Įvadas

HMC3 ląstelės, taip pat žinoma kaip žmogaus mikroglijos klonas 3, CHME-3 arba CHME3, yra viena iš plačiausiai naudojamų žmogaus mikroglijos ląstelių linijų neuromokslų tyrimuose. Šią liniją 1995 m. sukūrė Janabi, Peudenier, Héron ir kolegos, panaudodami SV40 didžiojo T antigeno priklausomą žmogaus embrioninių smegenų makrofagų imortalizaciją. [1] HMC3 ląstelės išlaiko pagrindines mikroglijos savybes, įskaitant nuolatinę jonizuoto kalcio rišančiojo adapterio molekulės Iba-1 ekspresiją ir interferono-gama indukuojamą MHC II klasės antigenų ekspresiją. [2] [3] Mikroglia, kaip centrinės nervų sistemos nuolatinės įgimtosios imuninės ląstelės, yra pagrindiniai neurouždegiminių ligų, Alzheimero ligos ir kitų neurodegeneracinių ligų tarpininkai. Todėl HMC3 ląstelės yra patogi žmogaus in vitro platforma, skirta mikroglijos aktyvacijos, neuroprotektyvinių medžiagų, virusinės neuroinfekcijos ir glioblastomos naviko mikroaplinkos tyrimams.

Svarbiausi aspektai

• HMC3 ląstelės – tai nemirtingos žmogaus vaisiaus smegenų mikroglijos ląstelės, gautos transfekuojant SV40 didžiojo T antigeno.
• Ši ląstelių linija nuolat ekspresuoja Iba-1, o stimuliuojama interferonu-gama padidina MHC II klasės ekspresiją; laboratorijų duomenys apie CD14, CD11b ir CD68 ekspresiją skiriasi, todėl juos reikėtų patikrinti kiekvienai konkrečiai partijai atskirai.
• HMC3 ląstelės yra plačiai naudojamas in vitro modelis, skirtas neurouždegiminių ligų, Alzhaimerio ligos ir neurodegeneracinių ligų tyrimams.
• Ši ląstelių linija yra jautri įvairių neurotropinių virusų, įskaitant Zika virusą, Borna ligos virusą Nr. 1, čikungunijos virusą ir rinovirusą, sukeltoms infekcijoms.
• HMC3 ląstelės nuolat ekspresuoja NOX4 ir gamina reaktyviąsias deguonies rūšis, todėl jos yra svarbios atliekant tyrimus, susijusius su oksidaciniu stresu.
• Ši linija buvo pritaikyta glioblastomos naviko mikroaplinkos tyrimams, vaistų farmakologijai ir biomedžiagų karkasų tyrimams.
• Interleukinas-1 beta – vartojamas atskirai arba kartu su interferonu-gama – yra veiksmingiausias uždegiminis stimuliatorius šioje ląstelių linijoje; reakcijos į LPS yra palyginti nedidelės, o TNF-alfa ir azoto oksidas beveik nepasireiškia.

Kas yra HMC3?

HMC3 (Cellosaurus pavyzdys CVCL_II76) yra transformuota žmogaus mikroglijos ląstelių linija, gauta iš 8–10 nėštumo savaičių amžiaus embriono vaisiaus smegenų. Donoro lytis nenurodyta. Donorui nebuvo diagnozuota jokia liga. Liniją 1995 m. sukūrė Janabi ir kolegos, transfekuodami pirmines embrioninių smegenų makrofagų kultūras plazmida, koduojančia SV40 didįjį T antigeną; taip buvo gautos keturios nepertraukiamos mikroglijos ląstelių linijos, iš kurių klonas Nr. 3 tapo plačiausiai naudojamas. [1] Transformuotos ląstelės išlaikė makrofagines savybes, pavyzdžiui, adheziją ir nespecifinį esterazės aktyvumą, ir galėjo fagocituoti zimozano daleles, nors fagocitinis aktyvumas išliko žemas. Ląstelės savaime gamino interleukiną-6, o jo gamyba dar labiau padidėjo po stimuliacijos interleukinu-1 alfa. [1] 2018 m. Dello Russo ir kolegų atliktoje išsamioje sisteminėje literatūros apžvalgoje buvo surinkti turimi šio klono charakteristikų duomenys ir išaiškintas svarbus painiavos šaltinis: ta pati ląstelių linija buvo žinoma pavadinimais CHME3, C13-NJ ir CHME-5. [3] Apžvalgoje padaryta išvada, kad, neatsižvelgiant į naudojamą pavadinimą, šios ląstelės turi panašų antigeninį ir funkcinį profilį ir turėtų būti laikomos vienu eksperimentiniu modeliu — kartu įspėjant, kad keli rinkoje esantys CHME-5 alikvotai buvo užteršti žiurkių gliomos ląstelėmis. ATCC patvirtintas HMC3 (ATCC CRL-3304) pagrindinis tirpalas neturi šios dviprasmybės.

Informacija apie HMC3 ląstelių kultūrą

HMC3 ląstelės yra atsparios bazinės terpės pasirinkimui: jos sėkmingai auginamos EMEM, MEM ir DMEM:Ham's F12 terpėse, į kurias kiekvieną kartą įmaišoma 10 % serumo. [3] Tačiau šis pasirinkimas nėra fenotipiškai neutralus. Dello Russo ir kolegos pranešė, kad bazinis reaktyviųjų deguonies rūšių susidarymas ląstelėse, augintose MEM arba DMEM:F12 terpėje, buvo žymiai mažesnis nei EMEM terpėje, o tai rodo mažiau aktyvią ramybės būsenos fenotipą. [3] Todėl tyrėjai, lygindami skirtingų laboratorijų duomenis, turėtų užfiksuoti naudotą terpę kartu su pasėlio numeriu.

HMC3 ląstelių privalumai

HMC3 ląstelės yra unikali ir lengvai prieinama žmogaus mikroglijos modelis tuo metu, kai sunku gauti pakankamą kiekį pirminių žmogaus mikroglijos ląstelių didelio masto tyrimams. Ši ląstelių linija auga adhezyviai ir ją lengva prižiūrėti. Svarbiausia, kad ląstelės nuolat ekspresuoja Iba-1, padidina MHC II klasės ekspresiją reaguodamos į interferoną-gama, o ATCC patvirtintame stambinyje transkribuoja neseniai apibrėžtus mikroglijos požyminius genus CX3CR1, CSF1R, P2RY12 ir TMEM119, taip suteikdamos biologiškai patvirtintą pirminių žmogaus mikroglijos ląstelių pakaitalą. [2] [3] Dėl šių savybių HMC3 ląstelės yra plačiai naudojama platforma neurouždegiminių ligų mechanizmų tyrimams, kuriems reikalinga atkuriamas, pritaikomas ir visiškai žmogaus kilmės ląstelinis medžiagas.

Dar vienas HMC3 ląstelių privalumas – jų jautrumas tam tikram uždegiminių dirgiklių rinkiniui. Veiksmingiausias interleukino-6 induktorius yra interleukinas-1 beta, kuris padidina bazinį išsiskyrimą iki penkiasdešimt kartų ir veikia sinergiškai su interferonu-gama; LPS ir amiloido beta peptidai sukelia kuklesnį, nuo koncentracijos priklausantį padidėjimą. [3] Šis laipsniškas, pakartojamas atsako profilis leidžia atlikti nuo koncentracijos priklausančius ir laiko eigos eksperimentus, kuriuos sunku įgyvendinti naudojant pirminių ląstelių preparatus. Jų reakcija tiek į prouždegiminius, tiek į priešuždegiminius dirgiklius – įskaitant farmakologinius preparatus, pavyzdžiui, rapamiciną ir deksmedetomidiną – dar labiau išplečia jų pritaikymo galimybes vaistų farmakologijoje ir neuroprotektyvinių preparatų atrankoje. [4] [5] Šios ląstelės taip pat yra jautrios įvairiems neurotropiniams virusams, todėl jų panaudojimas išplečiamas į neuroinfekcijų tyrimų sritį.

HMC3 ląstelių apribojimai

Kaip transformuota ląstelių linija, HMC3 ląstelės turi SV40 didžiojo T antigeną, kuris suteikia nemirtingumą, tačiau taip pat keičia tam tikrus ląstelių biologijos aspektus, palyginti su pirminėmis mikroglijos ląstelėmis. Li ir kolegos pranešė apie netikėtus NOX izoformų ekspresijos modelius – gausų NOX4, bet beveik jokio NOX2 mRNR – kurie skiriasi nuo pirminių mikroglijos ląstelių ir riboja šios linijos naudingumą kaip NOX2 tarpininkaujamo respiracinio sprogimo modelio. [2] [3] Todėl mokslininkai, prieš darydami plačias išvadas apie mechanizmus, turėtų patikrinti, ar tiriamas konkretus procesas šioje linijoje yra tiksliai atkartotas.

Reikėtų atkreipti dėmesį į dar tris apribojimus. Pirma, uždegimo mediatorių spektras yra neišsamus: HMC3 ląstelės išskiria tik nežymius kiekius priešuždegiminio citokino IL-10 (keleto pg/ml diapazone), gamina mažai arba visai negamina TNF-alfa nei savaime, nei po prouždegiminės aktyvacijos, o jų IL-6 lygis nuolat padidėjęs dėl NOX4 priklausomų reaktyviųjų deguonies rūšių. [2] [3] Antra, ir tai smarkiai skiriasi nuo graužikų mikroglijos, ramybės būsenoje esančios HMC3 ląstelės neišreiškia iNOS, o po stimuliacijos LPS, LPS kartu su interferonu-gama, IL-1 beta arba TNF-alfa nebuvo pastebėta nei iNOS indukcijos, nei išmatuojamo nitritų kaupimosi. [3] Todėl šis modelis nėra tinkamas tyrimams, susijusiems su azoto oksido ašimi.

Trečia, ši ląstelių linija buvo sukurta iš vaisiaus smegenų audinio, o tai reiškia, kad jos transkripcijos ir funkcinis profilis gali skirtis nuo suaugusiųjų mikroglijos būsenų, susijusių su vėlyvojo amžiaus neurodegeneracinėmis ligomis. Tyrėjai, modeliuojantys suaugusiųjų Alzheimerio ar Parkinsono ligą, turėtų interpretuoti iš HMC3 gautus duomenis kartu su papildomomis suaugusiųjų pirminėmis arba iš iPSC gautomis mikroglijos sistemomis, jei tai įmanoma. Galiausiai, pranešimai apie paviršiaus žymenų profilį nėra visiškai suderinti: nors Li ir kolegos aprašė konstitucinius Iba-1 ir CD14 kartu su interferono gama indukuojamais CD11b, CD68 ir MHC II klasės žymenimis, [2] tiek Janabi ir jo kolegų pateiktas pirminis apibūdinimas, [1] Be to, Dello Russo ir kolegų pateikti ATCC CRL-3304 ląstelių srauto citometrijos duomenys parodė, kad ramybės būsenos ląstelės buvo CD14 ir CD11b neigiamos, o interferonas-gama nesukėlė nei vieno, nei kito žymens išraiškos. [3] Šiems rezultatams įtakos turi antikūnų klonas, auginimo terpė ir pasėlių skaičius, o genetinė dreifo tendencija, atsirandanti atliekant pakartotinius pasėlius, paprastai yra užfiksuota nuolatinėse linijose; žymeklio ekspresiją reikėtų patvirtinti pačiam, o ne remtis prielaidomis.

Peržiūrėti visas specifikacijas ir užsisakyti

HMC3 ląstelių pritaikymas

Neurouždegimas ir mikroglijos aktyvacija

Neurouždegiminių ligų tyrimai yra plačiausiai išvystytas HMC3 ląstelių pritaikymas. Li ir kolegos įrodė, kad HMC3 ląstelės nuolat ekspresuoja NOX4, kuris skatina nuolatinį reaktyviųjų deguonies rūšių susidarymą ir ilgalaikę IL-6 ekspresiją – šis atradimas leido šias ląsteles laikyti lėtinio, silpno laipsnio neurouždegimo modeliu. [2] Šis nuolatinis uždegiminis fonas atspindi mikroglijos parengties aspektus, stebimus neurodegeneracinėse būklėse, ir suteikia tinkamą atskaitos tašką intervenciniams tyrimams.

Įtakingame Baek ir kolegų tyrime, naudojant RNR sekvenavimą, buvo tiriamas BET bromodomeno slopinimas HMC3 ląstelėse. [6] Autoriai parodė, kad BET inhibitorius JQ1 susilpnino LPS aktyvuotų HMC3 ląstelių uždegiminį ir migracijos atsaką, bei nustatė mechanizmą: LPS indukuoja transkripcijos faktorių IRF1, kuris tiesiogiai reguliuoja chemokinų, citokinų, interferono stimuliuojamų ir su migracija susijusių genų ekspresiją, o JQ1 žymiai sumažina IRF1 ekspresiją kartu su jo taikiniais genais. IRF1 ekspresijos slopinimas pakartojo šį poveikį ir slopino mikroglijos migraciją. [6] Šis darbas nustatė, kad BET–IRF1 ašis yra vaistais paveikiamas taikinys žmogaus mikroglijos neurouždegime, ir parodė, kad HMC3 ląstelės tinka farmakologinių intervencijų tyrimams mechanistiniu lygmeniu.

Šioje linijoje taip pat buvo tirti su mitochondrijų pažeidimais susiję molekuliniai modeliai. Nasi ir kolegos nustatė, kad stimuliacija mitochondrinės DNR ir kardiolipinu padidino ląstelinį oksidacinį stresą HMC3 ląstelėse, tačiau nepavyko sukelti klasikinės prouždegiminės reakcijos: HLA-DR ekspresija nebuvo padidinta, o nei TNF-alfa, nei IL-6 sekrecija nepadidėjo. [7] Autoriai tai aiškino kaip galimą endogeninį reguliavimo mechanizmą, ribojantį mikroglijos aktyvaciją. Atskirai Cappoli ir kolegos parodė, kad mTOR inhibitorius rapamicinas paradoksaliu būdu sustiprino IL-6 ekspresiją ir išsiskyrimą HMC3 ląstelėse, aktyvuotose interferono-gama/IL-1 beta mišiniu, tuo pačiu sumažindamas reaktyviųjų deguonies rūšių gamybą — taip paneigdamas prielaidas apie rapamicino priešuždegiminį poveikį žmogaus smegenyse esančiose imuninėse ląstelėse. [4] Šie tyrimai kartu rodo, kad HMC3 ląstelės yra jautri, žmogui aktuali sistema, leidžianti išnagrinėti molekulinius kelius, kuriais grindžiamos neurouždegiminės ligos.

Alzheimerio ligos ir neurodegeneracinių ligų modeliavimas

HMC3 ląstelės tapo svarbiu įrankiu modeliuojant mikroglijos indėlį į Alzheimero ligą. Ankstyvame Lindbergo ir kolegų charakterizavimo tyrime, atliktame su šiuo klonu, pavadintu CHME3, nustatyta, kad šviežiai ištirpintas amiloidas beta (1–40) sukėlė nuo dozės priklausomą IL-6 išsiskyrimo padidėjimą kartu su nuo dozės priklausomu gyvybingumo praradimu. [8] Alfa-melanocitų stimuliuojantis hormonas nepakeitė amiloido beta sukeltos IL-6 reakcijos, tačiau dozės priklausomai padidino bazinį IL-6 išsiskyrimą – šis poveikis priskiriamas melanokortino receptorių potipiams MCR3 arba MCR5. [8] Šis darbas patvirtino, kad HMC3 ląstelės yra tinkama platforma tirti ryšį tarp amiloido beta peptidų ir mikroglijos uždegiminių reakcijų, kurios yra esminės Alzhaimerio ligos patogenezėje.

González-Prieto ir kolegos tyrė CX3CR1 – vienintelį neuroninio chemokino CX3CL1 receptorių – Alzheimerio ligos kontekste. [9] CX3CR1 sintezė buvo padidėjusi 5xFAD pelių žievėje ir žmogaus smegenų mėginiuose, paimtuose sergančiųjų Alzhaimerio liga, o noradrenalino reabsorbcijos inhibitorių reboxetino vartojimas dar labiau padidino jo kiekį in vivo. Priešingai, tiesioginis noradrenalino veikimas HMC3 ląstelėms ir pirminėms žiurkių mikroglijos ląstelėms slopino CX3CR1 gamybą. [9] Autoriai padarė išvadą, kad mikroglijos reakcijos į noradrenaliną gali pasikeisti, kai nėra CX3CL1 gaminančių neuronų arba veikia kiti, su mikroglijos ląstelėmis nesusiję veiksniai — tai pamokantis pavyzdys, kaip HMC3 ląstelės gali izoliuoti ląstelių autonominę reakciją ir taip atskleisti platesnio audinio konteksto įtaką.

Li ir kolegų atliktame deksmedetomidino tyrime LPS ir ATP stimuliuotos HMC3 ląstelės buvo naudojamos kaip NLRP3 inflammasomo sukeltos neurouždegimo, susijusio su Alzhaimerio liga, modelis. [5] Deksmedetomidinas slopino IL-1β ir IL-18 išsiskyrimą per c-Fos/NLRP3/kaspazės-1 kaskadą, taip nustatydamas mechanizmo požiūriu naują priešuždegiminę ašį žmogaus mikroglijoje. HMC3 ląstelės taip pat buvo naudojamos kaip modelis mikroglios poliarizacijos tyrimams, reaguojant į fitoestrogenų turinčius augalų ekstraktus, dar labiau išplečiant jų pritaikymą vaistų, skirtų neurodegeneracinėms ligoms gydyti, atradimui. [10] [11]

Virusologija ir centrinės nervų sistemos infekcijos

HMC3 ląstelės pasirodė esą labai universalios virusinių neuroinfekcijų tyrimams, atsižvelgiant į jų žmogišką kilmę ir jų, kaip mikroglijos pirmosios gynybos linijos centrinėje nervų sistemoje, modelio vaidmenį. Martinez Viedma ir Pickett palygino HMC3 mikroglijos ląstelių ir JEG-3 placentos ląstelių šeimininko reakciją į Zika viruso infekciją, naudodami 84 įgimtų ir adaptyvių imuninių genų rinkinį, kurio profilis buvo nustatytas 24 ir 72 valandas po infekcijos. [12] Abiejų ląstelių tipų diferencialiai ekspresuojamų genų rinkiniai skyrėsi, o signalinių kelių analizė parodė, kad TLR7/8 signalizacija buvo slopinama mikroglijos ląstelėse, o placentos ląstelėse – aktyvuota; šis skirtumas vėliau buvo tiriamas siRNA eksperimentais. Tyrimas patvirtino, kad HMC3 ląstelės yra tinkama platforma šeimininko ir patogeno transkriptomikai centrinės nervų sistemos virusologijoje.

Zhangas ir kolegos, naudodami BoDV-1 užkrėstas HMC3 ląsteles, įrodė, kad miR-146a palengvina viruso replikaciją, slopindamas įgimto imuniteto signalizacijos ašį IRAK1/TRAF6/NF-κB. [13] Šis atradimas suteikė mechanistinį įžvalgą, kaip labai neurotropinis RNR virusas išvengia mikroglijos antivirusinių reakcijų. Kitu infekcijos modeliu Angel-Ambrocio ir kolegos pirmą kartą įrodė, kad žmogaus rinovirusas užbaigia visą savo virusinį ciklą HMC3 ląstelėse, taip nustatydami, kad mikroglijos ląstelės yra potencialus rinovirusu susijusių centrinės nervų sistemos komplikacijų ląstelinis rezervuaras. [14] Ši ląstelių linija taip pat palaiko chikungunya viruso replikaciją be ženklaus gyvybingumo praradimo iki 72 valandų po infekcijos. [19]

Sharma ir kolegos, naudodami virusų antklodės baltymų rišimosi tyrimus, LC-MS/MS proteomiką, siRNA slopinimą ir koimunoprecipitaciją, nustatė, kad prohibitinas 1/2 yra galimas 3 serotipo dengės viruso įėjimo receptorius mikroglijos CHME-3 ląstelėse – HMC3 sinonimas. [15] Pažymėtina, kad ta pati priklausomybė buvo nustatyta neuroninėse SH-SY5Y ląstelėse, bet ne astroglialinėse U-87 MG ląstelėse, o tai rodo, kad įsiskverbimo kelias yra specifinis tam tikram ląstelių tipui. Apibendrinant, šie virusologiniai tyrimai pabrėžia, kad HMC3 ląstelės yra plačiai taikomas žmogaus mikroglijos modelis, skirtas neurotropinių virusų patogenezei ir imuninės sistemos išvengimo strategijoms tirti.

Glioblastomos naviko mikroaplinka

HMC3 ląstelės buvo naudojamos kaip su glioma susijusių mikroglijos ląstelių modelis, siekiant ištirti, kaip glioblastomos naviko ląstelės pasinaudoja mikroglijos uždegiminiu fenotipu. Li ir kolegos įrodė, kad temozolomidui atsparių glioblastomos ląstelių bendras kultivavimas su HMC3 ląstelėmis skatino HMC3 ląstelių M2 poliarizaciją ir padidino naviką skatinančių citokinų TGF-β ir IL-6 sekreciją. [16] Ši poliarizacija buvo susieta su lncRNA SNHG15/miR-627-5p/CDK6 grandine, o CDK4/6 inhibitorius palbociklibas sumažino M2 žymenis ir kartu įveikė atsparumą temozolomidui pacientų kilmės ksenotransplantatų modeliuose.

Šie atradimai leidžia laikyti HMC3 ląsteles tinkamu žmogaus modeliu, skirtu tirti mikroglijos indėlį į imuninę sistemą slopinančią glioblastomos naviko mikroaplinką. Galimybė in vitro modeliuoti mikroglijos ir glioblastomos sąveiką naudojant HMC3 ląsteles suteikia patogią sistemą terapiniams taikinams identifikuoti, kurie vienu metu spręstų naviko ląstelių atsparumo ir imuninės sistemos išvengimo problemas. [16]

Neuroprotektyvūs agentai ir vaistų farmakologija

HMC3 ląstelės plačiai naudojamos neuroprotektyvių medžiagų atrankai ir jų veikimo mechanizmų žmogaus mikroglijoje charakterizavimui. Martínez Leo ir Segura Campos įvertino Salvia hispanica sėklų peptidų frakcijų neuroprotektyvų aktyvumą HMC3 ląstelėse ir nustatė, kad 1–3 kDa frakcija 51,3 % sumažino reaktyviųjų deguonies rūšių susidarymą bei azoto oksido, TNF-alfa ir IL-6 išsiskyrimą, o bendras apsauginis poveikis siekė 79,0 %. [17] Šio tipo tyrimai iliustruoja, kaip HMC3 ląstelės leidžia greitai atlikti žmogui aktualų maisto kilmės biologiškai aktyvių junginių atrankinį tyrimą.

Ma'arif ir kolegos atliko du susijusius tyrimus, naudodami HMC3 ląsteles, siekdami įvertinti augalinės kilmės fitoestrogenus iš Marsilea crenata lapų. N-butanolio frakcija sumažino MHC II klasės ekspresiją interferono-gama aktyvuotose ląstelėse, o tai atitinka klasikinės M1 aktyvacijos slopinimą, nors nurodyta dozės ir atsako kreivė nebuvo monotoniška. [10] 96 % etanolio ekstraktas padidino M2 žymens arginazės-1 ekspresiją; tame pačiame tyrime buvo pranešta apie aktyvuoto estrogeno receptoriaus beta ekspresijos sumažėjimą esant 125 ir 250 ppm koncentracijoms – šis rezultatas prieštarauja pačiam straipsnio pavadinimui ir turėtų būti vertinamas kaip neišspręstas. [11] Abiejuose tyrimuose buvo pasinaudota gerai apibūdintu interferono-gama poliarizacijos protokolu HMC3 ląstelėse, siekiant ištirti potencialią fitoestrogeninę neuroapsaugą po menopauzės pasireiškiančio neurouždegimo atveju.

Biomedžiagų ir audinių inžinerijos srityje Venkateswarlu ir kolegos naudojo gyvas HMC3 ląsteles, kultivuotas ant elektrospinuotų karkasų matricų, siekdami sukurti realaus laiko tūrinio vaizdavimo darbo eigą, skirtą citosolinio kalcio svyravimams tirti, naudojant lazerinio skenavimo konfokalinę mikroskopiją. [18] Šis darbas išplėtė HMC3 ląstelių taikymą už klasikinės farmakologijos ribų į naujos kartos biomedžiagų bandymus, parodydamas šios ląstelių linijos universalumą įvairiuose technologiniuose kontekstuose neuromokslinių tyrimų srityje.

Išvada

HMC3 ląstelės — žmogaus mikroglijos klonas Nr. 3 — įsitvirtino kaip pagrindinis in vitro modelis neurouždegiminių ligų, Alzheimero ligos, neurodegeneracinių ligų, centrinės nervų sistemos virusologijos, glioblastomos naviko mikroaplinkos tyrimų ir neuroprotektyvinių medžiagų atradimo srityse. Ši ląstelių linija, gauta iš žmogaus vaisiaus smegenų audinio ir imortalizuota SV40 transfekcijos būdu, ekspresuoja pagrindinius mikroglijos žymeklius ir reaguoja į apibrėžtą uždegiminių, farmakologinių ir infekcinių dirgiklių spektrą. Tyrimai, tokie kaip Baek ir kolegų atliktas BET inhibitorių tyrimas, parodė šios ląstelių linijos potencialą identifikuojant vaistams jautrius taikinus žmogaus mikroglijos neurouždegime. Nuo fundamentalių reaktyviųjų deguonies rūšių ir NLRP3 inflammasomo signalizacijos mechanizmų tyrimų iki taikomųjų augalinės kilmės neuroprotektyvinių medžiagų atrankų ir ant karkaso pagrįstų biomedžiagų bandymų – HMC3 ląstelės pasižymi išskirtiniu universalumu, su sąlyga, kad planuojant eksperimentus atsižvelgiama į jų dokumentuotus apribojimus, susijusius su TNF-alfa, azoto oksidu ir NOX2 biologija. Mokslininkams, ieškantiems patvirtinto, pritaikomo ir visiškai žmogaus mikroglijos modelio, HMC3 ląstelės taps vertingu ištekliu, padėsiančiu gilinti supratimą apie smegenų imunitetą ir ligas. Norėdami užsisakyti HMC3 ląsteles arba gauti daugiau informacijos apie produkto specifikacijas, apsilankykite svetainėje cytion.com.

Pagrindiniai leidiniai

1. Janabi N, Peudenier S, Héron B (1995) Žmogaus mikroglijos ląstelių linijų sukūrimas po pirminių embrioninių mikroglijos ląstelių kultūrų transfekcijos SV40 didžiuoju T antigenu. „Neuroscience letters“. PMID: 7478261
2. Li B, Bedard K, Sorce S (2009) NOX4 ekspresija žmogaus mikroglijos ląstelėse lemia nuolatinį reaktyviųjų deguonies rūšių susidarymą ir nuolatinę IL-6 ekspresiją. „Journal of innate immunity“. PMID: 20375612
3. Dello Russo C, Cappoli N, Coletta I (2018) Žmogaus mikroglijos HMC3 ląstelių linija: kur esame? Sisteminė literatūros apžvalga. „Journal of neuroinflammation“. PMID: 30200996
4. Cappoli N, Mezzogori D, Tabolacci E (2019) mTOR kinazės inhibitorius rapamicinas stiprina proinflamacinio citokino interleukino 6 ekspresiją ir išsiskyrimą, moduliuodamas žmogaus mikroglijos ląstelių aktyvaciją. „EXCLI“ žurnalas. PMID: 31645839
5. Li H, Zhang X, Chen M (2018) Dekmedetomidinas slopina uždegimą mikroglijos ląstelėse, stimuliuojamose LPS ir ATP, per c-Fos/NLRP3/kaspazės-1 kaskadas. „EXCLI“ žurnalas. PMID: 29743866
6. Baek M, Yoo E, Choi HI (2021) BET inhibitorius silpnina uždegiminį atsaką ir ląstelių migraciją žmogaus mikroglijos HMC3 ląstelių linijoje. „Scientific Reports“. PMID: 33893325
7. Nasi M, De Gaetano A, Bianchini E (2020) Su mitochondrijų pažeidimais susiję molekuliniai modeliai stimuliuoja reaktyviųjų deguonies rūšių gamybą žmogaus mikroglijoje. „Molecular and cellular neurosciences“. PMID: 32828963
8. Lindberg C, Hjorth E, Post C (2005) Citokinų gamyba žmogaus mikroglijos ląstelių linijoje: beta-amiloido ir alfa-melanocitų stimuliuojančio hormono poveikis. „Neurotoxicity research“. PMID: 16371321
9. González-Prieto M, Gutiérrez IL, García-Bueno B (2021) Mikroglijos CX3CR1 gamyba padidėja sergant Alzhaimerio liga ir ją reguliuoja noradrenalinas. „Glia“. PMID: 32662924
10. Ma'arif B, Mirza DM, Hasanah M (2020) „Marsilea crenata Presl.“ n-butanolio frakcijos antineurouždegiminis poveikis mikroglijos HMC3 ląstelių linijoje. „Journal of basic and clinical physiology and pharmacology“. PMID: 31967965
11. Ma'arif B, Agil M, Laswati H (2020) Arg1 ir aktyvuoto ERβ ekspresijos padidėjimas mikroglijos HMC3 ląstelėse, indukuojant 96 % etanolio ekstraktą iš Marsilea crenata Presl. lapų. Pagrindinės ir klinikinės fiziologijos bei farmakologijos žurnalas. PMID: 31981453
12. Martinez Viedma MDP, Pickett BE (2018) Zika viruso infekcijos skirtingų poveikių placentoje ir mikroglijos ląstelėse charakterizavimas. „Viruses“. PMID: 30453684
13. Zhang X, Guo Y, Xu X (2019) miR-146a skatina Borna ligos viruso 1 replikaciją per IRAK1/TRAF6/NF-κB signalizacijos kelią. „Virus research“. PMID: 31330207
14. Angel-Ambrocio AH, Bautista-Carbajal P, García-León ML (2020) Mikroglijos HMC3 ląstelės yra labai jautrios rinoviruso infekcijai. „Virus research“. PMID: 32768491
15. Sharma A, Vasanthapuram R, M Venkataswamy M (2020) Prohibitinas 1/2 tarpininkauja Dengue-3 patekimui į žmogaus neuroblastomos (SH-SY5Y) ir mikroglijos (CHME-3) ląsteles. Biomedicinos mokslų žurnalas. PMID: 32306962
16. Li Z, Zhang J, Zheng H (2019) Moduliuojant lncRNA SNHG15/CDK6/miR-627 grandinę palbociclibu, įveikiamas atsparumas temozolomidui ir sumažinama su glioma susijusios mikroglijos M2 poliarizacija daugiaformėje glioblastomoje. Eksperimentinių ir klinikinių vėžio tyrimų žurnalas: CR. PMID: 31462285
17. Martínez Leo EE, Segura Campos MR (2020) „Salvia hispanica“ peptidų frakcijų neuroprotektyvus poveikis HMC3 mikroglijos ląstelių prouždegiminiam reguliavimui. Maisto biochemijos žurnalas. PMID: 32207175
18. Venkateswarlu K, Suman G, Dhyani V (2020) Trimatis vaizdavimas ir realaus laiko citosolinio kalcio svyravimų kiekybinis vertinimas mikroglijos ląstelėse, kultivuojamose ant elektrospinuotų matricų, naudojant lazerinio skenavimo konfokalinę mikroskopiją. „Biotechnologija ir bioinžinerija“. PMID: 32557561
19. Qadri SW, Kumar N, Santhoshkumar R (2022) Žmogaus mikroglijos ląstelių linijos CHME-3 infekcija, siekiant ištirti Chikungunya viruso neuropatogenezę. „Journal of neurovirology“. PMID: 35352315