Células CESS

A linhagem celular CESS é uma linhagem de células linfoblastoides B derivada de um paciente humano com leucemia. Essa linhagem celular é comumente utilizada para estudar a produção de imunoglobulinas, particularmente a secreção de IgG, devido à sua forte resposta à estimulação por citocinas. As células CESS são transformadas pelo EBV e apresentam marcadores de superfície característicos de células B maduras, como CD19 e CD38. Elas expressam a classe sIgG1 de imunoglobulinas e servem como modelo para o estudo da diferenciação e função das células B, incluindo respostas imunes reguladas por citocinas como a interleucina-6 (IL-6), também conhecida como fator de estimulação das células B 2 (BSF-2). A IL-6 desempenha um papel crucial na estimulação da produção de imunoglobulinas nas células CESS, tornando-as um modelo valioso para investigar as respostas das células B em pesquisas imunológicas.

Além disso, as células CESS têm sido fundamentais em estudos focados na sinalização celular e na apoptose. Notavelmente, demonstrou-se que essas células produzem e respondem ao Fator de Crescimento Nervoso (NGF) por meio de um mecanismo de sinalização autócrina, expressando receptores de NGF de alta e baixa afinidade. O bloqueio da sinalização do NGF com anticorpos ou inibidores específicos induz a apoptose nas células CESS, caracterizada pela fosforilação de Bcl-2 e pela ativação da via p38 MAPK. Isso torna as células CESS um importante modelo para a compreensão dos mecanismos moleculares da sobrevivência e da apoptose das células B, particularmente no contexto da sinalização do NGF e de sua regulação das proteínas da família Bcl-2.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.