Sissejuhatus

HMC3-rakud, mida tuntakse ka nimetustega „Human Microglia Clone 3”, „CHME-3” või „CHME3”, on üks neuroteaduse uurimistöös kõige laialdasemalt kasutatavaid inimese mikroglia rakuliine. Selle liini lõid 1995. aastal Janabi, Peudenier, Héron ja nende kolleegid, kasutades inimese embrüonaalsest ajust pärinevate makrofaagide SV40 suure T-antigeenist sõltuvat immortaliseerimist. [1] HMC3-rakud säilitavad mikroglia põhilised omadused, sealhulgas ioniseeritud kaltsiumi siduva adaptermolekuli Iba-1 konstitutiivse ekspressiooni ja MHC II klassi antigeenide interferoon-gamma poolt indutseeritava ekspressiooni. [2] [3] Kesknärvisüsteemi püsivate loomulike immuunrakkudena on mikroglia neuroinflammatoorsete haiguste, Alzheimeri tõve ja muude neurodegeneratiivsete haiguste kesksed vahendajad. Seetõttu on HMC3-rakud hõlpsasti kasutatav inimese in vitro platvorm mikroglia aktiveerumise, neuroprotektiivsete ainete, viirusliku neuroinfektsiooni ja glioblastoomi kasvaja mikrokeskkonna uurimiseks.

Peamised järeldused

• HMC3-rakud on SV40 suure T-antigeeni transfektsiooni teel saadud surematud inimese loote aju mikroglia rakud.
• Rakuliin ekspresseerib Iba-1-d pidevalt ning suurendab MHC II klassi ekspressiooni interferoon-gamma stimuleerimisel; CD14, CD11b ja CD68 ekspressiooni kohta esitatud andmed erinevad laboratooriumiti ning neid tuleks iga konkreetse partii puhul eraldi kontrollida.
• HMC3-rakke kasutatakse laialdaselt in vitro mudelina neuroinflammatoriliste haiguste, Alzheimeri tõve ja neurodegeneratiivsete haiguste uurimiseks.
• See rakuliin on vastuvõtlik mitmete neurotroopsete viiruste poolt põhjustatud nakkustele, sealhulgas Zika-viirusele, Borna haiguse viirusele 1, chikungunya-viirusele ja rinoviirusele.
• HMC3-rakud ekspresseerivad pidevalt NOX4-i ja tekitavad reaktiivseid hapniku liike, mistõttu on need olulised oksüdatiivse stressi uurimisel.
• Seda rakuliini on kasutatud glioblastoomi kasvaja mikrokeskkonda käsitlevates uuringutes, ravimite farmakoloogias ning biomaterjalide kandestruktuuride uurimisel.
• Interleukiin-1 beeta – kas eraldi või koos interferoon-gammaga – on selles rühmas kõige tõhusam põletikuline stimulaator; reaktsioonid LPS-ile on suhteliselt tagasihoidlikud ning TNF-alfa ja lämmastikoksiid puuduvad peaaegu täielikult.

Mis on HMC3?

HMC3 (Cellosaurus, registreerimisnumber CVCL_II76) on transformeeritud inimese mikroglia rakuliin, mis on saadud 8–10-nädalase rasedusvanusega loote ajust. Doonori sugu ei ole täpsustatud. Doonoril ei olnud seotud ühtegi haigust. Rakuliini lõid Janabi ja kolleegid 1995. aastal, transfekteerides esmaseid embrüonaalse aju makrofaagide kultuure SV40 suure T-antigeeni kodeeriva plasmiidiga, mille tulemusena saadi neli järjepidevat mikroglia rakuliini, millest kloon 3 sai kõige laialdasemalt kasutusele võetud. [1] Transformeeritud rakud säilitasid makrofaagidele iseloomulikud omadused, nagu adhesiivsus ja mittespetsiifiline esteraasi aktiivsus, ning suutsid fagotsüteerida zymosaani osakesi, kuigi fagotsüütiline aktiivsus jäi madalaks. Rakud tootsid spontaanselt interleukiin-6-d, mille tootmine suurenes veelgi pärast interleukiin-1-alfa stimuleerimist. [1] Dello Russo ja tema kolleegide poolt 2018. aastal läbi viidud põhjalikus süstemaatilises kirjanduse ülevaates koondati selle klooni kohta kättesaadavad iseloomustusandmed ning selgitati üht olulist segadust tekitavat asjaolu: sama rakuliini on kasutatud nimetuste CHME3, C13-NJ ja CHME-5 all. [3] Ülevaates jõuti järeldusele, et sõltumata kasutatud nimetusest on rakkudel sarnane antigeenne ja funktsionaalne profiil ning neid tuleks käsitleda ühe eksperimentaalse mudelina – samas hoiatati, et mitmed ringluses olevad CHME-5 alikvoodid osutusid ristikontamineerituks rottide glioomirakkudega. ATCC poolt autentifitseeritud HMC3 (ATCC CRL-3304) algvaru on sellisest ebaselgusest vaba.

HMC3 rakukultuuri teave

HMC3-rakud on põhikeskkonna valiku suhtes vastupidavad: neid on edukalt kasvatatud EMEM-, MEM- ja DMEM:Ham’s F12-keskkonnas, millest igasse on lisatud 10% seerumit. [3] See valik ei ole aga fenotüübiliselt neutraalne. Dello Russo ja tema kolleegid teatasid, et MEM-is või DMEM:F12-s kasvatatud rakkudes oli basaalne reaktiivsete hapnikuühendite tootmine märkimisväärselt madalam kui EMEM-is, mis viitab vähem aktiveeritud puhkefenotüübile. [3] Seetõttu peaksid uurijad, kes võrdlevad eri laborite andmeid, koos passaaži numbriga märkima ka kasutatud kasvukeskkonna.

HMC3-rakkude eelised

HMC3-rakud pakuvad ainulaadselt kättesaadavat inimese mikroglia mudelit ajal, mil primaarseid inimese mikroglia rakke on raske hankida piisavas koguses suuremahulisteks uuringuteks. See rakuliin kasvab adhesiivselt ja on lihtne hooldada. Oluline on see, et rakud ekspresseerivad konstitutiivselt Iba-1-i, suurendavad MHC II klassi ekspressiooni vastusena interferoon-gammale ning – ATCC-i poolt autentifitseeritud varus – transkribeerivad hiljuti määratletud mikroglia iseloomulikke geene CX3CR1, CSF1R, P2RY12 ja TMEM119, pakkudes bioloogiliselt valideeritud asendajat primaarsetele inimese mikroglia rakkudele. [2] [3] Need omadused muudavad HMC3-rakud laialdaselt kasutatavaks platvormiks neuroinflammatoriliste haiguste mehhanismide uurimiseks, kus on vaja reprodutseeritavat, skaleeritavat ja täielikult inimese päritolu rakumaterjali.

HMC3-rakkude veel üks tugev külg on nende reageerimisvõime kindlale põletikuliste ärritajate rühmale. Interleukiin-6 kõige tõhusam indutseerija on interleukiin-1 beeta, mis suurendab baasvabanemist kuni viiekümnekordselt ja toimib sünergistlikult interferoon-gammaga; LPS ja amüloid-beeta-peptiidid põhjustavad tagasihoidlikumaid, kontsentratsioonist sõltuvaid suurenemisi. [3] See astmeline, korratav reaktsiooniprofiil võimaldab läbi viia kontsentratsioonist sõltuvaid ja ajalisi katseid, mida on primaarrakkude preparaatidel raske teostada. Nende reageerimisvõime nii proinflammatoorsetele kui ka antiinflammatoorsetele ärritajatele — sealhulgas farmakoloogilistele ainetele nagu rapamütsiin ja deksmedetomidiin — laiendab veelgi nende kasutusvõimalusi ravimifarmakoloogias ja neuroprotektiivsete ainete sõelumisel. [4] [5] Rakud on tundlikud ka mitmete neurotroopsete viiruste suhtes, mis laiendab nende kasutusala neuroinfektsioonide uurimisse.

HMC3-rakkude piirangud

Transformeeritud rakuliinina kannavad HMC3-rakud SV40 suure T-antigeeni, mis annab neile surematuse, kuid muudab ka rakubioloogia teatud aspekte võrreldes esmaste mikroglia rakkudega. Li ja kolleegid kirjeldasid ootamatuid NOX-isoformide ekspressioonimustreid – NOX4-d oli rohkesti, kuid NOX2 mRNA-d peaaegu üldse mitte –, mis erineb primaarsetest mikroglia rakkudest ja piirab selle liini kasutatavust NOX2-vahendatud respiratoorse plahvatuse mudelina. [2] [3] Seetõttu peaksid teadlased enne laiaulatuslike mehhanismiliste järelduste tegemist veenduma, et uuritav konkreetne signaalrada on selles rakuliinis täpselt taastatud.

Tähelepanu väärivad veel kolm piirangut. Esiteks on põletikuvahendajate valik puudulik: HMC3-rakud eritavad põletikuvastast tsütokiini IL-10 vaid tühistes kogustes (mõne pg/ml ulatuses), toodavad spontaanselt või pärast proinflammatoorset aktiveerimist vähe või üldse mitte TNF-alfa ning neil esineb NOX4-sõltuvate reaktiivsete hapnikuliikide poolt põhjustatud püsivalt kõrgenenud IL-6 tase. [2] [3] Teiseks, ja vastupidiselt näriliste mikroglia rakkudele, ei ekspresseeri puhkeolekus olevad HMC3-rakud iNOS-i, ning pärast stimuleerimist LPS-iga, LPS-iga koos interferoon-gammaga, IL-1-beetaga või TNF-alfaga ei ole täheldatud ei iNOS-i indutseerimist ega mõõdetavat nitriitide kogunemist. [3] Seetõttu ei sobi see mudel eriti hästi lämmastikoksiidi teljele keskenduvate uuringute jaoks.

Kolmandaks loodi see rakuliin loote ajukudest, mis tähendab, et selle transkriptsiooniline ja funktsionaalne profiil võib erineda täiskasvanueas tekkivatest mikroglia seisunditest, mis on seotud elu lõpupoole esinevate neurodegeneratiivsete haigustega. Teadlased, kes modelleerivad täiskasvanute Alzheimeri tõbe või Parkinsoni tõbe, peaksid HMC3-st saadud andmeid võimaluse korral tõlgendama koos täiendavate täiskasvanute primaarsetest rakkudest või iPSC-dest saadud mikrogliaalsüsteemidega. Lõpuks ei ole aruanded pinnamarkerite profiili kohta täielikult ühtlased: kuigi Li ja kolleegid kirjeldasid konstitutiivset Iba-1 ja CD14 koos interferoon-gamma poolt indutseeritava CD11b, CD68 ja MHC II klassiga, [2] nii Janabi ja tema kolleegide esialgne iseloomustus [1] ning Dello Russo ja tema kolleegide poolt ATCC CRL-3304 kohta esitatud voolutsütomeetrilised andmed näitasid, et puhkeolekus rakud olid CD14- ja CD11b-negatiivsed ning et interferoon-gamma ei indutseerinud kumbagi neist markeritest. [3] Nendele tulemustele avaldavad mõju nii antikeha kloon, kasvukeskkond kui ka passaažide arv, ning järjestikuste passaažide käigus toimuv geneetiline triiv on üldiselt dokumenteeritud pidevate liinide puhul; markerite ekspressiooni tuleks kinnitada laborisiseselt, mitte seda lihtsalt eeldada.

Vaata täielikke tehnilisi andmeid ja telli

HMC3-rakkude rakendused

Neuropõletik ja mikroglia aktiivsuse suurenemine

Neuropõletikuliste haiguste uurimine on HMC3-rakkude kõige laialdasemalt arendatud rakendusvaldkond. Li ja kolleegid näitasid, et HMC3-rakud ekspresseerivad konstitutiivselt NOX4-d, mis soodustab pidevat reaktiivsete hapnikuliikide tootmist ja püsivat IL-6 ekspressiooni – see avastus tõstis need rakud kroonilise, madala astme neuropõletiku mudeliks. [2] See pidev põletikuline toon peegeldab neurodegeneratiivsetes seisundites täheldatud mikroglia eelaktiveerumise aspekte, pakkudes asjakohast võrdlusalust sekkumisuuringuteks.

Baeki ja kolleegide mõjukas uuring uuris BET-bromodomeeni inhibeerimist HMC3-rakkudes, kasutades RNA-sekveneerimist. [6] Autorid näitasid, et BET-inhibiitor JQ1 nõrgendas LPS-iga aktiveeritud HMC3-rakkude põletikulist ja rändevastust ning tuvastasid selle mehhanismi: LPS indutseerib transkriptsioonifaktorit IRF1, mis reguleerib otseselt kemokiinide, tsütokiinide, interferooni poolt stimuleeritud ja rändega seotud geene, ning JQ1 vähendab märkimisväärselt IRF1-i koos selle sihtgeenidega. IRF1-i ekspressiooni mahasurumine kordas seda mõju ja pärssis mikroglia rännet. [6] Käesoleva tööga kinnitati BET–IRF1-telg ravimite sihtmärgina inimese mikrogliaalse neuropõletiku puhul ning näidati HMC3-rakkude sobivust farmakoloogiliste sekkumisuuringute läbiviimiseks mehhanistlikul tasandil.

Selles liinis uuriti ka mitokondriaalse kahjustusega seotud molekulaarseid mustreid. Nasi ja kolleegid leidsid, et stimuleerimine mitokondriaalse DNA ja kardiolipiini abil suurendas HMC3-rakkudes rakulist oksüdatiivset stressi, kuid ei suutnud märkimisväärselt esile kutsuda klassikalist proinflammatoorset reaktsiooni: HLA-DR-i ekspressiooni ülesreguleerumist ei toimunud ning ei TNF-alfa ega IL-6 sekretsioon suurenes. [7] Autorid tõlgendasid seda kui võimalikku endogeenset regulatsioonimehhanismi, mis piirab mikroglia aktiveerumist. Eraldi näitasid Cappoli ja kolleegid, et mTOR-inhibiitor rapamütsiin suurendas paradoksaalselt IL-6 ekspressiooni ja vabanemist HMC3-rakkudes, mida aktiveeriti interferoon-gamma/IL-1-beeta-kokteiliga, vähendades samal ajal reaktiivsete hapnikuühendite tootmist — seades kahtluse alla eeldused rapamütsiini põletikuvastase toime kohta inimese ajus asuvates immuunrakkudes. [4] Need uuringud näitavad ühiselt, et HMC3-rakud on tundlik ja inimesele asjakohane süsteem neuropõletikuliste haiguste aluseks olevate molekulaarsete signaaliteede analüüsimiseks.

Alzheimeri tõve ja neurodegeneratiivsete haiguste modelleerimine

HMC3-rakud on muutunud oluliseks vahendiks mikroglia panuse modelleerimisel Alzheimeri tõves. Lindbergi ja kolleegide varane iseloomustav uuring, mis viidi läbi selle klooniga nimetusega CHME3, näitas, et värskelt lahustatud amüloid-beeta (1–40) põhjustas IL-6 vabanemise doosist sõltuvat suurenemist koos eluvõime doosist sõltuva vähenemisega. [8] Alfa-melanotsüüte stimuleeriv hormoon ei mõjutanud amüloid-beeta poolt indutseeritud IL-6-vastust, kuid suurendas annusest sõltuvalt IL-6 baasvabanemist – see toime seostati melanokortiini retseptori alatüüpidega MCR3 või MCR5. [8] See töö kinnitas, et HMC3-rakud on sobiv platvorm amüloid-beeta-peptiidide ja mikroglia põletikuliste reaktsioonide vahelise seose uurimiseks, mis on Alzheimeri tõve patogeneesis kesksel kohal.

González-Prieto ja kolleegid uurisid Alzheimeri tõve puhul CX3CR1-i – ainsat retseptorit, mis vastab neuronite kemokiinile CX3CL1. [9] CX3CR1-i tootmine oli suurenenud 5xFAD-hiirte ajukoores ja inimese Alzheimeri tõve aju proovides ning noradrenaliini tagasihaarde inhibiitori reboxetiini manustamine suurendas seda in vivo veelgi. Seevastu noradrenaliini otsene manustamine HMC3-rakkudele ja primaarsetele roti mikroglia rakkudele pärssis CX3CR1 tootmist. [9] Autorid järeldasid, et mikroglia reaktsioonid noradrenaliinile võivad muutuda CX3CL1-d tootvate neuronite puudumisel või muude mikroglia-väliste tegurite mõjul – see on õpetlik näide sellest, kuidas HMC3-rakud suudavad isoleerida rakkudest sõltumatu reaktsiooni ja seeläbi tuua esile laiemat koekonteksti mõju.

Li ja kolleegide deksmedetomidiini uuringus kasutati LPS-i ja ATP-ga stimuleeritud HMC3-rakke Alzheimeri tõvega seotud NLRP3-inflammasoomi poolt põhjustatud neuropõletiku mudelina. [5] Deksmedetomidiin pärssis IL-1β ja IL-18 vabanemist c-Fos/NLRP3/kaspase-1 kaskaadi kaudu, tuvastades inimese mikroglia puhul mehhanismilt uue põletikuvastase telje. HMC3-rakke on kasutatud ka mudelina mikroglia polarisatsiooni uurimiseks vastusena fütoöstrogeene sisaldavatele taimeekstraktidele, mis laiendab veelgi nende kasulikkust neurodegeneratiivsete haiguste ravimite avastamisel. [10] [11]

Viroloogia ja kesknärvisüsteemi infektsioonid

HMC3-rakud on osutunud väga mitmekülgseks viiruslike neuroinfektsioonide uurimisel, arvestades nende inimese päritolu ja rolli kesknärvisüsteemi mikroglia esimese kaitseliini mudelina. Martinez Viedma ja Pickett võrdlesid HMC3-mikroglia- ja JEG-3-platsenta-rakkude peremeesorganismi reaktsiooni Zika-viiruse nakkusele, kasutades 84 sünnipärase ja adaptiivse immuunsüsteemi geeni paneeli, mille profiilid määrati kindlaks 24 ja 72 tundi pärast nakatumist. [12] Nendel kahel rakutüübil ilmnesid erinevad diferentsiaalselt ekspresseeritud geenide kogumid ning signaaliteede analüüs näitas, et TLR7/8 signaalimine oli mikroglia rakkudes pärsitud, samas kui platsenta rakkudes aktiveeritud – seda erinevust uuriti hiljem siRNA-eksperimentide abil. Uuringus tuvastati, et HMC3-rakud on sobiv platvorm peremees-patogeeni transkriptomika uurimiseks kesknärvisüsteemi viroloogias.

Zhang ja kolleegid kasutasid BoDV-1-ga nakatunud HMC3-rakke, et näidata, et miR-146a soodustab viiruse replikatsiooni, pärssides IRAK1/TRAF6/NF-κB loomuliku immuunsüsteemi signaalimisteed. [13] See avastus andis mehhanistliku ülevaate sellest, kuidas väga neurotroopne RNA-viirus väldib mikroglia antiviiruslikke reaktsioone. Eraldi nakkusmudelis näitasid Angel-Ambrocio ja kolleegid esmakordselt, et inimese rinoviirus läbib kogu oma viirusetsükli HMC3-rakkudes, mis kinnitab mikroglia rolli potentsiaalse rakulise reservuaarina rinoviirusega seotud kesknärvisüsteemi tüsistuste puhul. [14] See rakuliin toetab ka chikungunya-viiruse replikatsiooni ilma olulise eluvõime kaotuseta kuni 72 tundi pärast nakatumist. [19]

Sharma ja kolleegid tuvastasid prohibitiini 1/2 kui oletatava sisenemisretseptori dengue-viiruse serotüübile 3 mikrogliaalsetes CHME-3 rakkudes – mis on HMC3 sünonüüm – kasutades viiruse ülekattega valkude seondumise analüüse, LC-MS/MS proteoomikat, siRNA-ga väljalülitamist ja ko-immunopretsipitatsiooni. [15] Tähelepanuväärne on, et sama sõltuvus leiti neuronites SH-SY5Y, kuid mitte astrogliaalsetes U-87 MG rakkudes, mis viitab sellele, et sisenemistee on rakutüübispetsiifiline. Kokkuvõttes rõhutavad need viroloogilised uuringud, et HMC3-rakud on laialdaselt rakendatav inimese mikroglia mudel neurotroopsete viiruste patogeneesi ja immuunsüsteemist kõrvalehoidmise strateegiate uurimiseks.

Glioblastoomi kasvaja mikrokeskkond

HMC3-rakke on kasutatud glioomiga seotud mikroglia mudelina, et uurida, kuidas glioblastoomi kasvajarakud võtavad üle mikroglia põletikulise fenotüübi. Li ja kolleegid näitasid, et temozolomidile resistentsete glioblastoomi rakkude ühiskultiveerimine HMC3-rakkudega soodustas HMC3-rakkude M2-polarisatsiooni ja suurendas kasvajate teket soodustavate tsütokiinide TGF-β ja IL-6 sekretsiooni. [16] See polarisatsioon oli seotud lncRNA SNHG15/miR-627-5p/CDK6 ahelaga ning CDK4/6 inhibiitor palbotsiklib vähendas M2-markereid, ületades samal ajal temozolomiidiresistentsust patsientidelt pärinevates ksenotransplantaadi mudelites.

Need leiud muudavad HMC3-rakud asjakohaseks inimmudeliks, mille abil uurida mikroglia panust glioblastoomi immuunsust pärssivasse kasvaja mikrokeskkonda. Võimalus modelleerida mikroglia ja glioblastoomi vahelist vastastikmõju in vitro HMC3-rakkude abil pakub hõlpsasti käsitletavat süsteemi selliste ravisihte tuvastamiseks, mis võitlevad üheaegselt nii kasvajarakkude resistentsuse kui ka immuunsüsteemist kõrvalehoidmise vastu. [16]

Neuroprotektiivsed ained ja ravimite farmakoloogia

HMC3-rakke on laialdaselt kasutatud neuroprotektiivsete ainete sõelumiseks ja nende toimemehhanismide iseloomustamiseks inimese mikroglia rakkudes. Martínez Leo ja Segura Campos hindasid Salvia hispanica seemnetest saadud peptiidifraktsioonide neuroprotektiivset toimet HMC3-rakkudes ning leidsid, et 1–3 kDa fraktsioon vähendas reaktiivsete hapnikuühendite tootmist 51,3% võrra ja alandas lämmastikoksiidi, TNF-alfa ja IL-6 vabanemist, mille üldine kaitsev toime oli 79,0%. [17] Selline uuring illustreerib, kuidas HMC3-rakud võimaldavad toidust saadud bioaktiivsete ühendite kiiret ja inimesele asjakohast sõelumist.

Ma'arif ja kolleegid viisid läbi kaks seotud uuringut, kasutades HMC3-rakke, et hinnata Marsilea crenata lehtedest saadud taimseid fütoöstrogeene. N-butanooli fraktsioon vähendas MHC II klassi ekspressiooni interferoon-gamma poolt aktiveeritud rakkudes, mis on kooskõlas klassikalise M1-aktiveerimise pärssimisega, kuigi kirjeldatud annus-vastus suhe ei olnud monotoonne. [10] 96% etanooliekstrakt suurendas M2-markeri arginaasi-1 ekspressiooni; samas uuringus täheldati aktiveeritud östrogeeniretseptori beeta ekspressiooni langust kontsentratsioonidel 125 ja 250 ppm, mis on vastuolus artikli enda pealkirjaga ja mida tuleks käsitleda lahendamata küsimusena. [11] Mõlemas uuringus kasutati HMC3-rakkudes hästi iseloomustatud interferoon-gamma polarisatsiooniprotokolli, et uurida potentsiaalset fütoöstrogeenset neurokaitset postmenopausaalse neuropõletiku korral.

Biomaterjalide ja koetehnoloogia valdkonnas kasutasid Venkateswarlu ja kolleegid elektrospun-meetodil valmistatud kandematriksidel kasvatatud elus HMC3-rakke, et arendada välja reaalajas ruumilise kujutamise töövoog tsütosoolse kaltsiumi võnkumiste uurimiseks, kasutades laser-skaneerivat konfokaalmikroskoopiat. [18] See töö laiendas HMC3-rakkude rakendust klassikalisest farmakoloogiast järgmise põlvkonna biomaterjalide testimiseni, illustreerides selle rakuliini mitmekülgsust erinevates tehnoloogilistes kontekstides neuroteaduste uurimistöös.

Järeldus

HMC3-rakud – inimese mikroglia kloon 3 – on kinnistanud oma positsiooni nurgakivina in vitro mudelina neuroinflammatoorsete haiguste, Alzheimeri tõve, neurodegeneratiivsete haiguste, kesknärvisüsteemi viroloogia, glioblastoomi kasvaja mikrokeskkonda käsitlevate uuringute ning neuroprotektiivsete ainete avastamise valdkonnas. Inimese loote ajukudest saadud ja SV40-transfektsiooni abil surematuks muudetud rakuliin ekspresseerib peamisi mikroglia markereid ja reageerib kindlale hulgale põletikulistele, farmakoloogilistele ja nakkuslikele ärritajatele. Baeki ja kolleegide läbi viidud BET-inhibiitori uuringud on näidanud selle rakuliini võimet tuvastada ravimite sihtmärke inimese mikrogliaalse neuropõletiku puhul. Alates reaktiivsete hapnikuliikide ja NLRP3-inflammasoomi signaalimise fundamentaalsetest mehhanismiuuringutest kuni taimset päritolu neuroprotektiivsete ainete rakenduslike sõelumisteni ja raamistikupõhiste biomaterjalide testimiseni pakuvad HMC3-rakud erakordset mitmekülgsust – eeldusel, et eksperimentide kavandamisel võetakse arvesse nende dokumenteeritud piiranguid seoses TNF-alfa, lämmastikoksiidi ja NOX2 bioloogiaga. Teadlased, kes otsivad valideeritud, skaleeritavat ja täielikult inimese mikroglia mudelit, leiavad HMC3-rakkudes väärtusliku ressursi aju immuunsuse ja haiguste mõistmise edendamiseks. HMC3-rakkude tellimiseks või toote spetsifikatsioonide kohta lisateabe saamiseks külastage veebilehte cytion.com.

Olulisemad publikatsioonid

1. Janabi N, Peudenier S, Héron B (1995) Inimese mikroglia rakuliinide loomine pärast embrüonaalsete mikroglia rakkude esmaste kultuuride transfektsiooni SV40 suure T-antigeeniga. Neuroscience letters. PMID: 7478261
2. Li B, Bedard K, Sorce S (2009) NOX4 ekspressioon inimese mikroglia rakkudes viib reaktiivsete hapnikuliikide pideva tekkeni ja IL-6 pideva ekspressioonini. Journal of innate immunity. PMID: 20375612
3. Dello Russo C, Cappoli N, Coletta I (2018) Inimese mikroglia HMC3 rakuliin: milline on olukord? Süstemaatiline kirjanduse ülevaade. Journal of neuroinflammation. PMID: 30200996
4. Cappoli N, Mezzogori D, Tabolacci E (2019) mTOR-kinaasi inhibiitor rapamütsiin suurendab proinflammatoorse tsütokiini interleukiin-6 ekspressiooni ja vabanemist, moduleerides inimese mikroglia rakkude aktiveerumist. EXCLI journal. PMID: 31645839
5. Li H, Zhang X, Chen M (2018) Deksmedetomidiin pärsib mikroglia rakkudes LPS-i ja ATP-ga stimuleeritud põletikku c-Fos/NLRP3/kaspase-1 kaskaadide kaudu. EXCLI Journal. PMID: 29743866
6. Baek M, Yoo E, Choi HI (2021) BET-inhibiitor nõrgendab põletikulist reaktsiooni ja rakkude rännet inimese mikroglia HMC3 rakuliinis. Scientific reports. PMID: 33893325
7. Nasi M, De Gaetano A, Bianchini E (2020) Mitokondriaalse kahjustusega seotud molekulaarsed mustrid stimuleerivad reaktiivsete hapnikuliikide tootmist inimese mikroglia rakkudes. Molecular and cellular neurosciences. PMID: 32828963
8. Lindberg C, Hjorth E, Post C (2005) Tsütokiinide tootmine inimese mikroglia rakuliinis: beeta-amüloidi ja alfa-melanotsüüte stimuleeriva hormooni mõju. Neurotoxicity Research. PMID: 16371321
9. González-Prieto M, Gutiérrez IL, García-Bueno B (2021) Mikroglia CX3CR1-i tootmine suureneb Alzheimeri tõve korral ja seda reguleerib noradrenaliin. Glia. PMID: 32662924
10. Ma'arif B, Mirza DM, Hasanah M (2020) Marsilea crenata Presl. n-butanoolifraktsiooni neuropõletikuvastane toime mikroglia HMC3 rakuliinis. Põhi- ja kliinilise füsioloogia ja farmakoloogia ajakiri. PMID: 31967965
11. Ma'arif B, Agil M, Laswati H (2020) Arg1 ja aktiveeritud ERβ ekspressiooni suurenemine mikroglia HMC3-s Marsilea crenata Presl. lehtede 96% etanooliekstrakti indutseerimise tulemusena. Põhi- ja kliinilise füsioloogia ja farmakoloogia ajakiri. PMID: 31981453
12. Martinez Viedma MDP, Pickett BE (2018) Zika-viiruse nakkuse erinevate mõjude iseloomustamine platsenta- ja mikroglia rakkudes. Viruses. PMID: 30453684
13. Zhang X, Guo Y, Xu X (2019) miR-146a soodustab Borna haiguse viiruse 1 replikatsiooni IRAK1/TRAF6/NF-κB signaalitee kaudu. Virus Research. PMID: 31330207
14. Angel-Ambrocio AH, Bautista-Carbajal P, García-León ML (2020) Mikroglia HMC3-rakud on väga vastuvõtlikud rinoviiruse nakkusele. Virus Research. PMID: 32768491
15. Sharma A, Vasanthapuram R, M Venkataswamy M (2020) Prohibitiin 1/2 vahendab Dengue-3 sisenemist inimese neuroblastoomi (SH-SY5Y) ja mikroglia (CHME-3) rakkudesse. Biomeditsiiniteaduse ajakiri. PMID: 32306962
16. Li Z, Zhang J, Zheng H (2019) Palbotsiklibi poolt moduleeritav lncRNA SNHG15/CDK6/miR-627 ahel ületab temotsolomiidi resistentsuse ja vähendab glioblastoomi multiforme puhul glioomiga seotud mikroglia M2-polarisatsiooni. Eksperimentaalse ja kliinilise vähiuuringute ajakiri: CR. PMID: 31462285
17. Martínez Leo EE, Segura Campos MR (2020) Salvia hispanica peptiidifraktsioonide neuroprotektiivne toime HMC3 mikroglia rakkude proinflammatoorse modulatsiooni suhtes. Toidu biokeemia ajakiri. PMID: 32207175
18. Venkateswarlu K, Suman G, Dhyani V (2020) Elektrospun-maatriksidel kasvatatud mikrogliaalrakkude tsütosoolse kaltsiumi reaalajas võnkumiste kolmemõõtmeline kujutamine ja kvantifitseerimine laser-skaneeriva konfokaalmikroskoopia abil. Biotehnoloogia ja bioinseneria. PMID: 32557561
19. Qadri SW, Kumar N, Santhoshkumar R (2022) Inimese mikroglia rakuliini CHME-3 nakatamine Chikungunya-viiruse neuropatogeneesi uurimiseks. Journal of neurovirology. PMID: 35352315