Introduzione

Cellule HMC3, nota anche come Human Microglia Clone 3, CHME-3 o CHME3, rappresenta una delle linee cellulari microgliali umane più utilizzate nella ricerca neuroscientifica. La linea è stata creata nel 1995 da Janabi, Peudenier, Héron e colleghi mediante immortalizzazione, dipendente dall’antigene T grande dell’SV40, di macrofagi derivati dal cervello embrionale umano. [1] Le cellule HMC3 conservano le caratteristiche fondamentali dei microgliociti, tra cui l’espressione costitutiva della molecola adattatrice Iba-1, che lega il calcio ionizzato, e l’espressione indotta dall’interferone gamma degli antigeni MHC di classe II. [2] [3] In quanto cellule immunitarie innate residenti del sistema nervoso centrale, le microglia sono mediatori fondamentali delle malattie neuroinfiammatorie, del morbo di Alzheimer e di altre malattie neurodegenerative. Le cellule HMC3 costituiscono quindi una piattaforma in vitro umana facilmente gestibile per lo studio dell’attivazione microgliale, degli agenti neuroprotettivi, delle neuroinfezioni virali e del microambiente tumorale del glioblastoma.

Punti chiave

• Le cellule HMC3 sono microglia del cervello fetale umano immortalizzate mediante trasfezione con l'antigene T grande del virus SV40.
• La linea cellulare esprime Iba-1 in modo costitutivo e aumenta l'espressione dell'MHC di classe II in seguito alla stimolazione con interferone gamma; i dati relativi all'espressione di CD14, CD11b e CD68 variano da un laboratorio all'altro e devono essere verificati per ogni singolo lotto.
• Le cellule HMC3 sono un modello in vitro ampiamente utilizzato per lo studio delle malattie neuroinfiammatorie, del morbo di Alzheimer e delle malattie neurodegenerative.
• Questa linea cellulare è sensibile all’infezione da diversi virus neurotropici, tra cui il virus Zika, il virus della malattia di Borna 1, il virus chikungunya e il rinovirus.
• Le cellule HMC3 esprimono in modo costitutivo il gene NOX4 e generano specie reattive dell'ossigeno, il che le rende rilevanti per la ricerca sullo stress ossidativo.
• Questa linea è stata utilizzata in studi sul microambiente tumorale del glioblastoma, nella farmacologia dei farmaci e nella ricerca sugli scaffold biomateriali.
• L'interleuchina-1 beta — da sola o in combinazione con l'interferone-gamma — è lo stimolo infiammatorio più efficace in questa linea; le risposte all'LPS sono relativamente modeste, mentre il TNF-alfa e l'ossido nitrico sono in gran parte assenti.

Che cos’è l’HMC3?

HMC3 (codice Cellosaurus CVCL_II76) è una linea cellulare microgliale umana trasformata, derivata dal cervello fetale di un embrione di 8–10 settimane di età gestazionale. Il sesso del donatore non è specificato. Al donatore non era associata alcuna patologia. La linea è stata ottenuta da Janabi e colleghi nel 1995 mediante trasfezione di colture primarie di macrofagi cerebrali embrionali con un plasmide che codifica l’antigene T grande dell’SV40, ottenendo quattro linee cellulari microgliali continue, di cui il clone 3 è diventato quello più ampiamente utilizzato. [1] Le cellule trasformate hanno conservato caratteristiche macrofagiche quali l'aderenza e l'attività esterasi non specifica, e si sono dimostrate in grado di fagocitare particelle di zimosano, sebbene l'attività fagocitaria sia rimasta bassa. L'interleuchina-6 è stata prodotta spontaneamente dalle cellule, con un ulteriore aumento della produzione in seguito alla stimolazione con interleuchina-1 alfa. [1] Una revisione sistematica della letteratura del 2018, condotta da Dello Russo e colleghi, ha raccolto i dati di caratterizzazione disponibili relativi a questo clone e ha chiarito un importante punto di confusione: la stessa linea cellulare è stata diffusa con i nomi CHME3, C13-NJ e CHME-5. [3] La revisione ha concluso che, indipendentemente dalla denominazione utilizzata, le cellule presentano un profilo antigenico e funzionale simile e dovrebbero essere considerate come un unico modello sperimentale — pur avvertendo che diverse aliquote di CHME-5 in circolazione sono risultate contaminate da cellule di glioma di ratto. La scorta di HMC3 autenticata dall’ATCC (ATCC CRL-3304) è esente da tale ambiguità.

Informazioni sulla coltura cellulare HMC3

Le cellule HMC3 sono resistenti per quanto riguarda la scelta del terreno di coltura basale: sono state coltivate con successo in EMEM, MEM e DMEM:Ham's F12, ciascuno integrato con il 10% di siero. [3] Tuttavia, questa scelta non è fenotipicamente neutra. Dello Russo e colleghi hanno riportato che la produzione basale di specie reattive dell'ossigeno era nettamente inferiore nelle cellule coltivate in MEM o DMEM:F12 rispetto a quelle coltivate in EMEM, indicando un fenotipo a riposo meno attivato. [3] I ricercatori che mettono a confronto i dati tra diversi laboratori dovrebbero quindi registrare il terreno di coltura utilizzato insieme al numero di passaggi.

Vantaggi delle cellule HMC3

Le cellule HMC3 rappresentano un modello microgliale umano particolarmente accessibile in un momento in cui è difficile ottenere microglia umana primaria in quantità sufficienti per la ricerca su larga scala. La linea cresce in coltura aderente ed è semplice da mantenere. È fondamentale sottolineare che le cellule esprimono Iba-1 in modo costitutivo, sovraregolano l’MHC di classe II in risposta all’interferone gamma e — nella linea autenticata dall’ATCC — trascrivono i geni caratteristici della microglia definiti più di recente, quali CX3CR1, CSF1R, P2RY12 e TMEM119, fornendo un surrogato biologicamente convalidato della microglia umana primaria. [2] [3] Queste caratteristiche rendono le cellule HMC3 una piattaforma ampiamente utilizzata per gli studi meccanicistici sulle malattie neuroinfiammatorie che richiedono materiale cellulare riproducibile, scalabile e interamente umano.

Un ulteriore punto di forza delle cellule HMC3 è la loro reattività a una serie definita di stimoli infiammatori. L’induttore più efficace dell’interleuchina-6 è l’interleuchina-1 beta, che aumenta il rilascio basale fino a cinquanta volte e agisce in modo sinergico con l’interferone-gamma; l’LPS e i peptidi beta-amiloidi provocano aumenti più modesti e dipendenti dalla concentrazione. [3] Questo profilo di risposta graduale e riproducibile consente di condurre esperimenti in funzione della concentrazione e dell’andamento temporale, difficili da realizzare con preparazioni di cellule primarie. La loro reattività sia agli stimoli pro-infiammatori che a quelli anti-infiammatori — compresi agenti farmacologici quali la rapamicina e la dexmedetomidina — ne amplia ulteriormente l’utilità nella farmacologia dei farmaci e nello screening di agenti neuroprotettivi. [4] [5] Le cellule sono inoltre sensibili a diversi virus neurotropici, il che ne amplia l'impiego alla ricerca nel campo della neuroinfettologia.

Limiti delle cellule HMC3

In quanto linea cellulare trasformata, le cellule HMC3 presentano l’antigene T grande dell’SV40, che conferisce immortalità ma altera anche alcuni aspetti della biologia cellulare rispetto alla microglia primaria. Li e colleghi hanno riportato modelli di espressione delle isoforme NOX inaspettati — abbondante NOX4 ma quasi nessun mRNA di NOX2 — che contrastano con quelli della microglia primaria e limitano l’utilità di questa linea come modello per il burst respiratorio mediato da NOX2. [2] [3] I ricercatori dovrebbero quindi verificare che la via specifica oggetto di studio sia fedelmente riprodotta in questa linea cellulare prima di trarre conclusioni meccanicistiche di ampio respiro.

Tre ulteriori limitazioni meritano attenzione. Innanzitutto, il repertorio dei mediatori infiammatori è incompleto: le cellule HMC3 secernono solo quantità minime della citochina antinfiammatoria IL-10 (nell’ordine di pochi pg/ml), producono poco o nessun TNF-alfa sia spontaneamente che in seguito ad attivazione proinfiammatoria e mostrano livelli costitutivamente elevati di IL-6 indotti dalle specie reattive dell’ossigeno NOX4-dipendenti. [2] [3] In secondo luogo, e in netto contrasto con la microglia dei roditori, le cellule HMC3 a riposo non esprimono iNOS, e non è stata osservata né l’induzione dell’iNOS né un accumulo misurabile di nitriti in seguito alla stimolazione con LPS, LPS più interferone-gamma, IL-1 beta o TNF-alfa. [3] Gli studi incentrati sull'asse dell'ossido nitrico non trovano quindi adeguata rappresentazione in questo modello.

In terzo luogo, la linea cellulare è stata ottenuta da tessuto cerebrale fetale, il che significa che il suo profilo trascrizionale e funzionale potrebbe differire dagli stati microgliali che insorgono in età adulta, rilevanti per le malattie neurodegenerative della terza età. I ricercatori che studiano modelli della malattia di Alzheimer o del morbo di Parkinson nell’adulto dovrebbero interpretare i dati derivati dall’HMC3 in combinazione con sistemi microgliali complementari, sia primari adulti che derivati da iPSC, ove possibile. Infine, i dati relativi al profilo dei marcatori di superficie non sono del tutto concordanti: mentre Li e colleghi hanno descritto Iba-1 e CD14 costitutivi insieme a CD11b, CD68 e MHC di classe II inducibili dall’interferone gamma, [2] sia la caratterizzazione originale di Janabi e colleghi [1] e i dati di citometria a flusso riportati da Dello Russo e colleghi per la linea cellulare ATCC CRL-3304 hanno evidenziato che le cellule a riposo erano negative per CD14 e CD11b, senza che nessuno dei due marcatori fosse indotto dall’interferone gamma. [3] Il clone anticorpale, il terreno di coltura e il numero di passaggi influenzano tutti questi risultati; in generale, è documentata la deriva genetica nei passaggi seriali delle linee continue; l'espressione del marcatore dovrebbe essere confermata internamente piuttosto che data per scontata.

Visualizza le specifiche complete ed effettua l'ordine

Applicazioni delle cellule HMC3

Neuroinfiammazione e attivazione microgliale

Lo studio delle malattie neuroinfiammatorie rappresenta l’applicazione più ampiamente sviluppata delle cellule HMC3. Li e colleghi hanno dimostrato che le cellule HMC3 esprimono in modo costitutivo NOX4, che determina la produzione continua di specie reattive dell’ossigeno e l’espressione sostenuta di IL-6 — una scoperta che ha posizionato queste cellule come modello per la neuroinfiammazione cronica di basso grado. [2] Questo tono infiammatorio costitutivo rispecchia alcuni aspetti della predisposizione microgliale osservati nelle condizioni neurodegenerative, fornendo una base di riferimento rilevante per gli studi di intervento.

Uno studio influente condotto da Baek e colleghi ha esaminato l’inibizione del bromodominio BET nelle cellule HMC3 utilizzando il sequenziamento dell’RNA. [6] Gli autori hanno dimostrato che l’inibitore BET JQ1 attenuava la risposta infiammatoria e migratoria delle cellule HMC3 attivate dall’LPS e ne hanno identificato il meccanismo: L’LPS induce il fattore di trascrizione IRF1, che regola direttamente i geni delle chemochine, delle citochine, quelli stimolati dall’interferone e quelli correlati alla migrazione, e JQ1 riduce marcatamente l’IRF1 insieme ai suoi geni bersaglio. Il knockdown di IRF1 ha riprodotto l’effetto e ha inibito la migrazione microgliale. [6] Questo lavoro ha identificato l’asse BET–IRF1 come bersaglio farmacologico nella neuroinfiammazione microgliale umana e ha dimostrato l’idoneità delle cellule HMC3 per studi di intervento farmacologico a livello meccanicistico.

In questa linea cellulare sono stati esaminati anche i pattern molecolari associati al danno mitocondriale. Nasi e colleghi hanno scoperto che la stimolazione con DNA mitocondriale e cardiolipina aumentava lo stress ossidativo cellulare nelle cellule HMC3, pur non riuscendo in modo evidente a innescare una classica risposta pro-infiammatoria: l’espressione di HLA-DR non era sovraregolata e non aumentava né la secrezione di TNF-alfa né quella di IL-6. [7] Gli autori hanno interpretato questo fenomeno come un possibile meccanismo regolatorio endogeno che limita l’attivazione microgliale. Separatamente, Cappoli e colleghi hanno dimostrato che l’inibitore mTOR rapamicina aumentava paradossalmente l’espressione e il rilascio di IL-6 nelle cellule HMC3 attivate con un cocktail di interferone-gamma/IL-1 beta, riducendo contemporaneamente la produzione di specie reattive dell’ossigeno — mettendo in discussione le ipotesi sulle azioni antinfiammatorie della rapamicina nelle cellule immunitarie residenti nel cervello umano. [4] Questi studi dimostrano collettivamente che le cellule HMC3 costituiscono un sistema sensibile e rilevante per l’uomo per analizzare le vie molecolari alla base delle malattie neuroinfiammatorie.

Modellizzazione del morbo di Alzheimer e delle malattie neurodegenerative

Le cellule HMC3 sono diventate uno strumento importante per modellare il contributo dei microgliociti alla malattia di Alzheimer. Uno studio di caratterizzazione iniziale condotto da Lindberg e colleghi, eseguito su questo clone denominato CHME3, ha stabilito che l’amiloide beta (1–40) appena disciolta produceva un aumento dose-dipendente del rilascio di IL-6, accompagnato da una perdita di vitalità dose-dipendente. [8] L’ormone stimolante i melanociti alfa non ha modificato la risposta dell’IL-6 indotta dall’amiloide beta, ma ha aumentato il rilascio basale di IL-6 in modo dose-dipendente, un effetto attribuito ai sottotipi del recettore della melanocortina MCR3 o MCR5. [8] Questo lavoro ha confermato che le cellule HMC3 costituiscono una piattaforma versatile per lo studio della relazione tra i peptidi beta-amiloidi e le risposte infiammatorie microgliali, fondamentali nella patogenesi del morbo di Alzheimer.

González-Prieto e colleghi hanno studiato il CX3CR1 — l’unico recettore della chemochina neuronale CX3CL1 — nella malattia di Alzheimer. [9] La produzione di CX3CR1 era aumentata nella corteccia dei topi 5xFAD e nei campioni di cervello umano affetti da morbo di Alzheimer, e la somministrazione della reboxetina, un inibitore della ricaptazione della noradrenalina, l’ha ulteriormente aumentata in vivo. L’applicazione diretta di noradrenalina alle cellule HMC3 e alla microglia primaria di ratto, al contrario, ha inibito la produzione di CX3CR1. [9] Gli autori hanno concluso che le risposte microgliali alla noradrenalina potrebbero essere alterate in assenza di neuroni produttori di CX3CL1 o di altri fattori non microgliali — un esempio illuminante di come le cellule HMC3 possano isolare una risposta cellulare autonoma e quindi mettere in luce il contributo del contesto tissutale più ampio.

Lo studio sulla dexmedetomidina condotto da Li e colleghi ha utilizzato cellule HMC3 stimolate con LPS e ATP come modello di neuroinfiammazione guidata dall’inflammasoma NLRP3, rilevante per il morbo di Alzheimer. [5] La dexmedetomidina ha soppresso il rilascio di IL-1β e IL-18 attraverso una cascata c-Fos/NLRP3/caspasi-1, identificando un asse antinfiammatorio meccanisticamente nuovo nella microglia umana. Le cellule HMC3 sono state utilizzate anche come modello per studiare la polarizzazione microgliale in risposta a estratti vegetali contenenti fitoestrogeni, ampliando ulteriormente la loro utilità nella scoperta di farmaci per le malattie neurodegenerative. [10] [11]

Virologia e infezioni del SNC

Le cellule HMC3 si sono dimostrate altamente versatili per lo studio delle neuroinfezioni virali, data la loro origine umana e il loro ruolo di modello per la prima linea di difesa microgliale nel sistema nervoso centrale. Martinez Viedma e Pickett hanno confrontato la risposta dell’ospite delle cellule microgliali HMC3 e delle cellule placentari JEG-3 all’infezione da virus Zika utilizzando un pannello di 84 geni del sistema immunitario innato e adattativo, il cui profilo è stato analizzato a 24 e 72 ore dall’infezione. [12] I due tipi cellulari hanno mostrato insiemi distinti di geni espressi in modo differenziale, e l’analisi delle vie di segnalazione ha indicato che la segnalazione TLR7/8 era soppressa nelle cellule microgliali mentre era attivata nelle cellule placentari — una divergenza successivamente verificata mediante esperimenti con siRNA. Lo studio ha identificato le cellule HMC3 come una piattaforma adeguata per la trascrittomica ospite-patogeno nella virologia del SNC.

Zhang e colleghi hanno utilizzato cellule HMC3 infettate da BoDV-1 per dimostrare che miR-146a facilita la replicazione virale sopprimendo l’asse di segnalazione immunitario innato IRAK1/TRAF6/NF-κB. [13] Questa scoperta ha fornito una comprensione meccanicistica di come un virus a RNA altamente neurotropico eluda le risposte antivirali della microglia. In un modello di infezione distinto, Angel-Ambrocio e colleghi hanno dimostrato per la prima volta che il rinovirus umano completa il suo intero ciclo virale nelle cellule HMC3, identificando la microglia come potenziale serbatoio cellulare per le complicanze del SNC associate al rinovirus. [14] La linea supporta inoltre la replicazione del virus della chikungunya senza una significativa perdita di vitalità fino a 72 ore dopo l’infezione. [19]

Sharma e colleghi hanno identificato la prohibitina 1/2 come recettore di ingresso putativo per il virus della dengue di sierotipo 3 nelle cellule microgliali CHME-3 — sinonimo di HMC3 — utilizzando saggi di legame proteico con sovrapposizione virale, proteomica LC-MS/MS, knockdown con siRNA e co-immunoprecipitazione. [15] È da notare che la stessa dipendenza è stata riscontrata nelle cellule neuronali SH-SY5Y, ma non nelle cellule astrogliali U-87 MG, indicando che la via di ingresso è specifica per il tipo cellulare. Nel complesso, questi studi virologici evidenziano le cellule HMC3 come un modello microgliale umano ampiamente applicabile per lo studio della patogenesi e delle strategie di evasione immunitaria dei virus neurotropici.

Micromilieu tumorale del glioblastoma

Le cellule HMC3 sono state utilizzate come modello di microglia associata al glioma per studiare in che modo le cellule tumorali del glioblastoma cooptano il fenotipo infiammatorio della microglia. Li e colleghi hanno dimostrato che la cocultura di cellule di glioblastoma resistenti alla temozolomide con cellule HMC3 ha favorito la polarizzazione M2 delle cellule HMC3 e ha aumentato la secrezione delle citochine pro-tumorigene TGF-β e IL-6. [16] Questa polarizzazione era collegata al circuito lncRNA SNHG15/miR-627-5p/CDK6, e l’inibitore di CDK4/6 palbociclib ha ridotto i marcatori M2, superando al contempo la resistenza alla temozolomide in modelli di xenotrapianto derivati da pazienti.

Questi risultati indicano le cellule HMC3 come un modello umano rilevante per lo studio del contributo della microglia al microambiente tumorale immunosoppressivo del glioblastoma. La capacità di modellare l’interazione microglia-glioblastoma in vitro utilizzando le cellule HMC3 fornisce un sistema gestibile per identificare bersagli terapeutici che affrontino contemporaneamente la resistenza delle cellule tumorali e l’evasione immunitaria. [16]

Agenti neuroprotettivi e farmacologia dei farmaci

Le cellule HMC3 sono state ampiamente impiegate per lo screening di agenti neuroprotettivi e per la caratterizzazione dei loro meccanismi d’azione nella microglia umana. Martínez Leo e Segura Campos hanno valutato le frazioni peptidiche dei semi di Salvia hispanica per verificarne l’attività neuroprotettiva nelle cellule HMC3, scoprendo che la frazione da 1–3 kDa riduceva la produzione di specie reattive dell’ossigeno del 51,3% e diminuiva il rilascio di ossido nitrico, TNF-alfa e dell’IL-6, con un effetto protettivo complessivo del 79,0%. [17] Questo tipo di studio illustra come le cellule HMC3 consentano uno screening rapido e rilevante per l’uomo dei composti bioattivi di origine alimentare.

Ma'arif e colleghi hanno condotto due studi correlati utilizzando cellule HMC3 per valutare i fitoestrogeni di origine vegetale provenienti dalle foglie di Marsilea crenata. La frazione di n-butanolo ha ridotto l’espressione delle molecole MHC di classe II nelle cellule attivate dall’interferone gamma, in linea con l’inibizione dell’attivazione classica del tipo M1, sebbene la relazione dose-risposta riportata non fosse monotona. [10] Un estratto con etanolo al 96% ha aumentato l’espressione del marcatore M2 arginasi-1; lo stesso studio ha riportato una diminuzione dell’espressione del recettore beta degli estrogeni attivato a 125 e 250 ppm, un risultato che è in contrasto con il titolo stesso dell’articolo e dovrebbe essere considerato irrisolto. [11] Entrambi gli studi hanno sfruttato il protocollo ben caratterizzato di polarizzazione dell’interferone gamma nelle cellule HMC3 per indagare la potenziale neuroprotezione fitoestrogenica nella neuroinfiammazione postmenopausale.

Nel campo dei biomateriali e dell’ingegneria tissutale, Venkateswarlu e colleghi hanno utilizzato cellule HMC3 vive coltivate su matrici di scaffold elettrofilati per sviluppare un flusso di lavoro di imaging volumetrico in tempo reale per le oscillazioni del calcio citosolico utilizzando la microscopia confocale a scansione laser. [18] Questo lavoro ha esteso l’applicazione delle cellule HMC3 oltre la farmacologia classica fino ai test sui biomateriali di nuova generazione, illustrando la versatilità di questa linea cellulare in diversi contesti tecnologici nella ricerca neuroscientifica.

Conclusione

Le cellule HMC3 — il clone 3 della microglia umana — si sono affermate come un modello in vitro fondamentale per le malattie neuroinfiammatorie, il morbo di Alzheimer, le malattie neurodegenerative, la virologia del SNC, la ricerca sul microambiente tumorale del glioblastoma e la scoperta di agenti neuroprotettivi. Derivata dal tessuto cerebrale fetale umano e immortalizzata mediante trasfezione con SV40, la linea esprime marcatori microgliali chiave e risponde a una gamma definita di stimoli infiammatori, farmacologici e infettivi. Studi come quello sull’inibitore BET condotto da Baek e colleghi hanno dimostrato la capacità di questa linea cellulare di identificare bersagli farmacologici nella neuroinfiammazione microgliale umana. Dagli studi meccanicistici fondamentali sulle specie reattive dell’ossigeno e sulla segnalazione dell’inflammasoma NLRP3, fino agli screening applicati di agenti neuroprotettivi di origine vegetale e ai test su biomateriali basati su scaffold, le cellule HMC3 offrono una versatilità eccezionale — a condizione che, nella progettazione degli esperimenti, si tenga conto delle loro limitazioni documentate relative al TNF-alfa, all’ossido nitrico e alla biologia di NOX2. I ricercatori alla ricerca di un modello microgliale validato, scalabile e completamente umano troveranno nelle cellule HMC3 una risorsa preziosa per approfondire la comprensione dell’immunità cerebrale e delle patologie cerebrali. Per ordinare le cellule HMC3 o richiedere ulteriori informazioni sulle specifiche del prodotto, visitare il sito cytion.com.

Pubblicazioni chiave

1. Janabi N, Peudenier S, Héron B (1995) Creazione di linee cellulari microgliali umane dopo trasfezione di colture primarie di cellule microgliali embrionali con l’antigene T grande dell’SV40. Neuroscience letters. PMID: 7478261
2. Li B, Bedard K, Sorce S (2009) L’espressione di NOX4 nella microglia umana porta alla generazione costitutiva di specie reattive dell’ossigeno e all’espressione costitutiva di IL-6. Journal of innate immunity. PMID: 20375612
3. Dello Russo C, Cappoli N, Coletta I (2018) La linea cellulare microgliale umana HMC3: a che punto siamo? Una revisione sistematica della letteratura. Journal of Neuroinflammation. PMID: 30200996
4. Cappoli N, Mezzogori D, Tabolacci E (2019) La rapamicina, inibitore della chinasi mTOR, potenzia l’espressione e il rilascio della citochina pro-infiammatoria interleuchina 6, modulando l’attivazione delle cellule microgliali umane. EXCLI Journal. PMID: 31645839
5. Li H, Zhang X, Chen M (2018) La dexmedetomidina inibisce l’infiammazione nelle cellule della microglia sottoposte a stimolazione con LPS e ATP attraverso le cascate c-Fos/NLRP3/caspasi-1. EXCLI Journal. PMID: 29743866
6. Baek M, Yoo E, Choi HI (2021) L’inibitore BET attenua la risposta infiammatoria e la migrazione cellulare nella linea cellulare microgliale umana HMC3. Scientific Reports. PMID: 33893325
7. Nasi M, De Gaetano A, Bianchini E (2020) I pattern molecolari associati al danno mitocondriale stimolano la produzione di specie reattive dell’ossigeno nella microglia umana. Molecular and Cellular Neurosciences. PMID: 32828963
8. Lindberg C, Hjorth E, Post C (2005) Produzione di citochine da parte di una linea cellulare microgliale umana: effetti della beta-amiloide e dell’ormone stimolante i melanociti alfa. Neurotoxicity Research. PMID: 16371321
9. González-Prieto M, Gutiérrez IL, García-Bueno B (2021) La produzione di CX3CR1 da parte della microglia aumenta nella malattia di Alzheimer ed è regolata dalla noradrenalina. Glia. PMID: 32662924
10. Ma'arif B, Mirza DM, Hasanah M (2020) Attività antineuroinfiammatoria della frazione di n-butanolo di Marsilea crenata Presl. nella linea cellulare di microglia HMC3. Rivista di fisiologia e farmacologia di base e clinica. PMID: 31967965
11. Ma'arif B, Agil M, Laswati H (2020) Aumento dell’espressione di Arg1 e dell’ERβ attivato nella microglia HMC3 indotto dall’estratto al 96% di etanolo delle foglie di Marsilea crenata Presl. Rivista di fisiologia e farmacologia di base e clinica. PMID: 31981453
12. Martinez Viedma MDP, Pickett BE (2018) Caratterizzazione dei diversi effetti dell’infezione da virus Zika nelle cellule della placenta e della microglia. *Viruses*. PMID: 30453684
13. Zhang X, Guo Y, Xu X (2019) miR-146a promuove la replicazione del virus della malattia di Borna 1 attraverso la via di segnalazione IRAK1/TRAF6/NF-κB. Virus Research. PMID: 31330207
14. Angel-Ambrocio AH, Bautista-Carbajal P, García-León ML (2020) Le cellule HMC3 della microglia sono altamente suscettibili all’infezione da rinovirus. Virus Research. PMID: 32768491
15. Sharma A, Vasanthapuram R, M Venkataswamy M (2020) La prohibitina 1/2 media l’ingresso del Dengue-3 nelle cellule di neuroblastoma umano (SH-SY5Y) e nella microglia (CHME-3). Rivista di scienze biomediche. PMID: 32306962
16. Li Z, Zhang J, Zheng H (2019) La modulazione del circuito lncRNA SNHG15/CDK6/miR-627 mediante palbociclib supera la resistenza alla temozolomide e riduce la polarizzazione M2 della microglia associata al glioma nel glioblastoma multiforme. Rivista di ricerca oncologica sperimentale e clinica: CR. PMID: 31462285
17. Martínez Leo EE, Segura Campos MR (2020) Effetto neuroprotettivo delle frazioni peptidiche di Salvia hispanica sulla modulazione pro-infiammatoria delle cellule microgliali HMC3. Journal of food biochemistry. PMID: 32207175
18. Venkateswarlu K, Suman G, Dhyani V (2020) Imaging tridimensionale e quantificazione in tempo reale delle oscillazioni del calcio citosolico nelle cellule microgliali coltivate su matrici elettrofilate mediante microscopia confocale a scansione laser. Biotechnology and bioengineering. PMID: 32557561
19. Qadri SW, Kumar N, Santhoshkumar R (2022) Infezione della linea cellulare microgliale umana CHME-3 per lo studio della neuropatogenesi del virus Chikungunya. Journal of neurovirology. PMID: 35352315