Células KG-1a

A linhagem celular KG-1a é uma sublinhagem derivada da linhagem celular KG-1 original, que foi estabelecida a partir da medula óssea de um paciente diagnosticado com leucemia mieloide aguda (LMA). As células KG-1a são classificadas como uma linhagem celular de leucemia mieloide humana e se caracterizam particularmente por seu estado imaturo e indiferenciado. Ao contrário das células KG-1 originais, que se encontram principalmente no estágio de mieloblastos, as células KG-1a apresentam um fenótipo mais primitivo, assemelhando-se a progenitores mieloides precoces ou mesmo a células-tronco. Isso as torna uma ferramenta inestimável para o estudo da hematopoiese, da progressão da leucemia e dos mecanismos moleculares subjacentes à diferenciação mieloide.

As células KG-1a expressam vários marcadores de superfície típicos de progenitores hematopoiéticos precoces, como CD34, CD38 e HLA-DR, ao mesmo tempo em que não apresentam marcadores associados a células mieloides maduras. Esse perfil as torna altamente adequadas para pesquisas em biologia de células-tronco e para o desenvolvimento de terapias contra a leucemia. Além disso, as células KG-1a são frequentemente utilizadas em ensaios de triagem de medicamentos para avaliar a eficácia de potenciais compostos antileucêmicos, particularmente aqueles direcionados às células-tronco leucêmicas. Sua capacidade de manter um estado indiferenciado in vitro também fornece um modelo robusto para estudos de expressão gênica e ensaios funcionais relacionados à patogênese da leucemia.

Assim como outras linhagens celulares derivadas de tecido humano, as células KG-1a destinam-se exclusivamente ao uso em pesquisa e não são adequadas para aplicações terapêuticas ou in vivo. Elas exigem manuseio cuidadoso em condições estéreis, e suas características de crescimento requerem condições específicas de cultura, incluindo o uso do meio RPMI-1640 suplementado com soro fetal bovino. Pesquisadores que utilizam a linhagem celular KG-1a podem obter insights significativos sobre os estágios iniciais da transformação leucêmica e o papel dos progenitores hematopoiéticos na biologia do câncer.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.