Células L-591

A linhagem celular L-591 é uma das várias linhagens celulares neoplásicas derivadas de pacientes com doença de Hodgkin, especificamente do subtipo nodular esclerosante. Ela foi estabelecida como parte de um grupo de linhas celulares de linfoma de Hodgkin, incluindo as linhas L-428 e L-540, e tem sido fundamental para o avanço na compreensão dessa neoplasia hematológica. As células L-591 são caracterizadas pela aneuploidia e apresentam várias anomalias cromossômicas estruturais e numéricas, o que é indicativo de sua origem neoplásica. A linhagem é particularmente valiosa na pesquisa devido aos seus padrões cromossômicos distintos e à sua capacidade de proliferar in vitro, tornando-a um modelo confiável para o estudo dos mecanismos celulares do linfoma de Hodgkin.

Uma das características definidoras das células L-591 é seu imunofenótipo. As células expressam antígenos do tipo Ia e receptores associados às células T, mas não apresentam marcadores típicos de outras linhagens hematopoiéticas, como células mieloides, monócitos e macrófagos. Notavelmente, as células L-591 não produzem imunoglobulinas de superfície ou citoplasmáticas, nem apresentam antígenos específicos do vírus de Epstein-Barr (EBV), como o EBNA. Essa ausência de imunoglobulinas e de antígenos do EBV distingue a L-591 de outras linhagens celulares de linfoma de Hodgkin EBV-positivas e destaca sua utilidade na exploração das especificidades da patologia do linfoma de Hodgkin que são independentes da infecção pelo EBV.

A linhagem celular L-591 é morfologicamente semelhante às células de Reed-Sternberg (RS) e de Hodgkin (H), características do linfoma de Hodgkin. Essas células desempenham um papel crucial na pesquisa da doença de Hodgkin, servindo como modelo para a compreensão da patogênese da doença e para a identificação de possíveis alvos terapêuticos. As características únicas da L-591, combinadas com seu uso consolidado em ambientes laboratoriais, tornam-na uma ferramenta essencial no estudo do linfoma de Hodgkin, contribuindo significativamente para o conjunto de conhecimentos sobre essa neoplasia complexa.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.