Вступ

Клітини Ba/F3, також відома під синонімами BA/F3, BaF3, BAF3 та Baf3 (номер зразка в базі даних Cellosaurus — CVCL_0161), — це мишача лінія про-В-клітин, залежна від інтерлейкіну-3 (ІЛ-3), отримана з кісткового мозку. Цю лінію вперше описали Паласіос і Штайнметц у 1985 році серед групи безперервно проліферуючих, IL-3-залежних клонів кісткового мозку, які несли маркер лінії В-клітин B-220 і зберігали свої гени імуноглобулінів у зародковій конфігурації. ^[19] Спочатку вважалося, що ця лінія походить від миші BALB/c, проте подальше профілювання за допомогою SNP-матриці дозволило встановити, що насправді вона походить від миші C3H. ^[1] З моменту своєї розробки клітини Ba/F3 стали однією з найпоширеніших модельних систем у дослідженнях сигнальних шляхів гемопоезу та розробці онкологічних препаратів. Їхня сувора залежність від IL-3 для виживання та проліферації робить їх надзвичайно «чистою» платформою: введення онкогенної кінази або фузійного білка робить клітини незалежними від факторів, забезпечуючи потужні та кількісно вимірювані результати. Дослідники регулярно використовують цю властивість для характеристики фузійних білків BCR-ABL, мутацій FLT3, фузій JAK2 та багатьох інших клінічно значущих онкогенів-кіназ, а також для профілювання низькомолекулярних інгібіторів кіназ у форматі високої пропускної здатності.

Основні висновки

• Ba/F3 — це мишача IL-3-залежна лінія про-В-клітин, отримана з кісткового мозку мишей лінії C3H, зареєстрована в базі даних Cellosaurus під номером CVCL_0161.
• Припинення дії IL-3 забезпечує суворий селективний тест: батьківські клітини гинуть, тоді як клітини, що експресують активну онкогенну кіназу — або будь-яку іншу конструкцію, яка забезпечує постійний сигнал до росту, — виживають і проліферують.
• Цю клітинну лінію широко використовують для дослідження фузійних білків BCR-ABL, мутацій FLT3, сигнального шляху JAK–STAT та біології рецепторів цитокінів.
• Клітини Ba/F3 дедалі краще пристосовуються до високопродуктивного скринінгу інгібіторів кіназ, що робить їх основою розробки цільових протиракових препаратів. ^[2]
• На основі клітинної лінії Ba/F3 було створено сотні похідних клітинних ліній, що несуть визначені онкогенні мутації, які охоплюють EGFR, ALK, ROS1, RET, NTRK, FLT3 та багато інших клінічно значущих мішеней.

Що таке Ba/F3?

Ba/F3 — це факторзалежна лінія мишачих про-В-клітин, створена з кісткового мозку мишей лінії C3H; стать та вік донора в базі даних Cellosaurus щодо цієї лінії не вказані. Базова лінія не несе відомих мутацій активуючих кіназ і для виживання потребує екзогенного IL-3. Час подвоєння клітин становить приблизно 20 годин за стандартних умов культивування. Головною визначальною характеристикою лінії є її сувора залежність від IL-3, що означає, що будь-яку генетичну маніпуляцію, яка забезпечує незалежний від факторів ріст, можна швидко та однозначно виявити. Ця властивість у поєднанні з відсутністю ендогенних мутацій кіназ, що можуть вносити спотворення, зробила клітини Ba/F3 незамінним інструментом для аналізу онкогенного потенціалу злиття кіназ, точкових мутацій та конститутивно активних сигнальних молекул у біології гематопоетичних та солідних пухлин. Слід зазначити, що відсутність анотації мутацій не означає генетично незайманого фону: Cellosaurus також фіксує дані про варіації, отримані за допомогою SNP-масиву, для цієї лінії.

Профілювання за допомогою SNP-матриці дозволило виправити давню помилку щодо походження цієї лінії. У ранніх літературних джерелах Ba/F3 описувалася як лінія, що походить від миші BALB/c, однак геномний аналіз підтвердив її походження від лінії C3H. ^[1] З 99 ліній клітин мишей, досліджених у рамках цього дослідження, Ba/F3 була єдиною лінією, генетичний фон якої не збігався з заявленим штамом походження; ця розбіжність була незалежно підтверджена RIKEN, дистриб’ютором цієї лінії, а морфологічне порівняння з іншими лініями, похідними від C3H, вказало на те, що Ba/F3 є окремою клітинною лінією, а не результатом перехресного забруднення. Цей висновок підкреслює важливість регулярної аутентифікації клітинних ліній, особливо для ліній мишей, де одного лише STR-профілювання може бути недостатньо для розрізнення інбредних штамів. Дослідники, які використовують Ba/F3, повинні посилатися на номер доступу Cellosaurus CVCL_0161, щоб забезпечити однозначну ідентифікацію в публікаціях.

Інформація про клітинні культури

Переваги елементів Ba/F₃

Найважливішою перевагою клітин Ba/F3 є їхній бінарний, IL-3-залежний механізм виживання. За відсутності IL-3 вихідні клітини Ba/F3 швидко піддаються апоптозу. Введення онкогенної кінази або фузійного білка рятує клітини від загибелі, що дозволяє легко відбирати стабільно трансформовані клони без використання складних репортерних конструкцій. Ця властивість використовується в численних форматах аналізів — від класичних тестів на виживання колоній до сучасних високопродуктивних скринінгів проліферації для профілювання сполук. ^[2] Простота та надійність методу аналізу результатів роблять тести на основі Ba/F3 широко використовуваною системою першого етапу для оцінки ефективності інгібіторів кіназ, хоча абсолютні значення ефективності залежать від конкретного тесту та лабораторії, і їх слід обережно порівнювати між різними дослідженнями. ^[21]

Клітини Ba/F3 також генетично пластичні та легко піддаються трансфекції або трансдукції. Введення експресійних конструктів за допомогою ретровірусів, лентивірусів та електропорації дозволяє ефективно отримувати сублінії зі стабільною експресією. Це дозволило створити сотні похідних ліній, що несуть клінічно значущі мутації в таких мішенях, як EGFR, FLT3, BCR-ABL, EML4-ALK та RET, а також у багатьох інших. Відсутність ендогенних мутацій кіназ у батьківській лінії, що можуть спричинити спотворення результатів, гарантує, що фенотипічні реакції можна пов’язати саме з введеним трансгеном. Крім того, час подвоєння клітин, що становить приблизно 20 годин, сприяє швидкому проведенню експериментів, що значно скорочує терміни проведення аналізів порівняно з первинними клітинними культурами, які ростуть повільніше.

Платформа Ba/F3 виявилася надзвичайно придатною для досліджень у сфері виявлення сигнальних послідовностей. Кодзіма та Кітамура використали конструкт постійно активного рецептора цитокіну, щоб переорієнтувати залежність росту клітин Ba/F3 на локалізацію на поверхні клітин білків, що містять сигнальний пептид, що дозволило провести масштабний скринінг кДНК для ідентифікації секретованих та мембраноорієнтованих генних продуктів. ^[3] Цей креативний підхід демонструє, як залежність клітин Ba/F3 від IL-3 можна використовувати не лише в рамках традиційних досліджень онкогенних кіназ, а й у значно ширшому контексті, що робить цю клітинну лінію універсальною платформою для генетичного скринінгу.

Обмеження клітин Ba/F3

Незважаючи на численні переваги, клітини Ba/F3 мають властиві їм біологічні обмеження, які необхідно враховувати під час інтерпретації експериментальних даних. Як мишача лінія про-В-клітин, вони не мають багатьох сигнальних адапторів та корецепторів, присутніх у людських ракових клітинах. Значення потенції інгібіторів та відповідні сигнальні реакції, що спостерігаються в клітинах Ba/F3, можуть неточно відображати активність у первинних пухлинних клітинах людини або матеріалі, отриманому від пацієнтів. Наприклад, дослідники, які вивчають резистентність до цільових терапій аденокарциноми легенів, повинні перевірити результати досліджень на основі клітин Ba/F3 на більш фізіологічно релевантних моделях людських клітин, перш ніж робити клінічні висновки.

Геномне походження цієї лінії також було неправильно визначено. Протягом десятиліть лінію Ba/F3 відносили до походження BALB/c, але аналіз за допомогою SNP-матриці показав, що вона походить від миші C3H. ^[1] У тому ж дослідженні було виявлено ознаки анеуплоїдії приблизно у 42 % досліджених мишачих клітинних ліній, включаючи значну частину ліній, отриманих із нормальної, а не пухлинної тканини; сама лінія Ba/F3 була відмічена як така, що має помилкову ідентифікацію, а не через зміну кількості копій, але загальний результат ілюструє, наскільки легко каріотипний дрейф накопичується в культурі. Така нестабільність при великій кількості пасажів може впливати на результати сигнальних шляхів, вимірювання чутливості до ліків та відтворюваність трансформованих фенотипів. Тому дослідники повинні працювати з невеликою кількістю пасажів і регулярно перевіряти автентичність своїх культур.

Нарешті, клітини Ba/F3 не відтворюють повного мікросередовища пухлини або стромальних взаємодій, притаманних гематологічним злоякісним новоутворенням. У них також відсутня ендогенна експресія багатьох сигнальних компонентів людини, що означає: взаємодії корецепторів, важливі для функціонування онкогенів, можуть бути відсутніми або відрізнятися. Дослідження складних багатосубодиничних рецепторів цитокінів або рецепторів, що потребують глікозилювання-залежної сигналізації, можуть вимагати використання додаткових систем людських клітин для отримання біологічно обґрунтованих висновків. Незважаючи на ці застереження, клітини Ba/F3 залишаються потужним і широко визнаним інструментом першої лінії в біології кіназ.

Переглянути повні технічні характеристики та замовити

Застосування

Розробка ліків, що діють на кінази, та скринінг онкогенів

Клітини Ba/F3 стали домінуючою клітинною платформою для розробки ліків, спрямованих на кінази. Вармут та його колеги надали всебічну оцінку системи Ba/F3 для цієї мети, описавши, як аналіз незалежності від IL-3 можна адаптувати до форматів з високою пропускною здатністю для оцінки як онкогенного потенціалу мутацій кіназ, так і здатності низькомолекулярних інгібіторів кіназ зупиняти ріст, незалежний від факторів. ^[2]У огляді підкреслено, що клітини Ba/F3 підтримують надзвичайно широкий спектр онкогенних кіназ, що робить їх універсальною платформою для початкового профілювання варіантів кінома, пов’язаних з раком, перед переходом до більш складних моделей людських клітин.

Розроблена Кодзімою та Кітамурою «пастка сигнальної послідовності» продемонструвала, що клітини Ba/F3 можна використовувати не лише для досліджень онкогенних кіназ, а й для функціонального скринінгу бібліотек кДНК. ^[3]Завдяки поєднанню конститутивно активного рецептора цитокіну з функцією сигнального пептиду в ході одного пілотного експерименту було отримано 150 раніше відомих клонів — усі вони кодують секретовані або поверхневі білки клітин — а також 48 нових клонів кДНК, включаючи мембранні білки типу II, які раніше вислизали з-під контролю стратегій із використанням пасток сигнальних послідовностей. Цей підхід ілюструє масштабованість платформи Ba/F3, що виходить за межі класичної валідації мішеней для лікарських засобів.

Надзвичайна різноманітність похідних ліній Ba/F3, які зараз каталогізовані в Cellosaurus — що охоплюють сотні варіантів EGFR, злиття ALK, перебудови RET, злиття NTRK та мутацій резистентності — підкреслює, як батьківська лінія Ba/F3 стала фундаментальною основою для досліджень у галузі прецизійної онкології. Кожна похідна лінія зберігає «чистий» IL-3-залежний фон, додаючи при цьому одну визначену генетичну змінну, що дозволяє проводити систематичні дослідження взаємозв’язку «структура–активність» на клітинному рівні.

Мутації FLT3 та гостра мієлоїдна лейкемія

Одним із найважливіших застосувань клітин Ba/F3 стала характеристика мутацій FLT3 (fms-подібна тирозинкиназа 3) у гострій мієлоїдній лейкемії (ГМЛ). Внутрішня тандемна дуплікація FLT3 є однією з найпоширеніших онкогенних мутацій при ГМЛ, яка виявляється приблизно у 20–30 % випадків залежно від когорти та методу виявлення. ^[4][20]Хаякава та колеги продемонстрували, що тандемно-дуплікований FLT3, введений у дві IL-3-залежні лінії 32D та Ba/F3, конститутивно активує як STAT5, так і MAP-кіназу та забезпечує автономний, незалежний від IL-3 ріст, тоді як FLT3 дикого типу підтримував лише мінімальну проліферацію навіть за умови постійної стимуляції лігандом.^[4] Це знакове дослідження визначило клітини Ba/F3 як основну функціональну систему аналізу для валідації мутацій FLT3 і досі залишається методологічним еталоном у цій галузі.

Подальші дослідження значною мірою спиралися на цю основу. Дослідження фукозилювання ядра показали, що нокаут гена Fut8 за допомогою CRISPR/Cas9 у клітинах Ba/F3, які експресують FLT3 дикого типу, був достатнім для індукції IL-3-незалежної проліферації — ефекту, якого не спостерігалося у батьківських клітинах — що супроводжувалося підвищеною фосфориляцією тирозину та активацією STAT5, AKT та ERK, а також ліганд-незалежною димеризацією FLT3.^[20] Це дозволило виявити рівень регуляції через глікозилювання, який раніше не враховувався для цього рецептора. Резистентність до інгібітора FLT3 гільтерітинібу також досліджувалася на моделях Ba/F3 FLT3-ITD, де для розвитку резистентності при клінічно досяжних концентраціях препарату зазвичай були потрібні множинні вторинні мутації, деякі з яких раніше не описувалися. ^[21]У цій же роботі було систематично оцінено переваги та обмеження моделей Ba/F3 FLT3-ITD, при цьому було зазначено, що, хоча ця платформа добре підходить для виявлення та ранжування мутацій резистентності, вона не відтворює складну нішу кісткового мозку, яка визначає резистентність у пацієнтів.

Біологія BCR-ABL та хронічний мієлоїдний лейкоз

Клітини Ba/F3, трансфіковані фузійними білками BCR-ABL, відіграли важливу роль у розумінні молекулярної біології хронічного мієлоїдного лейкозу (ХМЛ). Канітрот та його колеги використовували клітини Ba/F3, що експресують ізоформи BCR-ABL p190 та p210, щоб продемонструвати, що BCR-ABL надає мутаторний фенотип, збільшуючи частоту спонтанних мутацій у три-п’ять разів порівняно з батьківськими клітинами, і що ця геномна нестабільність була пов’язана з підвищеною експресією ДНК-полімерази бета. ^[6]Це відкриття дозволило виявити механізм, за допомогою якого BCR-ABL може сприяти прогресуванню захворювання від хронічної фази ХМЛ до гострої мієлоїдної лейкемії.

Адаптерний білок CRKL, один із основних тирозинових фосфопротеїнів у лейкозних нейтрофілах пацієнтів із ХМЛ, був досліджений Уемурою та колегами на клітинах Ba/F3. ^[7]Клітини з надмірною експресією CRKL повної довжини демонстрували підвищену адгезію до фібронектину та змінену морфологію на поверхнях, покритих фібронектином, тоді як мутанти з делецією, у яких відсутній або SH2-домен, або N-кінцевий SH3-домен, таких властивостей не виявляли — що вказує на те, що для цього ефекту необхідні обидва домени. Адгезія блокувалася антитілом до бета-1-інтегрину, хоча надмірна експресія CRKL не змінювала поверхневу експресію бета-1-інтегрину та не індукувала спонтанно його активаційний епітоп. Ці експерименти вказують на участь CRKL у сигнальних шляхах, що регулюють інтегрин-опосередковану адгезію нижче за BCR-ABL.

У сукупності ці дослідження BCR-ABL ілюструють, як клітини Ba/F3 дають змогу чітко проаналізувати сигнальні шляхи, керовані онкогенами, усуваючи складність, пов’язану з ендогенною активністю кіназ. Ця платформа продовжує підтримувати характеристику мутацій резистентності до інгібіторів BCR-ABL, причому зараз доступні спеціалізовані лінії Ba/F3 BCR-ABL та похідні лінії BCR-ABL-T315I для безпосереднього профілювання інгібіторів у контексті клінічно значущих генотипів резистентності.

Сигнальні шляхи JAK–STAT

Клітини Ba/F3 слугували основною моделлю для аналізу того, які сигнальні події, що відбуваються нижче за цитокіновими рецепторами, насправді необхідні для росту. Лю та колеги сконструювали хімерну молекулу (бета/JAK2), що складається з позаклітинної та трансмембранної ділянок бета-казеїну, злитого з JAK2, та експресували її в клітинах Ba/F3. ^[8]Ця хімера перебувала у стані постійної фосфорилізації та була достатньою для забезпечення виживання та проліферації, незалежних від IL-3. Примітно, що STAT5, Shc та SHP-2 у цих клітинах не фосфорилювалися, а активність промоторів бета-казеїну та c-fos не підвищувалася, тоді як транскрипція c-myc була постійно активована. Автори дійшли висновку, що для виживання та проліферації достатньо лише активації JAK2, а активація STAT5 та MAP-кінази не є необхідною для цих конкретних ефектів — це корисне нагадування про те, що незалежний від факторів ріст у клітинах Ba/F3 сам по собі не означає активації STAT.

Роль STAT5 у сигнальному шляху IFN-альфа була досліджена в клітинах Ba/F3 Ястером та колегами, які показали, що IFN-альфа активує зв’язування STAT5A та STAT5B з ДНК, але що IL-3 є набагато потужнішим індуктором обох ізоформ. ^[9]Домінантно-негативний мутант JAK2 пригнічував активацію STAT5, індуковану IL-3, але не активацію, індуковану IFN-альфа, що свідчить про те, що ці два цитокіни задіюють незалежні механізми на верхньому рівні сигнального шляху, які сходяться на одному й тому ж транскрипційному факторі; проте автори дійшли висновку, що STAT5 не відіграє ключової ролі у сигналізації IFN-альфа в цій системі.

Конститутивну активацію JAK–STAT було змодельовано в клітинах Ba/F3 за допомогою фузійного білка TEL–JAK2 — онкогенної фузії, пов’язаної з гострою лімфобластною лейкемією Т-клітин. Хо та його колеги показали, що злиття домену TEL з функціональним доменом кінази JAK2 (JH1) перетворило клітини Ba/F3 на фактор-незалежні, тоді як злиття з доменом псевдокінази (JH2) або з кіназно-неактивним доменом JH1 цього не зробило; активні конструкти стимулювали конститутивну фосфориляцію тирозину STAT1, STAT3 та STAT5.^[5] Нещодавно було виявлено, що метотрексат пригнічує фосфорилювання STAT3 та STAT5 за допомогою TEL–JAK2 STAT3 та STAT5 у клітинах Ba/F3 через механізм, залежний від метаболізму фолатів: цей ефект був скасований фоліновою кислотою, відтворений за допомогою нокауту дігідрофолатредуктази за допомогою CRISPR/Cas9 і не імітований 5-фторурацилом. ^[22]

Сигналізацію IL-4 через STAT6 досліджували Гінграс та колеги, які продемонстрували, що коактиватори p300/CBP необхідні для індукції транскрипції, опосередкованої STAT6, і що надмірна експресія p300/CBP підсилює активність репортерного гена, керованого IL-4. ^[10]Більшість цих досліджень було проведено на клітинах COS7 та HeLa; клітини Ba/F3 надали ключові ендогенні докази, а саме — коімунопреципітацію нативного STAT6 разом із CBP.

Сигналізація через рецептори цитокінів та біологія гемопоетичних клітин

Система рецепторів GM-CSF/IL-3/IL-5 була детально вивчена з використанням клітин Ba/F3. Іто та колеги провели систематичний мутаційний аналіз восьми цитоплазматичних залишків тирозину загальної бета-субодиниці (betac), експресуючи серію мутантів «тирозин-фенилаланин» разом із диким типом людської альфа-субодиниці в клітинах Ba/F3, щоб визначити, які залишки опосередковують конкретні сигнальні ефекти. ^[12]Аналізуючи паралельну серію мутагенних досліджень, Окуда та його колеги повідомили, що мутація всіх восьми цитоплазматичних залишків тирозину в GMR-бета знижувала фосфорилювання самого рецептора, SHP2 та SHC, але не пригнічувала короткострокову проліферативну сигналізацію або фосфорилювання JAK2 та STAT5, що ілюструє ієрархію функцій доменів рецептора. ^[13]Було показано, що рецепторна тирозинкиназа RON залучається до шляху IL-3-бета-рецептора в клітинах Ba/F3 для індукції морфологічних змін, що включають перерозподіл F-актину та унікальні зміни форми ядра, що свідчить про взаємодію між системами рецепторних тирозинкиназ та цитокінових рецепторів. ^[14]

Вимоги до субдоменів рецептора також були детально проаналізовані для рецептора IL-2. Використовуючи трансфіковані лінії Ba/F3, Хант та його колеги визначили, що кислий домен та близька до мембрани серин-багата ділянка бета-ланцюга рецептора IL-2 є необхідними для активації MAP-кіназ p38 та p54, причому Tyr338 — місце зв’язування Shc — виступає в ролі критичного посередника. ^[11]Оскільки кислий домен не є обов’язковим для проліферації, індукованої IL-2, автори дійшли висновку, що для росту клітин Ba/F3 під впливом IL-2 насправді не потрібна активація ні MAP-кінази p38, ні p54; ця дисоціація також спостерігалася у первинних Т-клітинах.

Регуляція клітинного циклу в гемопоетичних прогеніторах також досліджувалася з використанням клітин Ba/F3. Махмуд та колеги продемонстрували, що TGF-бета1 уповільнював перехід від фази G1 до фази S у клітинах Ba/F3, пов’язуючи це уповільнення росту з підвищенням експресії білка Bcl-2 та інгібітора CDK p27. ^[15]Синергізм IL-4 з активованим Raf-1 у стимулюванні довготривалої проліферації клітин Ba/F3 досліджували Левінгс та його колеги, які виявили, що IL-4 сам по собі не може підтримувати ріст, але може взаємодіяти з активованим Ras або Raf-1 для забезпечення безперервної проліферації, порівнянної з тією, що забезпечується IL-3. ^[16]

У модифікованих системах перемикання рецепторів використовується залежність клітин Ba/F3 від IL-3 для застосування в генній терапії. Куме та його колеги розробили рецептор G-CSF, злитий з бактеріальною гіразою B (GcrGyr), у якому димеризуючий антибіотик кумерміцин запускав незалежну від IL-3 проліферацію клітин Ba/F3 як концептуально обґрунтовану селективну систему генного підсилення для розширення генетично модифікованих гематопоетичних клітин. ^[17]Аналогічно було показано, що фузійний білок IL-11 та розчинного рецептора IL-11 діє як суперагоніст на трансфіковані gp130 клітини Ba/F3, яким бракує мембранозв’язаного альфа-субодиниці рецептора IL-11, що демонструє: функціонально розчинні компоненти рецептора можуть замінювати трансмембранні субодиниці. ^[18]

Висновок

Клітини Ba/F3 (CVCL_0161) є однією з найбільш універсальних і широко валідованих платформ мишачих клітинних ліній у сучасних біомедичних дослідженнях. Їхня сувора залежність від IL-3 забезпечує елегантний та відтворюваний функціональний тест для онкогенних кіназ — включаючи фузійні білки BCR-ABL, мутації FLT3, та злиття JAK2 — а також для низькомолекулярних інгібіторів кіназ, що мають клінічне значення для хронічного мієлоїдного лейкозу, гострого мієлоїдного лейкозу, лімфобластного лейкозу-лімфоми з попередницьких клітин та аденокарциноми легенів. Десятиліття досліджень визначили сигнальний шлях JAK–STAT, біологію рецепторів цитокінів та регуляцію гемопоетичних клітин як основні сфери застосування Ba/F3. Адаптивність цієї лінії дозволила створити сотні похідних моделей із визначеними мутаціями резистентності, що робить її незамінною у розробці цільової терапії. Якщо ви плануєте започаткувати або розширити свою програму з вивчення біології кіназ або розробки лікарських засобів, клітини Ba/F3 доступні на сайті cytion.com — відвідайте сторінку продукту, щоб отримати додаткову інформацію або оформити замовлення вже сьогодні.

Ключові публікації

1. Didion JP, Buus RJ, Naghashfar Z (2014) Профілювання мишачих клітинних ліній за допомогою SNP-матриці дозволяє ідентифікувати їхні вихідні штами та виявляє перехресне забруднення й поширену анеуплоїдію. BMC Genomics. PMID: 25277546
2. Warmuth M, Kim S, Gu XJ (2007) Клітини Ba/F3 та їх використання у розробці лікарських засобів, що діють на кінази. Current Opinion in Oncology. PMID: 17133113
3. Kojima T, Kitamura T (1999) Пастка сигнальної послідовності на основі конститутивно активного рецептора цитокіну. Nature Biotechnology. PMID: 10331810
4. Хаякава Ф., Товатарі М., Кійої Х. (2000) Тандемно-дуплікований Flt3 конститутивно активує STAT5 та MAP-кіназу й індукує автономний ріст клітин у IL-3-залежних клітинних лініях. «Oncogene». PMID: 10698507
5. Хо Дж. М., Бітті Б. К., Сквайр Дж. А. (1999) Фузія транскрипційного фактора ets TEL з Jak2 призводить до конститутивної сигналізації Jak-Stat. Blood. PMID: 10361134
6. Canitrot Y, Lautier D, Laurent G (1999) Мутаторний фенотип клітинних ліній Ba/F3, трансфікованих BCR–ABL, та його зв’язок із підвищеною експресією ДНК-полімерази бета. Oncogene. PMID: 10348341
7. Uemura N, Salgia R, Ewaniuk DS (1999) Участь адаптерного білка CRKL в інтегрин-опосередкованій адгезії. Oncogene. PMID: 10362355
8. Лю Ц.Б., Іто Т., Араї К. (1999) Конститутивна активація JAK2 забезпечує мишам виживання та проліферацію клітин BA/F3 незалежно від інтерлейкіну-3. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10037724
9. Jaster R, Tschirch E, Bittorf T (1999) Роль STAT5 у передачі сигналу інтерферону-альфа в клітинах Ba/F3. Cellular Signalling. PMID: 10376805
10. Gingras S, Simard J, Groner B (1999) p300/CBP необхідний для транскрипційної індукції інтерлейкіном-4 та взаємодіє зі Stat6. «Nucleic Acids Research». PMID: 10373589
11. Хант А.Е., Лалі Ф.В., Лорд Дж.Д. (1999) Роль субдоменів бета-ланцюга рецептора інтерлейкіну (ІЛ)-2 та Shc в активації мітоген-активованої протеїнкінази p38 (MAP) та p54 MAP-кінази. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10066828
12. Іто Т., Лю Р., Араї К. (1999) Диференційний вплив залишків тирозину загальної бета-субодиниці рецептора на множинні сигнали, індуковані людським GM-CSF. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. PMID: 10329850
13. Окуда К., Фостер Р., Гріффін Дж. Д. (1999) Сигнальні домени бета-ланцюга рецептора GM-CSF/IL-3/IL-5. «Annals of the New York Academy of Sciences». [Огляд] PMID: 10372132
14. Мера А., Суга М., Андо М. (1999) Індукція змін форми клітин шляхом активації рецептора інтерлейкіну-3 із загальним бета-ланцюгом за допомогою тирозинкинази типу рецептора RON. «Журнал біологічної хімії». PMID: 10336478
15. Махмуд Н., Катаяма Н., Нішії К. (1999) Можлива участь bcl-2 у регуляції прогресування клітинного циклу гемопоетичних клітин за допомогою трансформуючого фактора росту-бета-1. British Journal of Haematology. PMID: 10233423
16. Левінгс М.К., Бессетт Д.К., Шрадер Дж.В. (1999) Інтерлейкін-4 діє синергічно з Raf-1, сприяючи довготривалій проліферації та активації N-кінцевої кінази c-jun. «Blood». PMID: 10339476
17. Куме А., Іто К., Уеда Й. (1999) Ген-гіраза B, що злитий з рецептором G-CSF: новий тип молекулярного перемикача для розширення генетично модифікованих гемопоетичних клітин. Biochemical and Biophysical Research Communications. PMID: 10381335
18. Планц С., Таккен І., Грьотцінгер Й. (1999) Фузійний білок інтерлейкіну-11 та розчинного рецептора інтерлейкіну-11 діє як суперагоніст на клітини, що експресують gp130. FEBS Letters. PMID: 10350068
19. Паласіос Р., Штайнметц М. (1985) IL-3-залежні мишачі клони, що експресують поверхневий антиген B-220, містять гени Ig у зародковій конфігурації та генерують В-лімфоцити in vivo. Cell. PMID: 3924409
20. Дуань Ц., Фукуда Т., Ісаджі Т. (2020) Дефіцит основного фукозилювання активує клітинну сигналізацію, залежну від експресії FLT3, у клітинній системі Ba/F3. The FASEB Journal. PMID: 31908039
21. Ян Дж., Фрідман Р. (2025) Сильні сторони та обмеження клітин Ba/F3 у моделюванні резистентності до гострого мієлоїдного лейкозу, опосередкованої FLT3. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. PMID: 41183623
22. Сайто М., Такеда К., Йошино М. (2026) Метотрексат інгібує шлях TEL-JAK2-STAT через механізм, що залежить від метаболізму фолатів, у клітинах Ba/F3. International Immunopharmacology. PMID: 42287956