Inleiding

HMC3-cellen, ook bekend als Human Microglia Clone 3, CHME-3 of CHME3, behoort tot de meest gebruikte menselijke microgliale cellijnen in neurowetenschappelijk onderzoek. De lijn werd in 1995 opgezet door Janabi, Peudenier, Héron en collega’s door middel van SV40-groot-T-antigeen-afhankelijke onsterfelijkmaking van menselijke embryonale macrofagen afkomstig uit de hersenen. [1] HMC3-cellen behouden de kernkenmerken van microglia, waaronder de constitutieve expressie van het geïoniseerd calcium-bindende adaptermolucule Iba-1 en de door interferon-gamma induceerbare expressie van MHC-klasse-II-antigenen. [2] [3] Als de in het centrale zenuwstelsel aanwezige cellen van het aangeboren immuunsysteem spelen microglia een cruciale rol bij neuro-inflammatoire aandoeningen, de ziekte van Alzheimer en andere neurodegeneratieve aandoeningen. HMC3-cellen dienen daarom als een hanteerbaar menselijk in-vitroplatform voor het bestuderen van microgliale activering, neuroprotectieve middelen, virale neuro-infectie en de tumor-micro-omgeving van glioblastoom.

Belangrijkste punten

• HMC3-cellen zijn onsterfbaar gemaakte menselijke foetale hersenmicroglia die zijn verkregen door transfectie met het grote T-antigeen van SV40.
• De cellijn brengt Iba-1 constitutief tot expressie en verhoogt de expressie van MHC klasse II bij stimulatie met interferon-gamma; de rapportages over de expressie van CD14, CD11b en CD68 verschillen per laboratorium en moeten voor elke specifieke batch worden geverifieerd.
• HMC3-cellen zijn een veelgebruikt in-vitromodel voor het onderzoek naar neuro-inflammatoire aandoeningen, de ziekte van Alzheimer en neurodegeneratieve aandoeningen.
• Deze stam is vatbaar voor infectie met verschillende neurotrope virussen, waaronder het zikavirus, het Borna-ziektevirus 1, het chikungunyavirus en het rhinovirus.
• HMC3-cellen brengen NOX4 constitutief tot expressie en produceren reactieve zuurstofsoorten, waardoor ze van belang zijn voor onderzoek naar oxidatieve stress.
• Deze methode is toegepast in onderzoek naar de micro-omgeving van glioblastoomtumoren, in de farmacologie van geneesmiddelen en in onderzoek naar biomateriaal-scaffolds.
• Interleukine-1 bèta — alleen of in combinatie met interferon-gamma — is de meest effectieve ontstekingsstimulator in deze reeks; de reacties op LPS zijn relatief bescheiden, en TNF-alfa en stikstofmonoxide komen vrijwel niet voor.

Wat is HMC3?

HMC3 (Cellosaurus-toegangsnummer CVCL_II76) is een getransformeerde menselijke microgliale cellijn afkomstig uit de foetale hersenen van een embryo met een zwangerschapsduur van 8–10 weken. Het geslacht van de donor is niet gespecificeerd. Er was geen ziekte bij de donor vastgesteld. De lijn werd in 1995 door Janabi en collega’s opgezet door transfectie van primaire embryonale hersenmacrofaagculturen met een plasmide dat codeert voor het grote T-antigeen van SV40, wat vier continue microgliale cellijnen opleverde, waarvan kloon 3 het meest werd gebruikt. [1] De getransformeerde cellen behielden macrofaagkenmerken zoals adhesie en niet-specifieke esterase-activiteit, en waren in staat om zymosan-deeltjes te fagocyteren, hoewel de fagocytische activiteit laag bleef. Interleukine-6 werd spontaan door de cellen aangemaakt, waarbij de productie verder toenam na stimulatie met interleukine-1-alfa. [1] In een uitgebreid systematisch literatuuronderzoek uit 2018, uitgevoerd door Dello Russo en collega’s, werden de beschikbare karakteriseringsgegevens voor deze kloon gebundeld en werd een belangrijk punt van verwarring opgehelderd: dezelfde cellijn is onder de namen CHME3, C13-NJ en CHME-5 in omloop geweest. [3] De beoordeling kwam tot de conclusie dat, ongeacht de gebruikte benaming, de cellen een vergelijkbaar antigene en functioneel profiel hebben en als één experimenteel model moeten worden beschouwd — waarbij echter werd gewaarschuwd dat verschillende CHME-5-aliquots die in omloop waren, kruisbesmet bleken te zijn met glioma-cellen van ratten. De door de ATCC geauthenticeerde HMC3-stam (ATCC CRL-3304) is vrij van deze onduidelijkheid.

Informatie over celcultuur met HMC3

HMC3-cellen zijn robuust wat betreft de keuze van het basismedium: ze zijn met succes gekweekt in EMEM, MEM en DMEM:Ham's F12, telkens aangevuld met 10% serum. [3] Deze keuze is echter niet fenotypisch neutraal. Dello Russo en collega’s meldden dat de basale productie van reactieve zuurstofsoorten aanzienlijk lager was in cellen die in MEM of DMEM:F12 waren gekweekt dan in EMEM, wat wijst op een minder geactiveerd rustfenotype. [3] Onderzoekers die gegevens van verschillende laboratoria met elkaar vergelijken, moeten daarom naast het aantal passages ook het gebruikte medium vermelden.

Voordelen van HMC3-cellen

HMC3-cellen bieden een uniek en toegankelijk model voor menselijke microglia, in een tijd waarin primaire menselijke microglia moeilijk in voldoende hoeveelheden te verkrijgen zijn voor grootschalig onderzoek. De celijn groeit adhesiën en is eenvoudig te onderhouden. Cruciaal is dat de cellen constitutief Iba-1 tot expressie brengen, MHC-klasse II opreguleren als reactie op interferon-gamma, en — in de door ATCC geauthenticeerde stam — de meer recent gedefinieerde kenmerkende microgliale genen CX3CR1, CSF1R, P2RY12 en TMEM119, waardoor ze een biologisch gevalideerde vervanging vormen voor primaire menselijke microglia. [2] [3] Dankzij deze eigenschappen vormen HMC3-cellen een veelgebruikt platform voor mechanistisch onderzoek naar neuro-inflammatoire aandoeningen waarvoor reproduceerbaar, schaalbaar en volledig menselijk celmateriaal nodig is.

Een ander sterk punt van HMC3-cellen is hun reactievermogen op een welbepaalde reeks ontstekingsprikkels. De meest effectieve inductor van interleukine-6 is interleukine-1 bèta, dat de basale afgifte tot wel vijftig keer verhoogt en synergetisch werkt met interferon-gamma; LPS en amyloïde-bèta-peptiden veroorzaken meer bescheiden, concentratieafhankelijke stijgingen. [3] Dit gegradeerde, reproduceerbare reactieprofiel maakt concentratieafhankelijke en tijdsverloopexperimenten mogelijk die bij preparaten van primaire cellen moeilijk te realiseren zijn. Hun reactievermogen op zowel pro-inflammatoire als anti-inflammatoire prikkels — waaronder farmacologische middelen zoals rapamycine en dexmedetomidine — vergroot hun bruikbaarheid in de geneesmiddelenfarmacologie en bij het screenen van neuroprotectieve middelen nog verder. [4] [5] De cellen zijn bovendien gevoelig voor diverse neurotrope virussen, waardoor ze ook kunnen worden ingezet voor onderzoek op het gebied van neuro-infectiologie.

Beperkingen van HMC3-cellen

Als getransformeerde cellijn dragen HMC3-cellen het SV40-large-T-antigeen, dat onsterfelijkheid verleent maar ook bepaalde aspecten van de celbiologie verandert in vergelijking met primaire microglia. Li en collega’s rapporteerden onverwachte expressiepatronen van NOX-isovormen — overvloedig NOX4 maar vrijwel geen NOX2-mRNA — wat in contrast staat met primaire microglia en het nut van deze lijn als model voor door NOX2 gemedieerde respiratoire burst beperkt. [2] [3] Onderzoekers moeten daarom nagaan of het specifieke onderzochte proces in deze lijn getrouw wordt nagebootst, alvorens algemene mechanistische conclusies te trekken.

Er zijn nog drie andere beperkingen die aandacht verdienen. Ten eerste is het repertoire aan ontstekingsmediatoren onvolledig: HMC3-cellen scheiden slechts marginale hoeveelheden van het ontstekingsremmende cytokine IL-10 af (in de orde van grootte van enkele pg/ml), produceren weinig of geen TNF-alfa, noch spontaan noch na pro-inflammatoire activering, en vertonen een constitutief verhoogd IL-6-gehalte als gevolg van NOX4-afhankelijke reactieve zuurstofsoorten. [2] [3] Ten tweede, en in schril contrast met microglia van knaagdieren, brengen rustende HMC3-cellen geen iNOS tot expressie, en is er na stimulatie met LPS, LPS in combinatie met interferon-gamma, IL-1-bèta of TNF-alfa noch iNOS-inductie, noch een meetbare nitrietophoping waargenomen. [3] Onderzoek dat zich richt op de stikstofmonoxide-as komt met dit model dan ook niet goed tot zijn recht.

Ten derde is de celijn afgeleid van foetaal hersenweefsel, wat betekent dat het transcriptie- en functionele profiel ervan kan afwijken van microgliale toestanden die bij volwassenen optreden en die relevant zijn voor neurodegeneratieve aandoeningen op latere leeftijd. Onderzoekers die de ziekte van Alzheimer of de ziekte van Parkinson bij volwassenen modelleren, dienen gegevens afkomstig van HMC3 waar mogelijk te interpreteren in combinatie met aanvullende primaire microgliale systemen van volwassenen of uit iPSC's afgeleide systemen. Ten slotte zijn de rapporten over het profiel van de oppervlaktemarkers niet volledig in overeenstemming: terwijl Li en collega’s constitutieve Iba-1 en CD14 beschreven, samen met door interferon-gamma induceerbare CD11b, CD68 en MHC klasse II, [2] zowel de oorspronkelijke karakterisering door Janabi en collega’s [1] en uit de door Dello Russo en collega’s gerapporteerde flowcytometrische gegevens voor ATCC CRL-3304 bleek dat rustende cellen CD14- en CD11b-negatief waren, en dat geen van beide markers door interferon-gamma werd geïnduceerd. [3] Zowel de antilichaamkloon als het kweekmedium en het aantal passages zijn van invloed op deze meetresultaten, en genetische drift bij seriële passages is in het algemeen aangetoond bij continue lijnen; de expressie van de marker moet intern worden bevestigd en mag niet zomaar worden aangenomen.

Bekijk de volledige specificaties en bestel

Toepassingen van HMC3-cellen

Neuro-ontsteking en microgliale activering

Het onderzoek naar neuro-inflammatoire aandoeningen vormt de meest uitgebreide toepassing van HMC3-cellen. Li en collega’s toonden aan dat HMC3-cellen constitutief NOX4 tot expressie brengen, wat leidt tot een voortdurende productie van reactieve zuurstofsoorten en een aanhoudende IL-6-expressie — een bevinding die deze cellen positioneerde als een model voor chronische, laaggradige neuro-inflammatie. [2] Deze constante ontstekingsactiviteit weerspiegelt aspecten van microgliale priming die bij neurodegeneratieve aandoeningen worden waargenomen, en biedt daarmee een relevante uitgangsbasis voor interventiestudies.

In een invloedrijk onderzoek van Baek en collega’s werd de remming van het BET-bromodomein in HMC3-cellen onderzocht met behulp van RNA-sequencing. [6] De auteurs toonden aan dat de BET-remmer JQ1 de ontstekings- en migratierespons van door LPS geactiveerde HMC3-cellen afzwakte, en identificeerden het mechanisme: LPS induceert de transcriptiefactor IRF1, die chemokines, cytokines, door interferon gestimuleerde en migratiegerelateerde genen direct reguleert, en JQ1 vermindert IRF1 samen met zijn doelgenen aanzienlijk. Het uitschakelen van IRF1 reproduceerde het effect en remde de migratie van microglia. [6] Dit onderzoek heeft de BET–IRF1-as aangewezen als een doelwit voor geneesmiddelen bij neuro-ontsteking in menselijke microglia en heeft aangetoond dat HMC3-cellen geschikt zijn voor farmacologische interventiestudies op mechanistisch niveau.

Ook moleculaire patronen die verband houden met mitochondriale schade werden in deze lijn onderzocht. Nasi en collega’s ontdekten dat stimulatie met mitochondriaal DNA en cardiolipine de cellulaire oxidatieve stress in HMC3-cellen verhoogde, terwijl er opvallend genoeg geen klassieke pro-inflammatoire reactie werd opgewekt: de HLA-DR-expressie werd niet verhoogd en noch de afscheiding van TNF-alfa, noch die van IL-6 nam toe. [7] De auteurs interpreteerden dit als een mogelijk endogeen regulerend mechanisme dat de activering van microglia beperkt. Los daarvan toonden Cappoli en collega’s aan dat de mTOR-remmer rapamycine paradoxaal genoeg de IL-6-expressie en -afgifte versterkte in HMC3-cellen die waren geactiveerd met een cocktail van interferon-gamma en IL-1-bèta, terwijl tegelijkertijd de productie van reactieve zuurstofsoorten werd verminderd — wat de aannames over de ontstekingsremmende werking van rapamycine in menselijke immuuncellen in de hersenen ter discussie stelt. [4] Deze studies tonen gezamenlijk aan dat HMC3-cellen een gevoelig, voor de mens relevant systeem vormen voor het ontrafelen van de moleculaire routes die ten grondslag liggen aan neuro-inflammatoire aandoeningen.

Modellering van de ziekte van Alzheimer en neurodegeneratieve aandoeningen

HMC3-cellen zijn een belangrijk hulpmiddel geworden voor het modelleren van de bijdrage van microglia aan de ziekte van Alzheimer. Een vroege karakteriseringsstudie door Lindberg en collega’s, uitgevoerd op deze kloon onder de naam CHME3, toonde aan dat vers opgelost amyloïde bèta(1–40) een dosisafhankelijke toename in de afgifte van IL-6 veroorzaakte, naast een dosisafhankelijk verlies aan levensvatbaarheid. [8] Alfa-melanocytstimulerend hormoon veranderde de door amyloïde-bèta geïnduceerde IL-6-reactie niet, maar verhoogde de basale IL-6-afgifte dosisafhankelijk, een effect dat wordt toegeschreven aan de melanocortinereceptorsubtypes MCR3 of MCR5. [8] Dit onderzoek bevestigde dat HMC3-cellen een bruikbaar platform vormen voor het bestuderen van de relatie tussen amyloïde-bèta-peptiden en inflammatoire reacties van microglia, die centraal staan in de pathogenese van de ziekte van Alzheimer.

González-Prieto en collega’s onderzochten CX3CR1 — de enige receptor voor de neuronale chemokine CX3CL1 — bij de ziekte van Alzheimer. [9] De productie van CX3CR1 was verhoogd in de cortex van 5xFAD-muizen en in hersenmonsters van mensen met de ziekte van Alzheimer, en toediening van de noradrenalineheropnameremmer reboxetine verhoogde deze productie in vivo nog verder. Directe toediening van noradrenaline aan HMC3-cellen en aan primaire microglia van ratten remde daarentegen de productie van CX3CR1. [9] De auteurs concludeerden dat microgliale reacties op noradrenaline mogelijk veranderd zijn bij afwezigheid van CX3CL1-producerende neuronen of andere niet-microglia-factoren — een leerzaam voorbeeld van hoe HMC3-cellen een celautonome reactie kunnen isoleren en daarmee de bijdrage van de bredere weefselcontext blootleggen.

In de dexmedetomidine-studie van Li en collega’s werden met LPS en ATP gestimuleerde HMC3-cellen gebruikt als model voor door het NLRP3-inflammasoom aangestuurde neuro-ontsteking die relevant is voor de ziekte van Alzheimer. [5] Dexmedetomidine onderdrukte de afgifte van IL-1β en IL-18 via een c-Fos/NLRP3/caspase-1-cascade, waarmee een mechanistisch nieuwe ontstekingsremmende as in menselijke microglia werd geïdentificeerd. HMC3-cellen hebben ook gediend als model voor het onderzoeken van microgliale polarisatie als reactie op fyto-oestrogeenhoudende plantenextracten, waardoor hun bruikbaarheid bij de ontwikkeling van geneesmiddelen voor neurodegeneratieve aandoeningen verder is uitgebreid. [10] [11]

Virologie en infecties van het centrale zenuwstelsel

HMC3-cellen zijn uiterst veelzijdig gebleken voor het bestuderen van virale neuro-infecties, gezien hun menselijke oorsprong en hun rol als model voor de eerste verdedigingslinie van microglia in het centrale zenuwstelsel. Martinez Viedma en Pickett vergeleken de gastheerreactie van HMC3-microgliacellen en JEG-3-placenta-cellen op een infectie met het Zika-virus aan de hand van een panel van 84 genen van het aangeboren en adaptieve immuunsysteem, waarvan de expressie 24 en 72 uur na infectie werd gemeten. [12] De twee celtypen vertoonden verschillende sets van differentieel tot expressie gebrachte genen, en uit pathway-analyse bleek dat de TLR7/8-signalering in de microgliale cellen werd onderdrukt, terwijl deze in de placentacellen juist werd geactiveerd — een verschil dat vervolgens werd onderzocht met siRNA-experimenten. De studie toonde aan dat HMC3-cellen een geschikt platform vormen voor gastheer-pathogeen-transcriptomica in de virologie van het centrale zenuwstelsel.

Zhang en collega’s gebruikten met BoDV-1 geïnfecteerde HMC3-cellen om aan te tonen dat miR-146a virale replicatie bevordert door de IRAK1/TRAF6/NF-κB-signaalroute van het aangeboren immuunsysteem te onderdrukken. [13] Deze bevinding leverde mechanistisch inzicht op in hoe een sterk neurotroop RNA-virus de antivirale reacties van microglia ontwijkt. In een afzonderlijk infectiemodel toonden Angel-Ambrocio en collega’s voor het eerst aan dat het humaan rhinovirus zijn volledige virale cyclus in HMC3-cellen voltooit, waarmee microglia werden aangewezen als een potentieel cellulair reservoir voor met het rhinovirus geassocieerde complicaties in het centrale zenuwstelsel. [14] Deze celijn ondersteunt ook de replicatie van het chikungunya-virus zonder significant verlies van levensvatbaarheid tot 72 uur na infectie. [19]

Sharma en collega’s identificeerden prohibitine 1/2 als een vermoedelijke toegangsreceptor voor het denguevirus serotype 3 in microgliale CHME-3-cellen — een synoniem voor HMC3 — met behulp van virus-overlay-eiwitbindingsassays, LC-MS/MS-proteomica, siRNA-knockdown en co-immunoprecipitatie. [15] Opvallend was dat dezelfde afhankelijkheid werd aangetroffen in neuronale SH-SY5Y-cellen, maar niet in astrogliale U-87 MG-cellen, wat erop wijst dat de toetredingsroute celsoortspecifiek is. Alles bij elkaar onderstrepen deze virologische studies de rol van HMC3-cellen als een breed toepasbaar menselijk microgliaal model voor het onderzoeken van de pathogenese en immuunontwijkingsstrategieën van neurotrope virussen.

Micro-omgeving van glioblastoomtumoren

HMC3-cellen zijn toegepast als model voor glioom-geassocieerde microglia om te bestuderen hoe glioblastoomtumorcellen het inflammatoire fenotype van microglia overnemen. Li en collega’s toonden aan dat het samen kweken van temozolomide-resistente glioblastoomcellen met HMC3-cellen de M2-polarisatie van HMC3-cellen bevorderde en de afscheiding van de pro-tumorogene cytokines TGF-β en IL-6 verhoogde. [16] Deze polarisatie hield verband met het lncRNA-circuit SNHG15/miR-627-5p/CDK6, en de CDK4/6-remmer palbociclib verminderde de M2-markers en overwon tegelijkertijd de temozolomide-resistentie in van patiënten afkomstige xenotransplantaatmodellen.

Deze bevindingen maken HMC3-cellen tot een relevant menselijk model voor het bestuderen van de bijdrage van microglia aan de immuunonderdrukkende tumor-micro-omgeving van glioblastoom. De mogelijkheid om de interactie tussen microglia en glioblastoom in vitro te modelleren met behulp van HMC3-cellen biedt een hanteerbaar systeem voor het identificeren van therapeutische doelwitten die tegelijkertijd de resistentie van tumorcellen en immuunontwijking aanpakken. [16]

Neuroprotectieve middelen en geneesmiddelenfarmacologie

HMC3-cellen zijn op grote schaal gebruikt voor het screenen van neuroprotectieve middelen en het karakteriseren van hun werkingsmechanismen in menselijke microglia. Martínez Leo en Segura Campos hebben peptidefracties uit Salvia hispanica-zaden geëvalueerd op neuroprotectieve activiteit in HMC3-cellen. Zij stelden vast dat de 1–3 kDa-fractie de productie van reactieve zuurstofsoorten met 51,3% verminderde en de afgifte van stikstofmonoxide, TNF-alfa en IL-6, met een totaal beschermend effect van 79,0%. [17] Dit soort onderzoek illustreert hoe HMC3-cellen een snelle, voor de mens relevante screening van uit voedsel afkomstige bioactieve stoffen mogelijk maken.

Ma'arif en collega’s voerden twee verwante onderzoeken uit met behulp van HMC3-cellen om uit planten afkomstige fyto-oestrogenen uit bladeren van Marsilea crenata te evalueren. De n-butanolfractie verminderde de MHC-klasse-II-expressie in door interferon-gamma geactiveerde cellen, wat overeenkomt met remming van de klassieke M1-activering, hoewel de gerapporteerde dosis-respons niet-monotoon was. [10] Een 96%-ethanolextract verhoogde de expressie van de M2-marker arginase-1; in hetzelfde onderzoek werd een afname van de expressie van de geactiveerde oestrogeenreceptor bèta bij 125 en 250 ppm gemeld, een resultaat dat in tegenspraak is met de titel van het artikel zelf en als onopgelost moet worden beschouwd. [11] Beide studies maakten gebruik van het goed gekarakteriseerde protocol voor interferon-gamma-polarisatie in HMC3-cellen om de potentiële fyto-oestrogene neuroprotectie bij postmenopauzale neuro-ontsteking te onderzoeken.

Op het gebied van biomaterialen en weefselengineering gebruikten Venkateswarlu en collega’s levende HMC3-cellen, gekweekt op elektrogesponnen scaffoldmatrices, om een realtime volumetrische beeldvormingsworkflow te ontwikkelen voor cytosolische calciumoscillaties met behulp van laserscanning-confocale microscopie. [18] Dit werk breidde de toepassing van HMC3-cellen uit van de klassieke farmacologie naar het testen van biomaterialen van de volgende generatie, waarmee de veelzijdigheid van deze celijn in diverse technologische contexten binnen het neurowetenschappelijk onderzoek werd geïllustreerd.

Conclusie

HMC3-cellen — de menselijke microgliale kloon 3 — hebben zich gevestigd als een hoeksteen onder de in-vitro-modellen voor neuro-inflammatoire aandoeningen, de ziekte van Alzheimer, neurodegeneratieve aandoeningen, virologie van het centrale zenuwstelsel, onderzoek naar de tumor-micro-omgeving van glioblastomen en de ontdekking van neuroprotectieve middelen. De lijn, afkomstig van menselijk foetaal hersenweefsel en geïmmortaliseerd door SV40-transfectie, brengt belangrijke microgliale markers tot expressie en reageert op een welbepaald scala aan inflammatoire, farmacologische en infectieuze prikkels. Studies zoals het onderzoek naar BET-remmers door Baek en collega’s hebben aangetoond hoe krachtig deze celijn is voor het identificeren van medicijnbare doelwitten bij neuro-inflammatie in menselijke microglia. Van fundamenteel mechanistisch onderzoek naar reactieve zuurstofsoorten en NLRP3-inflammasoom-signalering tot toegepaste screenings van uit planten afkomstige neuroprotectieve middelen en het testen van op scaffolds gebaseerde biomaterialen: HMC3-cellen bieden uitzonderlijke veelzijdigheid — mits bij het opzetten van experimenten rekening wordt gehouden met de gedocumenteerde beperkingen met betrekking tot de biologie van TNF-alfa, stikstofmonoxide en NOX2. Onderzoekers die op zoek zijn naar een gevalideerd, schaalbaar en volledig humaan microgliaal model, zullen HMC3-cellen een waardevolle bron vinden voor het vergroten van het inzicht in hersenimmuniteit en hersenziekten. Ga naar cytion.com om HMC3-cellen te bestellen of meer informatie over productspecificaties aan te vragen.

Belangrijke publicaties

1. Janabi N, Peudenier S, Héron B (1995) Totstandbrenging van menselijke microgliale cellijnen na transfectie van primaire culturen van embryonale microgliale cellen met het SV40 large T-antigeen. Neuroscience Letters. PMID: 7478261
2. Li B, Bedard K, Sorce S (2009) NOX4-expressie in menselijke microglia leidt tot de constante vorming van reactieve zuurstofsoorten en tot constante IL-6-expressie. Journal of Innate Immunity. PMID: 20375612
3. Dello Russo C, Cappoli N, Coletta I (2018) De menselijke microgliale HMC3-cellijn: hoe staat het ermee? Een systematisch literatuuroverzicht. Journal of Neuroinflammation. PMID: 30200996
4. Cappoli N, Mezzogori D, Tabolacci E (2019) De mTOR-kinaseremmer rapamycine versterkt de expressie en afgifte van het pro-inflammatoire cytokine interleukine 6, waardoor de activering van menselijke microgliacellen wordt gemoduleerd. EXCLI Journal. PMID: 31645839
5. Li H, Zhang X, Chen M (2018) Dexmedetomidine remt ontstekingen in microgliacellen bij stimulatie door LPS en ATP via c-Fos/NLRP3/caspase-1-cascades. EXCLI Journal. PMID: 29743866
6. Baek M, Yoo E, Choi HI (2021) De BET-remmer vermindert de ontstekingsreactie en celmigratie in de menselijke microgliale HMC3-cellijn. Scientific Reports. PMID: 33893325
7. Nasi M, De Gaetano A, Bianchini E (2020) Moleculaire patronen geassocieerd met mitochondriale schade stimuleren de productie van reactieve zuurstofsoorten in menselijke microglia. Molecular and Cellular Neurosciences. PMID: 32828963
8. Lindberg C, Hjorth E, Post C (2005) Cytokineproductie door een menselijke microgliale cellijn: effecten van bèta-amyloïde en alfa-melanocytstimulerend hormoon. Neurotoxicity Research. PMID: 16371321
9. González-Prieto M, Gutiérrez IL, García-Bueno B (2021) De productie van CX3CR1 door microglia neemt toe bij de ziekte van Alzheimer en wordt gereguleerd door noradrenaline. Glia. PMID: 32662924
10. Ma'arif B, Mirza DM, Hasanah M (2020) Anti-neuro-inflammatoire werking van de n-butanolfractie van Marsilea crenata Presl. in de microgliale HMC3-cellijn. Tijdschrift voor fundamentele en klinische fysiologie en farmacologie. PMID: 31967965
11. Ma'arif B, Agil M, Laswati H (2020) De versterking van de Arg1- en geactiveerde ERβ-expressie in microglia HMC3 door inductie van een 96% ethanolextract van de bladeren van Marsilea crenata Presl. Tijdschrift voor fundamentele en klinische fysiologie en farmacologie. PMID: 31981453
12. Martinez Viedma MDP, Pickett BE (2018) Karakterisering van de verschillende effecten van een Zika-virusinfectie in placenta- en microgliacellen. Viruses. PMID: 30453684
13. Zhang X, Guo Y, Xu X (2019) miR-146a bevordert de replicatie van het Borna-ziektevirus 1 via de IRAK1/TRAF6/NF-κB-signaalroute. Virus Research. PMID: 31330207
14. Angel-Ambrocio AH, Bautista-Carbajal P, García-León ML (2020) Microglia-HMC3-cellen zijn zeer vatbaar voor infectie met het rhinovirus. Virus Research. PMID: 32768491
15. Sharma A, Vasanthapuram R, M Venkataswamy M (2020) Prohibitin 1/2 bemiddelt de opname van Dengue-3 in menselijke neuroblastoomcellen (SH-SY5Y) en microgliacellen (CHME-3). Journal of Biomedical Science. PMID: 32306962
16. Li Z, Zhang J, Zheng H (2019) Door het lncRNA SNHG15/CDK6/miR-627-circuit te moduleren met palbociclib wordt de resistentie tegen temozolomide overwonnen en wordt de M2-polarisatie van glioom-geassocieerde microglia bij glioblastoma multiforme verminderd. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research: CR. PMID: 31462285
17. Martínez Leo EE, Segura Campos MR (2020) Neuroprotectief effect van peptidefracties uit Salvia hispanica op de pro-inflammatoire modulatie van HMC3-microglia-cellen. Journal of food biochemistry. PMID: 32207175
18. Venkateswarlu K, Suman G, Dhyani V (2020) Driedimensionale beeldvorming en kwantificering van realtime cytosolische calciumoscillaties in microgliale cellen gekweekt op elektrogesponnen matrices met behulp van laser-scanning confocale microscopie. Biotechnology and bioengineering. PMID: 32557561
19. Qadri SW, Kumar N, Santhoshkumar R (2022) Infectie van de menselijke microgliale cellijn CHME-3 om de neuropathogenese van het chikungunya-virus te bestuderen. Journal of Neurovirology. PMID: 35352315