Inledning

HMC3-celler, även känd som Human Microglia Clone 3, CHME-3 eller CHME3, är en av de mest använda mänskliga mikrogliacellinjerna inom neurovetenskaplig forskning. Cellinjen etablerades 1995 av Janabi, Peudenier, Héron och kollegor genom SV40-stort T-antigen-beroende immortaliserande av humana embryonala makrofager härrörande från hjärnan. [1] HMC3-celler behåller mikrogliacellernas grundläggande egenskaper, däribland det konstanta uttrycket av det joniserade kalciumbindande adaptermolekylen Iba-1 och det interferon-gamma-inducerbara uttrycket av MHC-klass II-antigener. [2] [3] Som de inneboende cellerna i det medfödda immunsystemet i centrala nervsystemet spelar mikroglia en avgörande roll vid neuroinflammatoriska sjukdomar, Alzheimers sjukdom och andra neurodegenerativa sjukdomar. HMC3-celler fungerar därför som en hanterbar human in vitro-plattform för att studera mikrogliaaktivering, neuroprotektiva medel, viral neuroinfektion och tumörens mikromiljö vid glioblastom.

Viktiga slutsatser

• HMC3-celler är odödliga mikroglia från mänsklig fosterhjärna som framställts genom transfektion med SV40:s stora T-antigen.
• Cellinjen uttrycker Iba-1 kontinuerligt och uppreglerar MHC klass II vid stimulering med interferon-gamma; rapporterna om uttrycket av CD14, CD11b och CD68 varierar mellan olika laboratorier och bör verifieras för varje enskilt parti.
• HMC3-celler är en mycket vanlig in vitro-modell för studier av neuroinflammatoriska sjukdomar, Alzheimers sjukdom och neurodegenerativa sjukdomar.
• Cellinjen är mottaglig för infektion av flera neurotropa virus, däribland zikavirus, Borna-sjukdomsvirus 1, chikungunyavirus och rhinovirus.
• HMC3-celler uttrycker NOX4 konstant och bildar reaktiva syreföreningar, vilket gör dem relevanta för forskning om oxidativ stress.
• Denna metod har använts i studier av glioblastoms tumörmikromiljö, läkemedelsfarmakologi och forskning om biomaterialstommar.
• Interleukin-1 beta – antingen ensamt eller i kombination med interferon-gamma – är den mest effektiva inflammatoriska stimulansen i denna serie; reaktionerna på LPS är relativt måttliga, och TNF-alfa och kväveoxid förekommer i stort sett inte alls.

Vad är HMC3?

HMC3 (Cellosaurus-accession CVCL_II76) är en transformerad human mikrogliacellinje som härrör från den fetala hjärnan hos ett embryo i graviditetsvecka 8–10. Donatorns kön är inte specificerat. Ingen sjukdom kunde kopplas till donatorn. Cellinjen etablerades av Janabi och kollegor 1995 genom transfektion av primära embryonala hjärnmakrofagkulturer med en plasmid som kodar för SV40:s stora T-antigen, vilket resulterade i fyra kontinuerliga mikrogliacellinjer, varav klon 3 blev den mest använda. [1] De transformerade cellerna behöll makrofagiska egenskaper, såsom vidhäftningsförmåga och ospecifik esterasaktivitet, och kunde fagocytera zymosanpartiklar, även om den fagocytiska aktiviteten förblev låg. Interleukin-6 producerades spontant av cellerna, och produktionen ökade ytterligare efter stimulering med interleukin-1 alfa. [1] I en omfattande systematisk litteraturöversikt från 2018, utförd av Dello Russo och kollegor, sammanställdes de tillgängliga karakteriseringsuppgifterna för denna klon och en viktig oklarhet klargjordes: samma cellinje har cirkulerat under namnen CHME3, C13-NJ och CHME-5. [3] I granskningen drogs slutsatsen att cellerna, oavsett vilken benämning som används, har en jämförbar antigenisk och funktionell profil och bör betraktas som en enda experimentell modell – samtidigt som man påpekade att flera CHME-5-aliquoter i omlopp visade sig vara korskontaminerade med gliomceller från råtta. Det ATCC-autentiserade HMC3-stamlagret (ATCC CRL-3304) är fritt från denna tvetydighet.

Information om cellodling med HMC3

HMC3-celler är tåliga när det gäller valet av basmedium: de har framgångsrikt odlats i EMEM, MEM och DMEM:Ham’s F12, var och en kompletterad med 10 % serum. [3] Detta val är dock inte fenotypiskt neutralt. Dello Russo och kollegor rapporterade att den basala produktionen av reaktiva syreföreningar var betydligt lägre i celler som odlats i MEM eller DMEM:F12 jämfört med EMEM, vilket tyder på en mindre aktiverad vilofenotyp. [3] Forskare som jämför data mellan olika laboratorier bör därför dokumentera vilket odlingsmedium som använts tillsammans med antalet passager.

Fördelar med HMC3-celler

HMC3-celler utgör en unik och lättillgänglig modell för humana mikroglia i en tid då det är svårt att få tag på primära humana mikroglia i tillräckliga mängder för storskalig forskning. Cellinjen växer adherent och är enkel att odla. Avgörande är att cellerna uttrycker Iba-1 konstitutivt, uppreglerar MHC klass II som svar på interferon-gamma och – i den ATCC-autentiserade stammen – transkriberar de mer nyligen definierade mikroglia-signaturgenerna CX3CR1, CSF1R, P2RY12 och TMEM119, vilket ger en biologiskt validerad ersättning för primära humana mikroglia. [2] [3] Dessa egenskaper gör HMC3-celler till en allmänt använd plattform för mekanistiska studier av neuroinflammatoriska sjukdomar som kräver reproducerbart, skalbart och helt humant cellmaterial.

En ytterligare styrka hos HMC3-cellerna är deras reaktionsförmåga på en definierad uppsättning inflammatoriska stimuli. Den mest effektiva induceraren av interleukin-6 är interleukin-1 beta, vilket ökar den basala frisättningen upp till femtiofaldigt och verkar synergistiskt med interferon-gamma; LPS och amyloid-beta-peptider framkallar mer måttliga, koncentrationsberoende ökningar. [3] Denna graderade, reproducerbara responsprofil möjliggör koncentrationsberoende experiment och tidsförloppsstudier som är svåra att genomföra i primära cellpreparat. Deras respons på både proinflammatoriska och antiinflammatoriska stimuli – inklusive farmakologiska medel såsom rapamycin och dexmedetomidin – utvidgar ytterligare deras användbarhet inom läkemedelsfarmakologi och screening av neuroprotektiva medel. [4] [5] Cellerna är dessutom mottagliga för flera neurotropa virus, vilket utvidgar deras användningsområde till forskning inom neuroinfektiologi.

Begränsningar hos HMC3-celler

Som en transformerad cellinje bär HMC3-cellerna på SV40:s stora T-antigen, vilket ger dem odödlighet men också förändrar vissa aspekter av cellbiologin jämfört med primära mikroglia. Li och kollegor rapporterade oväntade uttrycksmönster för NOX-isoformer – rikligt med NOX4 men nästan inget NOX2-mRNA – vilket står i kontrast till primära mikroglia och begränsar användbarheten av denna cellinje som modell för NOX2-medierad respiratorisk burst. [2] [3] Forskare bör därför kontrollera att just den signalväg som undersöks återges korrekt i denna cellinje innan de drar allmänna slutsatser om mekanismerna.

Ytterligare tre begränsningar förtjänar uppmärksamhet. För det första är repertoaren av inflammatoriska mediatorer ofullständig: HMC3-celler utsöndrar endast marginella mängder av den antiinflammatoriska cytokinet IL-10 (i storleksordningen några pg/ml), producerar lite eller ingen TNF-alfa, varken spontant eller efter proinflammatorisk aktivering, och uppvisar en konstant förhöjd nivå av IL-6 som drivs av NOX4-beroende reaktiva syreföreningar. [2] [3] För det andra, och i skarp kontrast till mikroglia hos gnagare, uttrycker vilande HMC3-celler inte iNOS, och varken induktion av iNOS eller mätbar nitritansamling har observerats efter stimulering med LPS, LPS i kombination med interferon-gamma, IL-1 beta eller TNF-alfa. [3] Studier som fokuserar på kväveoxidaxeln passar därför inte särskilt väl in i denna modell.

För det tredje har cellinjen framställts från fosterhjärnvävnad, vilket innebär att dess transkriptions- och funktionsprofil kan skilja sig från de mikrogliala tillstånd som uppstår hos vuxna och som är relevanta för neurodegenerativa sjukdomar i senare delen av livet. Forskare som modellerar Alzheimers sjukdom eller Parkinsons sjukdom hos vuxna bör, där så är möjligt, tolka data från HMC3 tillsammans med kompletterande mikroglia-system från vuxna primära celler eller iPSC. Slutligen är rapporterna om ytmarkörprofilen inte helt överensstämmande: medan Li och kollegor beskrev konstitutivt uttryck av Iba-1 och CD14 tillsammans med interferon-gamma-inducerbara CD11b, CD68 och MHC klass II, [2] både den ursprungliga beskrivningen av Janabi och kollegor [1] och de flödescytometriska data som Dello Russo och kollegor redovisade för ATCC CRL-3304 visade att vilande celler var CD14- och CD11b-negativa, och att ingen av markörerna inducerades av interferon-gamma. [3] Antikroppsklon, odlingsmedium och antal passager påverkar alla dessa mätresultat, och genetisk drift vid seriell passering är generellt dokumenterad för kontinuerliga linjer; marköruttrycket bör bekräftas internt snarare än att man utgår från att det stämmer.

Se fullständiga specifikationer och beställ

Användningsområden för HMC3-celler

Neuroinflammation och mikrogliaaktivering

Studier av neuroinflammatoriska sjukdomar utgör den mest utvecklade tillämpningen av HMC3-celler. Li och kollegor visade att HMC3-celler konstitutivt uttrycker NOX4, vilket driver en kontinuerlig produktion av reaktiva syreföreningar och ett ihållande uttryck av IL-6 – en upptäckt som positionerade dessa celler som en modell för kronisk, låggradig neuroinflammation. [2] Denna konstanta inflammatoriska ton speglar aspekter av mikrogliaaktivering som observerats vid neurodegenerativa tillstånd, vilket ger en relevant utgångspunkt för interventionsstudier.

En inflytelserik studie av Baek och kollegor undersökte hämningen av BET-bromodomänen i HMC3-celler med hjälp av RNA-sekvensering. [6] Författarna visade att BET-hämmaren JQ1 dämpade den inflammatoriska och migrationsrelaterade responsen hos LPS-aktiverade HMC3-celler och identifierade mekanismen: LPS inducerar transkriptionsfaktorn IRF1, som direkt reglerar kemokin-, cytokin-, interferonstimulerade och migrationsrelaterade gener, och JQ1 minskar IRF1 markant tillsammans med dess målgener. Knockdown av IRF1 reproducerade effekten och hämmade mikroglia-migrationen. [6] Detta arbete fastställde BET–IRF1-axeln som ett läkemedelsmål vid neuroinflammation i mänskliga mikroglia och visade att HMC3-celler är lämpliga för farmakologiska interventionsstudier på mekanistisk nivå.

Molekylära mönster associerade med mitokondriell skada undersöktes också i denna cellinje. Nasi och kollegor fann att stimulering med mitokondriellt DNA och kardiolipin ökade den cellulära oxidativa stressen i HMC3-celler, samtidigt som den märkbart misslyckades med att utlösa en klassisk proinflammatorisk respons: HLA-DR-uttrycket uppreglerades inte och varken utsöndringen av TNF-alfa eller IL-6 ökade. [7] Författarna tolkade detta som en möjlig endogen regleringsmekanism som begränsar mikrogliaaktivering. I en separat studie visade Cappoli och kollegor att mTOR-hämmaren rapamycin paradoxalt nog förstärkte IL-6-uttrycket och -utsöndringen i HMC3-celler som aktiverats med en blandning av interferon-gamma och IL-1 beta, samtidigt som produktionen av reaktiva syreföreningar minskade — vilket ifrågasätter antagandena om rapamycins antiinflammatoriska verkan i immunceller i den mänskliga hjärnan. [4] Dessa studier visar sammantaget att HMC3-celler utgör ett känsligt, människorelevant system för att kartlägga de molekylära signalvägarna som ligger till grund för neuroinflammatoriska sjukdomar.

Modellering av Alzheimers sjukdom och neurodegenerativa sjukdomar

HMC3-celler har blivit ett viktigt verktyg för att modellera mikroglia-cellernas bidrag till Alzheimers sjukdom. En tidig karakteriseringsstudie av Lindberg och kollegor, utförd på denna klon under namnet CHME3, visade att nyupplöst amyloid beta(1–40) orsakade en dosberoende ökning av IL-6-utsöndringen tillsammans med en dosberoende minskning av cellernas livskraft. [8] Alfa-melanocytstimulerande hormon påverkade inte den amyloidbeta-inducerade IL-6-responsen, men ökade den basala IL-6-utsöndringen dosberoende, en effekt som tillskrivs melanokortinreceptorsubtyperna MCR3 eller MCR5. [8] Detta arbete bekräftade att HMC3-celler utgör en hanterbar plattform för att studera sambandet mellan amyloid-beta-peptider och mikroglia-inflammatoriska reaktioner, vilka är centrala för patogenesen av Alzheimers sjukdom.

González-Prieto och kollegor undersökte CX3CR1 — den enda receptorn för det neuronala kemokinet CX3CL1 — vid Alzheimers sjukdom. [9] Produktionen av CX3CR1 var förhöjd i hjärnbarken hos 5xFAD-möss och i hjärnprover från människor med Alzheimers sjukdom, och administrering av noradrenalinåterupptagningshämmaren reboxetin ökade den ytterligare in vivo. Direkt tillförsel av noradrenalin till HMC3-celler och till primära mikroglia från råttor hämmade däremot produktionen av CX3CR1. [9] Författarna drog slutsatsen att mikroglia-responser på noradrenalin kan förändras i frånvaro av CX3CL1-producerande neuroner eller andra icke-mikroglia-relaterade faktorer — ett lärorikt exempel på hur HMC3-celler kan isolera en cellautonom respons och därigenom belysa bidraget från det bredare vävnadssammanhanget.

I studien om dexmedetomidin av Li och kollegor användes LPS- och ATP-stimulerade HMC3-celler som en modell för NLRP3-inflammasomdriven neuroinflammation med relevans för Alzheimers sjukdom. [5] Dexmedetomidin hämmade frisättningen av IL-1β och IL-18 via en c-Fos/NLRP3/kaspas-1-kaskad, vilket identifierade en mekanistiskt ny antiinflammatorisk axel i mänskliga mikroglia. HMC3-celler har även använts som modell för att undersöka mikrogliapolarisering som svar på fytoöstrogenhaltiga växtextrakt, vilket ytterligare utvidgar deras användbarhet vid läkemedelsutveckling för neurodegenerativa sjukdomar. [10] [11]

Virologi och infektioner i centrala nervsystemet

HMC3-celler har visat sig vara mycket mångsidiga för studier av virala neuroinfektioner, tack vare sitt mänskliga ursprung och sin roll som modell för mikroglia som första försvarslinje i centrala nervsystemet. Martinez Viedma och Pickett jämförde värdresponsen hos HMC3-mikroglia och JEG-3-placentaceller vid infektion med zikavirus med hjälp av en panel bestående av 84 gener relaterade till det medfödda och adaptiva immunsystemet, vilka profilerades 24 och 72 timmar efter infektion. [12] De två celltyperna uppvisade distinkta uppsättningar av differentiellt uttryckta gener, och signalvägsanalysen indikerade att TLR7/8-signaleringen var undertryckt i mikroglia-cellerna medan den var aktiverad i placentacellerna – en skillnad som därefter undersöktes genom siRNA-experiment. Studien fastställde att HMC3-celler utgör en lämplig plattform för transkriptomik av värd–patogen-interaktioner inom CNS-virologin.

Zhang och kollegor använde BoDV-1-infekterade HMC3-celler för att visa att miR-146a underlättar viral replikation genom att hämma den medfödda immunsignaleringsaxeln IRAK1/TRAF6/NF-κB. [13] Denna upptäckt gav mekanistisk insikt i hur ett starkt neurotropt RNA-virus undviker mikroglia-cellernas antivirala svar. I en separat infektionsmodell visade Angel-Ambrocio och kollegor för första gången att humant rhinovirus fullbordar hela sin virala cykel i HMC3-celler, vilket etablerar mikroglia som en potentiell cellulär reservoar för rhinovirusrelaterade komplikationer i centrala nervsystemet. [14] Cellinjen stöder även replikation av chikungunyavirus utan någon betydande förlust av livskraft fram till 72 timmar efter infektion. [19]

Sharma och kollegor identifierade prohibitin 1/2 som en möjlig inträdesreceptor för denguevirus serotyp 3 i mikroglia-cellerna CHME-3 – ett synonymt namn för HMC3 – med hjälp av virusoverlay-proteinbindningsanalyser, LC-MS/MS-proteomik, siRNA-knockdown och koimmunprecipitation. [15] Det är värt att notera att samma beroende konstaterades i neuronala SH-SY5Y-celler men inte i astrogliala U-87 MG-celler, vilket tyder på att inträdesvägen är celltypsspecifik. Sammantaget understryker dessa virologiska studier att HMC3-celler utgör en bredt tillämplig human mikroglialmodell för att undersöka patogenesen och immunundvikandestrategierna hos neurotropa virus.

Glioblastomets tumörmikromiljö

HMC3-celler har använts som en modell för gliomassocierade mikroglia för att studera hur glioblastomtumörceller utnyttjar mikrogliaens inflammatoriska fenotyp. Li och kollegor visade att samodling av temozolomidresistenta glioblastomceller med HMC3-celler främjade M2-polarisering av HMC3-cellerna och ökade utsöndringen av de tumörfrämjande cytokinerna TGF-β och IL-6. [16] Denna polarisering var kopplad till lncRNA-kretsen SNHG15/miR-627-5p/CDK6, och CDK4/6-hämmaren palbociclib minskade M2-markörerna samtidigt som den övervann temozolomidresistensen i xenotransplantatmodeller härledda från patienter.

Dessa fynd positionerar HMC3-celler som en relevant human modell för att studera mikroglia-bidrag till den immunsuppressiva tumörmikromiljön vid glioblastom. Möjligheten att modellera växelverkan mellan mikroglia och glioblastom in vitro med hjälp av HMC3-celler ger ett hanterbart system för att identifiera terapeutiska mål som samtidigt riktar in sig på tumörcellernas resistens och deras förmåga att undgå immunförsvaret. [16]

Neuroprotektiva medel och läkemedelsfarmakologi

HMC3-celler har använts i stor utsträckning för att screena neuroprotektiva medel och karakterisera deras verkningsmekanismer i humana mikroglia. Martínez Leo och Segura Campos utvärderade peptidfraktioner från frön av Salvia hispanica med avseende på neuroprotektiv aktivitet i HMC3-celler och fann att fraktionen på 1–3 kDa minskade produktionen av reaktiva syreföreningar med 51,3 % och sänkte frisättningen av kväveoxid, TNF-alfa och IL-6, med en total skyddande effekt på 79,0 %. [17] Denna typ av studie illustrerar hur HMC3-celler möjliggör snabb, humanrelevant screening av bioaktiva föreningar från livsmedel.

Ma’arif och kollegor genomförde två relaterade studier med HMC3-celler för att utvärdera växtbaserade fytoöstrogener från Marsilea crenata-blad. N-butanolfraktionen minskade uttrycket av MHC klass II i interferon-gamma-aktiverade celler, vilket stämmer överens med hämning av klassisk M1-aktivering, även om den rapporterade dos–responskurvan inte var monotont. [10] Ett 96-procentigt etanolextrakt ökade uttrycket av M2-markören arginas-1; samma studie rapporterade en minskning av uttrycket av aktiverad östrogenreceptor beta vid 125 och 250 ppm, ett resultat som står i motsats till artikelns egen titel och bör betraktas som oklart. [11] Båda studierna utnyttjade det välkarakteriserade protokollet för interferon-gamma-polarisering i HMC3-celler för att undersöka potentiell fytoöstrogen neuroprotektion vid neuroinflammation efter menopausen.

Inom området biomaterial och vävnadsteknik använde Venkateswarlu och kollegor levande HMC3-celler odlade på elektrospunna stödmatriser för att utveckla ett arbetsflöde för volymetrisk avbildning i realtid av cytosoliska kalciumoscillationer med hjälp av laserskannande konfokalmikroskopi. [18] Detta arbete utvidgade tillämpningen av HMC3-celler bortom klassisk farmakologi till nästa generations biomaterialtestning, vilket illustrerar cellinens mångsidighet inom olika tekniska sammanhang i neurovetenskaplig forskning.

Slutsats

HMC3-celler – den humana mikrogliala klonen 3 – har etablerat sig som en hörnsten bland in vitro-modeller för neuroinflammatoriska sjukdomar, Alzheimers sjukdom, neurodegenerativa sjukdomar, virologi i centrala nervsystemet, forskning om glioblastomets tumörmikromiljö samt upptäckt av neuroprotektiva medel. Cellinjen, som härrör från humant fetalt hjärnvävnad och har gjorts odödlig genom SV40-transfektion, uttrycker viktiga mikroglia-markörer och reagerar på ett definierat spektrum av inflammatoriska, farmakologiska och infektiösa stimuli. Studier såsom Baek och kollegers arbete med BET-hämmare har visat cellinjen potential att identifiera läkemedelsmål vid neuroinflammation i humana mikroglia. Från grundläggande mekanistiska studier av reaktiva syreföreningar och NLRP3-inflammasomsignalering till tillämpade screeningar av växtbaserade neuroprotektiva ämnen och testning av biomaterial baserade på scaffold-strukturer erbjuder HMC3-cellerna enastående mångsidighet – förutsatt att deras dokumenterade begränsningar avseende TNF-alfa, kväveoxid och NOX2-biologi beaktas vid utformningen av experimenten. Forskare som söker en validerad, skalbar och helt human mikroglialmodell kommer att finna HMC3-cellerna vara en värdefull resurs för att fördjupa förståelsen av hjärnans immunförsvar och sjukdomar. För att beställa HMC3-celler eller begära ytterligare information om produktspecifikationer, besök cytion.com.

Viktiga publikationer

1. Janabi N, Peudenier S, Héron B (1995) Etablering av humana mikrogliacellinjer efter transfektion av primärkulturer av embryonala mikrogliaceller med SV40:s stora T-antigen. Neuroscience Letters. PMID: 7478261
2. Li B, Bedard K, Sorce S (2009) NOX4-uttryck i humana mikroglia leder till konstant bildning av reaktiva syreföreningar och till konstant IL-6-uttryck. Journal of innate immunity. PMID: 20375612
3. Dello Russo C, Cappoli N, Coletta I (2018) Den humana mikroglialcellinjen HMC3: var står vi idag? En systematisk litteraturöversikt. Journal of Neuroinflammation. PMID: 30200996
4. Cappoli N, Mezzogori D, Tabolacci E (2019) mTOR-kinashämmaren rapamycin förstärker uttrycket och frisättningen av det proinflammatoriska cytokinet interleukin 6, vilket modulerar aktiveringen av humana mikrogliaceller. EXCLI journal. PMID: 31645839
5. Li H, Zhang X, Chen M (2018) Dexmedetomidin hämmar inflammation i mikroglia-celler vid stimulering av LPS och ATP genom c-Fos/NLRP3/kaspas-1-kaskader. EXCLI journal. PMID: 29743866
6. Baek M, Yoo E, Choi HI (2021) BET-hämmaren dämpar den inflammatoriska responsen och cellmigrationen i den humana mikrogliala cellinjen HMC3. Scientific Reports. PMID: 33893325
7. Nasi M, De Gaetano A, Bianchini E (2020) Molekylära mönster associerade med mitokondriell skada stimulerar produktionen av reaktiva syreföreningar i humana mikroglia. Molecular and cellular neurosciences. PMID: 32828963
8. Lindberg C, Hjorth E, Post C (2005) Cytokinproduktion i en human mikrogliacellinje: effekter av beta-amyloid och alfa-melanocytstimulerande hormon. Neurotoxicity Research. PMID: 16371321
9. González-Prieto M, Gutiérrez IL, García-Bueno B (2021) Produktionen av CX3CR1 i mikroglia ökar vid Alzheimers sjukdom och regleras av noradrenalin. Glia. PMID: 32662924
10. Ma'arif B, Mirza DM, Hasanah M (2020) Antineuroinflammatorisk aktivitet hos n-butanolfraktionen av Marsilea crenata Presl. i mikroglia-cellinjen HMC3. Journal of basic and clinical physiology and pharmacology. PMID: 31967965
11. Ma'arif B, Agil M, Laswati H (2020) Ökad uttryck av Arg1 och aktiverat ERβ i mikroglia-cellinjen HMC3 genom induktion av ett 96-procentigt etanolextrakt från blad av Marsilea crenata Presl. Journal of basic and clinical physiology and pharmacology. PMID: 31981453
12. Martinez Viedma MDP, Pickett BE (2018) Karakterisering av de olika effekterna av zikavirusinfektion i placenta- och mikroglia-celler. Viruses. PMID: 30453684
13. Zhang X, Guo Y, Xu X (2019) miR-146a främjar replikationen av Borna-sjukdomsvirus 1 via IRAK1/TRAF6/NF-κB-signalvägen. Virus Research. PMID: 31330207
14. Angel-Ambrocio AH, Bautista-Carbajal P, García-León ML (2020) Mikroglia-HMC3-celler är mycket mottagliga för infektion med rhinovirus. Virus Research. PMID: 32768491
15. Sharma A, Vasanthapuram R, M Venkataswamy M (2020) Prohibitin 1/2 medierar inträdet av dengue-3 i humana neuroblastomceller (SH-SY5Y) och mikroglia (CHME-3). Journal of biomedical science. PMID: 32306962
16. Li Z, Zhang J, Zheng H (2019) Modulering av lncRNA SNHG15/CDK6/miR-627-kretsen med palbociclib övervinner temozolomidresistens och minskar M2-polariseringen av gliomassocierade mikroglia i glioblastoma multiforme. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research: CR. PMID: 31462285
17. Martínez Leo EE, Segura Campos MR (2020) Neuroprotektiv effekt av peptidfraktioner från Salvia hispanica på den proinflammatoriska moduleringen av HMC3-mikroglia. Journal of food biochemistry. PMID: 32207175
18. Venkateswarlu K, Suman G, Dhyani V (2020) Tredimensionell avbildning och kvantifiering av cytosoliska kalciumoscillationer i realtid i mikroglia-celler odlade på elektrospunna matriser med hjälp av laserskannande konfokalmikroskopi. Biotechnology and bioengineering. PMID: 32557561
19. Qadri SW, Kumar N, Santhoshkumar R (2022) Infektion av den humana mikrogliacellinjen CHME-3 för att studera neuropatogenesen hos chikungunyaviruset. Journal of neurovirology. PMID: 35352315