Introdução

Células Ba/F3, também conhecida pelos sinônimos BA/F3, BaF3, BAF3 e Baf3 (número de acesso no Cellosaurus: CVCL_0161), é uma linhagem de células pro-B murinas dependentes da interleucina-3 (IL-3), derivada da medula óssea. A linhagem foi descrita pela primeira vez por Palacios e Steinmetz em 1985, entre um conjunto de clones da medula óssea que se proliferavam continuamente, dependentes de IL-3, portadores do marcador de linhagem de células B B-220 e que mantinham seus genes de imunoglobulina na configuração da linha germinativa. ^[19] Embora inicialmente tenha sido relatado que ela se originava de um camundongo BALB/c, uma análise posterior por matriz de SNPs confirmou que a linhagem, na verdade, é derivada de um camundongo C3H. ^[1] Desde o seu desenvolvimento, as células Ba/F3 tornaram-se um dos sistemas-modelo mais amplamente utilizados na pesquisa sobre sinalização hematopoiética e na descoberta de medicamentos oncológicos. Sua dependência estrita da IL-3 para sobrevivência e proliferação as torna uma plataforma excepcionalmente pura: a introdução de uma quinase oncogênica ou proteína de fusão torna as células independentes do fator, proporcionando uma leitura poderosa e quantificável. Os pesquisadores exploram rotineiramente essa propriedade para caracterizar proteínas de fusão BCR-ABL, mutações no FLT3, fusões do JAK2 e muitos outros oncogenes de quinase clinicamente relevantes, bem como para traçar o perfil de inibidores de quinase de moléculas pequenas em formatos de alto rendimento.

Principais conclusões

• Ba/F3 é uma linhagem de células pro-B murinas dependentes de IL-3, derivada da medula óssea do camundongo C3H, catalogada no banco de dados Cellosaurus sob o número de acesso CVCL_0161.
• A retirada da IL-3 proporciona um ensaio de seleção rigoroso: as células parentais morrem, enquanto as células que expressam uma quinase oncogênica ativa — ou qualquer outra construção que forneça um sinal de crescimento constitutivo — sobrevivem e proliferam.
• Essa linhagem tem sido amplamente utilizada para estudar proteínas de fusão BCR-ABL, mutações no FLT3, a via de sinalização JAK–STAT e a biologia dos receptores de citocinas.
• As células Ba/F3 estão cada vez mais adaptadas à triagem de inibidores de quinase em alta produtividade, tornando-se um pilar fundamental na descoberta de medicamentos direcionados contra o câncer. ^[2]
• Centenas de linhagens celulares derivadas, portadoras de mutações oncogênicas definidas, foram geradas a partir da Ba/F3, abrangendo EGFR, ALK, ROS1, RET, NTRK, FLT3 e muitos outros alvos clinicamente relevantes.

O que é Ba/F₃?

Ba/F3 é uma linhagem de células pro-B murinas dependentes de fator, estabelecida a partir da medula óssea de camundongos C3H; o sexo e a idade do doador não estão registrados nos dados do Cellosaurus para essa linhagem. A linhagem parental não apresenta mutações conhecidas em quinases ativadoras e requer IL-3 exógena para sobreviver. Seu tempo de duplicação é de aproximadamente 20 horas em condições padrão de cultura. A principal característica definidora da linhagem é sua estrita dependência de IL-3, o que significa que qualquer manipulação genética que confira crescimento independente de fatores pode ser detectada de forma rápida e inequívoca. Essa propriedade, combinada com a ausência de mutações endógenas de quinase que possam causar confusão, tornou as células Ba/F3 uma ferramenta indispensável para analisar o potencial oncogênico de fusões de quinase, mutações pontuais e moléculas de sinalização constitutivamente ativas na biologia de tumores hematopoiéticos e sólidos. Deve-se observar que a ausência de uma anotação de mutação não equivale a um fundo genético intacto: o Cellosaurus também registra dados de variação derivados de matrizes de SNP para essa linhagem.

A análise por matriz de SNP corrigiu uma atribuição equivocada de longa data quanto à origem dessa linhagem. A literatura inicial descrevia o Ba/F3 como derivado de um camundongo BALB/c, mas a análise genômica confirmou sua origem C3H. ^[1] Das 99 linhagens celulares de camundongo examinadas nesse estudo, a Ba/F3 foi a única cujo perfil genético não correspondia à linhagem de origem relatada; a discrepância foi confirmada de forma independente pelo RIKEN, distribuidor da linhagem, e uma comparação morfológica com outras linhagens derivadas da C3H indicou que a Ba/F3 é uma linhagem celular distinta, e não o resultado de contaminação cruzada. Essa descoberta ressalta a importância da autenticação rotineira de linhas celulares, particularmente para linhas de camundongos, nas quais o perfil de STR por si só pode ser insuficiente para distinguir linhagens endogâmicas. Pesquisadores que utilizam a Ba/F3 devem fazer referência ao número de acesso CVCL_0161 do Cellosaurus para garantir uma identificação inequívoca em publicações.

Informações sobre cultura celular

Vantagens das células de Ba/F₃

A vantagem mais significativa das células Ba/F3 é seu mecanismo binário de sobrevivência dependente de IL-3. Na ausência de IL-3, as células Ba/F3 parentais sofrem apoptose rapidamente. A introdução de uma quinase oncogênica ou de uma proteína de fusão resgata as células da morte, permitindo a seleção direta de clones transformados de forma estável, sem a necessidade de complexas construções repórteres. Essa propriedade tem sido aproveitada em diversos formatos de ensaio, desde os clássicos ensaios de sobrevivência de colônias até as modernas triagens de proliferação de alto rendimento para o perfil de compostos. ^[2] A simplicidade e a robustez da leitura tornam os ensaios baseados em Ba/F₃ um sistema de primeira linha amplamente utilizado para classificar a potência dos inibidores de quinase, embora os valores absolutos de potência continuem dependendo do ensaio e do laboratório e devam ser comparados entre estudos com cautela. ^[21]

As células Ba/F3 também são geneticamente maleáveis e fáceis de transfectar ou transduzir. A introdução de construções de expressão por meio de retrovírus, lentivírus e eletroporação produz, de forma eficiente, sublinhagens com expressão estável. Isso permitiu a geração de centenas de linhagens derivadas portadoras de mutações clinicamente relevantes em alvos como EGFR, FLT3, BCR-ABL, EML4-ALK e RET, entre muitos outros. A ausência de mutações endógenas de quinases que possam causar confusão na linhagem parental garante que as respostas fenotípicas sejam atribuíveis especificamente ao transgene introduzido. Além disso, o tempo de duplicação de aproximadamente 20 horas permite um rápido rendimento experimental, reduzindo consideravelmente os prazos dos ensaios em comparação com culturas de células primárias de crescimento mais lento.

A plataforma Ba/F3 provou ser excepcionalmente adequada para aplicações de descoberta de sequências de sinalização. Kojima e Kitamura utilizaram uma construção de receptor de citocina constitutivamente ativo para redirecionar a dependência de crescimento das células Ba/F3 para a localização na superfície celular de proteínas portadoras de peptídeos sinalizadores, permitindo a triagem em larga escala de cDNA para identificar produtos gênicos secretados e direcionados à membrana. ^[3] Essa aplicação criativa ilustra como a dependência das células Ba/F3 em relação à IL-3 pode ser aproveitada muito além dos estudos simples sobre oncogenes de quinase, estabelecendo a linhagem como uma plataforma versátil de triagem genética.

Limitações das células Ba/F3

Apesar de suas inúmeras vantagens, as células Ba/F3 apresentam limitações biológicas inerentes que devem ser levadas em consideração na interpretação dos dados experimentais. Por se tratarem de uma linhagem de células pro-B murinas, elas não possuem muitos adaptadores de sinalização e co-receptores presentes nas células cancerosas humanas. Os valores de potência dos inibidores e as respostas de sinalização a jusante observadas nas células Ba/F3 podem não refletir com precisão a atividade em células tumorais humanas primárias ou em material derivado de pacientes. Pesquisadores que estudam a resistência a terapias direcionadas para o adenocarcinoma de pulmão, por exemplo, devem validar os resultados baseados nas células Ba/F3 em modelos de células humanas mais fisiologicamente relevantes antes de tirar conclusões clínicas.

A origem genômica dessa linhagem também tem sido alvo de interpretações equivocadas. Durante décadas, a linhagem Ba/F3 foi atribuída à linhagem BALB/c, mas a análise por matriz de SNPs demonstrou que ela se origina de um camundongo C3H. ^[1] O mesmo estudo encontrou evidências de aneuploidia em cerca de 42% das linhagens celulares murinas examinadas, incluindo uma fração substancial de linhagens derivadas de tecido normal, e não de tecido tumoral; a própria linhagem Ba/F3 foi identificada como tendo sofrido um erro de identificação, e não por alteração no número de cópias, mas o achado geral ilustra com que facilidade a deriva cariotípica se acumula em cultura. Essa instabilidade em números elevados de passagens poderia influenciar os resultados de sinalização, as medições de sensibilidade a medicamentos e a reprodutibilidade dos fenótipos transformados. Os pesquisadores devem, portanto, trabalhar com baixos números de passagens e autenticar seus estoques rotineiramente.

Por fim, as células Ba/F3 não reproduzem integralmente o microambiente tumoral nem as interações estromais presentes nas neoplasias hematológicas. Elas também não apresentam expressão endógena de muitos componentes de sinalização humanos, o que significa que as interações com co-receptores importantes para a função dos oncogenes podem estar ausentes ou apresentar divergências. Estudos sobre receptores complexos de citocinas com múltiplas subunidades ou receptores que requerem sinalização dependente de glicosilação podem necessitar de sistemas celulares humanos complementares para se chegar a conclusões biologicamente válidas. Apesar dessas ressalvas, as células Ba/F3 continuam sendo uma ferramenta de primeira linha poderosa e amplamente aceita na biologia das quinases.

Veja as especificações completas e faça seu pedido

Aplicações

Descoberta de medicamentos direcionados a quinases e triagem de oncogenes

As células Ba/F3 tornaram-se a plataforma celular dominante para a descoberta de medicamentos direcionados às quinases. Warmuth e colegas apresentaram uma avaliação abrangente do sistema Ba/F3 para esse fim, descrevendo como o ensaio de independência de IL-3 pode ser adaptado a formatos de alto rendimento para avaliar tanto a potência oncogênica das mutações nas quinases quanto a capacidade dos inibidores de quinases de moléculas pequenas de reverter o crescimento independente de fatores. ^[2]A revisão destacou que as células Ba/F3 acomodam uma variedade notável de quinases oncogênicas, tornando-as uma plataforma universal para o perfil inicial de variantes do quinoma associadas ao câncer antes de se passar para modelos de células humanas mais complexos.

A armadilha de sequência de sinal desenvolvida por Kojima e Kitamura demonstrou que as células Ba/F3 podem ser utilizadas não apenas para estudos de oncogenes de quinases, mas também para a triagem funcional de bibliotecas de cDNA. ^[3]Ao acoplar um receptor de citocina constitutivamente ativo à função do peptídeo sinalizador, um único experimento piloto rendeu 150 clones já conhecidos — todos codificando proteínas secretadas ou de superfície celular —, além de 48 novos clones de cDNA, incluindo proteínas de membrana do tipo II que haviam escapado de estratégias anteriores de armadilha de sequência de sinal. Essa abordagem ilustra a escalabilidade da plataforma Ba/F3 além da validação clássica de alvos farmacológicos.

A extrema diversidade de linhagens derivadas de Ba/F3 agora catalogadas no Cellosaurus — abrangendo centenas de variantes de EGFR, fusões de ALK, rearranjos de RET, fusões de NTRK e mutações de resistência — ressalta como a linhagem parental Ba/F3 se tornou uma base fundamental para a pesquisa em oncologia de precisão. Cada linha derivada preserva o fundo genético puro dependente de IL-3 ao mesmo tempo em que adiciona uma única variável genética definida, possibilitando estudos sistemáticos da relação estrutura-atividade no nível celular.

Mutações no FLT3 e leucemia mieloide aguda

Uma das aplicações de maior impacto das células Ba/F3 tem sido a caracterização das mutações no FLT3 (tirosina quinase 3 semelhante à fms) na leucemia mieloide aguda (LMA). A duplicação em tandem interna do FLT3 está entre as lesões oncogênicas mais frequentes na LMA, relatada em cerca de 20% a 30% dos casos, dependendo da coorte e do método de detecção. ^[4][20]Hayakawa e colegas demonstraram que o FLT3 com duplicação em tandem, introduzido nas duas linhagens dependentes de IL-3 — 32D e Ba/F3 —, ativa constitutivamente tanto o STAT5 quanto a MAP quinase e confere crescimento autônomo e independente da IL-3, enquanto o FLT3 do tipo selvagem promovia apenas uma proliferação mínima, mesmo sob estimulação contínua do ligante.^[4] Esse estudo marcante estabeleceu as células Ba/F3 como um sistema de ensaio funcional primário para a validação de mutações no FLT3 e continua sendo uma referência metodológica para a área.

Trabalhos subsequentes se basearam amplamente nessa base. Estudos sobre a fucosilação do núcleo demonstraram que o knockout do gene Fut8 por CRISPR/Cas9 em células Ba/F3 que expressavam FLT3 do tipo selvagem foi suficiente para induzir a proliferação independente de IL-3 — um efeito não observado nas células parentais — acompanhada por aumento da fosforilação da tirosina e ativação de STAT5, AKT e ERK, bem como pela dimerização do FLT3 independente de ligante.^[20] Isso revelou uma camada de regulação por glicosilação até então não reconhecida para esse receptor. A resistência ao inibidor de FLT3 gilteritinibe também foi investigada em modelos Ba/F3 FLT3-ITD, nos quais a resistência em concentrações do fármaco clinicamente alcançáveis normalmente exigia múltiplas mutações secundárias, várias delas não relatadas anteriormente. ^[21]O mesmo trabalho avaliou sistematicamente os pontos fortes e as limitações dos modelos Ba/F3 FLT3-ITD, observando que, embora a plataforma seja adequada para identificar e classificar mutações de resistência, ela não reproduz o complexo nicho da medula óssea que determina a resistência nos pacientes.

Biologia do BCR-ABL e leucemia mieloide crônica

As células Ba/F3 transfectadas com proteínas de fusão BCR-ABL têm sido fundamentais para a compreensão da biologia molecular da leucemia mieloide crônica (LMC). Canitrot e colegas utilizaram células Ba/F3 que expressam as isoformas p190 e p210 do BCR-ABL para demonstrar que o BCR-ABL confere um fenótipo mutador, aumentando a frequência de mutações espontâneas de três a cinco vezes em comparação com as células parentais, e que essa instabilidade genômica estava associada ao aumento da expressão da DNA polimerase beta. ^[6]Essa descoberta forneceu um mecanismo pelo qual o BCR-ABL poderia impulsionar a progressão da doença da fase crônica da LMC para a leucemia mieloide aguda.

A proteína adaptadora CRKL, uma das principais fosfoproteínas de tirosina nos neutrófilos leucêmicos de pacientes com LMC, foi estudada em células Ba/F3 por Uemura e colegas. ^[7]Células que superexpressavam a CRKL de comprimento total apresentaram maior adesão à fibronectina e morfologia alterada em superfícies revestidas com fibronectina, ao passo que mutantes de deleção sem o domínio SH2 ou o domínio SH3 N-terminal não apresentaram esses efeitos — indicando que ambos os domínios são necessários para o efeito. A adesão foi bloqueada por um anticorpo anti-integrina beta1, embora a superexpressão de CRKL não tenha alterado a expressão de integrina beta1 na superfície nem induzido espontaneamente seu epítopo de ativação. Esses experimentos implicam a CRKL em vias de sinalização que regulam a adesão mediada por integrinas a jusante do BCR-ABL.

Em conjunto, esses estudos com o BCR-ABL exemplificam como as células Ba/F3 permitem uma análise clara da sinalização impulsionada por oncogenes, eliminando a complexidade da atividade endógena das quinases. A plataforma continua a apoiar a caracterização de mutações de resistência a inibidores de BCR-ABL, com linhagens dedicadas de Ba/F3 BCR-ABL e derivadas de BCR-ABL-T315I agora disponíveis para o perfil direto de inibidores no contexto de genótipos de resistência clinicamente relevantes.

Vias de sinalização JAK–STAT

As células Ba/F3 têm servido como modelo principal para analisar quais eventos de sinalização a jusante dos receptores de citocinas são realmente necessários para o crescimento. Liu e colegas construíram uma molécula quimérica (beta/JAK2) composta pelas regiões extracelular e transmembranar da beta-c, fundidas à JAK2, e a expressaram em células Ba/F3. ^[8]A molécula quimérica estava constitutivamente fosforilada e era suficiente para promover a sobrevivência e a proliferação independentes da IL-3. Notavelmente, STAT5, Shc e SHP-2 não estavam fosforilados nessas células, e a atividade dos promotores da beta-caseína e do c-fos não estava aumentada, enquanto a transcrição do c-myc estava constitutivamente ativada. Os autores concluíram que a ativação do JAK2, por si só, é suficiente para a sobrevivência e a proliferação e que a ativação do STAT5 e da MAP quinase não é necessária para esses resultados específicos — um lembrete útil de que o crescimento independente de fatores nas células Ba/F3 não implica, por si só, a ativação do STAT.

O papel do STAT5 na sinalização do IFN-alfa foi examinado em células Ba/F3 por Jaster e colegas, que demonstraram que o IFN-alfa ativa a ligação do STAT5A e do STAT5B ao DNA, mas que a IL-3 é um indutor muito mais potente de ambas as isoformas. ^[9]Um mutante JAK2 dominante-negativo suprimiu a ativação do STAT5 induzida pela IL-3, mas não a induzida pelo IFN-alfa, revelando que as duas citocinas acionam mecanismos a montante independentes para convergir no mesmo fator de transcrição; os autores, no entanto, concluíram que o STAT5 não é essencial para a sinalização do IFN-alfa nesse sistema.

A ativação constitutiva do JAK–STAT foi modelada em células Ba/F3 utilizando a proteína de fusão TEL–JAK2, uma fusão oncogênica associada à leucemia linfoblástica aguda de células T. Ho e colegas demonstraram que a fusão do domínio pontiagudo da TEL com o domínio funcional da quinase JAK2 (JH1) tornou as células Ba/F3 independentes de fatores, ao passo que a fusão com o domínio da pseudocinase (JH2) ou com um domínio JH1 quinase-inativo não o fez; as construções ativas induziram a fosforilação constitutiva da tirosina em STAT1, STAT3 e STAT5.^[5] Mais recentemente, descobriu-se que o metotrexato suprime a fosforilação de STAT3 e STAT5 por TEL–JAK2, STAT3 e STAT5 em células Ba/F3 por meio de um mecanismo dependente do metabolismo do folato: o efeito foi revertido pelo ácido folínico, reproduzido pelo nocaute de di-hidrofolato redutase por CRISPR/Cas9 e não imitado pelo 5-fluorouracil. ^[22]

A sinalização da IL-4 por meio do STAT6 foi investigada por Gingras e colegas, que demonstraram que os coativadores p300/CBP são necessários para a indução transcricional mediada pelo STAT6 e que a superexpressão de p300/CBP potencializa a atividade do gene repórter induzida pela IL-4. ^[10]A maior parte desse trabalho foi realizada em células COS7 e HeLa; as células Ba/F3 forneceram a evidência endógena fundamental, a saber, a coimunoprecipitação do STAT6 nativo juntamente com o CBP.

Sinalização de receptores de citocinas e biologia das células hematopoiéticas

O sistema de receptores de GM-CSF/IL-3/IL-5 foi amplamente mapeado utilizando células Ba/F3. Itoh e colegas realizaram uma análise mutacional sistemática dos oito resíduos de tirosina citoplasmáticos da subunidade beta comum (betac), expressando uma série de mutantes de tirosina para fenilalanina juntamente com a subunidade alfa humana do tipo selvagem em células Ba/F3 para determinar quais resíduos medeiam saídas específicas de sinalização. ^[12]Ao revisar uma série paralela de mutagênese, Okuda e colegas relataram que a mutação de todas as oito tirosinas citoplasmáticas no GMR-beta reduziu a fosforilação do próprio receptor, da SHP2 e da SHC, mas não inibiu a sinalização proliferativa de curto prazo nem a fosforilação de JAK2 e STAT5, ilustrando uma hierarquia das funções dos domínios do receptor. ^[13]Demonstrou-se que a tirosina quinase do receptor RON ativa a via do receptor beta da IL-3 em células Ba/F3 para induzir alterações morfológicas envolvendo a redistribuição da F-actina e mudanças únicas na forma nuclear, revelando uma interação entre os sistemas de tirosina quinase do receptor e de receptores de citocinas. ^[14]

Os requisitos dos subdomínios do receptor também foram analisados para o receptor de IL-2. Utilizando linhagens Ba/F3 transfectadas, Hunt e colegas identificaram o domínio ácido e a região rica em serina próxima à membrana da cadeia beta do receptor de IL-2 como necessários para a ativação das MAP-quinases p38 e p54, com a Tyr338 — o local de ligação ao Shc — atuando como um intermediário crítico. ^[11]Como o domínio ácido é dispensável para a proliferação induzida pela IL-2, os autores concluíram que nem a ativação da MAP quinase p38 nem da p54 é, de fato, necessária para o crescimento das células Ba/F3 induzido pela IL-2, uma dissociação que também se aplicou às células T primárias.

A regulação do ciclo celular em progenitores hematopoiéticos também foi estudada utilizando células Ba/F3. Mahmud e colegas demonstraram que o TGF-beta1 retardava a progressão da fase G1 para a fase S nas células Ba/F3, associando essa desaceleração do crescimento à regulação positiva da proteína Bcl-2 e do inibidor de CDK p27. ^[15]A sinergia da IL-4 com o Raf-1 ativado para impulsionar a proliferação de longo prazo das células Ba/F3 foi estudada por Levings e colegas, que descobriram que a IL-4, por si só, não era capaz de sustentar o crescimento, mas podia cooperar com o Ras ou o Raf-1 ativados para manter uma proliferação contínua comparável à induzida pela IL-3. ^[16]

Sistemas de comutação de receptores modificados geneticamente têm explorado a dependência das células Ba/F3 em relação à IL-3 para aplicações em terapia gênica. Kume e colegas desenvolveram um receptor de G-CSF fundido à girase B bacteriana (GcrGyr), no qual o antibiótico dimerizante coumermicina desencadeou a proliferação de Ba/F3 independente de IL-3, servindo como um sistema genético amplificador seletivo de prova de conceito para a expansão de células hematopoiéticas geneticamente modificadas. ^[17]Da mesma forma, demonstrou-se que uma proteína de fusão entre a IL-11 e o receptor solúvel da IL-11 atua como um superagonista em células Ba/F3 transfectadas com gp130, que não possuem o receptor alfa da IL-11 ligado à membrana, comprovando que componentes do receptor solúvel podem substituir funcionalmente as subunidades transmembranares. ^[18]

Conclusão

As células Ba/F3 (CVCL_0161) representam uma das plataformas de linhagens celulares murinas mais versáteis e amplamente validadas na pesquisa biomédica moderna. Sua estrita dependência de IL-3 proporciona um ensaio funcional elegante e reproduzível para quinases oncogênicas — incluindo proteínas de fusão BCR-ABL, mutações em FLT3, e fusões de JAK2 — e para inibidores de quinases de moléculas pequenas com relevância clínica para a leucemia mielóide crônica, leucemia mielóide aguda, leucemia linfoblástica de células precursoras-linfoma e adenocarcinoma de pulmão. Décadas de pesquisa estabeleceram a sinalização JAK–STAT, a biologia dos receptores de citocinas e a regulação das células hematopoiéticas como domínios centrais da aplicação das células Ba/F3. A adaptabilidade dessa linhagem permitiu a criação de centenas de modelos derivados portadores de mutações de resistência definidas, tornando-a indispensável no desenvolvimento de terapias direcionadas. Se você deseja estabelecer ou expandir seu programa de biologia de quinases ou de descoberta de medicamentos, as células Ba/F3 estão disponíveis em cytion.com — acesse a página do produto para solicitar informações ou fazer um pedido hoje mesmo.

Publicações importantes

1. Didion JP, Buus RJ, Naghashfar Z (2014) O perfil de SNPs em matrizes de linhas celulares de camundongo identifica suas linhagens de origem e revela contaminação cruzada e aneuploidia generalizada. BMC Genomics. PMID: 25277546
2. Warmuth M, Kim S, Gu XJ (2007) Células Ba/F3 e seu uso na descoberta de medicamentos para inibidores de quinase. Current Opinion in Oncology. PMID: 17133113
3. Kojima T, Kitamura T (1999) Uma armadilha de sequência de sinalização baseada em um receptor de citocina constitutivamente ativo. Nature Biotechnology. PMID: 10331810
4. Hayakawa F, Towatari M, Kiyoi H (2000) O Flt3 duplicado em tandem ativa constitutivamente o STAT5 e a MAP quinase e induz o crescimento celular autônomo em linhagens celulares dependentes de IL-3. Oncogene. PMID: 10698507
5. Ho JM, Beattie BK, Squire JA (1999) A fusão do fator de transcrição ets TEL com o Jak2 resulta em sinalização Jak-Stat constitutiva. Blood. PMID: 10361134
6. Canitrot Y, Lautier D, Laurent G (1999) Fenótipo mutador de linhagens celulares Ba/F3 transfectadas com BCR–ABL e sua associação com o aumento da expressão da DNA polimerase beta. Oncogene. PMID: 10348341
7. Uemura N, Salgia R, Ewaniuk DS (1999) Envolvimento da proteína adaptadora CRKL na adesão mediada por integrina. Oncogene. PMID: 10362355
8. Liu CB, Itoh T, Arai K (1999) A ativação constitutiva de JAK2 confere às células BA/F3 sobrevivência e proliferação independentes da interleucina-3 murina. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10037724
9. Jaster R, Tschirch E, Bittorf T (1999) Papel do STAT5 na transdução do sinal do interferon-alfa em células Ba/F3. Cellular Signalling. PMID: 10376805
10. Gingras S, Simard J, Groner B (1999) O p300/CBP é necessário para a indução transcricional pela interleucina-4 e interage com o Stat6. Nucleic Acids Research. PMID: 10373589
11. Hunt AE, Lali FV, Lord JD (1999) Papel dos subdomínios da cadeia beta do receptor da interleucina (IL)-2 e do Shc na ativação da proteína quinase ativada por mitógeno (MAP) p38 e da proteína quinase MAP p54. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10066828
12. Itoh T, Liu R, Arai K (1999) Influência diferencial dos resíduos de tirosina da subunidade beta do receptor comum sobre múltiplos sinais induzidos pelo GM-CSF humano. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. PMID: 10329850
13. Okuda K, Foster R, Griffin JD (1999) Domínios de sinalização da cadeia beta c do receptor de GM-CSF/IL-3/IL-5. Annals of the New York Academy of Sciences. [Revisão] PMID: 10372132
14. Mera A, Suga M, Ando M (1999) Indução de alterações na forma celular por meio da ativação do receptor da cadeia beta comum da interleucina-3 pela tirosina quinase do tipo receptor RON. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10336478
15. Mahmud N, Katayama N, Nishii K (1999) Possível envolvimento da bcl-2 na regulação da progressão do ciclo celular de células hematopoiéticas pelo fator de crescimento transformador beta-1. British Journal of Haematology. PMID: 10233423
16. Levings MK, Bessette DC, Schrader JW (1999) A interleucina-4 atua em sinergia com o Raf-1 para promover a proliferação a longo prazo e a ativação da quinase N-terminal de c-jun. Blood. PMID: 10339476
17. Kume A, Ito K, Ueda Y (1999) Um gene de fusão do receptor de G-CSF com a girase B: um novo tipo de interruptor molecular para a expansão de células hematopoiéticas geneticamente modificadas. Biochemical and Biophysical Research Communications. PMID: 10381335
18. Pflanz S, Tacken I, Grötzinger J (1999) Uma proteína de fusão da interleucina-11 e do receptor solúvel da interleucina-11 atua como um superagonista em células que expressam gp130. FEBS Letters. PMID: 10350068
19. Palacios R, Steinmetz M (1985) Clones de camundongo dependentes de IL-3 que expressam o antígeno de superfície B-220, contêm genes de Ig na configuração da linha germinativa e geram linfócitos B in vivo. Cell. PMID: 3924409
20. Duan C, Fukuda T, Isaji T (2020) A deficiência de fucosilação central ativa a sinalização celular dependente da expressão de FLT3 em um sistema de células Ba/F3. The FASEB Journal. PMID: 31908039
21. Yang J, Friedman R (2025) Pontos fortes e limitações das células Ba/F3 na modelagem da resistência à LMA induzida por FLT3. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. PMID: 41183623
22. Saito M, Takeda K, Yoshino M (2026) O metotrexato inibe a via TEL-JAK2-STAT por meio de um mecanismo dependente do metabolismo do folato nas células Ba/F3. International Immunopharmacology. PMID: 42287956