Úvod

Buňky Ba/F3, známá také pod synonymy BA/F3, BaF3, BAF3 a Baf3 (číslo přístupu v databázi Cellosaurus CVCL_0161), je myší pro-B buněčná linie závislá na interleukinu-3 (IL-3), odvozená z kostní dřeně. Tuto linii poprvé popsali Palacios a Steinmetz v roce 1985 jako součást skupiny nepřetržitě se množících, na IL-3 závislých klonů kostní dřeně, které nesly marker B-buněčné linie B-220 a zachovaly si své geny pro imunoglobuliny v konfiguraci zárodečné linie. ^[19] Původně se uvádělo, že pochází z myši BALB/c, avšak následné profilování pomocí SNP array prokázalo, že tato linie ve skutečnosti pochází z myši C3H. ^[1] Od svého vzniku se buňky Ba/F3 staly jedním z nejčastěji používaných modelových systémů ve výzkumu signálních drah v hematopoéze a při vývoji onkologických léků. Jejich striktní závislost na IL-3 pro přežití a proliferaci z nich činí mimořádně čistou platformu: zavedení onkogenní kinázy nebo fúzního proteinu způsobuje, že se buňky stanou nezávislými na faktorech, což poskytuje silný a kvantifikovatelný výsledek. Výzkumníci tuto vlastnost běžně využívají k charakterizaci fúzních proteinů BCR-ABL, mutací FLT3, fúzí JAK2 a mnoha dalších klinicky relevantních kinázových onkogenů, stejně jako k profilování malomolekulárních inhibitorů kináz ve formátech s vysokou propustností.

Hlavní body

• Ba/F3 je myší IL-3-dependentní linie pro-B buněk odvozená z kostní dřeně myšího kmenu C3H, zařazená v databázi Cellosaurus pod číslem CVCL_0161.
• Odstranění IL-3 představuje přísný selekční test: mateřské buňky odumírají, zatímco buňky exprimující aktivní onkogenní kinázu – nebo jakýkoli jiný konstrukt, který poskytuje konstitutivní růstový signál – přežívají a množí se.
• Tato buněčná linie se hojně využívá ke studiu fúzních proteinů BCR-ABL, mutací FLT3, signální dráhy JAK–STAT a biologie receptorů cytokinů.
• Buňky Ba/F3 se stále více přizpůsobují screeningu inhibitorů kináz s vysokou propustností, což z nich činí základní kámen cíleného vývoje léků proti rakovině. ^[2]
• Z buněčné linie Ba/F3 byly vygenerovány stovky odvozených buněčných linií nesoucích definované onkogenní mutace, které pokrývají EGFR, ALK, ROS1, RET, NTRK, FLT3 a mnoho dalších klinicky relevantních cílů.

Co je to Ba/F₃?

Ba/F3 je faktorově závislá myší pro-B buněčná linie izolovaná z kostní dřeně myši kmene C3H; pohlaví a věk dárce nejsou v databázi Cellosaurus pro tuto linii zaznamenány. Rodičovská linie nenese žádné známé mutace aktivujících kináz a pro přežití vyžaduje exogenní IL-3. Její doba zdvojnásobení je za standardních kultivačních podmínek přibližně 20 hodin. Primární charakteristickou vlastností této linie je její striktní závislost na IL-3, což znamená, že jakoukoli genetickou manipulaci, která by vedla k růstu nezávislému na faktorech, lze rychle a jednoznačně detekovat. Díky této vlastnosti, v kombinaci s absencí rušivých endogenních mutací kináz, se buňky Ba/F3 staly nepostradatelným nástrojem pro analýzu onkogenního potenciálu fúzí kináz, bodových mutací a konstitutivně aktivních signálních molekul v biologii hematopoetických i solidních nádorů. Je třeba poznamenat, že absence anotace mutace není totéž jako geneticky nezměněné pozadí: Cellosaurus také zaznamenává data o variacích odvozená z SNP-array pro tuto linii.

Profilování pomocí SNP arrayu napravilo dlouhodobě nesprávně uváděný původ této linie. V dřívější literatuře byl kmen Ba/F3 popisován jako odvozený od myši BALB/c, avšak genomová analýza potvrdila jeho původ v linii C3H. ^[1] Z 99 myších buněčných linií zkoumaných v této studii byla Ba/F3 jedinou linií, jejíž genetické pozadí neodpovídalo uváděnému původnímu kmeni; tuto nesrovnalost nezávisle potvrdila společnost RIKEN, distributor této linie, a morfologické srovnání s jinými liniemi odvozenými od C3H naznačilo, že Ba/F3 je samostatná buněčná linie, nikoli výsledek křížové kontaminace. Tento poznatek podtrhuje význam rutinní autentifikace buněčných linií, zejména u myších linií, u nichž samotné profilování STR nemusí stačit k rozlišení inbredních kmenů. Vědci používající linii Ba/F3 by měli v publikacích uvádět referenční číslo Cellosaurus CVCL_0161, aby zajistili jednoznačnou identifikaci.

Informace o buněčných kulturách

Výhody článků Ba/F₃

Nejvýznamnější výhodou buněk Ba/F3 je jejich binární spínač přežití závislý na IL-3. Při absenci IL-3 dochází u původních buněk Ba/F3 k rychlé apoptóze. Zavedení onkogenní kinázy nebo fúzního proteinu zachrání buňky před smrtí, což umožňuje přímý výběr stabilně transformovaných klonů bez nutnosti složitých reportérových konstruktů. Tato vlastnost byla využita v četných formátech testů, od klasických testů přežití kolonií až po moderní vysoce výkonné screeningy proliferace pro profilování sloučenin. ^[2] Díky jednoduchosti a spolehlivosti vyhodnocení jsou testy založené na Ba/F₃ široce používaným systémem pro prvotní hodnocení účinnosti inhibitorů kináz, ačkoli absolutní hodnoty účinnosti závisí na konkrétním testu a laboratoři a při srovnávání mezi jednotlivými studiemi je třeba postupovat opatrně. ^[21]

Buňky Ba/F3 jsou rovněž geneticky přizpůsobivé a lze je snadno transfekovat či transdukovat. Retrovirový, lentivirový a elektroporací založený přenos expresních konstruktů účinně vede ke vzniku stabilně exprimujících sublinií. To umožnilo vytvoření stovek derivátních linií nesoucích klinicky relevantní mutace v cílových genech, jako jsou EGFR, FLT3, BCR-ABL, EML4-ALK a RET, a v mnoha dalších. Absence rušivých endogenních mutací kináz v rodičovské linii zajišťuje, že fenotypové reakce lze přičíst výhradně zavedenému transgenu. Navíc doba zdvojnásobení, která činí přibližně 20 hodin, podporuje vysokou experimentální propustnost, což výrazně zkracuje dobu trvání testů ve srovnání s pomaleji rostoucími primárními buněčnými kulturami.

Platforma Ba/F3 se ukázala jako mimořádně vhodná pro aplikace zaměřené na objevování signálních sekvencí. Kojima a Kitamura využili konstrukt konstitutivně aktivního cytokinového receptoru k přesměrování růstové závislosti buněk Ba/F3 na lokalizaci proteinů nesoucích signální peptid na buněčném povrchu, což umožnilo provádět screening cDNA ve velkém měřítku za účelem identifikace sekretovaných a membránově vázaných genových produktů. ^[3] Tato kreativní aplikace ukazuje, jak lze závislost buněk Ba/F3 na IL-3 využít i mimo rámec běžného výzkumu onkogenních kináz, čímž se tato buněčná linie stává univerzální platformou pro genetický screening.

Omezení buněk Ba/F₃

Navzdory svým četným výhodám mají buňky Ba/F3 inherentní biologická omezení, která je třeba zohlednit při interpretaci experimentálních údajů. Jako myší pro-B buněčná linie postrádají mnoho signálních adaptérů a koreceptorů, které se vyskytují v lidských nádorových buňkách. Hodnoty účinnosti inhibitorů a následné signální reakce pozorované v buňkách Ba/F3 nemusí přesně odrážet aktivitu v primárních lidských nádorových buňkách nebo v materiálu odvozeném od pacientů. Vědci zabývající se například studiem rezistence vůči cílené léčbě adenokarcinomu plic musí před vyvozením klinických závěrů ověřit poznatky získané na buňkách Ba/F3 v lidských buněčných modelech, které jsou fyziologicky relevantnější.

K genomickému pozadí této linie se rovněž vázaly nesprávné informace. Po celá desetiletí se linie Ba/F3 připisovala původu BALB/c, avšak profilování pomocí SNP-array prokázalo, že pochází z myši C3H. ^[1] Tato studie odhalila známky aneuploidie u přibližně 42 % zkoumaných myších buněčných linií, včetně značné části linií odvozených spíše z normální než z nádorové tkáně; u samotné linie Ba/F3 byla zaznamenána spíše nesprávná identifikace než změna počtu kopií, avšak tento obecný nález ilustruje, jak snadno dochází v kultuře k hromadění karyotypových odchylek. Taková nestabilita při vysokém počtu pasáží by mohla ovlivnit výsledky signálních drah, měření citlivosti na léčiva a reprodukovatelnost transformovaných fenotypů. Vědci by proto měli pracovat s nízkým počtem pasáží a své kmeny pravidelně ověřovat.

A konečně, buňky Ba/F3 nereprodukují celé mikroprostředí nádoru ani stromální interakce, které se vyskytují u hematologických malignit. Chybí jim také endogenní exprese mnoha lidských signálních komponent, což znamená, že interakce koreceptorů důležité pro funkci onkogenů mohou chybět nebo se lišit. Studie komplexních cytokinových receptorů s více podjednotkami nebo receptorů vyžadujících signalizaci závislou na glykosylaci mohou vyžadovat doplňkové systémy lidských buněk, aby bylo možné dospět k biologicky platným závěrům. Navzdory těmto výhradám zůstávají buňky Ba/F3 výkonným a široce přijímaným nástrojem první volby v biologii kináz.

Zobrazit kompletní specifikace a objednat

Aplikace

Vývoj léčiv zaměřených na kinázy a screening onkogenů

Buňky Ba/F3 se staly dominantní buněčnou platformou pro vývoj léčiv zaměřených na kinázy. Warmuth a jeho kolegové poskytli komplexní hodnocení systému Ba/F3 pro tento účel a popsali, jak lze test nezávislosti na IL-3 přizpůsobit formátům s vysokou propustností, aby bylo možné vyhodnotit jak onkogenní potenciál mutací kináz, tak schopnost malomolekulárních inhibitorů kináz zvrátit růst nezávislý na faktorech. ^[2]V přehledu bylo zdůrazněno, že buňky Ba/F3 pokrývají pozoruhodnou škálu onkogenních kináz, což z nich činí univerzální platformu pro počáteční profilování variant kinomu spojených s rakovinou před přechodem k složitějším modelům lidských buněk.

Past na signální sekvenci vyvinutá Kojimou a Kitamurou prokázala, že buňky Ba/F3 lze použít nejen pro výzkum kinázových onkogenů, ale také pro funkční screening cDNA knihoven. ^[3]Díky spojení konstitutivně aktivního receptoru pro cytokiny s funkcí signálního peptidu přinesl jediný pilotní experiment 150 již dříve známých klonů – všechny kódující sekretované nebo buněčně povrchové proteiny – spolu s 48 novými cDNA klony, včetně membránových proteinů typu II, které unikly dřívějším strategiím pastí na signální sekvence. Tento přístup ilustruje škálovatelnost platformy Ba/F3 nad rámec klasické validace cílů pro léčiva.

Extrémní rozmanitost odvozených linií Ba/F3, které jsou nyní katalogizovány v Cellosaurus – zahrnující stovky variant EGFR, fúzí ALK, přestaveb RET, fúzí NTRK a rezistenčních mutací – podtrhuje, jak se mateřská linie Ba/F3 stala základním rámcem pro výzkum v oblasti přesné onkologie. Každá odvozená linie si zachovává čisté pozadí závislé na IL-3 a zároveň přidává jednu definovanou genetickou proměnnou, což umožňuje systematické studie vztahu mezi strukturou a aktivitou na buněčné úrovni.

Mutace FLT3 a akutní myeloidní leukémie

Jednou z nejvýznamnějších aplikací buněk Ba/F3 je charakterizace mutací FLT3 (fms-like tyrosine kinase 3) u akutní myeloidní leukémie (AML). Interní tandemová duplikace FLT3 patří mezi nejčastější onkogenní léze u AML, hlášené přibližně v 20 % až 30 % případů v závislosti na kohortě a detekční metodě. ^[4][20]Hayakawa a jeho kolegové prokázali, že tandemově duplikovaný FLT3, zavedený do dvou IL-3-dependentních buněčných linií 32D a Ba/F3, konstitutivně aktivuje jak STAT5, tak MAP kinázu a zajišťuje autonomní, růst nezávislý na IL-3, zatímco FLT3 divokého typu podporoval pouze minimální proliferaci i při nepřetržité stimulaci ligandem.^[4] Tato průlomová studie etablovala buňky Ba/F3 jako primární funkční testovací systém pro validaci mutací FLT3 a zůstává metodologickým standardem v této oblasti.

Následující práce na tomto základu rozsáhle navázaly. Studie fukosylace jádra ukázaly, že knockout genu Fut8 pomocí CRISPR/Cas9 v buňkách Ba/F3 exprimujících FLT3 divokého typu stačil k vyvolání proliferace nezávislé na IL-3 — což je účinek, který nebyl pozorován v původních buňkách — doprovázený zvýšenou tyrosinovou fosforylací a aktivací STAT5, AKT a ERK, jakož i dimerizací FLT3 nezávislou na ligandu.^[20] Tím byla odhalena úroveň regulace prostřednictvím glykosylace, která u tohoto receptoru nebyla dosud známá. Rezistence vůči inhibitoru FLT3 gilteritinibu byla rovněž zkoumána na modelech Ba/F3 FLT3-ITD, kde rezistence při klinicky dosažitelných koncentracích léčiva obvykle vyžadovala více sekundárních mutací, z nichž některé dosud nebyly popsány. ^[21]Stejná studie systematicky zvážila silné stránky a omezení modelů Ba/F3 FLT3-ITD a poznamenala, že ačkoli je tato platforma vhodná pro identifikaci a klasifikaci rezistenčních mutací, nedokáže replikovat komplexní mikroprostředí kostní dřeně, které u pacientů utváří rezistenci.

Biologie BCR-ABL a chronická myeloidní leukémie

Buňky Ba/F3 transfekované fúzními proteiny BCR-ABL sehrály klíčovou roli v porozumění molekulární biologii chronické myeloidní leukémie (CML). Canitrot a jeho kolegové použili buňky Ba/F3 exprimující izoformy p190 a p210 BCR-ABL k prokázání, že BCR-ABL způsobuje mutační fenotyp, čímž zvyšuje frekvenci spontánních mutací třikrát až pětkrát ve srovnání s rodičovskými buňkami, a že tato genomová nestabilita byla spojena se zvýšenou expresí DNA polymerázy beta. ^[6]Tento objev poskytl vysvětlení mechanismu, kterým by BCR-ABL mohl urychlovat progresi onemocnění z chronické fáze CML do akutní myeloidní leukémie.

Uemura a jeho kolegové studovali v buňkách Ba/F3 adaptorový protein CRKL, jeden z hlavních tyrosinových fosfoproteinů v leukemických neutrofilech pacientů s CML. ^[7]Buňky s nadměrnou expresí CRKL v plné délce vykazovaly zvýšenou adhezi k fibronektinu a změněnou morfologii na površích potažených fibronektinem, zatímco delece mutanti postrádající buď doménu SH2, nebo N-terminální doménu SH3 tyto vlastnosti nevykazovali — což naznačuje, že pro tento účinek jsou nezbytné obě domény. Adhezi blokovala protilátka proti integrinu beta1, ačkoli nadměrná exprese CRKL nezměnila povrchovou expresi integrinu beta1 ani spontánně neindukovala jeho aktivační epitop. Tyto experimenty naznačují, že CRKL se podílí na signálních drahách, které regulují adhezi zprostředkovanou integriny v návaznosti na BCR-ABL.

V souhrnu tyto studie BCR-ABL ilustrují, jak buňky Ba/F3 umožňují jasnou analýzu signálních drah řízených onkogeny tím, že odstraňují složitost endogenní kinázové aktivity. Tato platforma i nadále podporuje charakterizaci mutací rezistence vůči inhibitorům BCR-ABL, přičemž jsou nyní k dispozici specializované linie Ba/F3 BCR-ABL a deriváty BCR-ABL-T315I pro přímé profilování inhibitorů v kontextu klinicky relevantních genotypů rezistence.

Signální dráhy JAK–STAT

Buňky Ba/F3 sloužily jako primární model pro rozbor toho, které signální události za cytokinovými receptory jsou skutečně nezbytné pro růst. Liu a spolupracovníci sestrojili chimérickou molekulu (beta/JAK2) sestávající z extracelulární a transmembránové oblasti betac fúzované s JAK2 a exprimovali ji v buňkách Ba/F3. ^[8]Tato chiméra byla konstitutivně fosforylována a stačila k zajištění přežití a proliferace nezávislé na IL-3. Je pozoruhodné, že STAT5, Shc a SHP-2 v těchto buňkách fosforylovány nebyly a aktivita promotorů beta-kaseinu a c-fos nebyla zvýšena, zatímco transkripce c-myc byla konstitutivně aktivována. Autoři dospěli k závěru, že k přežití a proliferaci postačuje samotná aktivace JAK2 a že aktivace STAT5 a MAP kinázy není pro tyto konkrétní výstupy nutná — což je užitečné připomenutí, že růst buněk Ba/F3 nezávislý na signálních faktorech sám o sobě neznamená aktivaci STAT.

Úlohu STAT5 v signalizaci IFN-alfa zkoumali v buňkách Ba/F3 Jaster a spolupracovníci, kteří prokázali, že IFN-alfa aktivuje vazbu STAT5A a STAT5B na DNA, ale že IL-3 je mnohem silnějším induktorem obou izoforem. ^[9]Dominantně negativní mutant JAK2 potlačil aktivaci STAT5 indukovanou IL-3, nikoli však aktivaci indukovanou IFN-alfa, což odhalilo, že tyto dva cytokiny využívají nezávislé mechanismy v předcházející fázi signální dráhy, které konvergují na stejný transkripční faktor; autoři nicméně dospěli k závěru, že STAT5 není v tomto systému klíčový pro signalizaci IFN-alfa.

Konstitutivní aktivace signální dráhy JAK–STAT byla modelována v buňkách Ba/F3 pomocí fúzního proteinu TEL–JAK2, což je onkogenní fúze spojená s akutní lymfoblastickou leukémií T-buněk. Ho a jeho kolegové ukázali, že fúze špičaté domény TEL s funkční kinázovou doménou JAK2 (JH1) přeměnila buňky Ba/F3 na buňky nezávislé na signálních faktorech, zatímco fúze s pseudokinázovou doménou (JH2) nebo s kinázově neaktivní doménou JH1 k tomu nevedla; aktivní konstrukty vyvolávaly konstitutivní tyrosinovou fosforylaci STAT1, STAT3 a STAT5.^[5] V nedávné době bylo zjištěno, že methotrexát potlačuje fosforylaci TEL–JAK2, STAT3 a STAT5 v buňkách Ba/F3 prostřednictvím mechanismu závislého na metabolismu folátů: tento účinek byl zvrácen kyselinou folinovou, reprodukován pomocí CRISPR/Cas9 knockoutu dihydrofolátreduktázy a nebyl napodoben 5-fluorouracilem. ^[22]

Signalizaci IL-4 prostřednictvím STAT6 zkoumali Gingras a jeho spolupracovníci, kteří prokázali, že pro transkripční indukci zprostředkovanou STAT6 jsou nezbytné koaktivátory p300/CBP a že nadměrná exprese p300/CBP zesiluje aktivitu reportérového genu řízeného IL-4. ^[10]Většina této práce byla provedena na buňkách COS7 a HeLa; buňky Ba/F3 poskytly klíčový endogenní důkaz, a to koimunoprecipitaci nativního STAT6 společně s CBP.

Signalizace cytokinových receptorů a biologie hematopoetických buněk

Systém receptorů GM-CSF/IL-3/IL-5 byl pomocí buněk Ba/F3 podrobně zmapován. Itoh a jeho spolupracovníci provedli systematickou mutační analýzu osmi cytoplazmatických tyrosinových zbytků společné beta podjednotky (betac), přičemž v buňkách Ba/F3 exprimovali řadu mutantů s nahrazením tyrosinu fenylalaninem společně s divokým typem lidské alfa podjednotky, aby určili, které zbytky zprostředkovávají specifické signální výstupy. ^[12]Okuda a jeho spolupracovníci na základě přezkoumání paralelní série mutageneze uvedli, že mutace všech osmi cytoplazmatických tyrosinů v GMR-beta snížila fosforylaci samotného receptoru, SHP2 a SHC, avšak nevedla k potlačení krátkodobé proliferační signalizace ani fosforylace JAK2 a STAT5, což ilustruje hierarchii funkcí receptorových domén. ^[13]Bylo prokázáno, že tyrozinkináza RON aktivuje signální dráhu receptoru IL-3 beta v buňkách Ba/F3 a indukuje morfologické změny zahrnující redistribuci F-aktinu a specifické změny tvaru jádra, což odhaluje vzájemnou interakci mezi systémy tyrozinkinázových receptorů a cytokinových receptorů. ^[14]

Byly rovněž analyzovány požadavky na subdomény receptoru u receptoru IL-2. Pomocí transfekovaných linií Ba/F3 Hunt a jeho spolupracovníci identifikovali kyselou doménu a oblast bohatou na serin v blízkosti membrány v beta řetězci receptoru IL-2 jako nezbytné pro aktivaci MAP kináz p38 a p54, přičemž Tyr338 – vazebné místo pro Shc – slouží jako klíčový zprostředkovatel. ^[11]Vzhledem k tomu, že kyselá doména není nezbytná pro proliferaci indukovanou IL-2, autoři dospěli k závěru, že pro růst buněk Ba/F3 indukovaný IL-2 není ve skutečnosti nutná aktivace ani MAP kinázy p38, ani p54, což platí i pro primární T buňky.

Regulace buněčného cyklu v hematopoetických progenitorových buňkách byla rovněž studována s využitím buněk Ba/F3. Mahmud a spolupracovníci prokázali, že TGF-beta1 zpomaluje přechod z fáze G1 do fáze S v buňkách Ba/F3, přičemž toto zpomalení růstu spojili s upregulací proteinu Bcl-2 a inhibitoru CDK p27. ^[15]Synergický účinek IL-4 s aktivovaným Raf-1 při podpoře dlouhodobé proliferace buněk Ba/F3 studovali Levings a jeho spolupracovníci, kteří zjistili, že IL-4 sám o sobě nedokáže růst podporovat, ale může spolupracovat s aktivovaným Ras nebo Raf-1 k udržení nepřetržité proliferace srovnatelné s IL-3. ^[16]

Vytvořené systémy přepínání receptorů využily závislost buněk Ba/F3 na IL-3 pro aplikace v genové terapii. Kume a jeho spolupracovníci vyvinuli receptor G-CSF fúzovaný s bakteriální gyrazou B (GcrGyr), v němž dimerizující antibiotikum kumermycin spouštělo proliferaci buněk Ba/F3 nezávislou na IL-3 jako selektivní amplifikační genový systém typu „proof-of-concept“ pro expanzi geneticky modifikovaných hematopoetických buněk. ^[17]Podobně bylo prokázáno, že fúzní protein IL-11 a rozpustného receptoru IL-11 působí jako superagonista na buňky Ba/F3 transfekované gp130, kterým chybí membránově vázaný receptor alfa pro IL-11, což dokazuje, že rozpustné složky receptoru mohou funkčně nahradit transmembránové podjednotky. ^[18]

Závěr

Buňky Ba/F3 (CVCL_0161) představují jednu z nejvšestrannějších a nejrozsáhleji validovaných platforem myších buněčných linií v moderním biomedicínském výzkumu. Jejich přísná závislost na IL-3 poskytuje elegantní a reprodukovatelný funkční test pro onkogenní kinázy — včetně fúzních proteinů BCR-ABL, mutací FLT3, a fúzí JAK2 – a pro nízkomolekulární inhibitory kináz s klinickým významem pro chronickou myeloidní leukémii, akutní myeloidní leukémii, lymfoblastickou leukémii-lymfom z prekurzorových buněk a adenokarcinom plic. Desítky let výzkumu potvrdily, že signální dráha JAK–STAT, biologie receptorů cytokinů a regulace hematopoetických buněk patří mezi klíčové oblasti využití buněčné linie Ba/F3. Díky přizpůsobivosti této linie bylo možné vytvořit stovky odvozených modelů s definovanými rezistenčními mutacemi, což z ní činí nepostradatelný nástroj při vývoji cílené terapie. Pokud hodláte založit nebo rozšířit svůj program v oblasti biologie kináz či vývoje léčiv, buňky Ba/F3 jsou k dispozici na cytion.com – navštivte stránku produktu a požádejte o informace nebo si objednejte ještě dnes.

Klíčové publikace

1. Didion JP, Buus RJ, Naghashfar Z (2014) Profilování myších buněčných linií pomocí SNP array identifikuje jejich původní kmeny a odhaluje křížovou kontaminaci a rozšířenou aneuploidii. BMC Genomics. PMID: 25277546
2. Warmuth M, Kim S, Gu XJ (2007) Buňky Ba/F3 a jejich využití při vývoji léčiv zaměřených na kinázy. Current Opinion in Oncology. PMID: 17133113
3. Kojima T, Kitamura T (1999) Past na signální sekvenci založená na konstitutivně aktivním receptoru cytokinu. Nature Biotechnology. PMID: 10331810
4. Hayakawa F, Towatari M, Kiyoi H (2000) Tandemově duplikovaný Flt3 konstitutivně aktivuje STAT5 a MAP kinázu a indukuje autonomní buněčný růst v buněčných liniích závislých na IL-3. Oncogene. PMID: 10698507
5. Ho JM, Beattie BK, Squire JA (1999) Fúze transkripčního faktoru ets (TEL) s Jak2 vede ke konstitutivní signalizaci Jak-Stat. Blood. PMID: 10361134
6. Canitrot Y, Lautier D, Laurent G (1999) Mutátorový fenotyp buněčných linií Ba/F3 transfekovaných BCR–ABL a jeho souvislost se zvýšenou expresí DNA polymerázy beta. Oncogene. PMID: 10348341
7. Uemura N, Salgia R, Ewaniuk DS (1999) Účast adaptorového proteinu CRKL na adhezi zprostředkované integriny. Oncogene. PMID: 10362355
8. Liu CB, Itoh T, Arai K (1999) Konstitutivní aktivace JAK2 zajišťuje přežití a proliferaci buněk BA/F3 nezávislé na myším interleukinu-3. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10037724
9. Jaster R, Tschirch E, Bittorf T (1999) Úloha STAT5 v signální transdukci interferonu alfa v buňkách Ba/F3. Cellular Signalling. PMID: 10376805
10. Gingras S, Simard J, Groner B (1999) p300/CBP je nezbytný pro transkripční indukci interleukinem-4 a interaguje se Stat6. Nucleic Acids Research. PMID: 10373589
11. Hunt AE, Lali FV, Lord JD (1999) Úloha subdomén beta-řetězce receptoru interleukinu (IL)-2 a Shc při aktivaci p38 mitogenem aktivované proteinové (MAP) kinázy a p54 MAP kinázy. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10066828
12. Itoh T, Liu R, Arai K (1999) Diferenciální vliv tyrosinových zbytků společné beta-podjednotky receptoru na více signálů indukovaných lidským GM-CSF. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. PMID: 10329850
13. Okuda K, Foster R, Griffin JD (1999) Signální domény beta-c řetězce receptoru GM-CSF/IL-3/IL-5. Annals of the New York Academy of Sciences. [Přehled] PMID: 10372132
14. Mera A, Suga M, Ando M (1999) Indukce změn tvaru buněk prostřednictvím aktivace receptoru s společným beta řetězcem pro interleukin-3 tyrozinkinázou typu RON. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10336478
15. Mahmud N, Katayama N, Nishii K (1999) Možná úloha bcl-2 v regulaci průběhu buněčného cyklu hematopoetických buněk transformujícím růstovým faktorem beta1. British Journal of Haematology. PMID: 10233423
16. Levings MK, Bessette DC, Schrader JW (1999) Interleukin-4 působí synergicky s Raf-1 a podporuje dlouhodobou proliferaci a aktivaci N-terminální kinázy c-jun. Blood. PMID: 10339476
17. Kume A, Ito K, Ueda Y (1999) Fúzní gen receptoru G-CSF a gyrázy B: nový typ molekulárního spínače pro expanzi geneticky modifikovaných hematopoetických buněk. Biochemical and Biophysical Research Communications. PMID: 10381335
18. Pflanz S, Tacken I, Grötzinger J (1999) Fúzní protein interleukinu-11 a rozpustného receptoru interleukinu-11 působí jako superagonista na buňky exprimující gp130. FEBS Letters. PMID: 10350068
19. Palacios R, Steinmetz M (1985) Klony myší závislé na IL-3, které exprimují povrchový antigen B-220, obsahují geny pro imunoglobuliny v konfiguraci zárodečné linie a in vivo generují B lymfocyty. Cell. PMID: 3924409
20. Duan C, Fukuda T, Isaji T (2020) Nedostatek jádrové fukosylace aktivuje buněčnou signalizaci závislou na expresi FLT3 v buněčném systému Ba/F3. The FASEB Journal. PMID: 31908039
21. Yang J, Friedman R (2025) Silné stránky a omezení buněk Ba/F3 při modelování rezistence k AML zprostředkované FLT3. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. PMID: 41183623
22. Saito M, Takeda K, Yoshino M (2026) Methotrexát inhibuje signální dráhu TEL-JAK2-STAT prostřednictvím mechanismu závislého na metabolismu folátů v buňkách Ba/F3. International Immunopharmacology. PMID: 42287956