiss 3T3 yang dirangsang dengan faktor pertumbuhan yang berasal dari trombosit, dan hiperfosforilasi ini dihambat oleh penghambat MEK PD98059 [15]. Martelli dan rekan-rekannya menunjukkan bahwa stimulasi aktivitas fosfolipase C-β1 nuklir yang bergantung pada insulin-like growth factor-I (IGF-I) memerlukan sitoskeleton mikrotubulus yang utuh, karena gangguan dengan kolkisin menghentikan peningkatan diacylglycerol nuklir tanpa memengaruhi fosforilasi reseptor IGF-I atau aktivitas PI3K [5]. Critchley dan rekan-rekannya meninjau hubungan integrin-aktin yang melibatkan talin, α-aktinin, filamin, dan vinculin, serta melaporkan bahwa eksperimen pada sel Swiss 3T3 yang dipermeabilisasi dengan streptolysin-O menunjukkan keterlibatan protein pengikat GTP ARF-1 dalam mengarahkan paxillin ke adhesi fokal [16].

Regulasi Siklus Sel

Perilaku pertumbuhan sel 3T3-Swiss albino yang terhambat oleh kontak telah menjadikannya sebagai model klasik untuk studi siklus sel. Wang dan rekan-rekannya membuat pengamatan mengejutkan bahwa, dalam eksperimen fraksinasi subseluler, inhibitor kinase yang bergantung pada siklin p27Kip1 ditemukan secara eksklusif di sitosol sel Swiss/3T3 sepanjang fase G1 dan hingga awal fase S, bukan di nukleus seperti yang selama ini diasumsikan [17]. Setelah stimulasi serum pada sel-sel yang tidak aktif, ^p27Kip1 sitosolik menurun secara signifikan pada akhir fase G1, yang secara waktu sejalan dengan peningkatan kadar Cdk2 dan siklin E di dalam nukleus.

Sistem sel Swiss 3T3 yang tidak aktif memungkinkan para penulis menunjukkan bahwa Cdk2 yang tidak aktif mengendap bersama p27Kip1 pada sel-sel yang tidak aktif, sedangkan stimulasi serum mengaktifkan baik Cdk2 di nukleus maupun di sitosol seiring dengan penurunan p27Kip1; ^p27Kip1 yang diekspresikan berlebih terakumulasi di nukleus dan menghambat masuknya Cdk2 [17]. Berdasarkan hal ini, para penulis mengusulkan bahwa ^p27Kip1 sitosolik memiliki peran fungsional dalam progres siklus sel, kemungkinan dengan membatasi impor nuklear kompleks siklin E-Cdk2 — sebuah model kompartemenisasi yang beroperasi bersamaan dengan kontrol translasi dan yang dimediasi proteasom terhadap kelimpahan p27^Kip1. Kemampuan untuk menyinkronkan sel albino 3T3-Swiss secara konsisten melalui penahanan serum tetap menjadi inti dari kekuatan eksperimental temuan ini.

Penyembuhan Luka dan Pengujian Biomaterial

Identitas fibroblastik dan pertumbuhan sel 3T3-Swiss albino yang terhambat oleh kontak menjadikannya model referensi standar dalam penelitian penyembuhan luka dan penilaian biokompatibilitas biomaterial. Sebuah studi yang sangat informatif menyelidiki efektivitas resveratrol (RES) dalam proses penyembuhan luka dengan menggunakan fibroblas 3T3 Swiss Albino sebagai model sel utama [19]. Stres oksidatif diinduksi oleh hidrogen peroksida, dan dosis RES berkisar antara 1 hingga 100 µM diberikan selama maksimal 48 jam untuk menilai efeknya terhadap proliferasi sel, migrasi, dan tingkat stres oksidatif — faktor penentu utama efisiensi penutupan luka.

Dalam studi tersebut, hidrogen peroksida menurunkan indeks proliferasi, sedangkan pemberian resveratrol justru meningkatkannya, menurunkan tingkat stres oksidatif, serta meningkatkan laju migrasi dan pelestarian ultrastruktur; yang perlu diperhatikan, tidak terdeteksi adanya perbedaan dalam ekspresi mRNA kolagen-I (COL1A2), yang menunjukkan bahwa manfaat yang diamati tidak dimediasi melalui peningkatan transkripsi kolagen [19]. Penggunaan sel albino 3T3-Swiss dalam konteks ini mencerminkan penerimaannya sebagai garis sel fibroblast normal yang representatif, yang dapat dijadikan acuan untuk mengevaluasi intervensi penyembuhan luka. Penyaringan sitokompatibilitas yang sebanding menjadi landasan pengembangan perban luka: misalnya, hidrogel alginat yang mengandung ekstrak glikolat Calendula, misalnya, pertama kali dievaluasi untuk viabilitas sel pada fibroblas 3T3 melalui uji MTT dan SRB sebelum diuji pada model luka insisional pada tikus, di mana hidrogel tersebut meningkatkan penutupan luka dan deposisi kolagen [21].

Lini sel ini juga digunakan sebagai substrat acuan dalam pengujian genotoksisitas. Sebuah studi uji komet komparatif yang secara eksplisit menggunakan garis sel 3T3-Swiss albino mengevaluasi kinetika perbaikan DNA yang bergantung pada waktu setelah paparan terhadap enam agen genotoksik yang umum digunakan — hidrogen peroksida, kalium bromat, etil metansulfonat, metil metansulfonat, N-etil-N-nitrosourea, dan etoposid — dan menemukan profil perbaikan yang spesifik untuk masing-masing agen, di mana kerusakan yang disebabkan oleh hidrogen peroksida dan EMS diperbaiki dengan cepat, sedangkan lesi yang disebabkan oleh ENU dan etoposid bertahan lebih dari 24 jam [20]. Studi semacam ini menyediakan data acuan yang diperlukan untuk menstandarkan dan memvalidasi uji komet in vitro untuk pengujian genotoksisitas regulasi.

Vesikel Ekstraseluler dan Teknologi Terkini

Sel 3T3-Swiss albino telah memainkan peran penting sebagai referensi sel normal dalam studi biologi vesikel ekstraseluler (EV). Fukuta dan rekan-rekannya menggunakan sel melanoma murine B16F1 bersama dengan sel 3T3 Swiss Albino sebagai garis sel kanker dan sel normal yang representatif, masing-masing, untuk menyelidiki apakah stimulasi listrik tingkat rendah (0,34 mA/cm) dapat meningkatkan sekresi EV dari sel yang dikultur [18]. Desain eksperimental berpasangan ini sangat penting untuk membedakan respons seluler umum terhadap stimulasi listrik dari efek spesifik sel kanker pada pelepasan EV. Perawatan listrik meningkatkan jumlah partikel EV pada kedua lini sel — 1,7 kali lipat pada 3T3 Swiss Albino dan 1,26 kali lipat pada B16F1 — tanpa sitotoksisitas yang jelas [18].

Desain berpasangan ini juga mengungkap perbedaan mekanistik antara kedua jenis sel tersebut: penghambatan farmakologis terhadap Rho GTPase menekan peningkatan sekresi EV yang diinduksi secara elektrik pada garis sel melanoma secara bergantung pada dosis, tetapi memiliki sedikit efek pada sel 3T3 Swiss Albino, yang menunjukkan bahwa persyaratan sinyal yang mendasari tidak identik pada sel kanker dan sel normal [18]. Penanda eksosom representatif CD9, HSP70, dan CD81 terdeteksi dalam EV dari kedua garis sel tersebut dan pada dasarnya tidak berubah akibat perlakuan (HSP70 secara konsisten rendah pada EV yang berasal dari 3T3), yang — bersama dengan rasio partikel terhadap protein yang tidak berubah — menunjukkan bahwa perlakuan tersebut meningkatkan kuantitas EV tanpa mengubah kualitas EV. Seiring dengan berkembangnya penelitian EV ke bidang pengiriman terapi, penemuan biomarker, dan komunikasi seluler, ketersediaan garis sel fibroblast yang telah tervalidasi dengan baik dan tidak berasal dari tumor, seperti 3T3-Swiss albino, menjadi semakin berharga untuk mengkontekstualisasikan hasil dari model sel kanker atau sel rekayasa.

Kesimpulan

Sel 3T3-Swiss albino merupakan salah satu lini fibroblas murin yang paling serbaguna dan secara historis signifikan yang tersedia bagi komunitas penelitian. Mulai dari penelitian dasar mengenai pinositosis dan proliferasi yang dimediasi oleh faktor pertumbuhan yang berasal dari trombosit hingga penelitian terkini mengenai sekresi vesikel ekstraseluler yang ditingkatkan oleh arus listrik berintensitas rendah [18], garis sel yang diimortalkan secara spontan ini terus membuktikan relevansinya di berbagai disiplin ilmu. Peralihan ketenangan–proliferasi yang terdefinisi dengan baik, responsivitas mitogen yang luas, plastisitas sitoskeletal, serta penerimaannya sebagai tolok ukur sel normal untuk uji penyembuhan luka dan uji biomaterial memastikan bahwa sel 3T3-Swiss albino akan tetap menjadi pusat biologi sel selama bertahun-tahun mendatang — asalkan stok sel telah diautentikasi melalui profil STR, riwayat pemindahan sel didokumentasikan, dan protokol kultur dipilih secara cermat ketika fenotipe penghambatan kontak menjadi faktor penting dalam eksperimen. Para peneliti yang mencari sumber sel 3T3-Swiss albino yang andal dan terverifikasi untuk studi sinyal, sitoskeleton, atau penyembuhan luka berikutnya, dianjurkan untuk menelusuri spesifikasi produk dan melakukan pemesanan di cytion.com.

Publikasi Utama

1. TODARO GJ, GREEN H (1963) Studi kuantitatif tentang pertumbuhan sel embrio tikus dalam kultur dan perkembangannya menjadi garis sel yang mapan. The Journal of Cell Biology. PMID: 13985244
2. Almeida JL, Dakic A, Kindig K (2019) Studi antarlaboratorium untuk memvalidasi metode profil STR guna identifikasi intraspesies garis sel tikus. PloS one. PMID: 31220119
3. Didion JP, Buus RJ, Naghashfar Z (2014) Profil array SNP pada garis sel tikus mengidentifikasi strain asal mereka dan mengungkapkan kontaminasi silang serta aneuploidi yang meluas. BMC Genomics. PMID: 25277546
4. Salazar EP, Rozengurt E (1999) Bombesin dan faktor pertumbuhan yang berasal dari trombosit menginduksi asosiasi kinase adhesi fokal endogen dengan Src pada sel Swiss 3T3 yang utuh. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10497197
5. Martelli AM, Cocco L, Bareggi R (1999) Stimulasi aktivitas fosfolipase C-beta1 nuklir yang bergantung pada insulin-like growth factor-I pada sel Swiss 3T3 memerlukan sitoskeleton yang utuh dan disertai dengan peningkatan fosforilasi fosfolipase tersebut. Journal of Cellular Biochemistry. PMID: 10022515
6. Lim YP, Low BC, Lim J (1999) Asosiasi isotipe protein kinase C atipikal dengan protein pengikat FRS2 dalam sinyal faktor pertumbuhan fibroblast. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10383403
7. Davies PF, Ross R (1978) Peran faktor pertumbuhan yang berasal dari trombosit dalam memediasi pinositosis pada sel otot polos arteri dan sel endotel yang dikultur. Jurnal Biologi Sel. PMID: 103882
8. Johanson SO, Naccache PA, Crouch MF (1999) PI 3-kinase p110alpha yang tidak bergantung pada subunit p85 berkolokalisasi dengan p70 S6 kinase pada serat tegangan aktin dan mengatur pembentukan serat tegangan yang dirangsang oleh trombin pada sel Swiss 3T3. Experimental Cell Research. PMID: 10094829
9. Higaki M, Shimokado K (1999) Phosphatidylinositol 3-kinase diperlukan untuk penyerapan asam amino yang diinduksi faktor pertumbuhan oleh sel otot polos vaskular. Arteriosklerosis, trombosis, dan biologi vaskular. PMID: 10479654
10. Waldron RT, Iglesias T, Rozengurt E (1999) Aktivasi protein kinase D yang bergantung pada fosforilasi [Ulasan]. Electrophoresis. PMID: 10197446
11. Ohta Y, Suzuki N, Nakamura S (1999) GTPase kecil RalA menargetkan filamin untuk menginduksi filopodia. Prosiding Akademi Ilmu Pengetahuan Nasional Amerika Serikat. PMID: 10051605
12. Granés F, García R, Casaroli-Marano RP (1999) Syndecan-2 menginduksi filopodia melalui cdc42Hs yang aktif. Experimental Cell Research. PMID: 10222136
13. Hotchin NA, Kidd AG, Altroff H (1999) Aktivasi diferensial kinase adhesi fokal, Rho, dan Rac oleh domain FIII kesembilan dan kesepuluh fibronektin. Jurnal Ilmu Sel. PMID: 10444388
14. Li R, Debreceni B, Jia B (1999) Lokalisasi daerah spesifik PAK1, WASP, dan IQGAP1 pada Cdc42. Jurnal Kimia Biologi. PMID: 10514434
15. Miki H, Fukuda M, Nishida E (1999) Fosforilasi WAVE pada tahap hilir sinyal kinase protein yang diaktifkan mitogen. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10488099
16. Critchley DR, Holt MR, Barry ST (1999) Adhesi sel yang dimediasi integrin: hubungan dengan sitoskeleton [Ulasan]. Simposium Masyarakat Biokimia. PMID: 10320934
17. Wang G, Miskimins R, Miskimins WK (1999) Inhibitor kinase yang bergantung pada siklin, p27Kip1, terlokalisasi di sitosol pada sel Swiss/3T3. *Oncogene*. PMID: 10498870
18. Fukuta T, Nishikawa A, Kogure K (2019) Arus listrik berintensitas rendah meningkatkan sekresi vesikel ekstraseluler dari sel yang dibudidayakan. Biochemistry and Biophysics Reports. PMID: 31828227
19. Kaleci B, Koyuturk M (2020) Efektivitas resveratrol dalam proses penyembuhan luka dengan mengurangi stres oksidatif serta mendorong proliferasi dan migrasi sel fibroblast. Dermatologic Therapy. PMID: 32996685
20. İpek Tekneci S, Üstündağ A, Duydu Y (2025) Kinetika perbaikan DNA spesifik agen pada sel 3T3: studi komparatif menggunakan uji komet in vitro. Penelitian Toksikologi. PMID: 41399455
21. Possa GOK, Chopek S, Pereira AV (2024) Ekstrak glikolat Calendula meningkatkan penyembuhan luka pada hidrogel alginat. Acta Cirurgica Brasileira. PMID: 39630705
22. Aaronson SA, Todaro GJ (1968) Dasar perolehan potensi ganas oleh sel tikus yang dibudidayakan in vitro. Science. PMID: 4301647
23. Rubin H, Xu K (1989) Bukti mengenai sifat progresif dan adaptif dari transformasi spontan pada garis sel NIH 3T3. Prosiding Akademi Ilmu Pengetahuan Nasional Amerika Serikat. PMID: 2928308
24. Grundel R, Rubin H (1992) Adaptasi dan seleksi sebagai faktor dalam transformasi spontan sel NIH-3T3. Carcinogenesis. PMID: 1423847
25. Entri Cellosaurus 3T3-Swiss albino (RRID:CVCL_0120). SIB Swiss Institute of Bioinformatics. cellosaurus.org/CVCL_0120
26. FAQ Cellosaurus, Pertanyaan 21: Mengapa terdapat entri yang berbeda untuk garis sel 3T3 di Cellosaurus? cellosaurus.org/faq