Úvod

Bunky HMC3, známa aj ako ľudský mikrogliálny klon 3, CHME-3 alebo CHME3, patrí medzi najčastejšie používané ľudské mikrogliálne bunkové línie vo výskume neurovied. Túto líniu založili v roku 1995 Janabi, Peudenier, Héron a kolegovia prostredníctvom imortalizácie makrofágov pochádzajúcich z ľudského embryonálneho mozgu, závislou od veľkého T-antigénu vírusu SV40. [1] Bunky HMC3 si zachovávajú základné charakteristiky mikroglií, vrátane konštitutívnej expresie adaptérnej molekuly Iba-1 viažucej ionizovaný vápnik a expresie antigénov MHC triedy II indukovanej interferónom gama. [2] [3] Mikroglia, ako rezidentné bunky vrodeného imunitného systému centrálneho nervového systému, sú kľúčovými mediátormi neurozápalových ochorení, Alzheimerovej choroby a ďalších neurodegeneratívnych ochorení. Bunky HMC3 preto slúžia ako praktická ľudská in vitro platforma na štúdium aktivácie mikroglie, neuroprotektívnych látok, vírusovej neuroinfekcie a mikroprostredia nádoru glioblastómu.

Hlavné závery

• Bunky HMC3 sú imortalizované mikroglie z ľudského fetálneho mozgu, získané transfekciou veľkým T-antigénom vírusu SV40.
• Táto bunková línia konštitutívne exprimuje Iba-1 a pri stimulácii interferónom gama dochádza k zvýšeniu expresie MHC triedy II; údaje o expresii CD14, CD11b a CD68 sa v jednotlivých laboratóriách líšia a mali by sa overiť pre každú konkrétnu šaržu.
• Bunky HMC3 sú široko používaným in vitro modelom na štúdium neurozápalových ochorení, Alzheimerovej choroby a neurodegeneratívnych ochorení.
• Táto bunka je náchylná na infekciu viacerými neurotropnými vírusmi, medzi ktoré patria vírus Zika, vírus Borna 1, vírus chikungunya a rinovírus.
• Bunky HMC3 konštitutívne exprimujú NOX4 a produkujú reaktívne formy kyslíka, čo z nich robí dôležitý objekt výskumu oxidačného stresu.
• Táto bunka sa využíva v štúdiách mikroprostredia glioblastómu, vo farmakológii liekov a vo výskume nosných štruktúr z biomateriálov.
• Interleukín-1 beta – samostatne alebo v kombinácii s interferónom-gamma – je v tomto reťazci najúčinnejším zápalovým stimulantom; reakcie na LPS sú v porovnaní s tým skôr mierne a TNF-alfa a oxid dusnatý sa takmer nevyskytujú.

Čo je HMC3?

HMC3 (Cellosaurus, prístupový kód CVCL_II76) je transformovaná ľudská mikrogliálna bunková línia odvodená z fetálneho mozgu embrya vo veku 8–10 týždňov gestačného veku. Pohlavie darcu nie je špecifikované. S darcom nebola spojená žiadna choroba. Túto líniu založili Janabi a spolupracovníci v roku 1995 transfekciou primárnych kultúr embryonálnych mozgových makrofágov plazmidom kódujúcim veľký T-antigén vírusu SV40, čím vznikli štyri kontinuálne mikroglieové bunkové línie, z ktorých sa klon 3 stal najrozšírenejším. [1] Transformované bunky si zachovali makrofágové vlastnosti, ako sú adhézia a nešpecifická esterázová aktivita, a boli schopné fagocytovať častice zymosanu, hoci fagocytárna aktivita zostala na nízkej úrovni. Bunky spontánne produkovali interleukín-6, pričom sa produkcia po stimulácii interleukínom-1 alfa ešte zvýšila. [1] V rámci komplexného systematického prehľadu literatúry z roku 2018, ktorý vypracovali Dello Russo a spoluautori, boli zozbierané dostupné charakterizačné údaje o tomto klone a objasnená dôležitá nejasnosť: tá istá bunková línia bola uvádzaná pod názvami CHME3, C13-NJ a CHME-5. [3] Z prehľadu vyplynulo, že bez ohľadu na použité označenie majú tieto bunky porovnateľný antigénny a funkčný profil a mali by sa považovať za jeden experimentálny model – pričom sa však upozorňuje, že u viacerých alikvót CHME-5 nachádzajúcich sa v obehu bola zistená krížová kontaminácia bunkami gliómu potkana. Zásoba HMC3 (ATCC CRL-3304) overená organizáciou ATCC je bez tejto nejednoznačnosti.

Informácie o bunkovej kultúre HMC3

Bunky HMC3 sú odolné voči rôznym typom bazálneho média: úspešne sa kultivovali v médiách EMEM, MEM a DMEM:Ham’s F12, pričom každé z nich bolo doplnené 10 % séra. [3] Táto voľba však nie je fenotypovo neutrálna. Dello Russo a spolupracovníci uviedli, že bazálna produkcia reaktívnych foriem kyslíka bola výrazne nižšia v bunkách kultivovaných v MEM alebo DMEM:F12 ako v EMEM, čo naznačuje menej aktivovaný fenotyp v pokojovom stave. [3] Výskumníci, ktorí porovnávajú údaje z rôznych laboratórií, by preto mali spolu s číslom pasáže zaznamenať aj použité médium.

Výhody buniek HMC3

Bunky HMC3 predstavujú jedinečný a ľahko dostupný model ľudských mikrogliálnych buniek v čase, keď je ťažké získať primárne ľudské mikroglie v dostatočnom množstve pre výskum vo veľkom meradle. Táto bunka rastie adhezívne a jej kultivácia je jednoduchá. Kľúčové je, že bunky konštitutívne exprimujú Iba-1, v reakcii na interferón-gamma zvyšujú expresiu MHC triedy II a – v prípade zásob overených organizáciou ATCC – transkribujú nedávno definované charakteristické gény mikroglií CX3CR1, CSF1R, P2RY12 a TMEM119, čím poskytujú biologicky overenú náhradu za primárne ľudské mikroglie. [2] [3] Vďaka týmto vlastnostiam sú bunky HMC3 široko využívanou platformou pre mechanistické štúdie neurozápalových ochorení, ktoré si vyžadujú reprodukovateľný, škálovateľný a úplne ľudský bunkový materiál.

Ďalšou prednosťou buniek HMC3 je ich citlivosť na definovanú skupinu zápalových podnetov. Najúčinnejším induktorom interleukínu-6 je interleukín-1 beta, ktorý zvyšuje bazálne uvoľňovanie až päťdesiatnásobne a pôsobí synergicky s interferónom-gamma; LPS a amyloidové beta-peptidy vyvolávajú miernejšie, koncentráciou závislé zvýšenia. [3] Tento stupňovitý, reprodukovateľný profil reakcie umožňuje vykonávať experimenty závislé od koncentrácie a časového priebehu, ktoré sa v prípravkoch z primárnych buniek ťažko realizujú. Ich citlivosť na prozápalové aj protizápalové podnety – vrátane farmakologických látok, ako sú rapamycín a dexmedetomidín – ďalej rozširuje ich využiteľnosť vo farmakológii liekov a pri skríningu neuroprotektívnych látok. [4] [5] Tieto bunky sú navyše citlivé na viacero neurotropných vírusov, čo rozširuje ich využitie vo výskume neuroinfekciológie.

Obmedzenia buniek HMC3

Ako transformovaná bunková línia nesú bunky HMC3 veľký T-antigén vírusu SV40, ktorý im zaisťuje nesmrteľnosť, ale zároveň mení niektoré aspekty bunkovej biológie v porovnaní s primárnymi mikrogliami. Li a spolupracovníci opísali neočakávané vzory expresie izoforiem NOX – hojný NOX4, ale takmer žiadnu mRNA NOX2 –, čo je v kontraste s primárnymi mikrogliami a obmedzuje využiteľnosť tejto línie ako modelu pre respiračný výbuch sprostredkovaný NOX2. [2] [3] Výskumníci by preto mali overiť, či sa konkrétna skúmaná dráha v tejto línii verne reprodukuje, skôr než vyvodia všeobecné závery o mechanizmoch.

Pozornosť si zasluhujú ešte tri ďalšie obmedzenia. Po prvé, repertoár zápalových mediátorov je neúplný: Bunky HMC3 vylučujú iba zanedbateľné množstvá protizápalového cytokínu IL-10 (v rozmedzí niekoľkých pg/ml), produkujú málo alebo žiadny TNF-alfa, a to ani spontánne, ani po prozápalovej aktivácii, a vykazujú konštitutívne zvýšené hladiny IL-6, ktoré sú riadené reaktívnymi formami kyslíka závislými od NOX4. [2] [3] Po druhé, a v ostrom kontraste s mikrogliou hlodavcov, bunky HMC3 v pokojovom stave nevyjadrujú iNOS a po stimulácii LPS, LPS v kombinácii s interferónom-gammou, IL-1 beta alebo TNF-alfa nebola pozorovaná ani indukcia iNOS, ani merateľná akumulácia nitritov. [3] Tento model preto nie je vhodný pre štúdie zamerané na os oxidu dusnatého.

Po tretie, táto bunka bola vytvorená z tkaniva mozgu plodu, čo znamená, že jej transkripčný a funkčný profil sa môže líšiť od stavov mikroglie u dospelých, ktoré súvisia s neurodegeneratívnymi ochoreniami v pokročilom veku. Výskumníci, ktorí modelujú Alzheimerovu chorobu alebo Parkinsonovu chorobu u dospelých, by mali údaje odvodené z HMC3 interpretovať spolu s komplementárnymi systémami mikroglií pochádzajúcimi z dospelých primárnych buniek alebo z iPSC, ak je to možné. Nakoniec, správy o profile povrchových markerov nie sú úplne zhodné: zatiaľ čo Li a spolupracovníci opísali konštitutívny Iba-1 a CD14 spolu s interferónom-gamma indukovateľnými CD11b, CD68 a MHC triedy II, [2] ako pôvodná charakteristika od Janabiho a kolegov [1] a údaje z prietokovej cytometrie, ktoré uviedli Dello Russo a spolupracovníci pre kmeň ATCC CRL-3304, ukázali, že bunky v pokojovom stave sú CD14- a CD11b-negatívne, pričom ani jeden z týchto markerov nebol indukovaný interferónom-gammom. [3] Na tieto výsledky majú vplyv klon protilátky, kultivačné médium aj počet pasáží, pričom u kontinuálnych línií je vo všeobecnosti zdokumentovaná genetická drift pri sériových pasážach; expresiu markéra by sa malo potvrdiť interne, a nie len predpokladať.

Zobraziť kompletné technické údaje a objednať

Využitie buniek HMC3

Neurozápal a aktivácia mikroglií

Štúdium neurozápalových ochorení predstavuje najrozvinutejšie využitie buniek HMC3. Li a kolegovia preukázali, že bunky HMC3 konštitutívne exprimujú NOX4, čo vedie k nepretržitej produkcii reaktívnych foriem kyslíka a trvalej expresii IL-6 – tento objav zaradil tieto bunky medzi modely chronického, mierneho neurozápalu. [2] Tento konštitutívny zápalový tón odzrkadľuje aspekty primingu mikroglií pozorované pri neurodegeneratívnych ochoreniach, čím poskytuje relevantnú východiskovú úroveň pre intervenčné štúdie.

Vplyvná štúdia Baeka a kolegov skúmala inhibíciu bromodomény BET v bunkách HMC3 pomocou sekvenovania RNA. [6] Autori ukázali, že inhibítor BET JQ1 oslabil zápalovú a migračnú odpoveď buniek HMC3 aktivovaných LPS, a identifikovali mechanizmus: LPS indukuje transkripčný faktor IRF1, ktorý priamo reguluje gény chemokínov, cytokínov, génov stimulovaných interferónom a génov súvisiacich s migráciou, pričom JQ1 výrazne znižuje hladinu IRF1 spolu s jeho cieľovými génmi. Potlačenie expresie IRF1 reprodukovalo tento účinok a inhibovalo migráciu mikroglií. [6] Táto práca potvrdila os BET–IRF1 ako cieľ vhodný na liečbu pri neurozápale v ľudských mikrogliách a preukázala vhodnosť buniek HMC3 pre farmakologické intervenčné štúdie na mechanistickej úrovni.

V tejto línii boli tiež skúmané molekulárne vzory spojené s poškodením mitochondrií. Nasi a kolegovia zistili, že stimulácia mitochondriálnou DNA a kardiolipínom zvýšila bunkový oxidačný stres v bunkách HMC3, pričom však výrazne nedokázala vyvolať klasickú prozápalovú odpoveď: expresia HLA-DR nebola zvýšená a nezvýšilo sa ani vylučovanie TNF-alfa, ani IL-6. [7] Autori to interpretovali ako možný endogénny regulačný mechanizmus obmedzujúci aktiváciu mikroglií. Samostatne Cappoli a spolupracovníci ukázali, že inhibítor mTOR rapamycín paradoxne zvýšil expresiu a uvoľňovanie IL-6 v bunkách HMC3 aktivovaných kokteilom interferónu-gamma a IL-1 beta, pričom súčasne znížil produkciu reaktívnych foriem kyslíka — čo spochybňuje predpoklady o protizápalových účinkoch rapamycínu v imunitných bunkách nachádzajúcich sa v ľudskom mozgu. [4] Tieto štúdie spoločne dokazujú, že bunky HMC3 predstavujú citlivý systém relevantný pre človeka, ktorý umožňuje analyzovať molekulárne dráhy ležiace v základe neurozápalových ochorení.

Modelovanie Alzheimerovej choroby a neurodegeneratívnych ochorení

Bunky HMC3 sa stali dôležitým nástrojom na modelovanie príspevku mikroglií k Alzheimerovej chorobe. V rannej charakterizačnej štúdii, ktorú vykonali Lindberg a spolupracovníci na tomto klone pod názvom CHME3, sa zistilo, že čerstvo rozpustený amyloid beta(1–40) vyvolával dávkovo závislé zvýšenie uvoľňovania IL-6 spolu s dávkovo závislou stratou životaschopnosti. [8] Alfa-melanocyt-stimulujúci hormón nemodifikoval amyloid-beta-indukovanú odpoveď IL-6, ale zvýšil bazálne uvoľňovanie IL-6 v závislosti od dávky, čo je účinok pripisovaný podtypom melanokortínových receptorov MCR3 alebo MCR5. [8] Táto práca potvrdila, že bunky HMC3 sú vhodnou platformou na štúdium vzťahu medzi amyloidnými beta-peptidmi a zápalovými reakciami mikroglií, ktoré sú kľúčové pre patogenézu Alzheimerovej choroby.

González-Prieto a kolegovia skúmali CX3CR1 – jediný receptor pre neurónový chemokín CX3CL1 – pri Alzheimerovej chorobe. [9] Produkcia CX3CR1 bola zvýšená v kôre myší 5xFAD a v vzorkách mozgu ľudí s Alzheimerovou chorobou, pričom podávanie reboxetínu, inhibítora spätného vychytávania noradrenalínu, ju in vivo ešte viac zvýšilo. Naopak, priama aplikácia noradrenalínu na bunky HMC3 a na primárne mikroglie potkanov inhibovala produkciu CX3CR1. [9] Autori dospeli k záveru, že reakcie mikroglií na noradrenalín môžu byť zmenené v prípade absencie neurónov produkujúcich CX3CL1 alebo v dôsledku pôsobenia iných faktorov, ktoré nesúvisia s mikrogliami – ide o poučný príklad toho, ako môžu bunky HMC3 izolovať autonómnu bunkovú reakciu a tým odhaliť príspevok širšieho tkanivového kontextu.

Štúdia Li a kolegov o dexmedetomidíne použila bunky HMC3 stimulované LPS a ATP ako model neurozápalu riadeného inflamazómom NLRP3, ktorý súvisí s Alzheimerovou chorobou. [5] Dexmedetomidín potláčal uvoľňovanie IL-1β a IL-18 prostredníctvom kaskády c-Fos/NLRP3/kaspáza-1, čím identifikoval mechanisticky novú protizápalovú os v ľudských mikrogliách. Bunky HMC3 slúžili aj ako model na skúmanie polarizácie mikroglií v reakcii na rastlinné extrakty obsahujúce fytoestrogény, čím sa ďalej rozšírila ich využiteľnosť pri vývoji liekov na neurodegeneratívne ochorenia. [10] [11]

Virológia a infekcie centrálneho nervového systému

Bunky HMC3 sa ukázali ako veľmi univerzálne pri štúdiu vírusových neuroinfekcií, vzhľadom na ich ľudský pôvod a ich postavenie ako modelu prvej línie obrany mikroglií v centrálnom nervovom systéme. Martinez Viedma a Pickett porovnali reakciu hostiteľa mikrogliálnych buniek HMC3 a placentárnych buniek JEG-3 na infekciu vírusom Zika pomocou panelu 84 génov vrodeného a adaptívneho imunitného systému, ktorých profil bol stanovený 24 a 72 hodín po infekcii. [12] Oba typy buniek vykazovali odlišné súbory diferencovane exprimovaných génov a analýza signálnych dráh naznačila, že signálna dráha TLR7/8 bola v mikrogliálnych bunkách potlačená, zatiaľ čo v placentárnych bunkách bola aktivovaná — túto divergenciu následne overili experimenty s siRNA. Štúdia potvrdila, že bunky HMC3 sú vhodnou platformou pre transkriptomiku vzťahu hostiteľ–patogén vo virológii centrálneho nervového systému.

Zhang a spolupracovníci použili bunky HMC3 infikované vírusom BoDV-1 na preukázanie, že miR-146a uľahčuje vírusovú replikáciu potlačením osi vrodenej imunitnej signalizácie IRAK1/TRAF6/NF-κB. [13] Tento zistenie poskytlo mechanistický pohľad na to, ako vysoko neurotropný RNA vírus obchádza antivírusové reakcie mikroglií. V samostatnom infekčnom modeli Angel-Ambrocio a spolupracovníci po prvýkrát preukázali, že ľudský rinovírus dokončí celý svoj vírusový cyklus v bunkách HMC3, čím sa mikroglia stala potenciálnym bunkovým rezervoárom pre komplikácie v CNS spojené s rinovírusom. [14] Táto bunka tiež podporuje replikáciu vírusu chikungunya bez výraznej straty životaschopnosti až do 72 hodín po infekcii. [19]

Sharma a kolegovia identifikovali prohibitín 1/2 ako predpokladaný vstupný receptor pre vírus dengue sérotypu 3 v mikrogliálnych bunkách CHME-3 – synonymum pre HMC3 – pomocou testov viazania proteínov s vírusovým prekrytím, proteomiky LC-MS/MS, potlačenia siRNA a koimunoprecipitácie. [15] Je pozoruhodné, že rovnaká závislosť bola zistená v neurónových bunkách SH-SY5Y, avšak nie v astrogliálnych bunkách U-87 MG, čo naznačuje, že vstupná cesta je špecifická pre daný typ buniek. V súhrne tieto virologické štúdie potvrdzujú, že bunky HMC3 predstavujú široko použiteľný model ľudských mikrogliálnych buniek na skúmanie patogenézy a stratégií vyhýbania sa imunitnému systému neurotropných vírusov.

Mikroprostredie glioblastómového nádoru

Bunky HMC3 sa používajú ako model mikroglie asociovanej s gliómom na štúdium toho, ako nádorové bunky glioblastómu využívajú zápalový fenotyp mikroglie. Li a spolupracovníci preukázali, že spoločná kultivácia buniek glioblastómu rezistentných na temozolomid s bunkami HMC3 podporovala polarizáciu buniek HMC3 do typu M2 a zvýšila sekréciu protumorigénnych cytokínov TGF-β a IL-6. [16] Táto polarizácia bola spojená s okruhom lncRNA SNHG15/miR-627-5p/CDK6 a inhibítor CDK4/6 palbociclib znížil hladiny markerov M2 a zároveň prekonal rezistenciu voči temozolomidu v modeloch xenotransplantátov odvodených od pacientov.

Tieto zistenia stavajú bunky HMC3 do pozície relevantného ľudského modelu na štúdium príspevku mikroglií k imunosupresívnemu mikroprostrediu glioblastómu. Schopnosť modelovať interakciu mikroglií a glioblastómu in vitro pomocou buniek HMC3 poskytuje praktický systém na identifikáciu terapeutických cieľov, ktoré súčasne riešia rezistenciu nádorových buniek a ich únik pred imunitným systémom. [16]

Neuroprotektívne látky a farmakológia liekov

Bunky HMC3 sa vo veľkej miere využívajú na skríning neuroprotektívnych látok a charakterizovanie ich mechanizmov účinku v ľudskej mikroglie. Martínez Leo a Segura Campos hodnotili peptidové frakcie zo semien Salvia hispanica z hľadiska neuroprotektívnej aktivity v bunkách HMC3 a zistili, že frakcia s molekulovou hmotnosťou 1–3 kDa znížila produkciu reaktívnych foriem kyslíka o 51,3 % a znížila uvoľňovanie oxidu dusnatého, TNF-alfa a IL-6, pričom celkový ochranný účinok dosiahol 79,0 %. [17] Tento typ štúdie ilustruje, ako bunky HMC3 umožňujú rýchly skríning bioaktívnych zlúčenín pochádzajúcich z potravín, ktorý je relevantný pre človeka.

Ma’arif a spolupracovníci vykonali dve súvisiace štúdie s využitím buniek HMC3 na hodnotenie fytoestrogénov rastlinného pôvodu z listov Marsilea crenata. Frakcia n-butanolu znížila expresiu MHC triedy II v bunkách aktivovaných interferónom-gamma, čo je v súlade s inhibíciou klasickej aktivácie M1, hoci uvádzaná závislosť dávka–odozva nebola monotónna. [10] Extrakt s 96 % obsahom etanolu zvýšil expresiu markera M2 arginázy-1; tá istá štúdia uvádzala pokles expresie aktivovaného estrogénového receptora beta pri koncentráciách 125 a 250 ppm, čo je výsledok, ktorý je v rozpore s názvom samotnej štúdie a mal by sa považovať za nevyriešený. [11] Obidve štúdie využili dobre charakterizovaný protokol polarizácie interferónom-gamma v bunkách HMC3 na skúmanie potenciálnej fytoestrogénnej neuroprotekcie pri postmenopauzálnom neurozápale.

V oblasti biomateriálov a tkanivového inžinierstva Venkateswarlu a kolegovia použili živé bunky HMC3 kultivované na elektrospunových nosných matriciach na vývoj pracovného postupu volumetrického zobrazovania v reálnom čase pre oscilácie cytosolického vápnika pomocou laserovej skenovacej konfokálnej mikroskopie. [18] Táto práca rozšírila uplatnenie buniek HMC3 za hranice klasickej farmakológie do testovania biomateriálov novej generácie, čím ilustrovala všestrannosť tejto buneckej línie v rôznych technologických kontextoch neurovedeckého výskumu.

Záver

Bunky HMC3 — ľudský mikrogliálny klon 3 — sa etablovali ako základný in vitro model pre neurozápalové ochorenia, Alzheimerovu chorobu, neurodegeneratívne ochorenia, virológiu CNS, výskum mikroprostredia glioblastómových nádorov a objavovanie neuroprotektívnych látok. Táto bunka, získaná z tkaniva ľudského fetálneho mozgu a imortalizovaná transfekciou vírusom SV40, exprimuje kľúčové markery mikroglií a reaguje na definovaný rozsah zápalových, farmakologických a infekčných podnetov. Štúdie, ako napríklad práca Baeka a kolegov zameraná na inhibítory BET, preukázali schopnosť tejto línie identifikovať liečiteľné ciele v neurozápale ľudských mikrogliálnych buniek. Od základných mechanistických štúdií reaktívnych foriem kyslíka a signalizácie inflamasómu NLRP3 až po aplikované skríningy neuroprotektívnych látok rastlinného pôvodu a testovanie biomateriálov na báze nosných štruktúr ponúkajú bunky HMC3 výnimočnú univerzálnosť – za predpokladu, že sa pri navrhovaní experimentov zohľadnia ich zdokumentované obmedzenia týkajúce sa biológie TNF-alfa, oxidu dusnatého a NOX2. Výskumníci, ktorí hľadajú overený, škálovateľný a plne ľudský model mikroglií, nájdu v bunkách HMC3 cenný zdroj pre hlbšie pochopenie imunity a ochorení mozgu. Ak si chcete objednať bunky HMC3 alebo požiadať o ďalšie informácie o špecifikáciách produktu, navštívte stránku cytion.com.

Kľúčové publikácie

1. Janabi N, Peudenier S, Héron B (1995) Vytvorenie ľudských mikrogliálnych bunkových línií po transfekcii primárnych kultúr embryonálnych mikrogliálnych buniek veľkým T-antigénom vírusu SV40. Neuroscience letters. PMID: 7478261
2. Li B, Bedard K, Sorce S (2009) Expresia NOX4 v ľudských mikrogliálnych bunkách vedie ku konštitutívnej tvorbe reaktívnych foriem kyslíka a ku konštitutívnej expresii IL-6. Journal of innate immunity. PMID: 20375612
3. Dello Russo C, Cappoli N, Coletta I (2018) Ľudská mikrogliálna bunková línia HMC3: kde sa nachádzame? Systematický prehľad literatúry. Journal of neuroinflammation. PMID: 30200996
4. Cappoli N, Mezzogori D, Tabolacci E (2019) Inhibítor kinázy mTOR rapamycín zvyšuje expresiu a uvoľňovanie prozápalového cytokínu interleukínu 6, čím moduluje aktiváciu ľudských mikrogliálnych buniek. EXCLI journal. PMID: 31645839
5. Li H, Zhang X, Chen M (2018) Dexmedetomidín inhibuje zápal v mikrogliálnych bunkách pri stimulácii LPS a ATP prostredníctvom kaskád c-Fos/NLRP3/kaspáza-1. Časopis EXCLI. PMID: 29743866
6. Baek M, Yoo E, Choi HI (2021) Inhibítor BET zmierňuje zápalovú reakciu a migráciu buniek v ľudskej mikrogliálnej buneckej línii HMC3. Scientific reports. PMID: 33893325
7. Nasi M, De Gaetano A, Bianchini E (2020) Molekulárne vzory spojené s poškodením mitochondrií stimulujú produkciu reaktívnych foriem kyslíka v ľudských mikrogliálnych bunkách. Molecular and cellular neurosciences. PMID: 32828963
8. Lindberg C, Hjorth E, Post C (2005) Produkcia cytokínov ľudskou mikrogliálnou bunkovou líniou: vplyv beta-amyloidu a alfa-melanocyt-stimulujúceho hormónu. Neurotoxicity research. PMID: 16371321
9. González-Prieto M, Gutiérrez IL, García-Bueno B (2021) Produkcia CX3CR1 v mikroglii sa pri Alzheimerovej chorobe zvyšuje a je regulovaná noradrenalínom. Glia. PMID: 32662924
10. Ma'arif B, Mirza DM, Hasanah M (2020) Antineurozápalová aktivita n-butanolovej frakcie Marsilea crenata Presl. v bunkovej línii mikroglií HMC3. Časopis základnej a klinickej fyziológie a farmakológie. PMID: 31967965
11. Ma'arif B, Agil M, Laswati H (2020) Zvýšenie expresie Arg1 a aktivovaného ERβ v mikroglii HMC3 indukciou 96 % etanolovým extraktom z listov Marsilea crenata Presl. Časopis základnej a klinickej fyziológie a farmakológie. PMID: 31981453
12. Martinez Viedma MDP, Pickett BE (2018) Charakterizácia rôznych účinkov infekcie vírusom Zika na placentu a bunky mikroglie. Viruses. PMID: 30453684
13. Zhang X, Guo Y, Xu X (2019) miR-146a podporuje replikáciu vírusu Borna disease 1 prostredníctvom signálnej dráhy IRAK1/TRAF6/NF-κB. Virus research. PMID: 31330207
14. Angel-Ambrocio AH, Bautista-Carbajal P, García-León ML (2020) Mikroglia HMC3 sú vysoko náchylné na infekciu rinovírusom. Virus research. PMID: 32768491
15. Sharma A, Vasanthapuram R, M Venkataswamy M (2020) Prohibitín 1/2 sprostredkováva vstup vírusu dengue-3 do ľudských neuroblastómových (SH-SY5Y) a mikrogliových (CHME-3) buniek. Journal of biomedical science. PMID: 32306962
16. Li Z, Zhang J, Zheng H (2019) Modulácia lncRNA SNHG15/CDK6/miR-627 palbociclibom prekonáva rezistenciu na temozolomid a znižuje M2-polarizáciu mikroglií asociovaných s gliómom pri glioblastóme multiforme. Časopis experimentálneho a klinického výskumu rakoviny: CR. PMID: 31462285
17. Martínez Leo EE, Segura Campos MR (2020) Neuroprotektívny účinok peptidových frakcií Salvia hispanica na prozápalovú moduláciu mikrogliálnych buniek HMC3. Journal of food biochemistry. PMID: 32207175
18. Venkateswarlu K, Suman G, Dhyani V (2020) Trojrozmerné zobrazovanie a kvantifikácia oscilácií cytosolického vápnika v reálnom čase v mikrogliálnych bunkách kultivovaných na elektrospunových matriciach pomocou laserovej skenovacej konfokálnej mikroskopie. Biotechnology and bioengineering. PMID: 32557561
19. Qadri SW, Kumar N, Santhoshkumar R (2022) Infekcia ľudskej mikrogliálnej buneckej línie CHME-3 na štúdium neuropatogenézy vírusu Chikungunya. Journal of neurovirology. PMID: 35352315