Вступ

Цей Клітини 3T3-Swiss albino Лінія — також відома під синонімами Swiss 3T3, Swiss-3T3, 3T3 Swiss Albino та Swiss3T3 — є однією з найдовговічніших і найпоширеніших клітинних ліній у біомедичних дослідженнях. Створена у 1962 році Джорджем Тодаро та Говардом Гріном із роздрібнених ембріонів мишей швейцарського альбіноса та описана в їхній статті 1963 року, ця лінія виникла в результаті застосування протоколу послідовного перенесення, за якого майже всі культури ембріонів зрештою дали початок усталеним, спонтанно імунізованим лініям [1]. Протягом наступних шести десятиліть клітини 3T3-Swiss albino стали незамінною моделлю для вивчення регуляції клітинного циклу, сигнальних шляхів факторів росту, динаміки цитоскелету та біології загоєння ран. Їх чітко виражена здатність до контактної інгібіції, чутливість до мітогенів, таких як тромбоцитарний фактор росту та брадикінін, а також генетична маніпульованість зробили їх основоположною еталонною моделлю в незліченних дослідженнях сигнальних шляхів та тестах на скринінг лікарських препаратів.

Основні висновки

• 3T3-Swiss albino — це лінія мишачих ембріональних фібробластів, що була спонтанно імунізована та створена у 1962 році Тодаро та Гріном (номер у базі даних Cellosaurus — CVCL_0120, донор — самець, цілий ембріон) [25].
• Ця лінія демонструє контактне гальмування росту, що робить її потужною моделлю для вивчення переходу від стану спокою до проліферації — хоча вираженість цього фенотипу залежить від умов культивування, а не є незмінною властивістю лінії [22] [23].
• Він виявляє високу чутливість до різноманітних мітогенів, зокрема до тромбоцитарного фактора росту, бомбезину, брадикініну та інсуліноподібного фактора росту-I.
• Клітини 3T3-Swiss albino відіграли важливу роль у вивченні організації цитоскелету, сигнальних шляхів ГТФаз сімейства Rho та динаміки фокальних адгезій.
• Ця лінія породила велику родину похідних підліній — зокрема 3T3-L1, 3T3-L2, 3T3-C2 та підлінію 3T3-J2, що слугує в якості живильного шару, — які використовуються в дослідженнях адипогенезу, онкології та у кокультурних системах [25].
• Мультиплексний STR-аналіз, валідований у рамках міжлабораторних випробувань (19 мишачих маркерів та два людські маркери для міжвидового скринінгу; 18 із 19 мишачих маркерів виявилися придатними для внутрішньовидової дискримінації), тепер дозволяє проводити надійну ідентифікацію мишачих клітинних ліній, зокрема 3T3-Swiss albino [2].

Що таке 3T3-швейцарський альбінос?

3T3-Swiss albino було отримано з тканини цілого ембріона самця миші породи «Swiss albino» на ембріональній стадії; у донора не було виявлено жодних захворювань [25]. Назва «3T3» походить від оригінального протоколу культивування: клітини пересаджували кожні три дні з інкубаційною дозою 3 × 10⁵ клітин на 20 см² посуд. Тодаро та Грін продемонстрували, що темпи росту культур ембріонів мишей знижувалися при послідовних пересадках — причому швидкість зниження частково залежала від щільності інокуляції — перш ніж майже всі культури перетворилися на стабільні лінії протягом трьох місяців, а також що використовувані умови культивування визначали, які властивості набувала отримана лінія; режим 3T3 дав лінію, яка є надзвичайно чутливою до контактної інгібіції [1]. Отримана клітинна лінія має фібробластичну морфологію, росте у вигляді адгезивного моношару та піддається контактному гальмуванню проліферації при досягненні конфлюентності — ця властивість відрізняє її від трансформованих ліній і робить її ідеальною моделлю для вивчення переходів від стану спокою до проліферації.

Лінія мишей 3T3-Swiss albino була однією з тих, що увійшли до великого дослідження з використанням масиву SNP, метою якого було підтвердження заявлених генетичних фонів штамів та виявлення змін кількості копій хромосом, які неможливо визначити за допомогою STR-профілювання; серед 99 досліджених ліній 98 відповідали заявленому для них генетичному фону [3] [25]. З метою вирішення проблем аутентифікації на рівні повсякденної практики міжлабораторний консорціум, до складу якого увійшли дванадцять лабораторій, валідував мультиплексний аналіз STR-профілів для внутрішньовидової ідентифікації клітинних ліній мишей на основі 50 найпоширеніших ліній мишей; отримані профілі будуть опубліковані в базі даних NCBI BioSample; профіль STR, який зараз вказано для лінії 3T3-Swiss albino в базі даних Cellosaurus, походить саме з цього дослідження [2] [25]. Ці досягнення суттєво покращили відтворюваність результатів досліджень, що проводяться з використанням цієї широко поширеної лінії.

Інформація про клітинні культури

Переваги клітин 3T3-Swiss albino

Однією з найвагоміших переваг клітин 3T3-Swiss albino є їхня добре вивчена реакція на стимуляцію факторами росту після вилучення сироватки. Переведення клітин у стан спокою шляхом позбавлення сироватки, а потім повторна стимуляція визначеними мітогенами дозволяє дослідникам вивчати окремі сигнальні події з високою часовою роздільною здатністю. Цю експериментальну парадигму використовували для дослідження реакцій на тромбоцитарний фактор росту, бомбезин, брадикінін, інсуліноподібний фактор росту-I та основний фактор росту фібробластів — охоплюючи надзвичайно широкий спектр класів рецепторів та низових сигнальних шляхів у рамках єдиного, послідовного клітинного фону. [4] [5] [6].

Другою важливою перевагою є фенотип інгібування контакту цієї лінії. На відміну від багатьох трансформованих ракових ліній, клітини 3T3-Swiss albino зупиняють ріст при досягненні конфлюентності, а не продовжують надмірне розмноження. Це робить їх чудовою еталонною моделлю для тестів на загоєння ран методом «подряпини», де міграцію в оголену зону можна кількісно оцінити за визначених умов. Однак, що найважливіше, цей фенотип залежить від способу утримання клітин, а не є фіксованою характеристикою лінії. Ааронсон і Тодаро показали, що лінії ембріонів мишей, які утримувалися в умовах, що мінімізують міжклітинний контакт, залишалися непухлинними протягом понад 200 поколінь, тоді як лінії, що утримувалися в умовах інтенсивного міжклітинного контакту, стали пухлиноутворюючими вже за 30 поколінь — і що властивістю культури, яка найкраще корелювала з пухлиногенністю, була саме втрата контактного гальмування клітинного поділу [22]. У подальших дослідженнях було встановлено конкретні фактори, що впливають на цей процес: спонтанні трансформовані вогнища виникають у культурах клітин типу 3T3, які перебувають у стані конфлюентності понад десять днів, а їхня частота залежить від типу та концентрації використовуваної сироватки, а також від історії пасажу культури [23]. Ефект може проявитися надзвичайно швидко — клон, який не утворював вогнищ у п’ятдесяти послідовних аналізах протягом 21 тижня, почав утворювати їх уже через два дні в середовищі з низьким вмістом сироватки [24]. Ці експерименти проводилися на лініях 3T3, похідних від BALB/c та NIH, а не на самій лінії 3T3-Swiss albino, проте вони описують залежність від режиму, спільну для ліній фібробластів типу 3T3, і мають конкретне практичне значення: лабораторії, які покладаються саме на контактне гальмування, повинні працювати з низькою та задокументованою кількістю пасажів за визначених умов сироватки, уникати утримання культур у стані конфлюентності довше, ніж того вимагає аналіз, та перевіряти фенотип власноруч.

Фібробластичне походження цієї лінії також має безпосереднє значення для досліджень ремоделювання позаклітинного матриксу, інтегринної сигналізації та регенерації шкіри — забезпечуючи фізіологічний контекст, якого не можуть надати суто епітеліальні або онкологічні лінії. Крім того, обширний каталог похідних субліній, отриманих із 3T3-Swiss albino, розширює набір експериментальних інструментів, доступних дослідникам у сферах адипогенезу, онкології та кокультури стовбурових клітин. [25].

Обмеження клітин 3T3-Swiss albino

Незважаючи на свою корисність, клітини 3T3-Swiss albino мають певні властиві їм обмеження, зумовлені їхнім мишачим походженням та спонтанною безсмертністю. Каріотипний дрейф було зафіксовано ще в первинному дослідженні, в ході якого популяції переходили з диплоїдного в тетраплоїдний діапазон — часто дуже швидко — ще до появи маркерних хромосом [1]. Ця нестабільність не є характерною лише для цієї лінії: аналіз за допомогою SNP-матриці 99 широко використовуваних ліній клітин мишей виявив ознаки зміни кількості копій у 42 % з них, у тому числі у 24 % ліній, отриманих із нормальної, а не пухлинної тканини, що підтверджує: анеуплоїдія є поширеною особливістю клітинних культур мишей, а не специфічною лише для раку [3]. Така геномна нестабільність означає, що результати, отримані на пізніх пасажах, можуть неточно відображати властивості клітин на ранніх пасажах, а міжлабораторні порівняння можуть бути спотворені внаслідок невиявленого дрейфу. Тому дослідники повинні перевіряти автентичність своїх культур за допомогою валідованих методів STR та вести систематичний облік пасажів [2].

Пов’язаним з цим обмеженням є історична поширеність у науковому співтоваристві випадків неправильної ідентифікації або перехресного забруднення клітинних культур — проблема, яка широко задокументована щодо клітинних ліній мишей [3]. Особлива і часто недооцінена проблема пов’язана з номенклатурою: 3T3-Swiss albino (CVCL_0120, опубліковано у 1963 році) та NIH 3T3 (CVCL_0594, отримана від миші NIH Swiss та опублікована у 1969 році) — обидві в літературі часто скорочуються до «3T3» або «Swiss 3T3». Якщо у статті не вказано каталожний номер колекції, з якої походять клітини, ці дві лінії часто неможливо розрізнити без безпосереднього звернення до авторів [26]. Ця неоднозначність поширюється на значну частину класичної літератури з питань сигнальних шляхів, підсумовану нижче: у публікаціях, що описують дослідження на «Swiss 3T3», рідко вказується, про яку саме лінію йдеться, і, відповідно, отримані результати слід трактувати як такі, що стосуються мишачих фібробластів типу 3T3, якщо тільки у джерелі лінія не вказана прямо. Оскільки 3T3-Swiss albino, крім того, є не клональним ізолятом, а поліклональною популяцією, функціональна гетерогенність між запасами з різних джерел може додатково впливати на результати експериментів. Нарешті, як лінія фібробластів миші, 3T3-Swiss albino може не відтворювати нюанси сигналізації, що мають значення для біології людини, без ретельної валідації, і результати, отримані на цій моделі, слід підтверджувати на первинних клітинах відповідного виду або в системах in vivo, перш ніж робити трансляційні висновки.

Переглянути повні технічні характеристики та замовити

Застосування

Сигналізація факторів росту та клітинна проліферація

Клітини 3T3-Swiss albino слугували видатною моделлю для аналізу мітогенних сигнальних каскадів, що запускаються різноманітними факторами росту та нейропептидами. У ранніх роботах Девіса та Росса клітини Swiss 3T3 використовували разом із клітинами гладких м’язів аорти мавп та ендотеліальними клітинами аорти великої рогатої худоби, щоб показати, що заміна сироватки, отриманої з плазми, на сироватку цільної крові або частково очищений фактор росту, отриманий із тромбоцитів, помітно стимулювала піноцитоз, а також проліферацію в спокійних культурах — це був один із перших зв’язків між індукованим факторами росту мембранним транспортом та вступом у клітинний цикл, встановлений переважно на системі клітин гладких м’язів [7]. У подальших дослідженнях використовували парадигму вилучення сироватки/повторної стимуляції, щоб розмістити окремі сигнальні молекули в упорядкованих шляхах, що знаходяться нижче за активацією рецепторів.

Фосфатидилінозитол-3-кіназа (PI3K) виявилася центральним вузлом у реакціях, стимульованих факторами росту. Йохансон та колеги показали, що пул p110α PI3K, незалежний від p85-субодиниці, колокалізується з p70 S6-кіназою на стресових волокнах актину і що активність PI3K необхідна для утворення стресових волокон, індукованого тромбіном, у клітинах Swiss 3T3 [8]. Подібну роль PI3K у поглинанні поживних речовин описали Хігакі та Шимокадо, які продемонстрували, що інгібітори PI3K пригнічують стимульоване тромбоцитарним фактором росту поглинання амінокислот у клітинах гладких м’язів судин, а також повідомили про подібний інгібуючий ефект у клітинах Swiss 3T3 [9].

Протеїнкіназа D (PKD) активується в інтактних клітинах Swiss 3T3 під дією ефірів форболу, діацилгліцеролів, що проникають у клітини, бріостатину, нейропептидів та факторів росту через механізм, що залежить від фосфорилювання та вимагає присутності протеїнкінази C. Як зазначено у огляді Вальдрона, Іглесіаса та Розенгурта, мутагенез залишків серину 744 та серину 748 у петлі активації конструкцій PKD, експресованих у клітинах COS-7, безпосередньо продемонстрував, що опосередкована PKC фосфориляція цих двох залишків лежить в основі активації PKD [10]. Паралельно Лім та його колеги продемонстрували, що атипові ізоформи PKC — PKCλ та PKCζ — асоціюються з докер-білком FRS2 у клітинах Swiss 3T3, стимульованих основним фактором росту фібробластів, що вказує на включення атипових PKC до сигнального комплексу рецептора фактора росту фібробластів [6].

Динаміка цитоскелету та сигналізація ГТФаз сімейства Rho

Реакція цитоскелету клітин-альбіносів 3T3-Swiss на певні подразники зробила їх основною моделлю для досліджень ГТФаз родини Rho. Ота та колеги продемонстрували, що пов’язана з Ras мала ГТФаза RalA зв’язується з філаміном у специфічний для ГТФ спосіб та індукує утворення філоподій, багатих на актин, на поверхні клітин Swiss 3T3 шляхом залучення філаміну до філоподіального цитоскелету [11]. Важливо, що домінантно-негативний RalA або домен філаміну, що зв’язується з RalA, блокували індуковане Cdc42 утворення філоподій, що визначило RalA як проміжний елемент нижчого рівня в опосередкованій Cdc42 реорганізації цитоскелету. Аналогічно, Гранес та його колеги показали в дослідженнях трансфекції клітин COS-1 та Swiss 3T3, що надмірна експресія трансмембранного гепарансульфатного протеоглікану синдекану-2 індукувала утворення довгих філоподієподібних структур через механізм, що залежить від активного Cdc42 [12].

Було показано, що як бомбезин, так і тромбоцитарний фактор росту індукують взаємодію між фокальною адгезійною кіназою (FAK) та членами родини Src у клітинах Swiss 3T3, але різними шляхами. Реакція на бомбезин була виявлена вже через хвилину після стимуляції, досягала піку через десять хвилин і відбувалася незалежно від ^Ca²⁺ та фосфатидилінозитол-3'-кінази, тоді як реакція на низькі концентрації тромбоцитарного фактора росту вимагала участі PI3K; обидві реакції залежали від цілісності мережі актинових філаментів [4]. Хотчин та колеги використовували клітини Swiss 3T3 разом із фібробластами BHK для аналізу відмінного внеску дев’ятого та десятого доменів фібронектину типу III (FIII) у фосфорилювання FAK та активацію Rho/Rac, продемонструвавши, що FIII10 підтримує прикріплення клітин, не індукуючи фосфорилювання FAK [13]. Лі та його колеги біохімічно картирували регіони Cdc42, що специфікують PAK1, WASP та IQGAP1, а потім здійснили мікроін’єкцію конститутивно активних хімер Cdc42/RhoA у клітини Swiss 3T3, що перебували на сироватковому голодуванні, і виявили, що домен «switch I» забезпечує необхідні детермінанти для зв’язування ефекторів, тоді як кожен ефектор розпізнається за допомогою окремого механізму [14].

Було виявлено, що рівень фосфорилювання WAVE — білка сімейства WASP, який опосередковує зморщування мембрани нижче за Rac, — підвищується в клітинах Swiss 3T3, стимульованих тромбоцитарним фактором росту, і ця гіперфосфориляція інгібувалася інгібітором MEK PD98059 [15]. Мартеллі та колеги продемонстрували, що залежна від інсуліноподібного фактора росту-I (IGF-I) стимуляція активності ядерної фосфоліпази C-β1 вимагає інтактного мікротрубочкового цитоскелету, оскільки його руйнування за допомогою колхіцину призупиняло збільшення рівня діацилгліцеролу в ядрі, не впливаючи при цьому на фосфорилювання рецептора IGF-I або активність PI3K [5]. Крітчлі та колеги проаналізували взаємодію інтегрину з актином за участю таліну, α-актиніну, філаміну та вінкуліну і повідомили, що експерименти на клітинах Swiss 3T3, пермеабілізованих стрептолізином-O, вказують на участь GTP-зв’язуючого білка ARF-1 у направленні паксиліну до фокальних адгезій [16].

Регуляція клітинного циклу

Характер росту клітин-альбіносів 3T3-Swiss, що гальмується контактом, зробив їх класичною моделлю для досліджень клітинного циклу. Ван та його колеги зробили несподіване спостереження: під час експериментів із субклітинного фракціонування інгібітор циклін-залежної кінази ^p27^Kip1 виявлявся виключно в цитозолі клітин Swiss/3T3 протягом фази G1 та на початку фази S, а не в ядрі, як передбачалося раніше [17]. Після стимуляції клітин у стані спокою сироваткою рівень цитозольного ^p27Kip1 помітно знижувався до кінця фази G1, що за часом збігалося зі збільшенням ядерних рівнів як Cdk2, так і цикліну E.

Система клітин Swiss 3T3 у стані спокою дозволила авторам продемонструвати, що неактивний Cdk2 копреципітує з p27Kip1 у клітинах у стані спокою, тоді як стимуляція сироваткою активує як ядерний, так і цитозольний Cdk2 у міру зниження рівня p27^Kip1; надмірно експресований p27^Kip1 накопичувався в ядрі та блокував проникнення Cdk2 [17]. На цій підставі автори висунули гіпотезу, що цитозольний p27^Kip1 відіграє функціональну роль у прогресуванні клітинного циклу, ймовірно, обмежуючи імпорт у ядро комплексів цикліну E-Cdk2 — модель компартменталізації, яка діє паралельно з трансляційним та опосередкованим протеасомою контролем кількості p27K^ip1. Здатність відтворюваним чином синхронізувати клітини 3T3-Swiss albino шляхом позбавлення сироватки залишається ключовим фактором експериментальної значущості цих результатів.

Загоєння ран та випробування біоматеріалів

Фібробластична ідентичність та інгібування росту клітин 3T3-Swiss albino під впливом контакту роблять їх стандартною еталонною моделлю в дослідженнях загоєння ран та оцінці біосумісності біоматеріалів. Особливо повчальне дослідження було присвячене вивченню ефективності ресвератролу (RES) у процесі загоєння ран із використанням фібробластів 3T3 Swiss Albino як первинної клітинної моделі [19]. Окислювальний стрес індукували перекисом водню, а дози RES у діапазоні від 1 до 100 мкМ застосовували протягом до 48 годин для оцінки впливу на проліферацію клітин, міграцію та рівні окислювального стресу — ключові чинники, що визначають ефективність загоєння ран.

У цьому дослідженні перекис водню знижував індекс проліферації, тоді як застосування ресвератролу підвищувало його, знижувало рівні окислювального стресу та покращувало швидкість міграції й збереження ультраструктури; при цьому не було виявлено жодних відмінностей в експресії мРНК колагену-I (COL1A2), що вказує на те, що спостережуваний позитивний ефект не опосередковувався підвищенням транскрипції колагену [19]. Використання клітин 3T3-Swiss albino в цьому контексті свідчить про їх визнання як репрезентативної лінії нормальних фібробластів, на тлі якої можна оцінювати ефективність заходів із загоєння ран. Подібний скринінг цитосумісності лежить в основі розробки ранозагоювальних пов’язок: наприклад, альгінатний гідрогель, що містить гліколевий екстракт календули, наприклад, спочатку оцінювали на життєздатність клітин у фібробластах 3T3 за допомогою тестів MTT та SRB, перш ніж випробувати його на моделі хірургічної рани у щурів, де він покращив закриття рани та відкладення колагену [21].

Цю лінію також використовують як еталонний субстрат у тестуванні на генотоксичність. У порівняльному дослідженні методом «комети», проведеному саме з використанням лінії 3T3-Swiss albino, оцінювали залежну від часу кінетику репарації ДНК після впливу шести широко використовуваних генотоксичних агентів — перекису водню, бромату калію, етилметанесульфонату, метилметанесульфонату, N-етил-N-нітрозосечовину та етопозид — і виявило специфічні для кожного агента профілі репарації: пошкодження, спричинені перекисом водню та ЕМС, репарувалися швидко, тоді як ураження, спричинені ЕНУ та етопозидом, зберігалися понад 24 години [20]. Дослідження такого роду надають еталонні дані, необхідні для стандартизації та валідації методу «комета» in vitro для регуляторних випробувань на генотоксичність.

Позаклітинні везикули та нові технології

Клітини 3T3-Swiss albino відіграють важливу роль як еталон нормальних клітин у дослідженнях біології позаклітинних везикул (EV). Фукута та його колеги використовували клітини мишачої меланоми B16F1 разом із клітинами 3T3 Swiss Albino як репрезентативні лінії ракових та нормальних клітин відповідно, щоб дослідити, чи може електрична стимуляція низької інтенсивності (0,34 мА/см) посилити секрецію EV з культивованих клітин [18]. Така пара експериментальних підходів була необхідною для розрізнення загальних клітинних реакцій на електричну стимуляцію від специфічних для ракових клітин ефектів на вивільнення EV. Електрична обробка збільшила кількість частинок ВЕ в обох лініях — у 1,7 раза в лінії 3T3 Swiss Albino та у 1,26 раза в лінії B16F1 — без видимої цитотоксичності [18].

Цей парний експериментальний дизайн також виявив механістичну відмінність між двома типами клітин: фармакологічне інгібування Rho-ГТФази пригнічувало індуковане електричним впливом збільшення секреції ЕВ у лінії меланоми у дозозалежний спосіб, але мало впливало на клітини 3T3 Swiss Albino, що вказує на те, що базові сигнальні вимоги у ракових та нормальних клітинах не є ідентичними [18]. Типові маркери екзосом CD9, HSP70 та CD81 були виявлені в ЕВ обох ліній і практично не зазнали змін під впливом обробки (рівень HSP70 у ЕВ, отриманих із клітин 3T3, залишався стабільно низьким), що — разом із незмінним співвідношенням «частинка до білка» — свідчить про те, що обробка збільшила кількість ЕВ, не змінюючи їхньої якості. У міру того як дослідження ЕВ поширюються на сфери доставки ліків, виявлення біомаркерів та клітинної комунікації, наявність добре валідованої лінії фібробластів, що не походить із пухлин, такої як 3T3-Swiss albino, стає дедалі ціннішою для контекстуалізації результатів, отриманих на моделях ракових або модифікованих клітин.

Висновок

Клітини 3T3-Swiss albino є однією з найбільш універсальних та історично значущих ліній мишачих фібробластів, доступних науковій спільноті. Від фундаментальних досліджень піноцитозу та проліферації, опосередкованих тромбоцитарним фактором росту, до сучасних досліджень секреції позаклітинних везикул, посиленої слабким електричним полем [18], ця спонтанно імунізована лінія постійно доводить свою актуальність у різних наукових дисциплінах. Її чітко визначений перехід від стану спокою до проліферації, широка чутливість до мітогенів, пластичність цитоскелету та визнання в якості еталону нормальних клітин для досліджень загоєння ран і біоматеріалів гарантують, що клітини 3T3-Swiss albino залишатимуться центральними в клітинній біології ще протягом багатьох років — за умови, що запаси підтверджені методом STR-профілювання, історія пасажування задокументована, а режим культивування обрано свідомо, коли фенотип контактної інгібіції має значення для експерименту. Дослідникам, які шукають надійне, аутентифіковане джерело клітин 3T3-Swiss albino для своїх наступних досліджень у галузі сигналізації, цитоскелету або загоєння ран, рекомендується ознайомитися з технічними характеристиками продукту та оформити замовлення на сайті cytion.com.

Ключові публікації

1. TODARO GJ, GREEN H (1963) Кількісні дослідження росту клітин ембріонів мишей у культурі та їхнього розвитку у стабільні лінії. The Journal of cell biology. PMID: 13985244
2. Almeida JL, Dakic A, Kindig K (2019) Міжлабораторне дослідження з валідації методу STR-профілювання для внутрішньовидової ідентифікації клітинних ліній мишей. PloS one. PMID: 31220119
3. Дідіон Дж. П., Буус Р. Дж., Нагхашфар З. (2014) Профілювання клітинних ліній мишей за допомогою SNP-масиву дозволяє ідентифікувати їхні вихідні штами та виявляє перехресне забруднення й поширену анеуплоїдію. BMC Genomics. PMID: 25277546
4. Салазар Е.П., Розенгурт Е. (1999) Бомбезин та тромбоцитарний фактор росту індукують асоціацію ендогенної фокальної адгезійної кінази з Src в інтактних клітинах Swiss 3T3. The Journal of biological chemistry. PMID: 10497197
5. Мартеллі А. М., Кокко Л., Бареджі Р. (1999) Залежна від інсуліноподібного фактора росту-I стимуляція активності ядерної фосфоліпази C-бета1 у клітинах Swiss 3T3 вимагає інтактного цитоскелету та супроводжується підвищеною фосфориляцією фосфоліпази. Journal of cellular biochemistry. PMID: 10022515
6. Лім Й.П., Лоу Б.С., Лім Дж. (1999) Асоціація атипових ізотипів протеїнкінази С із докер-білком FRS2 у сигнальному шляху фактора росту фібробластів. Журнал біологічної хімії. PMID: 10383403
7. Davies PF, Ross R (1978) Опосередкування піноцитозу в культивованих гладком’язових клітинах артерій та ендотеліальних клітинах за допомогою фактора росту, що походить з тромбоцитів. Журнал клітинної біології. PMID: 103882
8. Йохансон С.О., Наккаше П.А., Крауч М.Ф. (1999) p110α-PI 3-кіназа, незалежна від p85-субодиниці, колокалізується з p70 S6-кіназою на стресових волокнах актину та регулює стимульоване тромбіном утворення стресових волокон у клітинах Swiss 3T3. «Експериментальні дослідження клітин». PMID: 10094829
9. Хігакі М., Шімокадо К. (1999) Фосфатидилінозитол-3-кіназа необхідна для індукованого факторами росту поглинання амінокислот клітинами гладких м’язів судин. Атеросклероз, тромбоз та судинна біологія. PMID: 10479654
10. Вальдрон Р.Т., Іглесіас Т., Розенгурт Е. (1999) Фосфорилювання-залежна активація протеїнкінази D [Огляд]. Електрофорез. PMID: 10197446
11. Ота Й., Судзукі Н., Накамура С. (1999) Мала ГТФаза RalA взаємодіє з філаміном для індукції філоподій. Матеріали Національної академії наук США. PMID: 10051605
12. Гранес Ф., Гарсія Р., Касаролі-Марано Р.П. (1999) Синдекан-2 індукує філоподії за допомогою активної cdc42Hs. Experimental cell research. PMID: 10222136
13. Хотчин Н.А., Кідд А.Г., Альтрофф Х. (1999) Диференціальна активація фокальної адгезійної кінази, Rho та Rac дев’ятим і десятим доменами FIII фібронектину. Журнал клітинної науки. PMID: 10444388
14. Лі Р., Дебрецені Б., Цзя Б. (1999) Локалізація регіонів Cdc42, що визначають взаємодію з PAK1, WASP та IQGAP1. «Журнал біологічної хімії». PMID: 10514434
15. Мікі Х., Фукуда М., Нішіда Е. (1999) Фосфорилювання WAVE нижче за сигнальним шляхом мітоген-активованої протеїнкінази. Журнал біологічної хімії. PMID: 10488099
16. Крітчлі Д. Р., Холт М. Р., Баррі С. Т. (1999) Інтегрин-опосередкована клітинна адгезія: зв’язок із цитоскелетом [Огляд]. Симпозіум Біохімічного товариства. PMID: 10320934
17. Ван Г., Міскімінс Р., Міскімінс В.К. (1999) Інгібітор циклін-залежної кінази p27Kip1 локалізується в цитозолі клітин Swiss/3T3. «Онкоген». PMID: 10498870
18. Фукута Т., Нішікава А., Когуре К. (2019) Електричний струм низької напруги посилює секрецію позаклітинних везикул із культивованих клітин. Biochemistry and biophysics reports. PMID: 31828227
19. Калечі Б., Коютурк М. (2020) Ефективність ресвератролу в процесі загоєння ран шляхом зменшення окисного стресу та стимулювання проліферації й міграції фібробластів. Dermatologic therapy. PMID: 32996685
20. Іпек Текнечі С., Устундаг А., Дуйду Ю. (2025) Кінетика репарації ДНК, специфічна для агента, у клітинах 3T3: порівняльне дослідження з використанням методу «комети» in vitro. Дослідження в галузі токсикології. PMID: 41399455
21. Посса Г.О.К., Чопек С., Перейра А.В. (2024) Гліколевий екстракт календули покращує загоєння ран за допомогою альгінатного гідрогелю. «Acta cirurgica brasileira». PMID: 39630705
22. Aaronson SA, Todaro GJ (1968) Основи набуття злоякісного потенціалу клітинами мишей, культивованими in vitro. «Science». PMID: 4301647
23. Рубін Г., Сюй К. (1989) Докази прогресивного та адаптивного характеру спонтанної трансформації в клітинній лінії NIH 3T3. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. PMID: 2928308
24. Грундель Р., Рубін Г. (1992) Адаптація та селекція як фактори спонтанної трансформації клітин NIH-3T3. Carcinogenesis. PMID: 1423847
25. Запис у базі даних Cellosaurus 3T3-Swiss albino (RRID:CVCL_0120). SIB Швейцарський інститут біоінформатики. cellosaurus.org/CVCL_0120
26. Часті запитання щодо Cellosaurus, питання 21: Чому в базі даних Cellosaurus існують різні записи щодо клітинної лінії 3T3? cellosaurus.org/faq