Introdução

O Células 3T3-Swiss albinas A linhagem — também conhecida pelos sinônimos Swiss 3T3, Swiss-3T3, 3T3 Swiss Albino e Swiss3T3 — é uma das linhagens celulares mais duradouras e amplamente utilizadas na pesquisa biomédica. Estabelecida em 1962 por George Todaro e Howard Green a partir de embriões desagregados de camundongos albinos suíços e descrita em seu artigo de 1963, a linhagem surgiu de um protocolo de transferência em série, no qual quase todas as culturas de embriões acabaram dando origem a linhagens estabelecidas e espontaneamente imortalizadas [1]. Ao longo das seis décadas seguintes, as células 3T3-Swiss albinas tornaram-se um modelo indispensável para o estudo da regulação do ciclo celular, da sinalização de fatores de crescimento, da dinâmica do citoesqueleto e da biologia da cicatrização de feridas. Seu comportamento bem definido de inibição por contato, sua capacidade de resposta a mitógenos, como o fator de crescimento derivado de plaquetas e a bradicinina, e sua maleabilidade genética fizeram delas um modelo de referência fundamental em inúmeros estudos de vias de sinalização e ensaios de triagem de medicamentos.

Principais conclusões

• A 3T3-Swiss albino é uma linhagem de fibroblastos embrionários murinos imortalizados espontaneamente, estabelecida em 1962 por Todaro e Green (número de acesso no Cellosaurus: CVCL_0120, doador macho, embrião inteiro) [25].
• Essa linhagem apresenta inibição do crescimento por contato, o que a torna um modelo poderoso para o estudo da transição entre a quiescência e a proliferação — embora a intensidade desse fenótipo dependa do regime de cultura, e não seja uma propriedade fixa da linhagem [22] [23].
• Ele apresenta alta sensibilidade a diversos mitógenos, incluindo o fator de crescimento derivado de plaquetas, a bombesina, a bradicinina e o fator de crescimento semelhante à insulina tipo I.
• As células albinas suíças 3T3 têm sido fundamentais para a análise da organização do citoesqueleto, da sinalização das GTPases da família Rho e da dinâmica das adesões focais.
• Essa linhagem deu origem a uma grande família de sublinhagens derivadas — incluindo 3T3-L1, 3T3-L2, 3T3-C2 e a sublinhagem da camada alimentadora 3T3-J2 — utilizadas em aplicações de adipogênese, oncologia e cocultura [25].
• Um ensaio STR multiplex validado entre laboratórios (19 marcadores de camundongo mais dois marcadores humanos para triagem interespécies; 18 dos 19 marcadores de camundongo se mostraram adequados para a discriminação intraespécies) permite agora a autenticação confiável de linhagens celulares de camundongo, incluindo a 3T3-Swiss albino [2].

O que é o 3T3-Swiss albino?

A linha 3T3-Swiss albino foi derivada do tecido do embrião inteiro de um camundongo macho da linhagem Swiss albino na fase embrionária, sem nenhuma doença associada ao doador [25]. O nome “3T3” remete ao protocolo de transferência original: as células eram repicadas a cada três dias com um inóculo de 3 × 10⁵ células por 20 cm² plato. Todaro e Green demonstraram que as culturas de embriões de camundongo apresentavam uma redução na taxa de crescimento após transferências sucessivas — sendo que a taxa de redução dependia, em parte, da densidade de inoculação — antes que quase todas as culturas se desenvolvessem em linhagens estabelecidas em até três meses, e que as condições de cultura utilizadas determinavam quais propriedades a linhagem resultante adquiria; o regime 3T3 produziu uma linhagem extremamente sensível à inibição por contato [1]. A linhagem resultante apresenta morfologia fibroblástica, cresce como uma monocamada aderente e sofre inibição de proliferação por contato quando atinge a confluência — uma propriedade que a distingue das linhagens transformadas e a torna um modelo ideal para o estudo das transições da quiescência para a proliferação.

A linhagem 3T3-Swiss albino estava entre as linhagens de camundongos incluídas em um amplo estudo com matriz de SNPs, destinado a verificar os origens genéticas relatadas das linhagens e a detectar alterações no número de cópias cromossômicas que a análise de perfis STR não consegue identificar; das 99 linhagens examinadas, 98 corresponderam à origem genética relatada para elas [3] [25]. Para abordar as questões relacionadas à autenticação no âmbito da prática rotineira, um consórcio interlaboratorial composto por doze laboratórios validou um ensaio multiplex de perfilagem de STR para a identificação intraespecífica de linhagens celulares de camundongo, com base em 50 das linhagens de camundongo mais comumente utilizadas, sendo que os perfis resultantes serão publicados no banco de dados BioSample do NCBI; o perfil de STR agora listado para o 3T3-Swiss albino no Cellosaurus deriva desse estudo [2] [25]. Esses avanços melhoraram substancialmente a reprodutibilidade das pesquisas realizadas com essa linhagem amplamente distribuída.

Informações sobre cultura celular

Vantagens das células 3T3-Swiss albino

Um dos pontos fortes mais notáveis das células 3T3-Swiss albino é sua resposta bem caracterizada à estimulação por fatores de crescimento após a retirada do soro. Colocar as células em estado de quiescência por meio da privação de soro e, em seguida, reestimulá-las com mitógenos definidos permite que os pesquisadores estudem eventos de sinalização distintos com alta resolução temporal. Esse paradigma experimental tem sido utilizado para investigar respostas ao fator de crescimento derivado de plaquetas, à bombesina, à bradicinina, ao fator de crescimento semelhante à insulina tipo I e ao fator de crescimento básico dos fibroblastos — abrangendo uma gama excepcionalmente ampla de classes de receptores e vias de sinalização a jusante dentro de um único contexto celular consistente [4] [5] [6].

Uma segunda grande vantagem é o fenótipo de inibição de contato dessa linhagem. Ao contrário de muitas linhagens cancerosas transformadas, as células albinas 3T3-Swiss param de se dividir ao atingirem a confluência, em vez de continuarem a crescer excessivamente. Isso as torna um excelente modelo de referência para ensaios de cicatrização de feridas (scratch assays), nos quais a migração para uma zona desnudada pode ser quantificada sob condições definidas. No entanto, é fundamental ressaltar que esse fenótipo depende da forma como as células são cultivadas, e não é uma característica fixa da linhagem. Aaronson e Todaro demonstraram que linhagens de embriões de camundongo mantidas em condições que minimizam o contato célula a célula permaneceram não tumorigênicas por mais de 200 gerações, enquanto linhagens cultivadas sob contato celular intenso passaram a produzir tumores em 30 gerações — e que a propriedade de cultura que mais se correlacionava com a tumorigênese era precisamente a perda da inibição do contato na divisão celular [22]. Trabalhos posteriores identificaram as variáveis específicas envolvidas: focos transformados espontâneos surgem em culturas do tipo 3T3 mantidas em condição de confluência por mais de dez dias, e sua frequência depende do tipo e da concentração do soro utilizado, bem como do histórico de passagens da cultura [23]. O efeito pode ser surpreendentemente rápido — um clone que não produziu focos em cinquenta ensaios consecutivos ao longo de 21 semanas começou a formá-los após apenas dois dias em meio com baixo teor de soro [24]. Essas experiências foram realizadas em linhagens 3T3 derivadas de BALB/c e NIH, e não na própria linhagem 3T3-Swiss albino, mas descrevem uma dependência de regime comum às linhagens de fibroblastos do tipo 3T3 e trazem uma implicação prática concreta: os laboratórios que dependem especificamente da inibição por contato devem trabalhar com números de passagens baixos e documentados, sob condições séricas definidas, evitar manter as culturas em confluência por mais tempo do que o necessário para o ensaio e verificar o fenótipo por conta própria.

A origem fibroblástica dessa linhagem também é diretamente relevante para estudos sobre a remodelação da matriz extracelular, a sinalização das integrinas e a reparação dérmica — proporcionando um contexto fisiológico que linhagens puramente epiteliais ou cancerosas não podem oferecer. Além disso, o extenso catálogo de sublinhagens derivadas da 3T3-Swiss albino amplia o conjunto de ferramentas experimentais à disposição dos pesquisadores nas áreas de adipogênese, oncologia e aplicações de cocultura de células-tronco [25].

Limitações das células 3T3-Swiss albino

Apesar de sua utilidade, as células 3T3-Swiss albino apresentam limitações inerentes decorrentes de sua origem murina e de sua imortalização espontânea. A deriva cariotípica já havia sido documentada no estudo original, no qual as populações passaram da faixa diplóide para a tetraplóide — muitas vezes de forma muito rápida — antes que os cromossomos marcadores surgissem [1]. Essa instabilidade não é exclusiva dessa linhagem: a análise por matriz de SNP de 99 linhagens celulares de camundongo comumente utilizadas revelou evidências de alteração no número de cópias em 42% delas, incluindo 24% das linhagens derivadas de tecido normal, e não de tecido tumoral, o que confirma que a aneuploidia é uma característica generalizada da cultura celular de camundongo, e não específica do câncer [3]. Essa instabilidade genômica significa que os resultados obtidos em altas passagens podem não refletir fielmente as propriedades das células em passagens iniciais, e as comparações entre laboratórios podem ser prejudicadas por variações não detectadas. Os pesquisadores devem, portanto, autenticar seus estoques utilizando métodos STR validados e manter registros consistentes das passagens [2].

Uma limitação relacionada é a prevalência histórica de estoques de células identificadas incorretamente ou contaminadas por cruzamento na comunidade científica, uma questão amplamente documentada no que diz respeito às linhagens celulares de camundongos [3]. Uma armadilha específica e frequentemente ignorada diz respeito à nomenclatura: o 3T3-Swiss albino (CVCL_0120, publicado em 1963) e o NIH 3T3 (CVCL_0594, derivadas de um camundongo suíço do NIH e publicadas em 1969) são frequentemente abreviadas como “3T3” ou “Swiss 3T3” na literatura. Quando um artigo não informa o número de catálogo da coleção de onde as células provêm, muitas vezes não é possível distinguir as duas linhagens sem entrar em contato diretamente com os autores [26]. Essa ambiguidade se estende a grande parte da literatura clássica sobre sinalização resumida a seguir: os relatos que descrevem trabalhos com “Swiss 3T3” raramente especificam a qual linhagem se referem e, portanto, os resultados devem ser interpretados como aplicáveis aos fibroblastos murinos do tipo 3T3, a menos que a fonte identifique a linhagem explicitamente. Como a 3T3-Swiss albino, além disso, não é um isolado clonal, mas uma população policlonal, a heterogeneidade funcional entre lotes de diferentes fontes pode influenciar adicionalmente os resultados experimentais. Por fim, por ser uma linhagem de fibroblastos de camundongo, o 3T3-Swiss albino pode não reproduzir nuances de sinalização relevantes para a biologia humana sem uma validação cuidadosa, e os resultados desse modelo devem ser corroborados em sistemas de células primárias ou in vivo apropriados para a espécie antes que conclusões translacionais sejam tiradas.

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Aplicações

Sinalização de fatores de crescimento e proliferação celular

As células albinas 3T3-Swiss têm servido como um modelo de excelência para a análise das cascatas de sinalização mitogênica desencadeadas por diversos fatores de crescimento e neuropeptídeos. Em trabalhos iniciais de Davies e Ross, as células 3T3-Swiss foram utilizadas juntamente com células do músculo liso aórtico de macaco e células endoteliais aórticas bovinas para demonstrar que a substituição do soro derivado do plasma pelo soro de sangue total ou pelo fator de crescimento derivado de plaquetas parcialmente purificado estimulava marcadamente a pinocitose, bem como a proliferação em culturas quiescentes — uma das primeiras ligações entre o tráfego de membrana induzido por fatores de crescimento e a entrada no ciclo celular, estabelecida principalmente no sistema de células musculares lisas [7]. Estudos subsequentes exploraram o paradigma de retirada de soro/reestimulação para situar moléculas de sinalização individuais em vias ordenadas a jusante da ativação do receptor.

A fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K) emergiu como um nó central nas respostas estimuladas por fatores de crescimento. Johanson e colegas demonstraram que um pool de PI3K p110α, independente da subunidade p85, se colocaliza com a quinase p70 S6 em fibras de estresse de actina e que a atividade da PI3K é necessária para a formação de fibras de estresse induzida por trombina em células Swiss 3T3 [8]. Um papel comparável da PI3K na captação de nutrientes foi descrito por Higaki e Shimokado, que demonstraram que inibidores da PI3K aboliram a captação de aminoácidos estimulada pelo fator de crescimento derivado de plaquetas em células musculares lisas vasculares e relataram um efeito inibidor semelhante em células Swiss 3T3 [9].

A proteína quinase D (PKD) é ativada em células Swiss 3T3 intactas por ésteres de forbol, diacilgliceróis permeáveis às células, briostatina, neuropeptídeos e fatores de crescimento, por meio de um mecanismo dependente de fosforilação e que requer a proteína quinase C. Conforme revisado por Waldron, Iglesias e Rozengurt, a mutagênese dos resíduos da alça de ativação — serina 744 e serina 748 — em construções de PKD expressas em células COS-7 demonstrou diretamente que a fosforilação mediada pela PKC desses dois resíduos está na base da ativação da PKD [10]. Paralelamente, Lim e colegas demonstraram que as isoformas atípicas da PKC, PKCλ e PKCζ, associam-se à proteína de ligação FRS2 em células Swiss 3T3 estimuladas com fator de crescimento fibroblástico básico, colocando a PKC atípica dentro do complexo de sinalização do receptor do fator de crescimento fibroblástico [6].

Dinâmica do citoesqueleto e sinalização das GTPases da família Rho

A capacidade de resposta do citoesqueleto das células 3T3-Swiss albinas a estímulos definidos tornou-as um modelo fundamental para a pesquisa sobre as GTPases da família Rho. Ohta e colegas demonstraram que a pequena GTPase RalA, relacionada ao Ras, se liga à filamina de maneira específica para o GTP e induz a formação de filópodes ricos em actina na superfície das células Swiss 3T3, recrutando a filamina para o citoesqueleto dos filópodes [11]. Fundamentalmente, a RalA dominante-negativa ou o domínio de ligação à RalA da filamina bloquearam a formação de filópodes induzida pela Cdc42, posicionando a RalA como um intermediário a jusante na reorganização do citoesqueleto mediada pela Cdc42. Da mesma forma, Granés e colegas demonstraram, em estudos de transfecção em células COS-1 e Swiss 3T3, que a superexpressão do proteoglicano transmembranar de heparano sulfato sindecano-2 induziu longas estruturas semelhantes a filópodes por meio de um mecanismo dependente da Cdc42 ativa [12].

Demonstrou-se que tanto a bombesina quanto o fator de crescimento derivado de plaquetas induzem a associação entre a quinase de adesão focal (FAK) e membros da família Src em células Swiss 3T3, mas por vias distintas. A resposta à bombesina era detectável em até um minuto após a estimulação, atingia o pico após dez minutos e ocorria independentemente do ^Ca²⁺ e da fosfatidilinositol 3'-quinase, enquanto a resposta a baixas concentrações do fator de crescimento derivado de plaquetas exigia a PI3K; ambas dependiam da integridade da rede de filamentos de actina [4]. Hotchin e colegas utilizaram células Swiss 3T3 juntamente com fibroblastos BHK para analisar as contribuições distintas do nono e décimo domínios da fibronectina tipo III (FIII) para a fosforilação da FAK e a ativação de Rho/Rac, demonstrando que o FIII10 sustenta a adesão celular sem induzir a fosforilação da FAK [13]. Li e colegas mapearam bioquimicamente as regiões de Cdc42 específicas para PAK1, WASP e IQGAP1 e, em seguida, microinjetaram quimeras de Cdc42/RhoA em células Swiss 3T3 privadas de soro, revelando que o domínio switch I fornece determinantes essenciais para a ligação dos efetores, enquanto cada efetor é reconhecido por meio de um mecanismo distinto [14].

Verificou-se que o estado de fosforilação da WAVE, uma proteína da família WASP que medeia o franzimento da membrana a jusante da Rac, aumentava em células Swiss 3T3 estimuladas com fator de crescimento derivado de plaquetas, e essa hiperfosforilação foi inibida pelo inibidor de MEK PD98059 [15]. Martelli e colegas demonstraram que a estimulação dependente do fator de crescimento semelhante à insulina tipo I (IGF-I) da atividade da fosfolipase C-β1 nuclear exigia um citoesqueleto de microtúbulos intacto, uma vez que a perturbação com colchicina aboliu o aumento do diacilglicerol nuclear sem afetar a fosforilação do receptor de IGF-I ou a atividade da PI3K [5]. Critchley e colegas revisaram a ligação integrina-actina envolvendo talina, α-actinina, filamina e vinculina, e relataram que experimentos em células Swiss 3T3 permeabilizadas com estreptolisina-O implicam a proteína de ligação a GTP ARF-1 no direcionamento da paxilina para as adesões focais [16].

Regulação do ciclo celular

O comportamento de crescimento inibido por contato das células 3T3-Swiss albinas as posicionou como um modelo clássico para estudos do ciclo celular. Wang e colegas fizeram a surpreendente observação de que, em experimentos de fracionamento subcelular, o inibidor da quinase dependente de ciclina ^p27^Kip1 foi encontrado exclusivamente no citosol das células Swiss/3T3 durante toda a fase G1 e no início da fase S, em vez de no núcleo, como se supunha [17]. Após a estimulação sérica de células quiescentes, ^{o p27Kip1} citosólico diminuiu acentuadamente no final da fase G1, o que coincidiu com um aumento nos níveis nucleares tanto de Cdk2 quanto de ciclina E.

O sistema de células Swiss 3T3 quiescentes permitiu aos autores demonstrar que a Cdk2 inativa se coprecipita com a ^p27Kip1 em células quiescentes, enquanto a estimulação sérica ativa tanto a Cdk2 nuclear quanto a citosólica à medida que a ^p27Kip1 diminui; ^{a p27Kip1} superexpressa acumulou-se no núcleo e bloqueou a entrada da Cdk2 [17]. Com base nisso, os autores propuseram que ^{a p27Kip1} citosólica desempenha um papel funcional na progressão do ciclo celular, possivelmente ao restringir a importação nuclear dos complexos ciclina E-Cdk2 — um modelo de compartimentação que opera em conjunto com o controle translacional e mediado pelo proteassoma da abundância de ^p27Kip1. A capacidade de sincronizar células 3T3-Swiss albinas de maneira reproduzível por privação de soro continua sendo fundamental para a validade experimental dessas descobertas.

Cicatrização de feridas e testes de biomateriais

A identidade fibroblástica e o crescimento inibido por contato das células 3T3-Swiss albino as tornam um modelo de referência padrão na pesquisa sobre cicatrização de feridas e na avaliação da biocompatibilidade de biomateriais. Um estudo particularmente esclarecedor investigou a eficácia do resveratrol (RES) no processo de cicatrização de feridas utilizando fibroblastos 3T3-Swiss Albino como modelo celular primário [19]. O estresse oxidativo foi induzido por peróxido de hidrogênio, e doses de RES variando de 1 a 100 µM foram aplicadas por até 48 horas para avaliar os efeitos sobre a proliferação celular, a migração e os níveis de estresse oxidativo — determinantes-chave da eficiência do fechamento da ferida.

Nesse estudo, o peróxido de hidrogênio reduziu o índice de proliferação, enquanto a aplicação de resveratrol o aumentou, diminuiu os níveis de estresse oxidativo e melhorou as taxas de migração e a preservação ultraestrutural; notavelmente, não foi detectada diferença na expressão do mRNA do colágeno I (COL1A2), indicando que o benefício observado não foi mediado pelo aumento da transcrição do colágeno [19]. O uso de células 3T3-Swiss albinas nesse contexto reflete sua aceitação como uma linhagem representativa de fibroblastos normais, em relação à qual as intervenções de cicatrização de feridas podem ser avaliadas. Triagens comparáveis de citocompatibilidade sustentam o desenvolvimento de curativos para feridas: um hidrogel de alginato contendo extrato glicólico de calêndula, por exemplo, foi inicialmente avaliado quanto à viabilidade celular em fibroblastos 3T3 por meio dos ensaios MTT e SRB antes de ser testado em um modelo de ferida incisional em ratos, onde melhorou o fechamento da ferida e a deposição de colágeno [21].

A linhagem também é utilizada como substrato de referência em testes de genotoxicidade. Um estudo comparativo do ensaio cometa, utilizando explicitamente a linhagem 3T3-Swiss albino, avaliou a cinética de reparo do DNA em função do tempo após a exposição a seis agentes genotóxicos comumente utilizados — peróxido de hidrogênio, bromato de potássio, metanossulfonato de etila, metanossulfonato de metila, N-etil-N-nitrosoureia e etoposídeo — e identificou perfis de reparo específicos para cada agente, com os danos induzidos pelo peróxido de hidrogênio e pelo EMS sendo reparados rapidamente, enquanto as lesões induzidas pela ENU e pelo etoposídeo persistiram por mais de 24 horas [20]. Estudos desse tipo fornecem os dados de referência necessários para padronizar e validar o ensaio de cometa in vitro para testes regulatórios de genotoxicidade.

Vesículas Extracelulares e Tecnologias Emergentes

As células 3T3-Swiss albino assumiram um papel importante como referência de células normais em estudos sobre a biologia das vesículas extracelulares (EV). Fukuta e colegas utilizaram células de melanoma murino B16F1 juntamente com células 3T3 Swiss Albino como linhagens representativas de células cancerosas e normais, respectivamente, para investigar se a estimulação elétrica de baixa intensidade (0,34 mA/cm) poderia aumentar a secreção de EV a partir de células em cultura [18]. Esse desenho experimental emparelhado foi essencial para distinguir as respostas celulares gerais à estimulação elétrica dos efeitos específicos das células cancerosas na liberação de EV. O tratamento elétrico aumentou o número de partículas de EV em ambas as linhagens — 1,7 vezes nas células 3T3 Swiss Albino e 1,26 vezes nas células B16F1 — sem citotoxicidade aparente [18].

O desenho emparelhado também revelou uma diferença mecanicista entre os dois tipos de células: a inibição farmacológica da Rho GTPase suprimiu o aumento induzido eletricamente na secreção de EV na linhagem de melanoma de maneira dependente da dose, mas teve pouco efeito nas células 3T3 Swiss Albino, indicando que os requisitos de sinalização subjacentes não são idênticos em células cancerosas e normais [18]. Os marcadores representativos de exossomos CD9, HSP70 e CD81 foram detectados nos EV de ambas as linhagens e permaneceram essencialmente inalterados pelo tratamento (sendo o HSP70 consistentemente baixo nos EV derivados de 3T3), o que — juntamente com uma razão partícula/proteína inalterada — sugere que o tratamento aumentou a quantidade de EV sem alterar sua qualidade. À medida que a pesquisa com EV se expande para a administração terapêutica, a descoberta de biomarcadores e a comunicação celular, a disponibilidade de uma linhagem de fibroblastos bem validada e não derivada de tumor, como a 3T3-Swiss albino, torna-se cada vez mais valiosa para contextualizar resultados de modelos de células cancerosas ou modificadas geneticamente.

Conclusão

As células 3T3-Swiss albino constituem uma das linhas de fibroblastos murinos mais versáteis e historicamente significativas à disposição da comunidade científica. Desde trabalhos fundamentais sobre a pinocitose e a proliferação mediadas pelo fator de crescimento derivado de plaquetas até investigações atuais sobre a secreção de vesículas extracelulares potencializada por eletricidade de baixa intensidade [18], essa linhagem espontaneamente imortalizada tem comprovado continuamente sua relevância em diversas disciplinas. Sua alternância bem definida entre quiescência e proliferação, ampla responsividade a mitógenos, plasticidade do citoesqueleto e aceitação como referência de célula normal para ensaios de cicatrização de feridas e de biomateriais garantem que as células 3T3-Swiss albino continuarão sendo fundamentais para a biologia celular nos próximos anos — desde que os lotes sejam autenticados por perfil de STR, que os históricos de passagem sejam documentados e que o regime de cultura seja escolhido deliberadamente nos casos em que o fenótipo de inibição de contato seja relevante para o experimento. Pesquisadores que buscam uma fonte confiável e autenticada de células 3T3-Swiss albino para seu próximo estudo de sinalização, citoesqueleto ou cicatrização de feridas são incentivados a explorar as especificações do produto e fazer um pedido em cytion.com.

Publicações importantes

1. TODARO GJ, GREEN H (1963) Estudos quantitativos do crescimento de células embrionárias de camundongo em cultura e seu desenvolvimento em linhagens estabelecidas. The Journal of Cell Biology. PMID: 13985244
2. Almeida JL, Dakic A, Kindig K (2019) Estudo interlaboratorial para validar um método de perfilagem de STR para identificação intraespecífica de linhagens celulares de camundongo. PloS one. PMID: 31220119
3. Didion JP, Buus RJ, Naghashfar Z (2014) O perfil de matrizes de SNPs de linhagens celulares de camundongo identifica suas cepas de origem e revela contaminação cruzada e aneuploidia generalizada. BMC Genomics. PMID: 25277546
4. Salazar EP, Rozengurt E (1999) A bombesina e o fator de crescimento derivado de plaquetas induzem a associação da quinase de adesão focal endógena com a Src em células Swiss 3T3 intactas. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10497197
5. Martelli AM, Cocco L, Bareggi R (1999) A estimulação dependente do fator de crescimento semelhante à insulina tipo I da atividade da fosfolipase C-beta1 nuclear em células Swiss 3T3 requer um citoesqueleto intacto e é acompanhada por aumento da fosforilação da fosfolipase. Journal of Cellular Biochemistry. PMID: 10022515
6. Lim YP, Low BC, Lim J (1999) Associação de isótipos atípicos da proteína quinase C com a proteína de ligação FRS2 na sinalização do fator de crescimento fibroblástico. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10383403
7. Davies PF, Ross R (1978) Mediação da pinocitose em células musculares lisas arteriais e endoteliais em cultura pelo fator de crescimento derivado de plaquetas. The Journal of Cell Biology. PMID: 103882
8. Johanson SO, Naccache PA, Crouch MF (1999) Uma PI-3-quinase p110alfa independente da subunidade p85 se colocaliza com a quinase p70 S6 nas fibras de estresse de actina e regula a formação de fibras de estresse estimulada pela trombina em células Swiss 3T3. Experimental Cell Research. PMID: 10094829
9. Higaki M, Shimokado K (1999) A fosfatidilinositol 3-quinase é necessária para a captação de aminoácidos induzida por fatores de crescimento pelas células do músculo liso vascular. Arteriosclerose, trombose e biologia vascular. PMID: 10479654
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17. Wang G, Miskimins R, Miskimins WK (1999) O inibidor da quinase dependente de ciclina p27Kip1 está localizado no citosol em células Swiss/3T3. *Oncogene*. PMID: 10498870
18. Fukuta T, Nishikawa A, Kogure K (2019) A eletricidade de baixa intensidade aumenta a secreção de vesículas extracelulares por células cultivadas. Relatórios de Bioquímica e Biofísica. PMID: 31828227
19. Kaleci B, Koyuturk M (2020) Eficácia do resveratrol no processo de cicatrização de feridas por meio da redução do estresse oxidativo e da promoção da proliferação e migração de fibroblastos. Terapia Dermatológica. PMID: 32996685
20. İpek Tekneci S, Üstündağ A, Duydu Y (2025) Cinética de reparo de DNA específica para cada agente em células 3T3: um estudo comparativo utilizando o ensaio cometa in vitro. Pesquisa em toxicologia. PMID: 41399455
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25. Entrada no Cellosaurus: 3T3-Swiss albino (RRID:CVCL_0120). SIB – Instituto Suíço de Bioinformática. cellosaurus.org/CVCL_0120
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