Ievads

HMC3 šūnas, kas pazīstama arī kā cilvēka mikroglijas klons 3, CHME-3 vai CHME3, ir viena no visplašāk izmantotajām cilvēka mikroglijas šūnu līnijām neirozinātnes pētījumos. Šo līniju 1995. gadā izveidoja Janabi, Peudenier, Héron un kolēģi, izmantojot SV40 lielā T antigēna atkarīgu cilvēka embrionālo smadzeņu makrofāgu imortalizāciju. [1] HMC3 šūnas saglabā galvenās mikrogliālo šūnu īpašības, tostarp jonizētā kalcija saistošās adaptermolekulas Iba-1 pastāvīgo ekspresiju un MHC II klases antigēnu ekspresiju, ko inducē interferons-gamma. [2] [3] Kā centrālās nervu sistēmas rezidentās iedzimtas imūnsistēmas šūnas mikroglijas ir galvenie neiroiekaisuma slimību, Alcheimera slimības un citu neirodeģeneratīvo slimību mediatori. Tādējādi HMC3 šūnas kalpo kā viegli izmantojama cilvēka in vitro platforma mikroglijas aktivācijas, neiroprotektīvo līdzekļu, vīrusu neiroinfekcijas un glioblastomas audzēja mikrovides pētīšanai.

Galvenie secinājumi

• HMC3 šūnas ir imortalizētas cilvēka augļa smadzeņu mikroglijas šūnas, kas iegūtas, veicot transfekciju ar SV40 lielā T antigēna palīdzību.
• Šī šūnu līnija pastāvīgi ekspresē Iba-1 un, stimulējot ar interferonu-gamma, paaugstina MHC II klases ekspresiju; ziņojumi par CD14, CD11b un CD68 ekspresiju atšķiras atkarībā no laboratorijas, tāpēc tie jāpārbauda katrai konkrētajai partijai.
• HMC3 šūnas ir plaši izmantots in vitro modelis neiroiekaisuma slimību, Alcheimera slimības un neirodeģeneratīvo slimību pētīšanai.
• Šī šūnu līnija ir uzņēmīga pret infekciju, ko izraisa vairāki neirotropi vīrusi, tostarp Zikas vīruss, Bornas slimības vīruss 1, čikungunjas vīruss un rinovīruss.
• HMC3 šūnas pastāvīgi ekspresē NOX4 un rada reaktīvās skābekļa formas, tādējādi padarot tās nozīmīgas oksidatīvā stresa pētījumos.
• Šī šūnu līnija ir izmantota glioblastomas audzēja mikrovides pētījumos, zāļu farmakoloģijā un biomateriālu skeleta pētījumos.
• Interleikīns-1 beta — gan atsevišķi, gan kombinācijā ar interferonu-gamma — ir visefektīvākais iekaisuma stimulators šajā virknē; reakcijas uz LPS ir salīdzinoši nelielas, bet TNF-alfa un slāpekļa oksīds praktiski nav novērojami.

Kas ir HMC3?

HMC3 (Cellosaurus reģistrācijas numurs CVCL_II76) ir transformēta cilvēka mikroglijas šūnu līnija, kas iegūta no 8–10 nedēļu gestācijas vecuma embrija smadzenēm. Donora dzimums nav norādīts. Donoram netika konstatētas nekādas slimības. Šo līniju 1995. gadā izveidoja Janabi un kolēģi, transfekcijot primārās embrionālās smadzeņu makrofāgu kultūras ar plazmīdu, kas kodē SV40 lielo T antigēnu, iegūstot četras nepārtrauktas mikroglijas šūnu līnijas, no kurām visplašāk tika izmantots 3. klons. [1] Transformētās šūnas saglabāja makrofāgu īpašības, piemēram, adheziju un nespecifisku esterāzes aktivitāti, un spēja fagocitēt zimozāna daļiņas, lai gan fagocitārā aktivitāte saglabājās zema. Šūnas spontāni ražoja interleikīnu-6, un tā ražošana vēl vairāk palielinājās pēc stimulācijas ar interleikīnu-1 alfa. [1] Dello Russo un kolēģu 2018. gadā veiktajā visaptverošajā sistemātiskajā literatūras pārskatā tika apkopoti pieejamie dati par šī klona raksturojumu un noskaidrots svarīgs neskaidrības avots: viena un tā pati šūnu līnija ir bijusi pazīstama ar nosaukumiem CHME3, C13-NJ un CHME-5. [3] Pārskatā tika secināts, ka neatkarīgi no izmantotā nosaukuma šīm šūnām ir līdzīgs antigēnais un funkcionālais profils un tās būtu jāuzskata par vienu eksperimentālo modeli — vienlaikus brīdinot, ka tika konstatēts, ka vairākas apgrozībā esošās CHME-5 alikvotas ir krusteniski piesārņotas ar žurku gliomas šūnām. ATCC sertificētajai HMC3 (ATCC CRL-3304) pamatkrājai šāda neskaidrība nepastāv.

Informācija par HMC3 šūnu kultūru

HMC3 šūnas ir izturīgas attiecībā uz pamatvides izvēli: tās ir veiksmīgi kultivētas EMEM, MEM un DMEM:Ham's F12 vidēs, katrai no tām pievienojot 10 % seruma. [3] Tomēr šī izvēle nav fenotipiski neitrāla. Dello Russo un kolēģi ziņoja, ka bazālā reaktīvo skābekļa savienojumu veidošanās bija ievērojami zemāka šūnās, kas audzētas MEM vai DMEM:F12 vidē, nekā EMEM vidē, kas liecina par mazāk aktivētu miera fenotipu. [3] Tādēļ pētniekiem, kuri salīdzina datus starp laboratorijām, kopā ar pasāžu skaitu būtu jāreģistrē izmantotais barotnes veids.

HMC3 šūnu priekšrocības

HMC3 šūnas piedāvā unikāli pieejamu cilvēka mikroglijas modeli laikā, kad primāro cilvēka mikroglijas šūnu ir grūti iegūt pietiekamā daudzumā liela mēroga pētījumiem. Šī šūnu līnija aug adhezīvi un ir viegli uzturam. Īpaši svarīgi ir tas, ka šīs šūnas pastāvīgi ekspresē Iba-1, paaugstina MHC II klases ekspresiju, reaģējot uz interferonu-gamma, un — ATCC sertificētajā krājumā — transkribē nesen definētos mikroglijas raksturīgos gēnus CX3CR1, CSF1R, P2RY12 un TMEM119, tādējādi nodrošinot bioloģiski apstiprinātu primāro cilvēka mikroglijas aizvietotāju. [2] [3] Šīs īpašības padara HMC3 šūnas par plaši izmantotu platformu neiroiekaisuma slimību mehānismu pētījumiem, kuros nepieciešams reproducējams, mērogojams un pilnībā cilvēka izcelsmes šūnu materiāls.

Vēl viena HMC3 šūnu priekšrocība ir to reaģētspēja uz noteiktu iekaisuma stimulu kopumu. Efektīvākais interleikīna-6 induktors ir interleikīns-1 beta, kas palielina bazālo izdalīšanos līdz pat piecdesmitkārt un darbojas sinerģiski ar interferonu-gamma; LPS un amiloīda beta peptīdi izraisa mazākus, no koncentrācijas atkarīgus pieaugumus. [3] Šis pakāpenisks, reproducējams reakcijas profils ļauj veikt koncentrācijai atkarīgus un laika gaitā novērotus eksperimentus, ko primāro šūnu preparātos ir grūti īstenot. To reaģētspēja gan uz proinflamatoriskiem, gan pretiekaisuma stimuliem — tostarp uz farmakoloģiskām vielām, piemēram, rapamicīnu un deksmedetomidīnu — vēl vairāk paplašina to pielietojamību zāļu farmakoloģijā un neiroprotektīvo līdzekļu skrīningā. [4] [5] Šīs šūnas ir jutīgas arī pret vairākiem neirotropiskiem vīrusiem, tādējādi paplašinot to pielietojumu neiroinfekcijoloģijas pētījumos.

HMC3 šūnu ierobežojumi

Kā transformēta šūnu līnija, HMC3 šūnas nes SV40 lielā T antigēnu, kas piešķir tām nemirstību, taču vienlaikus maina arī dažus šūnu bioloģijas aspektus salīdzinājumā ar primārajām mikrogliālajām šūnām. Li un kolēģi ziņoja par negaidītiem NOX izoformu ekspresijas modeļiem — bagātīgu NOX4, bet gandrīz nekādu NOX2 mRNS —, kas atšķiras no primārajām mikrogliālajām šūnām un ierobežo šīs līnijas lietderību kā NOX2-mediēta elpošanas sprādziena modeļa. [2] [3] Tāpēc pētniekiem, pirms izdarīt vispārīgus secinājumus par mehānismiem, būtu jāpārliecinās, ka konkrētais pētītais ceļš šajā līnijā ir precīzi atspoguļots.

Vērā jāņem vēl trīs ierobežojumi. Pirmkārt, iekaisuma mediatoru klāsts nav pilnīgs: HMC3 šūnas izdalī pretiekaisuma citokīnu IL-10 tikai niecīgos daudzumos (dažu pg/ml diapazonā), ražo maz vai vispār neražo TNF-alfa ne spontāni, ne pēc proinflamatoriskas aktivācijas, un tām ir pastāvīgi paaugstināts IL-6 līmenis, ko nosaka NOX4 atkarīgie reaktīvie skābekļa savienojumi. [2] [3] Otrkārt, un atšķirībā no grauzēju mikroglijas, atpūtas stāvoklī esošās HMC3 šūnas neekspresē iNOS, un pēc stimulācijas ar LPS, LPS kopā ar interferonu-gamma, IL-1 beta vai TNF-alfa nav novērota ne iNOS indukcija, ne arī izmērāma nitrītu uzkrāšanās. [3] Tāpēc pētījumiem, kas vērsti uz slāpekļa oksīda asi, šis modelis nav īpaši piemērots.

Treškārt, šī šūnu līnija tika izveidota no augļa smadzeņu audiem, kas nozīmē, ka tās transkripcijas un funkcionālais profils var atšķirties no pieaugušajiem raksturīgajiem mikroglijas stāvokļiem, kas saistīti ar novecošanās posmā radušām neirodeģeneratīvām slimībām. Pētniekiem, kuri modelē pieaugušo Alcheimera slimību vai Parkinsona slimību, HMC3 iegūtie dati būtu jāinterpretē kopā ar papildu pieaugušo primārajām vai no iPSC iegūtajām mikroglijas sistēmām, ja tas ir iespējams. Visbeidzot, ziņojumi par virsmas marķieru profilu nav pilnībā saskaņoti: kamēr Li un kolēģi aprakstīja konstitutīvo Iba-1 un CD14 kopā ar interferona-gamma inducējamo CD11b, CD68 un MHC II klasi, [2] gan Janabi un kolēģu sākotnējais raksturojums [1] Turklāt plūsmas citometrijas dati, ko Dello Russo un kolēģi publicēja par ATCC CRL-3304, liecināja, ka miera stāvoklī esošās šūnas ir CD14- un CD11b-negatīvas, un neviens no šiem marķieriem netika inducēts ar interferonu-gamma. [3] Šos rādītājus ietekmē gan antivielu klons, gan kultivēšanas barotne, gan pasāžu skaits, un parasti ir dokumentēts, ka sērijveida pasāžošanas laikā notiek ģenētiskā dreifa; marķiera ekspresija ir jāapstiprina laboratorijā, nevis jāpieņem kā pašsaprotama.

Apskatīt pilnu specifikāciju un pasūtīt

HMC3 šūnu pielietojumi

Neiroiekaisums un mikroglijas aktivācija

Neiroiekaisuma slimību izpēte ir visplašāk attīstītā HMC3 šūnu pielietojuma joma. Li un kolēģi pierādīja, ka HMC3 šūnas konstitutīvi ekspresē NOX4, kas veicina nepārtrauktu reaktīvo skābekļa savienojumu ražošanu un ilgstošu IL-6 ekspresiju — šis atklājums padarīja šīs šūnas par modeli hroniskam, vieglas pakāpes neiroiekaisumam. [2] Šis pastāvīgais iekaisuma fons atspoguļo mikroglijas sagatavošanās aspektus, kas novēroti neirodeģeneratīvās slimībās, tādējādi nodrošinot atbilstošu atsauces punktu intervences pētījumiem.

Ietekmīgā Baek un kolēģu pētījumā, izmantojot RNS sekvencēšanu, tika pētīta BET bromodomēna inhibīcija HMC3 šūnās. [6] Autori parādīja, ka BET inhibitors JQ1 vājināja LPS aktivēto HMC3 šūnu iekaisuma un migrācijas reakciju, kā arī identificēja šā mehānisma darbības principu: LPS inducē transkripcijas faktoru IRF1, kas tieši regulē ķīmisko kinīnu, citokīnu, interferona stimulēto un ar migrāciju saistīto gēnu ekspresiju, un JQ1 ievērojami samazina IRF1 līmeni kopā ar tā mērķa gēniem. IRF1 ekspresijas nomākšana reproducēja šo efektu un inhibēja mikroglijas migrāciju. [6] Šis darbs noteica BET–IRF1 asi kā zāļu iedarbības mērķi cilvēka mikroglijas neiroiekaisumā un parādīja HMC3 šūnu piemērotību farmakoloģiskās intervences pētījumiem mehānisma līmenī.

Šajā pētījumā tika izpētīti arī ar mitohondriālo bojājumu saistītie molekulārie modeļi. Nasi un kolēģi atklāja, ka stimulācija ar mitohondriālo DNS un kardiolipīnu palielināja šūnu oksidatīvo stresu HMC3 šūnās, vienlaikus ievērojami nespējot izraisīt klasisku proinflamatorisku reakciju: HLA-DR ekspresija netika paaugstināta, un nepalielinājās ne TNF-alfa, ne IL-6 sekrēcija. [7] Autori to interpretēja kā iespējamu endogēnu regulējošu mehānismu, kas ierobežo mikroglijas aktivāciju. Atsevišķi Cappoli un kolēģi parādīja, ka mTOR inhibitors rapamicīns paradoksāli pastiprināja IL-6 ekspresiju un izdalīšanos HMC3 šūnās, kas bija aktivētas ar interferona-gamma/IL-1 beta kokteili, vienlaikus samazinot reaktīvo skābekļa savienojumu veidošanos — tādējādi apstrīdot pieņēmumus par rapamicīna pretiekaisuma iedarbību cilvēka smadzenēs esošajās imūnšūnās. [4] Šie pētījumi kopumā parāda, ka HMC3 šūnas ir jutīga, cilvēkam atbilstoša sistēma, lai izpētītu molekulāros ceļus, kas ir neiroiekaisuma slimību pamatā.

Alcheimera slimības un neirodeģeneratīvo slimību modelēšana

HMC3 šūnas ir kļuvušas par svarīgu instrumentu mikroglijas lomas modelēšanai Alcheimera slimībā. Lindberga un kolēģu agrīnā raksturojošā pētījumā, kas veikts ar šo klonu ar nosaukumu CHME3, tika konstatēts, ka svaigi izšķīdinātais amiloīds beta (1–40) izraisīja devas atkarīgu IL-6 izdalīšanās palielināšanos, kā arī devas atkarīgu dzīvotspējas zudumu. [8] Alfa-melanocītu stimulējošais hormons nemainīja amiloīda beta izraisīto IL-6 reakciju, taču devas atkarīgi palielināja bazālo IL-6 izdalīšanos — šis efekts tika attiecināts uz melanokortīna receptoru apakštipiem MCR3 vai MCR5. [8] Šis darbs apstiprināja, ka HMC3 šūnas ir piemērota platforma, lai pētītu saikni starp amiloīda beta peptīdiem un mikroglijas iekaisuma reakcijām, kurām ir centrālā nozīme Alcheimera slimības patogēnēzē.

González-Prieto un kolēģi pētīja CX3CR1 — vienīgo neironu ķīmiskā signālvielas CX3CL1 receptoru — saistībā ar Alcheimera slimību. [9] CX3CR1 sintēze bija palielināta 5xFAD pelēm smadzeņu garozā un cilvēku Alcheimera slimības smadzeņu paraugos, un noradrenalīna atpakaļsaistes inhibitora reboxetīna ievadīšana to vēl vairāk palielināja in vivo. Turpretim noradrenalīna tieša pievade HMC3 šūnām un primārajām žurku mikroglijas šūnām, gluži pretēji, inhibēja CX3CR1 ražošanu. [9] Autori secināja, ka mikroglijas reakcijas uz noradrenalīnu var būt mainītas CX3CL1 ražojošu neironu trūkuma vai citu ar mikrogliju nesaistītu faktoru ietekmē — tas ir uzskatāms piemērs tam, kā HMC3 šūnas var izolēt šūnu autonomu reakciju un tādējādi atklāt plašāka audu konteksta ietekmi.

Li un kolēģu pētījumā par deksmedetomidīnu tika izmantotas ar LPS un ATP stimulētas HMC3 šūnas kā Alcheimera slimībai raksturīgas, NLRP3 inflammasomas izraisītas neiroiekaisuma modelis. [5] Deksmedetomidīns nomāca IL-1β un IL-18 atbrīvošanos caur c-Fos/NLRP3/kaspāzes-1 kaskādi, tādējādi identificējot mehāniski jaunu pretiekaisuma asi cilvēka mikrogliālajās šūnās. HMC3 šūnas ir kalpojušas arī kā modelis, lai pētītu mikroglijas polarizāciju reakcijā uz fitoestrogēnus saturošiem augu ekstraktiem, tādējādi vēl vairāk paplašinot to lietderību zāļu izstrādē neirodeģeneratīvo slimību ārstēšanai. [10] [11]

Viroloģija un CNS infekcijas

HMC3 šūnas ir izrādījušās ļoti daudzpusīgas vīrusu neiroinfekciju pētīšanā, ņemot vērā to cilvēka izcelsmi un to lomu kā modelim mikroglijas pirmajai aizsardzības līnijai centrālajā nervu sistēmā. Martinez Viedma un Pickett salīdzināja HMC3 mikroglijas šūnu un JEG-3 placentas šūnu saimnieka reakciju uz Zikas vīrusa infekciju, izmantojot 84 iedzimto un adaptīvo imūngēnu paneli, kuru profilus noteica 24 un 72 stundas pēc inficēšanās. [12] Abiem šūnu tipiem tika novēroti atšķirīgi diferencēti ekspresēto gēnu kopumi, un signālceļu analīze liecināja, ka TLR7/8 signālceļš mikrogliālajās šūnās bija nomākts, bet placentas šūnās — aktivizēts; šo atšķirību vēlāk pārbaudīja ar siRNA eksperimentiem. Pētījumā tika noskaidrots, ka HMC3 šūnas ir piemērota platforma saimnieka–patogēna transkriptomikas pētījumiem centrālās nervu sistēmas vīrusoloģijā.

Zhang un kolēģi izmantoja ar BoDV-1 inficētas HMC3 šūnas, lai pierādītu, ka miR-146a veicina vīrusa replikāciju, nomācot iedzimtās imūnsistēmas signālu pārraides asi IRAK1/TRAF6/NF-κB. [13] Šis atklājums sniedza mehānisku ieskatu tajā, kā ļoti neirotropisks RNS vīruss izvairās no mikroglijas pretvīrusu reakcijām. Atsevišķā infekcijas modelī Angel-Ambrocio un kolēģi pirmo reizi pierādīja, ka cilvēka rinovīruss pabeidz savu pilno vīrusu ciklu HMC3 šūnās, tādējādi nosakot mikrogliālo šūnu kā potenciālu šūnu rezervuāru ar rinovīrusu saistītām CNS komplikācijām. [14] Šī šūnu līnija atbalsta arī čikungunjas vīrusa replikāciju bez nozīmīga dzīvotspējas zuduma līdz pat 72 stundām pēc inficēšanās. [19]

Šarma un kolēģi, izmantojot vīrusa pārklājuma proteīnu saistīšanās testus, LC-MS/MS proteomiku, siRNA nomākšanu un koimunoprecipitāciju, identificēja prohibitīnu 1/2 kā iespējamo ieejas receptoru dengues vīrusa 3. serotipam mikrogliālajās CHME-3 šūnās — HMC3 sinonīms. [15] Jāatzīmē, ka tāda pati atkarība tika konstatēta neironu SH-SY5Y šūnās, bet ne astroglialajās U-87 MG šūnās, kas liecina, ka iekļūšanas ceļš ir atkarīgs no šūnu tipa. Kopumā šie viroloģiskie pētījumi uzsver, ka HMC3 šūnas ir plaši piemērojams cilvēka mikroglijas modelis, lai pētītu neirotropisko vīrusu patogēnēzi un imūnsistēmas izvairīšanās stratēģijas.

Glioblastomas audzēja mikrovide

HMC3 šūnas ir izmantotas kā ar gliomu saistītas mikroglijas modelis, lai pētītu, kā glioblastomas audzēja šūnas pārņem mikroglijas iekaisuma fenotipu. Li un kolēģi parādīja, ka temozolomīdrezistentu glioblastomas šūnu kopkultivēšana ar HMC3 šūnām veicināja HMC3 šūnu M2 polarizāciju un palielināja pro-tumorogēno citokīnu TGF-β un IL-6 sekrēciju. [16] Šī polarizācija bija saistīta ar lncRNA SNHG15/miR-627-5p/CDK6 ķēdi, un CDK4/6 inhibitors palbociclib samazināja M2 marķierus, vienlaikus pārvarot rezistenci pret temozolomīdu pacientu izcelsmes ksenotransplantātu modeļos.

Šie atklājumi liecina, ka HMC3 šūnas ir piemērots cilvēka modelis, lai pētītu mikrogliālo šūnu lomu imūnsistēmu nomācošajā glioblastomas audzēja mikrovidē. Spēja in vitro modelēt mikroglijas un glioblastomas mijiedarbību, izmantojot HMC3 šūnas, nodrošina viegli pārvaldāmu sistēmu terapeitisko mērķu identificēšanai, kas vienlaikus risina gan audzēja šūnu rezistenci, gan imūnsistēmas apiešanu. [16]

Neiroprotektīvie līdzekļi un zāļu farmakoloģija

HMC3 šūnas ir plaši izmantotas neiroprotektīvo vielu skrīningam un to darbības mehānismu raksturošanai cilvēka mikroglijā. Martínez Leo un Segura Campos novērtēja peptīdu frakcijas no Salvia hispanica sēklām attiecībā uz neiroprotektīvo aktivitāti HMC3 šūnās, konstatējot, ka 1–3 kDa frakcija par 51,3 % samazināja reaktīvo skābekļa savienojumu veidošanos un samazināja slāpekļa oksīda, TNF-alfa un IL-6 izdalīšanos, nodrošinot kopējo aizsargājošo efektu 79,0 % apmērā. [17] Šāda veida pētījums ilustrē, kā HMC3 šūnas ļauj ātri veikt cilvēkam atbilstošu pārtikas izcelsmes bioaktīvo savienojumu skrīningu.

Ma'arif un kolēģi veica divus saistītus pētījumus, izmantojot HMC3 šūnas, lai novērtētu no Marsilea crenata lapām iegūtos augu izcelsmes fitoestrogēnus. N-butanola frakcija samazināja MHC II klases ekspresiju interferona-gamma aktivētajās šūnās, kas atbilst klasiskās M1 aktivācijas inhibīcijai, lai gan ziņotā devas–reakcijas līkne nebija monotona. [10] 96 % etanola ekstrakts palielināja M2 marķiera argināzes-1 ekspresiju; tajā pašā pētījumā tika ziņots par aktivēto estrogēna receptora beta ekspresijas samazināšanos pie 125 un 250 ppm, kas ir rezultāts, kas ir pretrunā ar paša raksta virsrakstu un kas jāuzskata par neatrisinātu jautājumu. [11] Abos pētījumos tika izmantots labi raksturotais interferona-gamma polarizācijas protokols HMC3 šūnās, lai izpētītu potenciālo fitoestrogēno neiroprotekciju pēcmenopauzes neiroiekaisumā.

Biomateriālu un audu inženierijas jomā Venkateswarlu un kolēģi izmantoja dzīvas HMC3 šūnas, kas kultivētas uz elektrospunētiem skeleta materiāliem, lai izstrādātu reāllaika volumetriskās attēlveidošanas darba plūsmu citosoliskā kalcija svārstību novērošanai, izmantojot lāzera skenējošo konfokālo mikroskopiju. [18] Šis darbs paplašināja HMC3 šūnu pielietojumu ārpus klasiskās farmakoloģijas, iekļaujot to nākamās paaudzes biomateriālu testēšanā, tādējādi ilustrējot šīs šūnu līnijas daudzpusību dažādos tehnoloģiskos kontekstos neirozinātņu pētījumos.

Secinājums

HMC3 šūnas — cilvēka mikroglijas klons Nr. 3 — ir kļuvušas par pamata in vitro modeli neiroiekaisuma slimībām, Alcheimera slimībai, neirodeģeneratīvām slimībām, centrālās nervu sistēmas viroloģijai, glioblastomas audzēja mikrovides pētījumiem un neiroprotektīvo līdzekļu atklāšanai. Šī šūnu līnija, kas iegūta no cilvēka augļa smadzeņu audiem un imortalizēta ar SV40 transfekciju, ekspresē galvenos mikroglijas marķierus un reaģē uz noteiktu iekaisuma, farmakoloģisko un infekcijas stimulu spektru. Pētījumi, piemēram, Baek un kolēģu veiktais darbs ar BET inhibitoriem, ir pierādījuši šīs šūnu līnijas potenciālu identificēt zāļu mērķus cilvēka mikroglijas neiroiekaisumā. Sākot no reaktīvo skābekļa savienojumu un NLRP3 inflammasoma signālceļu fundamentāliem mehānismu pētījumiem līdz augu izcelsmes neiroprotektīvo vielu lietišķajai skrīninga analīzei un uz skeleta balstītu biomateriālu testēšanai, HMC3 šūnas piedāvā izcilu daudzpusību — ar nosacījumu, ka eksperimentu plānošanā tiek ņemti vērā to dokumentētie ierobežojumi attiecībā uz TNF-alfa, slāpekļa oksīda un NOX2 bioloģiju. Pētniekiem, kuri meklē validētu, mērogojamu un pilnībā cilvēka mikroglijas modeli, HMC3 šūnas būs vērtīgs resurss, lai padziļinātu izpratni par smadzeņu imunitāti un slimībām. Lai pasūtītu HMC3 šūnas vai pieprasītu papildu informāciju par produkta specifikācijām, apmeklējiet cytion.com.

Galvenās publikācijas

1. Janabi N, Peudenier S, Héron B (1995) Cilvēka mikroglijas šūnu līniju izveide pēc embrionālo mikroglijas šūnu primāro kultūru transfekcijas ar SV40 lielā T antigēna palīdzību. „Neuroscience letters“. PMID: 7478261
2. Li B, Bedard K, Sorce S (2009) NOX4 ekspresija cilvēka mikroglijā izraisa reaktīvo skābekļa savienojumu pastāvīgu veidošanos un IL-6 pastāvīgu ekspresiju. Journal of innate immunity. PMID: 20375612
3. Dello Russo C, Cappoli N, Coletta I (2018) Cilvēka mikroglijas HMC3 šūnu līnija: kāda ir pašreizējā situācija? Sistematisks literatūras pārskats. Journal of neuroinflammation. PMID: 30200996
4. Cappoli N, Mezzogori D, Tabolacci E (2019) mTOR kināzes inhibitors rapamicīns pastiprina proinflamatoriskā citokīna interleikīna 6 ekspresiju un atbrīvošanu, modulējot cilvēka mikrogliālo šūnu aktivāciju. EXCLI žurnāls. PMID: 31645839
5. Li H, Zhang X, Chen M (2018) Dekmedetomidīns inhibē iekaisumu mikroglijas šūnās LPS un ATP stimulācijas ietekmē, iedarbojoties uz c-Fos/NLRP3/kaspāzes-1 kaskādēm. EXCLI žurnāls. PMID: 29743866
6. Baek M, Yoo E, Choi HI (2021) BET inhibitors vājinā iekaisuma reakciju un šūnu migrāciju cilvēka mikroglijas HMC3 šūnu līnijā. „Scientific Reports”. PMID: 33893325
7. Nasi M, De Gaetano A, Bianchini E (2020) Ar mitohondriālo bojājumu saistītie molekulārie modeļi stimulē reaktīvo skābekļa savienojumu veidošanos cilvēka mikrogliā. „Molecular and cellular neurosciences”. PMID: 32828963
8. Lindberg C, Hjorth E, Post C (2005) Citokīnu ražošana cilvēka mikrogliālajā šūnu līnijā: beta-amiloīda un alfa-melanocītu stimulējošā hormona ietekme. Neurotoxicity Research. PMID: 16371321
9. González-Prieto M, Gutiérrez IL, García-Bueno B (2021) Mikroglijas CX3CR1 ražošana palielinās Alcheimera slimības gadījumā, un to regulē noradrenalīns. Glia. PMID: 32662924
10. Ma'arif B, Mirza DM, Hasanah M (2020) Marsilea crenata Presl. n-butanola frakcijas pretneiroiekaisuma aktivitāte mikroglijas HMC3 šūnu līnijā. Pamata un klīniskās fizioloģijas un farmakoloģijas žurnāls. PMID: 31967965
11. Ma'arif B, Agil M, Laswati H (2020) Arg1 un aktivētā ERβ ekspresijas pastiprināšanās mikroglijas HMC3 šūnās, inducējot Marsilea crenata Presl. lapu 96 % etanola ekstraktu. Pamat- un klīniskās fizioloģijas un farmakoloģijas žurnāls. PMID: 31981453
12. Martinez Viedma MDP, Pickett BE (2018) Zikas vīrusa infekcijas dažādo ietekmju raksturošana placentā un mikrogliālajās šūnās. Vīrusi. PMID: 30453684
13. Zhang X, Guo Y, Xu X (2019) miR-146a veicina Borna slimības vīrusa 1 replikāciju caur IRAK1/TRAF6/NF-κB signālceļu. Vīrusu pētījumi. PMID: 31330207
14. Angel-Ambrocio AH, Bautista-Carbajal P, García-León ML (2020) Mikroglijas HMC3 šūnas ir ļoti uzņēmīgas pret rinovīrusa infekciju. Virus research. PMID: 32768491
15. Sharma A, Vasanthapuram R, M Venkataswamy M (2020) Prohibitīns 1/2 veicina Dengue-3 iekļūšanu cilvēka neiroblastomas (SH-SY5Y) un mikroglijas (CHME-3) šūnās. Biomedicīnas zinātņu žurnāls. PMID: 32306962
16. Li Z, Zhang J, Zheng H (2019) Palbociclib izraisītā lncRNA SNHG15/CDK6/miR-627 signālceļa modulācija pārvar temozolomīda rezistenci un samazina ar gliomu saistīto mikroglijas šūnu M2 polarizāciju daudzveidīgajā glioblastomā. Eksperimentālo un klīnisko vēža pētījumu žurnāls: CR. PMID: 31462285
17. Martínez Leo EE, Segura Campos MR (2020) Salvia hispanica peptīdu frakciju neiroprotektīvā iedarbība uz HMC3 mikroglijas šūnu proinflamatorisko modulāciju. Pārtikas bioķīmijas žurnāls. PMID: 32207175
18. Venkateswarlu K, Suman G, Dhyani V (2020) Trīsdimensiju attēlveidošana un reāllaika citosolālo kalcija svārstību kvantificēšana mikroglijas šūnās, kas kultivētas uz elektrospun matričām, izmantojot lāzera skenējošo konfokālo mikroskopiju. Biotehnoloģija un bioinženierija. PMID: 32557561
19. Qadri SW, Kumar N, Santhoshkumar R (2022) Cilvēka mikroglijas šūnu līnijas CHME-3 inficēšana, lai pētītu Čikungunjas vīrusa neiropatogēnēzi. Journal of neurovirology. PMID: 35352315