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CTX
Tissue
Cérebro (córtex cerebral)
Disease
Neuroepitélio cortical fetal normal; linhagem de células-tronco neurais condicionalmente imortalizadas

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CTX

Cell line · Product number 305358

CTX (also designated CTX0E03) is a conditionally immortalized human neural stem cell line derived from first-trimester human fetal cortical neuroepitheliu...

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01General information

Description

A CTX (também conhecida como CTX0E03) é uma linhagem de células-tronco neurais humanas condicionalmente imortalizadas, derivada do neuroepitélio cortical fetal humano do primeiro trimestre. A linhagem foi gerada por integração retroviral de um transgene de fusão c-mycERTAM, que estimula a proliferação celular apenas na presença de 4-hidroxitamoxifeno (4-OHT). Na ausência de 4-OHT e em meio livre de mitógenos, as células CTX0E03 sofrem parada de crescimento e se diferenciam em neurônios e astrócitos, mantendo a capacidade de diferenciação multipotente. A linhagem é clonal, possui cariótipo humano normal (46,XY) e foi desenvolvida em condições compatíveis com as BPF (Boas Práticas de Fabricação) para possível aplicação clínica.

A CTX0E03 foi avaliada em modelos pré-clínicos de acidente vascular cerebral isquêmico (modelo de ratos com oclusão da artéria cerebral média [MCAo]), nos quais as células implantadas promoveram uma recuperação significativa da função sensório-motora. A linhagem entrou em ensaios clínicos para o tratamento do AVC. Ela também é utilizada como modelo in vitro para a biologia de células-tronco neurais, diferenciação de neurônios corticais, pesquisa sobre a doença de Alzheimer (estudos de toxicidade do Abeta) e triagem neurofarmacológica. O sistema de imortalização condicional torna o CTX0E03 particularmente adequado para estudos de segurança e eficácia, já que a proliferação pode ser desativada pela remoção do 4-OHT antes do transplante.

Tissue
Cérebro (córtex cerebral)
Disease
Neuroepitélio cortical fetal normal; linhagem de células-tronco neurais condicionalmente imortalizadas
Applications
Biologia das células-tronco neurais; diferenciação de neurônios corticais; pesquisa sobre acidente vascular cerebral; modelagem de doenças neurodegenerativas; pesquisa sobre a doença de Alzheimer; triagem neurofarmacológica; pesquisa em terapia celular

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: Contains a single-copy retroviral c-mycERTAM conditional immortalization transgene. Proliferation is 4-OHT-dependent. Not tumorigenic in vivo. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Semelhante a células-tronco neurais (bipolar, alongada)
Cell type
Células-tronco neurais
Doubling time
50 a 60 horas

04Identifiers

Citation
CTX (número de catálogo da Cytion 305358)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_C2BI

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase, 5 min., 37 °C
Subculturing
Quando atingirem 70–80% de confluência, aspirar o meio, lavar com PBS (sem Ca²⁺/Mg²⁺), adicionar Accutase e incubar por 5–10 min a 37 °C. Neutralize com meio completo, centrifugue a 300 × g por 5 minutos, ressuspenda em meio fresco com 4-OHT e replante em frascos pré-revestidos. Revestir os frascos com laminina (10 μg/ml em PBS) por 1 hora a 37 °C antes da semeadura.
Split ratio
1 a 3
Seeding density
1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
A cada 3 a 5 dias (dependendo da densidade da cultura)