Inledning

Ba/F3-celler, även känd under synonymerna BA/F3, BaF3, BAF3 och Baf3 (Cellosaurus-accessionsnummer CVCL_0161), är en interleukin-3 (IL-3)-beroende pro-B-cellinje från mus, härledd från benmärg. Linjen beskrevs först av Palacios och Steinmetz 1985 bland en grupp kontinuerligt prolifererande, IL-3-beroende benmärgskloner som bar B-cellslinjemarkören B-220 och behöll sina immunoglobulin-gener i könscellskonfiguration. ^[19] Ursprungligen uppgavs den härstamma från en BALB/c-mus, men senare SNP-array-profilering visade att stammen i själva verket härstammar från en C3H-mus. ^[1] Sedan de utvecklades har Ba/F3-celler blivit ett av de mest använda modellsystemen inom forskning om hematopoetisk signalering och utveckling av cancerläkemedel. Deras strikta beroende av IL-3 för överlevnad och proliferation gör dem till en exceptionellt ren plattform: införandet av ett onkogent kinas eller fusionsprotein gör cellerna faktoroberoende, vilket ger ett kraftfullt och kvantifierbart resultat. Forskare utnyttjar rutinmässigt denna egenskap för att karakterisera BCR-ABL-fusionsproteiner, FLT3-mutationer, JAK2-fusioner och många andra kliniskt relevanta kinasonkogener, samt för att profilera småmolekylära kinasinhibitorer i högkapacitetsformat.

Viktiga slutsatser

• Ba/F3 är en IL-3-beroende pro-B-cellinje från mus, härrörande från benmärg från C3H-mus, och är registrerad i Cellosaurus med referensnummer CVCL_0161.
• IL-3-tillbakadragande utgör ett strikt selektionsförfarande: föräldracellerna dör, medan celler som uttrycker ett aktivt onkogent kinas – eller någon annan konstruktion som ger en konstant tillväxtsignal – överlever och förökar sig.
• Denna cellinje har använts i stor utsträckning för att studera BCR-ABL-fusionsproteiner, FLT3-mutationer, JAK–STAT-signalering och cytokinreceptorbiologi.
• Ba/F3-celler blir alltmer anpassade för screening av kinasinhibitorer med hög genomströmning, vilket gör dem till en hörnsten i utvecklingen av målinriktade cancerläkemedel. ^[2]
• Hundratals derivatcellinjer med definierade onkogena mutationer har framställts från Ba/F3, vilka omfattar EGFR, ALK, ROS1, RET, NTRK, FLT3 och många andra kliniskt relevanta mål.

Vad är Ba/F3?

Ba/F3 är en faktorberoende pro-B-cellinje från mus, etablerad från benmärg från C3H-mus; donatorns kön och ålder är inte registrerade i Cellosaurus-data för denna linje. Moderstammen bär inte på några kända aktiverande kinasmutationer och kräver exogent IL-3 för att överleva. Dess fördubblingstid är cirka 20 timmar under standardodlingsförhållanden. Stammens främsta utmärkande egenskap är dess strikta IL-3-beroende, vilket innebär att varje genetisk manipulation som ger faktoroberoende tillväxt kan detekteras snabbt och entydigt. Denna egenskap, i kombination med avsaknaden av störande endogena kinasmutationer, har gjort Ba/F3-celler till ett oumbärligt verktyg för att analysera den onkogena potentialen hos kinasfusioner, punktmutationer och konstitutivt aktiva signalmolekyler inom både hematopoetisk och solid tumörbiologi. Det bör noteras att avsaknaden av en mutationsannotering inte är detsamma som en genetiskt orörd bakgrund: Cellosaurus registrerar även variationsdata härledda från SNP-arrayer för denna cellinje.

Genom SNP-array-profilering kunde man rätta till en långvarig felaktig uppgift om denna stams ursprung. I tidigare litteratur beskrevs Ba/F3 som härstammande från en BALB/c-mus, men en genomisk analys bekräftade att den härstammar från C3H. ^[1] Av de 99 muscellinjer som undersöktes i den studien var Ba/F3 den enda linjen vars genetiska bakgrund inte stämde överens med den rapporterade ursprungsstammen; avvikelsen bekräftades oberoende av RIKEN, en distributör av linjen, och en morfologisk jämförelse med andra C3H-härledda linjer visade att Ba/F3 är en separat cellinje snarare än resultatet av korskontaminering. Detta fynd understryker vikten av rutinmässig autentisering av cellinjer, särskilt för muslinjer där STR-profilering ensam kan vara otillräcklig för att särskilja inavlade stammar. Forskare som använder Ba/F3 bör hänvisa till Cellosaurus-accessionsnumret CVCL_0161 för att säkerställa entydig identifiering i publikationer.

Information om cellodling

Fördelar med Ba/F3-celler

Den största fördelen med Ba/F3-celler är deras binära, IL-3-beroende överlevnadsmekanism. I frånvaro av IL-3 genomgår de ursprungliga Ba/F3-cellerna snabbt apoptos. Införandet av ett onkogent kinas eller fusionsprotein räddar cellerna från döden, vilket möjliggör enkel selektion av stabilt transformerade kloner utan komplexa reporterkonstruktioner. Denna egenskap har utnyttjats i ett stort antal analysformat, från klassiska kolonöverlevnadsanalyser till moderna högkapacitetsscreeningar av cellproliferation för profilering av kemiska föreningar. ^[2] Tack vare att avläsningen är enkel och tillförlitlig har Ba/F3-baserade analyser blivit ett allmänt använt system för en första bedömning av kinasinhibitorers potens, även om de absoluta potensvärdena fortfarande varierar beroende på analysmetod och laboratorium och därför bör jämföras mellan olika studier med försiktighet. ^[21]

Ba/F3-celler är dessutom genetiskt anpassningsbara och lätta att transfektera eller transducera. Retroviral, lentiviral och elektroporationsbaserad överföring av expressionskonstruktioner ger alla effektivt sublinjer med stabil expression. Detta har möjliggjort framställningen av hundratals derivatlinjer som bär kliniskt relevanta mutationer i målgenom såsom EGFR, FLT3, BCR-ABL, EML4-ALK och RET, bland många andra. Avsaknaden av störande endogena kinasmutationer i moderlinjen säkerställer att fenotypiska reaktioner specifikt kan hänföras till det införda transgenet. Dessutom möjliggör fördubblingstiden på cirka 20 timmar en snabb experimentell genomströmning, vilket avsevärt förkortar analysperioderna jämfört med långsammare växande primära cellkulturer.

Ba/F3-plattformen har visat sig vara särskilt väl lämpad för tillämpningar inom upptäckt av signalssekvenser. Kojima och Kitamura utnyttjade en konstant aktiv cytokinreceptorkonstruktion för att omdirigera Ba/F3-cellernas tillväxtberoende mot lokalisering på cellytan av proteiner som bär signalpeptider, vilket möjliggjorde storskalig cDNA-screening för att identifiera utsöndrade och membranbundna genprodukter. ^[3] Denna kreativa tillämpning visar hur Ba/F3-cellernas IL-3-beroende kan utnyttjas långt utöver renodlad forskning om onkogena kinaser, vilket etablerar cellinjen som en mångsidig plattform för genetisk screening.

Begränsningar hos Ba/F3-celler

Trots sina många fördelar har Ba/F3-celler inneboende biologiska begränsningar som måste beaktas vid tolkningen av experimentella data. Eftersom de är en pro-B-cellinje från möss saknar de många signaladapter och koreceptorer som finns i humana cancerceller. De värden för hämmarnas potens och de nedströms signalresponser som observeras i Ba/F3-celler speglar kanske inte aktiviteten i primära humana tumörceller eller material från patienter på ett korrekt sätt. Forskare som studerar resistens mot riktade terapier för lungadenokarcinom måste till exempel validera Ba/F3-baserade resultat i mer fysiologiskt relevanta humana cellmodeller innan de drar kliniska slutsatser.

Denna linjes genomiska bakgrund har också varit föremål för felaktiga tolkningar. Under årtionden ansågs Ba/F3 ha sitt ursprung i BALB/c, men profilering med SNP-array visade att den härstammar från en C3H-mus. ^[1] Samma studie fann tecken på aneuploidi hos ungefär 42 % av de undersökta muscellinjerna, däribland en betydande andel linjer som härstammade från normal vävnad snarare än tumörvävnad; själva Ba/F3-linjen flaggades för felidentifiering snarare än för förändringar i kopiantalet, men det allmänna resultatet illustrerar hur lätt karyotypisk drift ackumuleras i odling. En sådan instabilitet vid höga passagenummer kan påverka signaleringsresultat, mätningar av läkemedelskänslighet och reproducerbarheten hos transformerade fenotyper. Forskare bör därför arbeta med låga passagenummer och rutinmässigt verifiera sina stamceller.

Slutligen återspeglar Ba/F3-celler inte den fullständiga tumörmikromiljön eller de stromala interaktionerna som förekommer vid hematologiska maligniteter. De saknar också endogent uttryck av många humana signalkomponenter, vilket innebär att koreceptorinteraktioner som är viktiga för onkogenernas funktion kan saknas eller vara avvikande. Studier av komplexa cytokinreceptorer med flera subenheter eller receptorer som kräver glykosyleringsberoende signalering kan behöva kompletterande humana cellsystem för att man ska kunna dra biologiskt giltiga slutsatser. Trots dessa förbehåll förblir Ba/F3-celler ett kraftfullt och allmänt accepterat förstahandsverktyg inom kinasbiologin.

Se fullständiga specifikationer och beställ

Tillämpningar

Utveckling av kinashämmande läkemedel och screening av onkogener

Ba/F3-celler har blivit den dominerande cellulära plattformen för läkemedelsutveckling riktad mot kinaser. Warmuth och kollegor har gjort en omfattande utvärdering av Ba/F3-systemet för detta ändamål och beskrivit hur IL-3-oberoende analysmetoder kan anpassas till högkapacitetsformat för att utvärdera både den onkogena potentialen hos kinasmutationer och förmågan hos småmolekylära kinasinhibitorer att vända faktoroberoende tillväxt. ^[2]Översiktsartikeln lyfte fram att Ba/F3-celler rymmer en anmärkningsvärd bredd av onkogena kinaser, vilket gör dem till en universell plattform för inledande profilering av cancerassocierade kinomvarianter innan man går vidare till mer komplexa humana cellmodeller.

Den signalsekvensfälla som utvecklats av Kojima och Kitamura visade att Ba/F3-celler kan användas inte bara för forskning kring onkogena kinaser utan även för funktionell screening av cDNA-bibliotek. ^[3]Genom att koppla en konstant aktiv cytokinreceptor till signalpeptidfunktionen resulterade ett enda pilotexperiment i 150 tidigare kända kloner – alla kodande för utsöndrade eller cellytproteiner – tillsammans med 48 nya cDNA-kloner, inklusive typ II-membranproteiner som undgått tidigare strategier med signalsekvensfällor. Denna metod illustrerar skalbarheten hos Ba/F3-plattformen bortom klassisk validering av läkemedelsmål.

Den extrema mångfalden av derivatlinjer av Ba/F3 som nu är katalogiserade i Cellosaurus – omfattande hundratals EGFR-varianter, ALK-fusioner, RET-omarrangemang, NTRK-fusioner och resistensmutationer – understryker hur den ursprungliga Ba/F3-linjen har blivit ett grundläggande ramverk för precisionsonkologisk forskning. Varje derivatlinje bevarar den rena IL-3-beroende bakgrunden samtidigt som den tillför en enda definierad genetisk variabel, vilket möjliggör systematiska studier av struktur–aktivitetssamband på cellnivå.

FLT3-mutationer och akut myeloid leukemi

En av de mest betydelsefulla tillämpningarna av Ba/F3-celler har varit karakteriseringen av FLT3-mutationer (fms-liknande tyrosinkinas 3) vid akut myeloid leukemi (AML). Intern tandemduplikation av FLT3 är en av de vanligaste onkogena lesionerna vid AML och rapporteras i ungefär 20–30 % av fallen, beroende på kohort och detektionsmetod. ^[4][20]Hayakawa och kollegor visade att tandemduplicerat FLT3, som infördes i de två IL-3-beroende cellinjerna 32D och Ba/F3, konstant aktiverar både STAT5 och MAP-kinas och ger upphov till autonom, IL-3-oberoende tillväxt, medan vildtyp-FLT3 endast stödde minimal proliferation även vid kontinuerlig ligandstimulering.^[4] Denna banbrytande studie etablerade Ba/F3-celler som ett primärt funktionellt testsystem för validering av FLT3-mutationer och förblir en metodologisk referens inom området.

Efterföljande forskning har i stor utsträckning byggt vidare på denna grund. Studier av kärnfukosylering visade att CRISPR/Cas9-knockout av Fut8-genen i Ba/F3-celler som uttrycker vildtyp-FLT3 var tillräckligt för att driva på IL-3-oberoende proliferation — en effekt som inte observerades i modercellerna — åtföljd av ökad tyrosinfosforylering och aktivering av STAT5, AKT och ERK, samt av ligandoberoende FLT3-dimerisering.^[20] Detta avslöjade en regleringsmekanism via glykosylering som tidigare inte hade uppmärksammats för denna receptor. Resistens mot FLT3-hämmaren gilteritinib har också undersökts i Ba/F3 FLT3-ITD-modeller, där resistens vid kliniskt uppnåeliga läkemedelskoncentrationer vanligtvis krävde flera sekundära mutationer, varav flera tidigare inte hade rapporterats. ^[21]I samma arbete vägdes fördelarna och begränsningarna hos Ba/F3 FLT3-ITD-modellerna systematiskt in, och man konstaterade att även om plattformen är väl lämpad för att identifiera och rangordna resistensmutationer, återger den inte den komplexa nischen i benmärgen som formar resistensen hos patienter.

BCR-ABL-biologi och kronisk myeloid leukemi

Ba/F3-celler som transficerats med BCR-ABL-fusionsproteiner har spelat en avgörande roll för förståelsen av den molekylära biologin bakom kronisk myeloid leukemi (CML). Canitrot och kollegor använde Ba/F3-celler som uttrycker BCR-ABL-isoformerna p190 och p210 för att visa att BCR-ABL ger upphov till en mutatorfenotyp, vilket ökar frekvensen av spontana mutationer tre- till femfaldigt jämfört med föräldracellerna, och att denna genomiska instabilitet var förknippad med förhöjt uttryck av DNA-polymeras beta. ^[6]Denna upptäckt gav en förklaring till hur BCR-ABL kan driva sjukdomsförloppet från kronisk CML till akut myeloid leukemi.

Adapterproteinet CRKL, ett av de viktigaste tyrosinfosfoproteiner i leukemiska neutrofiler från CML-patienter, studerades i Ba/F3-celler av Uemura och kollegor. ^[7]Celler som överuttryckte CRKL i full längd uppvisade ökad vidhäftning till fibronektin och förändrad morfologi på fibronektinbelagda ytor, medan deletionsmutanter som saknade antingen SH2- eller den N-terminala SH3-domänen inte gjorde det — vilket indikerar att båda domänerna krävs för effekten. Adhesionen blockerades av en antikropp mot beta1-integrin, även om överuttrycket av CRKL varken förändrade ytuttrycket av beta1-integrin eller spontant inducerade dess aktiveringsepitop. Dessa experiment pekar på att CRKL är involverat i signalvägar som reglerar integrinmedierad adhesion nedströms om BCR-ABL.

Sammantaget visar dessa BCR-ABL-studier hur Ba/F3-celler möjliggör en tydlig analys av onkogendriven signalering genom att eliminera komplexiteten hos endogen kinasaktivitet. Plattformen fortsätter att stödja karakteriseringen av resistensmutationer mot BCR-ABL-hämmare, och det finns nu särskilda Ba/F3-linjer med BCR-ABL och BCR-ABL-T315I-derivat tillgängliga för direkt profilering av hämmare i samband med kliniskt relevanta resistensgenotyper.

JAK–STAT-signalvägar

Ba/F3-celler har fungerat som en primär modell för att analysera vilka signalhändelser nedströms om cytokinreceptorerna som faktiskt krävs för tillväxt. Liu och kollegor konstruerade en chimär molekyl (beta/JAK2) bestående av betac:s extracellulära och transmembrana regioner fusionerade med JAK2 och uttryckte den i Ba/F3-celler. ^[8]Den chimära molekylen var konstant fosforylerad och tillräcklig för att driva IL-3-oberoende överlevnad och proliferation. Noterbart är att STAT5, Shc och SHP-2 inte fosforylerades i dessa celler och att aktiviteten hos beta-kasein- och c-fos-promotorerna inte förstärktes, medan c-myc-transkriptionen var konstant aktiverad. Författarna drog slutsatsen att aktivering av JAK2 i sig är tillräcklig för överlevnad och proliferation och att aktivering av STAT5 och MAP-kinas inte krävs för just dessa effekter – en nyttig påminnelse om att faktoroberoende tillväxt i Ba/F3-celler i sig inte innebär att STAT aktiveras.

STAT5:s roll i IFN-alfa-signaleringen undersöktes i Ba/F3-celler av Jaster och kollegor, som visade att IFN-alfa aktiverar STAT5A:s och STAT5B:s DNA-bindning, men att IL-3 är en betydligt kraftfullare inducerare av båda isoformerna. ^[9]En dominant-negativ JAK2-mutant hämmade IL-3-driven men inte IFN-alfa-driven STAT5-aktivering, vilket visade att de två cytokinerna utnyttjar oberoende uppströmsmekanismer för att konvergera mot samma transkriptionsfaktor; författarna drog dock slutsatsen att STAT5 inte är avgörande för IFN-alfa-signalering i detta system.

Konstitutiv JAK–STAT-aktivering har modellerats i Ba/F3-celler med hjälp av TEL–JAK2-fusionsproteinet, en onkogen fusion som är associerad med akut lymfoblastisk T-cellsleukemi. Ho och kollegor visade att fusion av TEL:s spetsiga domän med den funktionella JAK2-kinasdomänen (JH1) gjorde Ba/F3-cellerna faktoroberoende, medan fusion med pseudokinasdomänen (JH2) eller med en kinasinaktiv JH1-domän inte gjorde det; aktiva konstruktioner drev på en konstitutiv tyrosinfosforylering av STAT1, STAT3 och STAT5.^[5] Mer nyligen visade det sig att metotrexat hämmar TEL–JAK2, STAT3- och STAT5-fosforylering i Ba/F3-celler genom en folatmetabolismberoende mekanism: effekten reverserades av folinsyra, reproducerades genom CRISPR/Cas9-knockout av dihydrofolatreduktas och kunde inte efterliknas av 5-fluorouracil. ^[22]

IL-4-signalering via STAT6 undersöktes av Gingras och kollegor, som visade att p300/CBP-koaktivatorer krävs för STAT6-medierad transkriptionell induktion och att överuttryck av p300/CBP förstärker IL-4-driven reportergenaktivitet. ^[10]Större delen av detta arbete utfördes i COS7- och HeLa-celler; Ba/F3-celler bidrog med det avgörande endogena beviset, nämligen koimmunoprecipitationen av nativt STAT6 tillsammans med CBP.

Cytokinreceptorsignalering och hematopoetisk cellbiologi

GM-CSF/IL-3/IL-5-receptorsystemet har kartlagts ingående med hjälp av Ba/F3-celler. Itoh och kollegor utförde en systematisk mutationsanalys av de åtta cytoplasmiska tyrosinresterna i den gemensamma beta-subenheten (betac) och uttryckte en serie tyrosin-till-fenylalanin-mutanter tillsammans med den vildtypshumana alfa-subenheten i Ba/F3-celler för att fastställa vilka rester som förmedlar specifika signalutgångar. ^[12]Vid granskningen av en parallell mutagenesserie rapporterade Okuda och kollegor att mutation av alla åtta cytoplasmiska tyrosiner i GMR-beta minskade fosforyleringen av själva receptorn, SHP2 och SHC, men inte hindrade kortvarig proliferativ signalering eller fosforylering av JAK2 och STAT5, vilket illustrerar en hierarki av receptordomänernas funktioner. ^[13]Det visades att RON-receptortyrosinkinas aktiverar IL-3-betac-receptorsignalvägen i Ba/F3-celler för att inducera morfologiska förändringar som involverar omfördelning av F-aktin och unika förändringar av kärnans form, vilket avslöjar korskommunikation mellan receptortyrosinkinas- och cytokinreceptorsystem. ^[14]

Krav på receptorsubdomäner har även analyserats för IL-2-receptorn. Med hjälp av transfekterade Ba/F3-cellinjer identifierade Hunt och kollegor den sura domänen och den membrannära serinrika regionen i IL-2-receptorns beta-kedja som nödvändiga för aktivering av p38- och p54-MAP-kinaser, där Tyr338 – Shc-bindningsstället – fungerar som en avgörande mellanhand. ^[11]Eftersom den sura domänen inte är nödvändig för IL-2-driven proliferation drog författarna slutsatsen att varken aktivering av p38- eller p54-MAP-kinas faktiskt krävs för IL-2-driven tillväxt av Ba/F3-celler, en dissociation som även gällde för primära T-celler.

Regleringen av cellcykeln i hematopoetiska progenitorceller har också studerats med hjälp av Ba/F3-celler. Mahmud och kollegor visade att TGF-beta1 fördröjde övergången från G1- till S-fasen i Ba/F3-celler och kopplade denna tillväxtfördröjning till uppreglering av Bcl-2-proteinet och CDK-hämmaren p27. ^[15]Synergismen mellan IL-4 och aktiverat Raf-1 för att driva långsiktig Ba/F3-proliferation studerades av Levings och kollegor, som fann att IL-4 ensamt inte kunde upprätthålla tillväxten men kunde samverka med aktiverat Ras eller Raf-1 för att upprätthålla en kontinuerlig proliferation jämförbar med IL-3. ^[16]

Genmanipulerade receptorswitchingsystem har utnyttjat Ba/F3-cellernas IL-3-beroende för genterapitillämpningar. Kume och kollegor utvecklade en G-CSF-receptor fusionerad med bakteriellt gyrase B (GcrGyr), där det dimeriserande antibiotikumet coumermycin utlöste IL-3-oberoende Ba/F3-proliferation som ett selektivt förstärkande gensystem för att expandera genetiskt modifierade hematopoetiska celler. ^[17]På liknande sätt visade sig ett fusionsprotein av IL-11 och den lösliga IL-11-receptorn fungera som en superagonist på gp130-transfekterade Ba/F3-celler som saknade den membranbundna IL-11-receptor-alfa, vilket visade att lösliga receptorkomponenter funktionellt kan ersätta transmembrana subenheter. ^[18]

Slutsats

Ba/F3-celler (CVCL_0161) utgör en av de mest mångsidiga och omfattande validerade plattformarna för murina cellinjer inom modern biomedicinsk forskning. Deras strikta IL-3-beroende ger en elegant och reproducerbar funktionell analysmetod för onkogena kinaser — inklusive BCR-ABL-fusionsproteiner, FLT3-mutationer, och JAK2-fusioner – samt för småmolekylära kinasinhibitorer med klinisk relevans för kronisk myeloid leukemi, akut myeloid leukemi, lymfoblastisk leukemi-lymfom hos prekursorceller och lungadenokarcinom. Årtionden av forskning har etablerat JAK–STAT-signalering, cytokinreceptorbiologi och reglering av hematopoetiska celler som centrala tillämpningsområden för Ba/F3. Cellinjens anpassningsförmåga har möjliggjort skapandet av hundratals derivatmodeller med definierade resistensmutationer, vilket gör den oumbärlig vid utveckling av målinriktad terapi. Om du vill etablera eller utöka ditt program inom kinasebiologi eller läkemedelsutveckling finns Ba/F3-celler tillgängliga på cytion.com – besök produktsidan för att ställa frågor eller lägga en beställning redan idag.

Viktiga publikationer

1. Didion JP, Buus RJ, Naghashfar Z (2014) SNP-arrayprofilering av muscellinjer identifierar deras ursprungsstammar och avslöjar korskontaminering och utbredd aneuploidi. BMC Genomics. PMID: 25277546
2. Warmuth M, Kim S, Gu XJ (2007) Ba/F3-celler och deras användning vid läkemedelsutveckling för kinaser. Current Opinion in Oncology. PMID: 17133113
3. Kojima T, Kitamura T (1999) En signalsekvensfälla baserad på en konstant aktiv cytokinreceptor. Nature Biotechnology. PMID: 10331810
4. Hayakawa F, Towatari M, Kiyoi H (2000) Tandemduplicerad Flt3 aktiverar STAT5 och MAP-kinas konstant och inducerar autonom celltillväxt i IL-3-beroende cellinjer. Oncogene. PMID: 10698507
5. Ho JM, Beattie BK, Squire JA (1999) Fusion av Ets-transkriptionsfaktorn TEL med Jak2 resulterar i konstitutiv Jak-Stat-signalering. Blood. PMID: 10361134
6. Canitrot Y, Lautier D, Laurent G (1999) Mutatorfenotyp hos BCR–ABL-transfekterade Ba/F3-cellinjer och dess samband med förhöjd expression av DNA-polymeras beta. Oncogene. PMID: 10348341
7. Uemura N, Salgia R, Ewaniuk DS (1999) Adapterproteinet CRKL:s inblandning i integrinmedierad adhesion. Oncogene. PMID: 10362355
8. Liu CB, Itoh T, Arai K (1999) Konstitutiv aktivering av JAK2 medför interleukin-3-oberoende överlevnad och proliferation av BA/F3-celler hos möss. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10037724
9. Jaster R, Tschirch E, Bittorf T (1999) STAT5:s roll i signaltransduktionen av interferon-alfa i BA/F3-celler. Cellular Signalling. PMID: 10376805
10. Gingras S, Simard J, Groner B (1999) p300/CBP krävs för transkriptionell induktion av interleukin-4 och interagerar med Stat6. Nucleic Acids Research. PMID: 10373589
11. Hunt AE, Lali FV, Lord JD (1999) Betydelsen av subdomänerna i interleukin (IL)-2-receptorns betakedja och Shc för aktiveringen av p38-mitogenaktiverat protein (MAP)-kinas och p54-MAP-kinas. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10066828
12. Itoh T, Liu R, Arai K (1999) Olika påverkan av tyrosinrester i den gemensamma receptorns beta-subenhet på flera signaler inducerade av humant GM-CSF. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. PMID: 10329850
13. Okuda K, Foster R, Griffin JD (1999) Signaleringsdomäner hos beta-c-kedjan i GM-CSF/IL-3/IL-5-receptorn. Annals of the New York Academy of Sciences. [Översiktsartikel] PMID: 10372132
14. Mera A, Suga M, Ando M (1999) Induktion av förändringar i cellform genom aktivering av den gemensamma beta-kedjereceptorn för interleukin-3 av tyrosinkinasen av RON-receptortyp. The Journal of Biological Chemistry. PMID: 10336478
15. Mahmud N, Katayama N, Nishii K (1999) Möjlig inblandning av bcl-2 i regleringen av cellcykelprogression hos hematopoetiska celler genom transformerande tillväxtfaktor-beta1. British Journal of Haematology. PMID: 10233423
16. Levings MK, Bessette DC, Schrader JW (1999) Interleukin-4 verkar synergistiskt med Raf-1 för att främja långvarig proliferation och aktivering av c-jun N-terminalt kinas. Blood. PMID: 10339476
17. Kume A, Ito K, Ueda Y (1999) Ett fusionsgen mellan G-CSF-receptorn och gyrase B: En ny typ av molekylär omkopplare för expansion av genetiskt modifierade hematopoetiska celler. Biochemical and Biophysical Research Communications. PMID: 10381335
18. Pflanz S, Tacken I, Grötzinger J (1999) Ett fusionsprotein av interleukin-11 och den lösliga interleukin-11-receptorn fungerar som en superagonist på celler som uttrycker gp130. FEBS Letters. PMID: 10350068
19. Palacios R, Steinmetz M (1985) IL-3-beroende muskloner som uttrycker ytantigenet B-220, innehåller Ig-gener i germlinjekonfiguration och genererar B-lymfocyter in vivo. Cell. PMID: 3924409
20. Duan C, Fukuda T, Isaji T (2020) Brist på kärnfukosylering aktiverar cellulär signalering som är beroende av FLT3-uttryck i ett Ba/F3-cellsystem. The FASEB Journal. PMID: 31908039
21. Yang J, Friedman R (2025) Styrkor och begränsningar hos Ba/F3-celler vid modellering av FLT3-driven AML-resistens. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. PMID: 41183623
22. Saito M, Takeda K, Yoshino M (2026) Metotrexat hämmar TEL-JAK2-STAT-signalvägen genom en folatmetabolismberoende mekanism i Ba/F3-celler. International Immunopharmacology. PMID: 42287956