Uvod

Celice HMC3, znana tudi kot klon človeške mikroglije 3, CHME-3 ali CHME3, predstavlja eno izmed najpogosteje uporabljanih linij človeških mikroglialnih celic v nevroznanstvenih raziskavah. Linijo so leta 1995 vzpostavili Janabi, Peudenier, Héron in sodelavci z imortalizacijo makrofagov, pridobljenih iz človeškega embrionalnega možgana, ki je bila odvisna od velikega T-antigena virusa SV40. [1] Celice HMC3 ohranjajo ključne značilnosti mikroglije, vključno s konstantno ekspresijo adapterne molekule Iba-1, ki veže ionizirani kalcij, ter z interferonom gama inducirano ekspresijo antigenov MHC razreda II. [2] [3] Mikroglija, kot rezidentne celice prirojenega imunskega sistema centralnega živčnega sistema, igra ključno vlogo pri nevrovnetnih boleznih, Alzheimerjevi bolezni in drugih nevrodegenerativnih boleznih. Celice HMC3 zato služijo kot prilagodljiva človeška in vitro platforma za preučevanje aktivacije mikroglije, nevrozaščitnih sredstev, virusnih nevroinfekcij in tumorskega mikrookolja glioblastoma.

Ključne ugotovitve

• Celice HMC3 so imortalizirane človeške fetalne mikroglie iz možganov, pridobljene s transfekcijo velikega T-antigena virusa SV40.
• Celična linija konstantno izraža Iba-1, pri stimulaciji z interferonom gama pa poveča izražanje MHC razreda II; poročila o izražanju CD14, CD11b in CD68 se med laboratoriji razlikujejo, zato jih je treba preveriti za vsako posamezno serijo.
• Celice HMC3 so pogosto uporabljen in vitro model za preučevanje nevrovnetnih bolezni, Alzheimerjeve bolezni in nevrodegenerativnih bolezni.
• Ta linija je dovzetna za okužbo z več nevrotropnimi virusi, vključno z virusom Zika, virusom bolezni Borna 1, virusom chikungunya in rinovirusom.
• Celice HMC3 stalno izražajo NOX4 in proizvajajo reaktivne oblike kisika, zaradi česar so pomembne za raziskave oksidativnega stresa.
• Ta linija se je uporabljala v raziskavah mikrookolja glioblastomskih tumorjev, farmakologiji zdravil ter raziskavah biomaterialnih nosilcev.
• Interleukin-1 beta – samostojno ali v kombinaciji z interferonom-gama – je najučinkovitejši vnetni stimulans v tej liniji; odzivi na LPS so razmeroma skromni, TNF-alfa in dušikov oksid pa sta v glavnem odsotna.

Kaj je HMC3?

HMC3 (Cellosaurus, dostopna številka CVCL_II76) je transformirana človeška linija mikroglialnih celic, pridobljena iz plodovega možganov zarodka v 8.–10. tednu nosečnosti. Spol darovalca ni naveden. Darovalec ni imel nobene bolezni. Linijo so leta 1995 vzpostavili Janabi in sodelavci s transfekcijo primarnih kultur embrionalnih možganskih makrofagov s plazmidom, ki kodira velik T-antigen SV40, kar je privedlo do štirih neprekinjenih linij mikroglialnih celic, od katerih se je klon 3 najbolj uveljavil. [1] Transformirane celice so ohranile makrofagne lastnosti, kot sta adhezija in nespecifična esterasna aktivnost, ter so bile sposobne fagocitirati delce zimosana, čeprav je fagocitna aktivnost ostala nizka. Celice so spontano proizvajale interleukin-6, pri čemer se je proizvodnja po stimulaciji z interleukinom-1 alfa še dodatno povečala. [1] V obsežnem sistematičnem pregledu literature iz leta 2018, ki so ga opravili Dello Russo in sodelavci, so zbrali razpoložljive podatke o značilnostih tega klona in pojasnili pomembno točko, ki je povzročala zmedo: ista celična linija je bila znana pod imeni CHME3, C13-NJ in CHME-5. [3] V pregledu so ugotovili, da imajo celice, ne glede na uporabljeno poimenovanje, podoben antigenski in funkcionalni profil ter jih je treba obravnavati kot en eksperimentalni model – hkrati pa so opozorili, da je bilo ugotovljeno, da je več alikvotov CHME-5, ki so v obtoku, navzkrižno onesnaženih s celicami glioma podgan. Zaloga HMC3 (ATCC CRL-3304), ki jo je potrdila ATCC, je brez te nejasnosti.

Podatki o celični kulturi HMC3

Celice HMC3 so odporne glede na izbiro bazalnega gojišča: uspešno so se gojile v gojiščih EMEM, MEM in DMEM:Ham's F12, ki so bila vsa obogatena z 10 % seruma. [3] Vendar ta izbira ni fenotipsko nevtralna. Dello Russo in sodelavci so poročali, da je bila bazalna produkcija reaktivnih kisikovih spojin v celicah, gojenih v MEM ali DMEM:F12, znatno nižja kot v EMEM, kar kaže na manj aktiviran mirovni fenotip. [3] Raziskovalci, ki primerjajo podatke med različnimi laboratoriji, bi zato morali poleg številke pasáže zabeležiti tudi uporabljeno gojišče.

Prednosti celic HMC3

Celice HMC3 predstavljajo edinstveno dostopen model človeških mikroglijskih celic v času, ko je primarne človeške mikroglije težko pridobiti v zadostnih količinah za raziskave v velikem obsegu. Linija se razmnožuje adhezivno in je enostavna za vzdrževanje. Ključnega pomena je, da celice konstitutivno izražajo Iba-1, v odzivu na interferon-gama povečajo izražanje MHC razreda II ter – v zalogi, ki jo je potrdila ATCC – transkribirajo nedavno opredeljene značilne gene mikroglije CX3CR1, CSF1R, P2RY12 in TMEM119, s čimer zagotavljajo biološko potrjen nadomestek za primarne človeške mikroglije. [2] [3] Zaradi teh lastnosti so celice HMC3 široko uporabljena platforma za mehanistične študije nevrovnetnih bolezni, ki zahtevajo ponovljiv, prilagodljiv in popolnoma človeški celični material.

Dodatna prednost celic HMC3 je njihova odzivnost na določen nabor vnetnih dražljajev. Najučinkovitejši induktor interleukina-6 je interleukin-1 beta, ki poveča bazalno sproščanje do petdesetkrat in deluje sinergistično z interferonom-gama; LPS in amiloidni beta-peptidi povzročajo skromnejša, od koncentracije odvisna povečanja. [3] Ta stopnjevan in ponovljiv profil odziva omogoča izvajanje poskusov, odvisnih od koncentracije in časovnega poteka, kar je v pripravkih iz primarnih celic težko doseči. Njihova odzivnost na pro-vnetne in protivnetne dražljaje — vključno s farmakološkimi sredstvi, kot sta rapamicin in deksmedetomidin — še dodatno razširja njihovo uporabnost v farmakologiji zdravil in pri presejanju nevrozaščitnih sredstev. [4] [5] Celice so občutljive tudi na številne nevrotropne viruse, kar razširja njihovo uporabo na področje raziskav nevroinfektiologije.

Omejitve celic HMC3

Kot transformirana celična linija celice HMC3 nosijo velik T-antigen SV40, ki jim zagotavlja nesmrtnost, hkrati pa spreminja nekatere vidike celične biologije v primerjavi s primarnimi mikroglijskimi celicami. Li in sodelavci so poročali o nepričakovanih vzorcih izražanja izoform NOX – obilni NOX4, a skoraj nobene NOX2 mRNA –, kar je v nasprotju s primarnimi mikrogliami in omejuje uporabnost te linije kot modela za NOX2-posredovani respiratorni izbruh. [2] [3] Raziskovalci bi zato morali preveriti, ali je konkretna preučevana pot v tej liniji zvesto ponazorjena, preden izpeljejo splošne zaključke o delovanju.

Pozornost si zaslužijo še tri omejitve. Prvič, nabor vnetnih posrednikov je nepopoln: celice HMC3 izločajo le zanemarljive količine protivnetnega citokina IL-10 (v obsegu nekaj pg/ml), spontano ali po provnetni aktivaciji proizvajajo malo ali nič TNF-alfa ter kažejo konstantno povišano raven IL-6, ki jo povzročajo NOX4-odvisne reaktivne kisikove spojine. [2] [3] Drugič, v izrazitem nasprotju z mikroglijo glodalcev, mirujoče celice HMC3 ne izražajo iNOS-a, po stimulaciji z LPS-om, LPS-om v kombinaciji z interferonom-gama, IL-1 beta ali TNF-alfa pa ni bila opazena niti indukcija iNOS-a niti merljivo kopičenje nitritov. [3] Študije, ki se osredotočajo na os dušikovega oksida, zato niso ustrezno zajete v tem modelu.

Tretjič, linija je bila vzpostavljena iz plodovnega možganskega tkiva, kar pomeni, da se njen transkripcijski in funkcionalni profil lahko razlikuje od stanj mikroglije pri odraslih, ki so povezana z nevrodegenerativnimi boleznimi v poznejšem življenju. Raziskovalci, ki modelirajo Alzheimerjevo ali Parkinsonovo bolezen pri odraslih, bi morali podatke, pridobljene iz linije HMC3, po možnosti interpretirati skupaj z dopolnilnimi mikroglijskimi sistemi, pridobljenimi iz primarnih celic odraslih ali iz iPSC. Nazadnje, poročila o profilu površinskih markerjev niso popolnoma skladna: medtem ko so Li in sodelavci opisali konstitutivni Iba-1 in CD14 skupaj z interferonom gama inducibilnim CD11b, CD68 in MHC razreda II, [2] tako prvotna opredelitev, ki so jo podali Janabi in sodelavci, kot tudi [1] podatki pretočne citometrije, ki so jih objavili Dello Russo in sodelavci za linijo ATCC CRL-3304, so pokazali, da so celice v mirovanju negativne za CD14 in CD11b, pri čemer interferon-gama ni povzročil izražanja nobenega od teh markerjev. [3] Na te rezultate vplivajo klon protitelesa, gojišče in število pasaz, genetski drift pri serijskih pasazah pa je na splošno dokumentiran za neprekinjene linije; izražanje markerja je treba potrditi v lastnem laboratoriju, namesto da se zgolj predpostavlja.

Oglejte si celotne tehnične podatke in oddajte naročilo

Uporaba celic HMC3

Nevrovnetje in aktivacija mikroglije

Raziskovanje nevrovnetnih bolezni predstavlja najbolj razvito področje uporabe celic HMC3. Li in sodelavci so dokazali, da celice HMC3 konstitutivno izražajo NOX4, ki spodbuja neprekinjeno nastajanje reaktivnih kisikovih spojin in trajno izražanje IL-6 – to odkritje je te celice uvrstilo med modele za kronično, blago nevrovnetje. [2] Ta konstantna vnetna aktivnost odraža vidike pripravljenosti mikroglije, ki jih opazimo pri nevrodegenerativnih stanjih, in zagotavlja ustrezno izhodišče za intervencijske študije.

Vplivna študija, ki so jo opravili Baek in sodelavci, je z uporabo sekvenciranja RNA preučevala inhibicijo bromodomene BET v celicah HMC3. [6] Avtorji so pokazali, da je zaviralec BET JQ1 oslabil vnetni in migracijski odziv celic HMC3, aktiviranih z LPS, ter identificirali mehanizem: LPS inducira transkripcijski faktor IRF1, ki neposredno regulira gene za kemokine, citokine, gene, stimulirane z interferonom, in gene, povezane z migracijo, JQ1 pa znatno zmanjša izražanje IRF1 skupaj z njegovimi ciljnimi geni. Zmanjšanje izražanja IRF1 je ponovilo ta učinek in zavrlo migracijo mikroglije. [6] Ta raziskava je os BET–IRF1 opredelila kot cilj za zdravljenje z zdravili pri nevrovnetju človeških mikrogličnih celic ter dokazala primernost celic HMC3 za študije farmakoloških posegov na mehanistični ravni.

V tej liniji so preučili tudi molekularne vzorce, povezane s poškodbo mitohondrijev. Nasi in sodelavci so ugotovili, da je stimulacija z mitohondrijsko DNK in kardiolipinom povečala celični oksidativni stres v celicah HMC3, pri čemer pa ni sprožila klasičnega pro-vnetnega odziva: ekspresija HLA-DR se ni povečala, prav tako pa se ni povečalo izločanje niti TNF-alfa niti IL-6. [7] Avtorji so to razlagali kot možen endogeni regulativni mehanizem, ki omejuje aktivacijo mikrogleje. Ločeno so Cappoli in sodelavci pokazali, da je zaviralec mTOR rapamicin paradoksalno okrepil izražanje in sproščanje IL-6 v celicah HMC3, aktiviranih s koktajlom interferona-gama/IL-1 beta, hkrati pa zmanjšal nastajanje reaktivnih kisikovih spojin – s čimer so postavili pod vprašaj predpostavke o protivnetnih učinkih rapamicina v imunskih celicah, ki se nahajajo v človeških možganih. [4] Te študije skupaj kažejo, da so celice HMC3 občutljiv sistem, relevanten za človeka, za raziskovanje molekularnih poti, na katerih temeljijo nevrovnetne bolezni.

Modeliranje Alzheimerjeve bolezni in nevrodegenerativnih bolezni

Celice HMC3 so postale pomembno orodje za modeliranje vloge mikroglije pri Alzheimerjevi bolezni. Zgodnja karakterizacijska študija, ki so jo izvedli Lindberg in sodelavci na tem klonu pod imenom CHME3, je ugotovila, da je sveže raztopljeni amiloid beta (1–40) povzročil odmerno odvisno povečanje sproščanja IL-6 skupaj z odmerno odvisno izgubo vitalnosti. [8] Alfa-melanocit-stimulirajoči hormon ni spremenil odziva na IL-6, ki ga je povzročil amiloid beta, je pa odmerno odvisno povečal bazalno sproščanje IL-6, kar je učinek, pripisan podtipom melanokortinskega receptorja MCR3 ali MCR5. [8] Ta raziskava je potrdila, da so celice HMC3 primerna platforma za preučevanje odnosa med amiloidnimi beta-peptidi in vnetnimi odzivi mikroglije, ki so ključni za patogenezo Alzheimerjeve bolezni.

González-Prieto in sodelavci so pri Alzheimerjevi bolezni preučevali CX3CR1 – edini receptor za nevronski kemokin CX3CL1. [9] Proizvodnja CX3CR1 je bila povečana v korteksu miši 5xFAD in v vzorcih človeških možganov z Alzheimerjevo boleznijo, dajanje reboxetina, zaviralca ponovnega privzema noradrenalina, pa jo je in vivo še dodatno povečalo. Nasprotno pa je neposredna aplikacija noradrenalina na celice HMC3 in na primarne mikrogleje podgan zavirala proizvodnjo CX3CR1. [9] Avtorji so ugotovili, da so odzivi mikroglije na noradrenalin lahko spremenjeni v odsotnosti nevronov, ki proizvajajo CX3CL1, ali drugih dejavnikov, ki niso povezani z mikroglijo – to je poučen primer, kako lahko celice HMC3 izolirajo celično avtonomen odziv in s tem razkrijejo vpliv širšega tkivnega konteksta.

V študiji o deksmedetomidinu, ki so jo izvedli Li in sodelavci, so kot model nevrovnetja, pogojenega z inflammasomom NLRP3 in pomembnega za Alzheimerjevo bolezen, uporabili celice HMC3, stimulirane z LPS in ATP. [5] Deksmedetomidin je zaviral sproščanje IL-1β in IL-18 prek kaskade c-Fos/NLRP3/kaspaza-1, s čimer je bil identificiran mehanistično nov protivnetni osi v človeški mikrogliji. Celice HMC3 so služile tudi kot model za preučevanje polarizacije mikroglije v odzivu na rastlinske izvlečke, ki vsebujejo fitoestrogene, s čimer se je njihova uporabnost pri odkrivanju zdravil za nevrodegenerativne bolezni še dodatno razširila. [10] [11]

Virologija in okužbe centralnega živčnega sistema

Celice HMC3 so se izkazale za zelo vsestranske pri preučevanju virusnih nevroinfekcij, glede na njihov človeški izvor in vlogo kot model za prvo obrambno linijo mikroglije v centralnem živčnem sistemu. Martinez Viedma in Pickett sta primerjala odziv gostitelja mikroglijskih celic HMC3 in placentnih celic JEG-3 na okužbo z virusom Zika z uporabo niza 84 genov prirojenega in pridobljenega imunskega sistema, katerih profil sta določila 24 in 72 ur po okužbi. [12] Oba tipa celic sta pokazala različne sklope diferencialno izraženih genov, analiza signalnih poti pa je pokazala, da je bila signalizacija TLR7/8 v mikroglialnih celicah zavrta, medtem ko je bila v placentnih celicah aktivirana – to razliko so naknadno preučili s poskusi s siRNA. Študija je potrdila, da so celice HMC3 primerna platforma za transkriptomiko gostitelj–patogen v virologiji centralnega živčnega sistema.

Zhang in sodelavci so z uporabo celic HMC3, okuženih z BoDV-1, pokazali, da miR-146a olajšuje virusno replikacijo z zaviranjem osi signalizacije prirojenega imunskega odziva IRAK1/TRAF6/NF-κB. [13] Ta ugotovitev je omogočila vpogled v mehanizem, kako se visoko nevrotropni RNA-virus izogiba protivirusnim odzivom mikroglije. V ločenem modelu okužbe so Angel-Ambrocio in sodelavci prvič dokazali, da človeški rinovirus v celoti zaključi svoj virusni cikel v celicah HMC3, s čimer so mikroglio opredelili kot potencialni celični rezervoar za zaplete v centralnem živčnem sistemu, povezane z rinovirusom. [14] Ta linija omogoča tudi replikacijo virusa chikungunya brez znatne izgube vitalnosti do 72 ur po okužbi. [19]

Sharma in sodelavci so z uporabo testov vezave beljakovin z virusnim prekrivanjem, proteomike LC-MS/MS, siRNA-knockdown in koimunoprecipitacije identificirali prohibitin 1/2 kot domnevni receptor za vstop virusa dengue serotipa 3 v mikroglijske celice CHME-3 – sinonim za HMC3. [15] Zanimivo je, da je bila ista odvisnost ugotovljena v nevronskih celicah SH-SY5Y, ne pa v astroglialnih celicah U-87 MG, kar kaže, da je pot vstopa specifična za posamezen tip celic. Vse te virološke študije skupaj poudarjajo, da so celice HMC3 široko uporaben model človeških mikroglialnih celic za preučevanje patogeneze in strategij izogibanja imunskemu odzivu nevrotropnih virusov.

Mikrookolje glioblastomskega tumorja

Celice HMC3 so bile uporabljene kot model mikroglije, povezane z gliomom, za preučevanje, kako tumorne celice glioblastoma izkoriščajo vnetni fenotip mikroglije. Li in sodelavci so pokazali, da je skupno gojenje celic glioblastoma, odpornih na temozolomid, s celicami HMC3 spodbudilo polarizacijo celic HMC3 v tip M2 in povečalo izločanje protumorigenih citokinov TGF-β in IL-6. [16] Ta polarizacija je bila povezana s krožnim sistemom lncRNA SNHG15/miR-627-5p/CDK6, inhibitor CDK4/6 palbociclib pa je zmanjšal markerje M2 in hkrati premagal odpornost na temozolomid v modelih ksenotransplantatov, pridobljenih iz bolnikov.

Ti izsledki uvrščajo celice HMC3 med pomembne človeške modele za preučevanje prispevka mikroglije k imunosupresivnemu mikrookolju glioblastomskega tumorja. Zmožnost modeliranja medsebojnega vpliva mikroglije in glioblastoma in vitro z uporabo celic HMC3 zagotavlja praktičen sistem za identifikacijo terapevtskih ciljev, ki hkrati obravnavajo odpornost tumorskih celic in izogibanje imunskemu odzivu. [16]

Nevroprotektivna sredstva in farmakologija zdravil

Celice HMC3 so se obsežno uporabljale za presejanje nevroprotektivnih sredstev in opredeljevanje njihovih mehanizmov delovanja v človeški mikrogliji. Martínez Leo in Segura Campos sta ocenila nevroprotektivno aktivnost peptidnih frakcij iz semen Salvia hispanica v celicah HMC3 in ugotovila, da je frakcija 1–3 kDa zmanjšala nastajanje reaktivnih kisikovih spojin za 51,3 % ter zmanjšala sproščanje dušikovega oksida, TNF-alfa in IL-6, s skupnim zaščitnim učinkom 79,0 %. [17] Ta vrsta študije ponazarja, kako celice HMC3 omogočajo hiter, za človeka relevanten presejalni pregled bioaktivnih spojin iz hrane.

Ma'arif in sodelavci so izvedli dve sorodni študiji z uporabo celic HMC3 za oceno fitoestrogenov rastlinskega izvora iz listov Marsilea crenata. Frakcija n-butanola je zmanjšala izražanje MHC razreda II v celicah, aktiviranih z interferonom gama, kar je skladno z zaviranjem klasične aktivacije M1, čeprav poročana odvisnost od odmerka ni bila monotona. [10] 96-odstotni etanolni ekstrakt je povečal izražanje M2-markerja arginaze-1; ista študija je poročala o zmanjšanju izražanja aktiviranega estrogenskega receptorja beta pri 125 in 250 ppm, kar je v nasprotju z naslovom članka in bi ga bilo treba obravnavati kot nerešeno vprašanje. [11] Obe študiji sta izkoristili dobro opredeljen protokol polarizacije z interferonom gama v celicah HMC3 za preučevanje potencialne fitoestrogene nevrozaščite pri nevrovnetju po menopavzi.

Na področju biomaterialov in tkivnega inženirstva so Venkateswarlu in sodelavci uporabili žive celice HMC3, gojene na elektrospunih ogrodnih matricah, za razvoj delovnega toka volumetričnega slikanja v realnem času za oscilacije citozolnega kalcija z uporabo konfokalne mikroskopije z laserskim skeniranjem. [18] To delo je razširilo uporabo celic HMC3 preko meja klasične farmakologije na testiranje biomaterialov naslednje generacije, s čimer je ponazorilo vsestranskost te linije v različnih tehnoloških kontekstih v nevroznanstvenih raziskavah.

Zaključek

Celice HMC3 – klon 3 človeških mikrogličnih celic – so se uveljavile kot temeljni in vitro model za nevrovnetne bolezni, Alzheimerjevo bolezen, nevrodegenerativne bolezni, virologijo centralnega živčnega sistema, raziskave mikrookolja glioblastomskih tumorjev in odkrivanje nevrozaščitnih sredstev. Linija, ki izhaja iz človeškega fetalnega možganskega tkiva in je bila imortalizirana s transfekcijo SV40, izraža ključne mikroglijske markerje in se odziva na določen spekter vnetnih, farmakoloških in infekcijskih dražljajev. Študije, kot je raziskava o delovanju zaviralcev BET, ki so jo opravili Baek in sodelavci, so pokazale zmožnost te linije pri identificiranju ciljnih molekul za zdravila pri nevrovnetju človeških mikroglijskih celic. Od temeljnih mehanističnih študij reaktivnih kisikovih spojin in signalizacije inflammasoma NLRP3 do aplikativnega presejanja nevroprotektivnih sredstev rastlinskega izvora ter testiranja biomaterialov na osnovi ogrodij – celice HMC3 ponujajo izjemno vsestranskost, pod pogojem, da se pri načrtovanju poskusov upoštevajo njihove dokumentirane omejitve glede biologije TNF-alfa, dušikovega oksida in NOX2. Raziskovalci, ki iščejo validiran, prilagodljiv in popolnoma človeški model mikroglije, bodo v celicah HMC3 našli dragocen vir za poglobljeno razumevanje imunosti možganov in bolezni. Če želite naročiti celice HMC3 ali zaprositi za dodatne informacije o specifikacijah izdelka, obiščite spletno stran cytion.com.

Ključne publikacije

1. Janabi N, Peudenier S, Héron B (1995) Vzpostavitev človeških mikroglialnih celičnih linij po transfekciji primarnih kultur embrionalnih mikroglialnih celic z velikim T-antigenom SV40. Neuroscience letters. PMID: 7478261
2. Li B, Bedard K, Sorce S (2009) Ekspresija NOX4 v človeški mikrogliji vodi do konstitutivnega nastajanja reaktivnih kisikovih spojin in do konstitutivne ekspresije IL-6. Journal of innate immunity. PMID: 20375612
3. Dello Russo C, Cappoli N, Coletta I (2018) Človeška mikroglialna celična linija HMC3: kje smo danes? Sistematični pregled literature. Journal of neuroinflammation. PMID: 30200996
4. Cappoli N, Mezzogori D, Tabolacci E (2019) Inhibitor kinaze mTOR, rapamicin, poveča izražanje in sproščanje provnetnega citokina interleukina 6, s čimer modulira aktivacijo človeških mikroglijskih celic. EXCLI journal. PMID: 31645839
5. Li H, Zhang X, Chen M (2018) Deksmedetomidin zavira vnetje v mikroglialnih celicah ob stimulaciji z LPS in ATP prek kaskad c-Fos/NLRP3/kaspaza-1. Revija EXCLI. PMID: 29743866
6. Baek M, Yoo E, Choi HI (2021) Inhibitor BET zmanjšuje vnetni odziv in migracijo celic v človeški mikroglijski celični liniji HMC3. Scientific reports. PMID: 33893325
7. Nasi M, De Gaetano A, Bianchini E (2020) Molekularni vzorci, povezani s poškodbo mitohondrijev, spodbujajo nastajanje reaktivnih kisikovih spojin v človeških mikroglijskih celicah. Molecular and cellular neurosciences. PMID: 32828963
8. Lindberg C, Hjorth E, Post C (2005) Proizvodnja citokinov v človeški liniji mikroglialnih celic: učinki beta-amiloida in alfa-melanocit-stimulirajočega hormona. Raziskave nevrotoksičnosti. PMID: 16371321
9. González-Prieto M, Gutiérrez IL, García-Bueno B (2021) Proizvodnja CX3CR1 v mikrogliji se pri Alzheimerjevi bolezni poveča in jo regulira noradrenalin. Glia. PMID: 32662924
10. Ma'arif B, Mirza DM, Hasanah M (2020) Protivnetno delovanje n-butanolne frakcije Marsilea crenata Presl. v celični liniji mikroglije HMC3. Revija za osnovno in klinično fiziologijo ter farmakologijo. PMID: 31967965
11. Ma'arif B, Agil M, Laswati H (2020) Povečanje izražanja Arg1 in aktiviranega ERβ v mikroglijskih celicah HMC3 z indukcijo 96-odstotnega etanolnega ekstrakta listov Marsilea crenata Presl. Revija za osnovno in klinično fiziologijo ter farmakologijo. PMID: 31981453
12. Martinez Viedma MDP, Pickett BE (2018) Opis različnih učinkov okužbe z virusom Zika v celicah placente in mikroglije. Viruses. PMID: 30453684
13. Zhang X, Guo Y, Xu X (2019) miR-146a spodbuja replikacijo virusa Borna 1 prek signalne poti IRAK1/TRAF6/NF-κB. Virus research. PMID: 31330207
14. Angel-Ambrocio AH, Bautista-Carbajal P, García-León ML (2020) Mikroglijske celice HMC3 so zelo dovzetne za okužbo z rinovirusom. Virus research. PMID: 32768491
15. Sharma A, Vasanthapuram R, M Venkataswamy M (2020) Prohibitin 1/2 posreduje vstop virusa dengue-3 v človeške nevroblastomske (SH-SY5Y) in mikroglialne (CHME-3) celice. Journal of biomedical science. PMID: 32306962
16. Li Z, Zhang J, Zheng H (2019) Modulacija vezja lncRNA SNHG15/CDK6/miR-627 s palbociclibom premaga odpornost na temozolomid in zmanjša M2-polarizacijo mikroglie, povezane z gliomom, pri glioblastomu multiforme. Revija za eksperimentalne in klinične raziskave raka: CR. PMID: 31462285
17. Martínez Leo EE, Segura Campos MR (2020) Nevroprotektivni učinek peptidnih frakcij Salvia hispanica na pro-vnetno modulacijo mikroglialnih celic HMC3. Journal of food biochemistry. PMID: 32207175
18. Venkateswarlu K, Suman G, Dhyani V (2020) Tridimenzionalno slikanje in kvantifikacija oscilacij citozolskega kalcija v realnem času v mikroglialnih celicah, gojenih na elektrospunih matricah, z uporabo laserske skenirne konfokalne mikroskopije. Biotehnologija in bioinženiring. PMID: 32557561
19. Qadri SW, Kumar N, Santhoshkumar R (2022) Okužba človeške linije mikroglialnih celic CHME-3 za preučevanje nevropatogeneze virusa chikungunya. Journal of neurovirology. PMID: 35352315