Въведение

Клетки HMC3, известна още като „Клон 3 на човешка микроглия“, CHME-3 или CHME3, представлява една от най-широко използваните линии на човешки микроглиални клетки в изследванията в областта на невронауките. Линията е създадена през 1995 г. от Janabi, Peudenier, Héron и колеги чрез иммортализация, зависима от големия Т-антиген на SV40, на макрофаги, получени от човешки ембрионален мозък. [1] Клетките HMC3 запазват основните характеристики на микроглиалните клетки, включително постоянната експресия на адаптерната молекула Iba-1, свързваща йонизирания калций, и индуцираната от интерферон-гама експресия на антигени от клас II на MHC. [2] [3] Като резидентни клетки на вродения имунитет в централната нервна система, микроглията са ключови медиатори при невровъзпалителни заболявания, болестта на Алцхаймер и други невродегенеративни заболявания. Следователно HMC3-клетките служат като удобна човешка in vitro платформа за изучаване на активацията на микроглията, невропротективните средства, вирусната невроинфекция и туморната микросреда на глиобластома.

Основни изводи

• Клетките HMC3 са иммортализирани човешки фетални мозъчни микроглиални клетки, получени чрез трансфекция с големия Т-антиген на SV40.
• Клетъчната линия експресира Iba-1 постоянно и увеличава експресията на MHC клас II при стимулация с интерферон-гама; данните за експресията на CD14, CD11b и CD68 се различават между отделните лаборатории и трябва да бъдат проверявани за всяка конкретна партида.
• Клетките HMC3 са широко използван in vitro модел за изследване на невровъзпалителни заболявания, болестта на Алцхаймер и невродегенеративни заболявания.
• Клетъчната линия е податлива на инфекция с редица невротропни вируси, включително вируса Зика, вируса на болестта на Борна 1, вируса чикунгуня и риновируса.
• Клетките HMC3 постоянно експресират NOX4 и генерират реактивни кислородни видове, което ги прави подходящи за изследвания в областта на оксидативния стрес.
• Тази линия е била използвана в изследвания на микросредата на глиобластома, фармакологията на лекарствените средства и изследванията върху биоматериални скафолди.
• Интерлейкин-1 бета — самостоятелно или в комбинация с интерферон-гама — е най-ефективният възпалителен стимул в тази линия; реакциите към LPS са сравнително слаби, а TNF-алфа и азотният оксид до голяма степен липсват.

Какво представлява HMC3?

HMC3 (Cellosaurus, номер на донатора CVCL_II76) е трансформирана човешка микроглиална клетъчна линия, получена от феталния мозък на ембрион на 8–10-седмична гестационна възраст. Полът на донора не е уточнен. Донорът не е страдал от никакви заболявания. Линията е създадена от Janabi и колеги през 1995 г. чрез трансфекция на първични култури от ембрионални мозъчни макрофаги с плазмид, кодиращ големия Т-антиген на SV40, в резултат на което са получени четири непрекъснати микроглиални клетъчни линии, от които клон 3 се превърна в най-широко използваният. [1] Трансформираните клетки запазиха макрофагичните си характеристики, като адхезия и неспецифична естеразна активност, и бяха способни да фагоцитират частици от зимозан, въпреки че фагоцитната активност остана ниска. Интерлейкин-6 се синтезираше спонтанно от клетките, като производството му се увеличаваше допълнително след стимулация с интерлейкин-1 алфа. [1] В обширен систематичен преглед на литературата от 2018 г., изготвен от Дело Русо и колеги, бяха събрани наличните данни за характеристиките на този клон и беше изяснена една важна точка, която създаваше объркване: една и съща клетъчна линия е била известна под наименованията CHME3, C13-NJ и CHME-5. [3] В прегледа се стигна до заключението, че независимо от използваното наименование, клетките имат сходен антигенен и функционален профил и следва да се разглеждат като един експериментален модел — като същевременно се отбелязва, че няколко аликвоти от CHME-5, намиращи се в обращение, са били установени като кръстосано замърсени с клетки от глиом на плъх. Запасът от HMC3 (ATCC CRL-3304), сертифициран от ATCC, е свободен от тази неяснота.

Информация за клетъчната култура HMC3

Клетките HMC3 са устойчиви по отношение на избора на базова среда: те са били успешно култивирани в EMEM, MEM и DMEM:Ham's F12, като всяка от тях е била допълнена с 10 % серум. [3] Този избор обаче не е фенотипно неутрален. Дело Русо и колегите му съобщиха, че базовото производство на реактивни кислородни видове е било значително по-ниско в клетки, отглеждани в MEM или DMEM:F12, в сравнение с тези, отглеждани в EMEM, което сочи по-слабо активиран фенотип в състояние на покой. [3] Следователно изследователите, които сравняват данни от различни лаборатории, трябва да отбелязват използваната среда заедно с номера на пасажа.

Предимства на клетките HMC3

Клетките HMC3 представляват уникално достъпен модел на човешка микроглия в момент, когато е трудно да се получат първични човешки микроглиални клетки в достатъчни количества за широкомащабни изследвания. Клетъчната линия расте адхезивно и се поддържа лесно. От решаващо значение е, че клетките експресират Iba-1 конститутивно, повишават експресията на MHC клас II в отговор на интерферон-гама и — в запаса, сертифициран от ATCC — транскрибират по-скоро определените характерни за микроглиалните клетки гени CX3CR1, CSF1R, P2RY12 и TMEM119, като по този начин осигурява биологично валидиран заместител на първичната човешка микроглия. [2] [3] Тези свойства превръщат клетките HMC3 в широко използвана платформа за механистични изследвания на невровъзпалителни заболявания, които изискват възпроизводим, мащабируем и изцяло човешки клетъчен материал.

Друго предимство на HMC3-клетките е тяхната реактивност към определен набор от възпалителни стимули. Най-ефективният индуктор на интерлевкин-6 е интерлевкин-1 бета, който увеличава базовото отделяне до петдесет пъти и действа синергично с интерферон-гама; LPS и бета-амилоидните пептиди предизвикват по-умерени, зависими от концентрацията увеличения. [3] Този градиран, възпроизводим профил на реакцията позволява провеждането на експерименти, зависещи от концентрацията и времето, които са трудни за осъществяване в препарати от първични клетки. Тяхната реактивност както към провъзпалителни, така и към противовъзпалителни стимули — включително фармакологични средства като рапамицин и дексмедетомидин — допълнително разширява приложението им във фармакологията на лекарствата и при скрининга на невропротективни средства. [4] [5] Клетките са податливи и на редица невротропни вируси, което разширява приложението им в изследванията в областта на невроинфекционологията.

Ограничения на клетките HMC3

Като трансформирана клетъчна линия, клетките HMC3 носят големия Т-антиген на SV40, който им придава безсмъртие, но също така променя някои аспекти на клетъчната биология в сравнение с първичните микроглиални клетки. Ли и колегите му съобщават за неочаквани модели на експресия на изоформите на NOX — изобилие от NOX4, но почти никаква мРНК на NOX2 — което контрастира с първичната микроглия и ограничава полезността на тази линия като модел за NOX2-медииран респираторен взрив. [2] [3] Следователно изследователите трябва да се уверят, че конкретният изследван метаболитен път е точно възпроизведен в тази клетъчна линия, преди да направят общи заключения относно механизмите.

Три допълнителни ограничения заслужават внимание. Първо, наборът от възпалителни медиатори е непълен: HMC3-клетките секретират само незначителни количества от противовъзпалителния цитокин IL-10 (в диапазона на няколко pg/ml), произвеждат малко или никакво TNF-алфа нито спонтанно, нито след провъзпалителна активация и показват постоянно повишени нива на IL-6, предизвикани от NOX4-зависими реактивни кислородни видове. [2] [3] На второ място, и в ярък контраст с микроглията при гризачите, клетките HMC3 в покой не експресират iNOS, като след стимулация с LPS, LPS в комбинация с интерферон-гама, IL-1 бета или TNF-алфа не е наблюдавана нито индукция на iNOS, нито измеримо натрупване на нитрити. [3] Следователно този модел не е подходящ за изследвания, фокусирани върху осът на азотния оксид.

Трето, линията е създадена от фетална мозъчна тъкан, което означава, че нейният транскрипционен и функционален профил може да се различава от състоянията на микроглията при възрастни, свързани с невродегенеративни заболявания в късна възраст. Изследователите, които моделират болестта на Алцхаймер или болестта на Паркинсон при възрастни, трябва да интерпретират данните, получени от HMC3, заедно с допълващи ги системи от микроглиални клетки, получени от възрастни първични клетки или от индуцирани плюрипотентни стволови клетки (iPSC), когато това е възможно. Накрая, данните за профила на повърхностните маркери не са напълно съгласувани: докато Ли и колегите му описват конститутивен Iba-1 и CD14 заедно с индуцируеми от интерферон-гама CD11b, CD68 и MHC клас II, [2] както първоначалната характеристика, направена от Джанаби и колегите му [1] а данните от проточна цитометрия, публикувани от Дело Русо и колеги за ATCC CRL-3304, показаха, че клетките в покой са CD14- и CD11b-отрицателни, като нито един от двата маркера не се индуцира от интерферон-гама. [3] Клонът на антителата, културалната среда и броят на пасажите оказват влияние върху тези резултати, а генетичната дрейфа при последователните пасажи е документирана като цяло за непрекъснатите линии; експресията на маркерите трябва да се потвърждава вътрешно, а не да се приема за даденост.

Вижте пълните технически характеристики и поръчайте

Приложения на HMC3-клетките

Невровъзпаление и активация на микроглиалните клетки

Изследването на невровъзпалителните заболявания представлява най-широко развитото приложение на HMC3 клетките. Ли и колегите му доказаха, че HMC3 клетките конститутивно експресират NOX4, което води до непрекъснато производство на реактивни кислородни видове и продължителна експресия на IL-6 — откритие, което позиционира тези клетки като модел за хронично, нискостепенно невровъзпаление. [2] Този постоянен възпалителен тон отразява аспекти на микроглиалната подготовка, наблюдавани при невродегенеративни състояния, като предоставя подходяща отправна точка за интервенционни проучвания.

В едно влиятелно проучване на Бек и колегите му бе изследвано инхибирането на бромодомейна на BET в HMC3 клетките чрез секвениране на РНК. [6] Авторите показаха, че BET-инхибиторът JQ1 отслабва възпалителния и миграционния отговор на активираните с LPS HMC3 клетки и идентифицираха механизма: LPS индуцира транскрипционния фактор IRF1, който директно регулира гените, свързани с хемокини, цитокини, интерферон-стимулирани и миграционни гени, а JQ1 значително намалява нивото на IRF1 заедно с неговите целеви гени. Потискането на IRF1 възпроизвежда ефекта и инхибира миграцията на микроглиалните клетки. [6] Тази работа утвърди оста BET–IRF1 като мишена за лекарствено въздействие при невровъзпалението на човешката микроглия и демонстрира пригодността на HMC3-клетките за фармакологични интервенционни изследвания на механистично ниво.

В тази линия бяха изследвани и молекулярни модели, свързани с митохондриално увреждане. Наси и колегите му установиха, че стимулацията с митохондриална ДНК и кардиолипин увеличава клетъчния оксидативен стрес в HMC3 клетките, като в същото време не успява да предизвика класически провъзпалителен отговор: експресията на HLA-DR не се повишава и не се наблюдава увеличение в секрецията нито на TNF-алфа, нито на IL-6. [7] Авторите тълкуват това като възможен ендогенен регулаторен механизъм, ограничаващ активацията на микроглиалните клетки. Отделно от това Каполи и колегите му показаха, че инхибиторът на mTOR рапамицин парадоксално засилва експресията и освобождаването на IL-6 в HMC3 клетки, активирани с коктейл от интерферон-гама/IL-1 бета, като едновременно с това намалява производството на реактивни кислородни видове — което оспорва предположенията за противовъзпалителните действия на рапамицина в имунните клетки, намиращи се в човешкия мозък. [4] Взети заедно, тези проучвания демонстрират, че HMC3-клетките представляват чувствителна, релевантна за човека система за анализиране на молекулярните пътища, лежащи в основата на невровъзпалителните заболявания.

Моделиране на болестта на Алцхаймер и невродегенеративните заболявания

Клетките HMC3 се превърнаха във важен инструмент за моделиране на приноса на микроглиалните клетки към болестта на Алцхаймер. Ранно проучване за характеризиране, проведено от Линдберг и колеги върху този клон под името CHME3, установи, че прясно разтворен амилоид бета (1–40) предизвиква дозозависимо увеличение на освобождаването на IL-6, съпътствано от дозозависима загуба на жизнеспособност. [8] Алфа-меланоцит-стимулиращият хормон не променяше индуцирания от амилоид бета отговор на IL-6, но повишаваше базовото освобождаване на IL-6 дозозависимо – ефект, приписван на подтиповете на меланокортиновия рецептор MCR3 или MCR5. [8] Тази работа потвърди, че HMC3-клетките са подходяща платформа за изучаване на връзката между амилоид-бета-пептидите и възпалителните реакции на микроглиите, които са от централно значение за патогенезата на болестта на Алцхаймер.

Гонсалес-Прието и колегите му изследваха CX3CR1 — единствения рецептор за невроналния хемокин CX3CL1 — при болестта на Алцхаймер. [9] Продукцията на CX3CR1 беше повишена в кората на мишки 5xFAD и в проби от човешки мозък с болестта на Алцхаймер, а прилагането на ребоксетин — инхибитор на обратното захващане на норадреналин — я увеличи още повече in vivo. Директното прилагане на норадреналин върху HMC3 клетки и върху първични микроглиални клетки от плъхове, напротив, инхибира производството на CX3CR1. [9] Авторите стигат до заключението, че реакциите на микроглията към норадреналин могат да бъдат променени при липса на неврони, произвеждащи CX3CL1, или други фактори, различни от микроглията — поучителен пример за това как HMC3-клетките могат да изолират автономна клетъчна реакция и по този начин да разкрият приноса на по-широкия тъканен контекст.

Проучването на дексмедетомидин, проведено от Ли и колеги, използва LPS- и ATP-стимулирани HMC3 клетки като модел на невровъзпаление, задвижвано от NLRP3 инфламазома, свързано с болестта на Алцхаймер. [5] Дексмедетомидинът потискаше освобождаването на IL-1β и IL-18 чрез каскада c-Fos/NLRP3/каспаза-1, като по този начин идентифицираше механистично нова противовъзпалителна ос в човешката микроглия. Клетките HMC3 са послужили също като модел за изследване на поляризацията на микроглията в отговор на растителни екстракти, съдържащи фитоестрогени, което допълнително разширява тяхната полезност при откриването на лекарства за невродегенеративни заболявания. [10] [11]

Вирусология и инфекции на ЦНС

Клетките HMC3 се оказаха изключително универсални за изучаване на вирусни невроинфекции, предвид човешкия им произход и ролята им като модел за първата линия на защита на микроглията в централната нервна система. Мартинес Виедма и Пикет сравниха реакцията на гостоприемника при микроглиалните клетки HMC3 и плацентарните клетки JEG-3 към инфекция с вируса Зика, като използваха панел от 84 гена на вродения и придобития имунитет, профилирани 24 и 72 часа след инфекцията. [12] Двата типа клетки показаха различни набори от диференциално експресирани гени, а анализът на сигналните пътища показа, че TLR7/8 сигнализацията е потисната в микроглиалните клетки, докато в плацентарните клетки е активирана — различие, което впоследствие беше проучено чрез siRNA експерименти. Проучването установи, че HMC3-клетките са подходяща платформа за транскриптомика на взаимодействието между гостоприемник и патоген във вирусологията на ЦНС.

Zhang и колегите му използваха HMC3-клетки, инфектирани с BoDV-1, за да демонстрират, че miR-146a улеснява вирусната репликация чрез потискане на сигналната ос на вродената имунна система IRAK1/TRAF6/NF-κB. [13] Това откритие предостави механистична представа за това как силно невротропен РНК-вирус избягва антивирусните реакции на микроглиалните клетки. В отделен модел на инфекция Ангел-Амбросио и колегите му демонстрираха за първи път, че човешкият риновирус завършва целия си вирусен цикъл в HMC3 клетки, което установява микроглията като потенциален клетъчен резервоар за усложнения в ЦНС, свързани с риновируса. [14] Тази клетъчна линия поддържа също така репликацията на вируса на чикунгуня без значителна загуба на жизнеспособност до 72 часа след инфекцията. [19]

Шарма и колегите му идентифицираха прохибитин 1/2 като вероятен рецептор за проникване на вируса на денга серотип 3 в микроглиалните клетки CHME-3 — синоним на HMC3 — като използваха тестове за свързване на протеини чрез наслагване на вируса, протеомика чрез LC-MS/MS, потискане чрез siRNA и коимунопреципитация. [15] Забележително е, че същата зависимост е установена в невронните SH-SY5Y клетки, но не и в астроглиалните U-87 MG клетки, което показва, че пътят на проникване е специфичен за всеки тип клетки. Като цяло тези вирусологични проучвания подчертават ролята на HMC3-клетките като широко приложим човешки микроглиален модел за изследване на патогенезата и стратегиите за избягване на имунната система на невротропните вируси.

Микросреда на глиобластома

Клетките HMC3 са били използвани като модел на микроглия, свързана с глиома, за да се проучи как туморните клетки на глиобластома кооптират възпалителния фенотип на микроглията. Ли и колегите му демонстрираха, че съвместното култивиране на резистентни към темозоломид клетки от глиобластома с HMC3-клетки стимулира M2-поляризацията на HMC3-клетките и увеличава секрецията на протуморогенните цитокини TGF-β и IL-6. [16] Тази поляризация беше свързана с веригата lncRNA SNHG15/miR-627-5p/CDK6, а инхибиторът на CDK4/6 палбоциклиб намали маркерите за M2, като същевременно преодоля резистентността към темозоломид в модели на ксенографти, получени от пациенти.

Тези резултати позиционират HMC3-клетките като подходящ човешки модел за изучаване на приноса на микроглията към имуносупресивната туморна микросреда на глиобластома. Възможността за моделиране на взаимодействието между микроглиите и глиобластомата in vitro с помощта на HMC3-клетки предоставя удобна система за идентифициране на терапевтични мишени, които едновременно се борят с резистентността на туморните клетки и с избягването на имунния отговор. [16]

Невропротективни средства и фармакология на лекарствата

Клетките HMC3 са широко използвани за скрининг на невропротективни средства и характеризиране на механизмите им на действие в човешката микроглия. Мартинес Лео и Сегура Кампос оцениха пептидните фракции от семена на Salvia hispanica за невропротективна активност в HMC3 клетки и установиха, че фракцията 1–3 kDa намалява производството на реактивни кислородни видове с 51,3% и понижава освобождаването на азотен оксид, TNF-алфа и IL-6, като общият защитен ефект е 79,0%. [17] Този тип изследвания илюстрира как HMC3-клетките позволяват бърз скрининг на биоактивни съединения от хранителни източници, приложим за човека.

Ma'arif и колегите му проведоха две свързани проучвания, използвайки HMC3 клетки, за да оценят фитоестрогените от растителен произход, извлечени от листата на Marsilea crenata. Фракцията на н-бутанол намали експресията на MHC клас II в клетки, активирани с интерферон-гама, което съответства на инхибиране на класическата M1 активация, въпреки че отчетената доза-реакция не беше монотонна. [10] Екстракт с 96% етанол е увеличил експресията на M2 маркера аргиназа-1; същото проучване е отчело намаление на експресията на активирания естрогенен рецептор бета при 125 и 250 ppm – резултат, който е в противоречие със самото заглавие на статията и следва да се разглежда като нерешен. [11] И двете проучвания използваха добре охарактеризирания протокол за поляризация с интерферон-гама в HMC3 клетки, за да изследват потенциалната фитоестрогенна невропротекция при постменопаузално невровъзпаление.

В областта на биоматериалите и тъканното инженерство Венкатесварлу и колегите му използваха живи HMC3 клетки, култивирани върху електроизтъкани скелетни матрици, за да разработят работен процес за обемно изображение в реално време на цитозолни калциеви колебания чрез лазерна сканираща конфокална микроскопия. [18] Тази работа разшири приложението на клетките HMC3 отвъд класическата фармакология към тестването на биоматериали от ново поколение, като илюстрира многофункционалността на тази клетъчна линия в различни технологични контексти в невронаучните изследвания.

Заключение

Клетките HMC3 — човешкият микроглиален клон 3 — се утвърдиха като основен in vitro модел за невровъзпалителни заболявания, болестта на Алцхаймер, невродегенеративни заболявания, вирусология на ЦНС, изследвания на микросредата на глиобластома и откриване на невропротективни средства. Произхождаща от човешка фетална мозъчна тъкан и иммортализирана чрез трансфекция със SV40, линията експресира ключови микроглиални маркери и реагира на определен набор от възпалителни, фармакологични и инфекциозни стимули. Изследвания като това на Baek и колегите му върху BET-инхибиторите са доказали потенциала на тази клетъчна линия за идентифициране на мишени за лекарствено въздействие при човешката микроглиална невровъзпаление. От фундаментални механистични изследвания на реактивните кислородни видове и сигнализацията на инфламазома NLRP3 до приложни скрининги на невропротективни агенти от растителен произход и тестване на биоматериали на базата на скафолд, клетките HMC3 предлагат изключителна гъвкавост — при условие, че документираните им ограничения относно биологията на TNF-алфа, азотния оксид и NOX2 се вземат предвид при проектирането на експериментите. Изследователите, които търсят валидиран, мащабируем и изцяло човешки микроглиален модел, ще открият, че HMC3-клетките са ценен ресурс за задълбочаване на разбирането за имунитета и заболяванията на мозъка. За да поръчате HMC3-клетки или да поискате допълнителна информация относно спецификациите на продукта, посетете cytion.com.

Ключови публикации

1. Janabi N, Peudenier S, Héron B (1995) Създаване на човешки микроглиални клетъчни линии след трансфекция на първични култури от ембрионални микроглиални клетки с големия Т-антиген на SV40. Neuroscience letters. PMID: 7478261
2. Li B, Bedard K, Sorce S (2009) Експресията на NOX4 в човешката микроглия води до конститутивно образуване на реактивни кислородни видове и до конститутивна експресия на IL-6. Journal of innate immunity. PMID: 20375612
3. Дело Русо С., Каполи Н., Колета И. (2018) Човешката микроглиална клетъчна линия HMC3: къде се намираме? Систематичен преглед на литературата. Journal of neuroinflammation. PMID: 30200996
4. Cappoli N, Mezzogori D, Tabolacci E (2019) Инхибиторът на mTOR киназата рапамицин усилва експресията и освобождаването на провъзпалителния цитокин интерлевкин 6, модулирайки активацията на човешките микроглиални клетки. EXCLI journal. PMID: 31645839
5. Ли Х., Джан Х., Чен М. (2018) Дексмедетомидин инхибира възпалението в микроглиалните клетки при стимулация с LPS и ATP чрез каскадите c-Fos/NLRP3/каспаза-1. Списание EXCLI. PMID: 29743866
6. Baek M, Yoo E, Choi HI (2021) Инхибиторът на BET отслабва възпалителния отговор и клетъчната миграция в човешката микроглиална клетъчна линия HMC3. Scientific reports. PMID: 33893325
7. Наси М., Де Гаетано А., Бианкини Е. (2020) Молекулярните модели, свързани с митохондриално увреждане, стимулират производството на реактивни кислородни видове в човешката микроглия. Molecular and cellular neurosciences. PMID: 32828963
8. Линдберг С., Хьорт Е., Пост С. (2005) Производство на цитокини от човешка микроглиална клетъчна линия: ефекти на бета-амилоида и алфа-меланоцит-стимулиращия хормон. Изследвания върху невротоксичността. PMID: 16371321
9. Гонсалес-Прието М., Гутиерес И.Л., Гарсия-Буено Б. (2021) Производството на CX3CR1 в микроглията се увеличава при болестта на Алцхаймер и се регулира от норадреналин. Glia. PMID: 32662924
10. Ма'ариф Б., Мирза Д.М., Хасана М. (2020) Антиневровъзпалителна активност на н-бутанолната фракция от Marsilea crenata Presl. в клетъчната линия на микроглията HMC3. Списание за фундаментална и клинична физиология и фармакология. PMID: 31967965
11. Ma'arif B, Agil M, Laswati H (2020) Повишаване на експресията на Arg1 и активирания ERβ в микроглията HMC3 чрез индуциране с 96% етанолен екстракт от листата на Marsilea crenata Presl. Списание за фундаментална и клинична физиология и фармакология. PMID: 31981453
12. Мартинес Виедма МДП, Пикет Б.Е. (2018) Характеризиране на различните ефекти от инфекцията с вируса Зика в плацентата и микроглиалните клетки. „Вируси“. PMID: 30453684
13. Zhang X, Guo Y, Xu X (2019) miR-146a стимулира репликацията на вируса на болестта на Борна 1 чрез сигналния път IRAK1/TRAF6/NF-κB. Virus research. PMID: 31330207
14. Angel-Ambrocio AH, Bautista-Carbajal P, García-León ML (2020) Микроглиалните HMC3 клетки са силно податливи на инфекция с риновирус. Virus research. PMID: 32768491
15. Шарма А., Васантапурам Р., М. Венкатасвами М. (2020) Прохибитин 1/2 посредничи при проникването на денга-3 в човешки невробластомни (SH-SY5Y) и микроглиални (CHME-3) клетки. Списание за биомедицински науки. PMID: 32306962
16. Ли З., Джан Дж., Zheng H (2019) Модулирането на веригата lncRNA SNHG15/CDK6/miR-627 чрез палбоциклиб преодолява резистентността към темозоломид и намалява M2-поляризацията на микроглията, свързана с глиома, при мултиформен глиобластом. Списание за експериментални и клинични изследвания на рака: CR. PMID: 31462285
17. Мартинес Лео Е.Е., Сегура Кампос М.Р. (2020) Невропротективен ефект на пептидните фракции от Salvia hispanica върху провъзпалителната модулация на микроглиалните клетки HMC3. Списание за хранителна биохимия. PMID: 32207175
18. Венкатесварлу К., Суман Г., Дхиани В. (2020) Триизмерно изобразяване и количествено определяне на цитозолни калциеви осцилации в реално време в микроглиални клетки, култивирани върху електроизтъкани матрици, чрез лазерна сканираща конфокална микроскопия. „Биотехнология и биоинженерство“. PMID: 32557561
19. Кадри С.У., Кумар Н., Сантошкумар Р. (2022) Инфектиране на човешката микроглиална клетъчна линия CHME-3 за изследване на невропатогенезата на вируса Чикунгуня. Списание по невровирусология. PMID: 35352315