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HROC18
Tissue
Cólon (ceco), UICC I
Disease
Adenocarcinoma primário, estágio TNM T2N0M0 R0L0V0, grau G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
Metastatic site
Não aplicável (estágio I da UICC; TNM T2N0M0; sem metástases regionais ou à distância)
Synonyms
HROC 18

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HROC18

Cell line · Product number 300808

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher since 2006. HROC18 was derived from a primary...

US$800.00excl. tax and shipping
Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description
Esta é uma das linhas celulares de uma série de linhas celulares tumorais que vêm sendo estabelecidas pelo PD Dr. Michael Linnebacher desde 2006. A HROC18 foi derivada de um adenocarcinoma de células claras primário. As células são globulares, com contornos indistintos, apresentam uma alta relação núcleo/citoplasma e exibem tanto microvilosidades quanto desmossomos. Elas podem ser cultivadas em ágar mole.
Tissue
Cólon (ceco), UICC I
Disease
Adenocarcinoma primário, estágio TNM T2N0M0 R0L0V0, grau G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
Metastatic site
Não aplicável (estágio I da UICC; TNM T2N0M0; sem metástases regionais ou à distância)
Applications
Pesquisa sobre câncer colorretal; biologia do câncer colorretal em estágio inicial; modelagem do câncer colorretal com mutações nos genes APC/p53; avaliação da sensibilidade a medicamentos e de terapias direcionadas; imunologia do câncer colorretal; estudos com biobanco de HROC correspondentes aos pacientes
Synonyms
  • HROC 18

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Células epiteliais
Tumourigenic
Sim, em camundongos nude imunossuprimidos
Ploidy status
Aneuploide
MSI status
MSS
Doubling time
30 horas

04Identifiers

Citation
HROC18 (número de catálogo da Cytion 300808)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0B45

05Expression and susceptibility

Protein expression
Beta-actina, osteopontina, PTEN
Antigen expression
CD15+, CD24+, CD44+, CD55+, CD58+, CD50+, CD54+, CD66acde+, CD71+, CD102+, CD326+, CD80-, CD86-, EpCAM+, HLA-A2+, EGFR+
Mutational profile
APC mutante, p53 mutante, K-Ras selvagem, N-Ras selvagem, H-Ras selvagem, B-RAF selvagem, PIK3CA mutante
Viruses
Isento de vírus patogênicos para o ser humano, como HBV, HCV e HIV.

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Split ratio
1 a 3
Seeding density
2 × 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
A cada 3 a 5 dias
Post-thaw recovery
1 a 2 semanas
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
65 anos
Ethnicity
caucasiano