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- Tissue
- Cólon (ceco), UICC I
- Disease
- Adenocarcinoma primário, estágio TNM T2N0M0 R0L0V0, grau G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
- Metastatic site
- Não aplicável (estágio I da UICC; TNM T2N0M0; sem metástases regionais ou à distância)
- Synonyms
- HROC 18
Documents
HROC18
Cell line · Product number 300808
This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher since 2006. HROC18 was derived from a primary...
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01General information
- Description
- Esta é uma das linhas celulares de uma série de linhas celulares tumorais que vêm sendo estabelecidas pelo PD Dr. Michael Linnebacher desde 2006. A HROC18 foi derivada de um adenocarcinoma de células claras primário. As células são globulares, com contornos indistintos, apresentam uma alta relação núcleo/citoplasma e exibem tanto microvilosidades quanto desmossomos. Elas podem ser cultivadas em ágar mole.
- Tissue
- Cólon (ceco), UICC I
- Disease
- Adenocarcinoma primário, estágio TNM T2N0M0 R0L0V0, grau G2, Lk(n) + 0, ∑ Lk(n) 28
- Metastatic site
- Não aplicável (estágio I da UICC; TNM T2N0M0; sem metástases regionais ou à distância)
- Applications
- Pesquisa sobre câncer colorretal; biologia do câncer colorretal em estágio inicial; modelagem do câncer colorretal com mutações nos genes APC/p53; avaliação da sensibilidade a medicamentos e de terapias direcionadas; imunologia do câncer colorretal; estudos com biobanco de HROC correspondentes aos pacientes
- Synonyms
- HROC 18
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line established by PD Dr. Linnebacher. Confirmed free of HBV, HCV, HIV.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Cell type
- Células epiteliais
- Tumourigenic
- Sim, em camundongos nude imunossuprimidos
- Ploidy status
- Aneuploide
- MSI status
- MSS
- Doubling time
- 30 horas
04Identifiers
- Citation
- HROC18 (número de catálogo da Cytion 300808)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0B45
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Beta-actina, osteopontina, PTEN
- Antigen expression
- CD15+, CD24+, CD44+, CD55+, CD58+, CD50+, CD54+, CD66acde+, CD71+, CD102+, CD326+, CD80-, CD86-, EpCAM+, HLA-A2+, EGFR+
- Mutational profile
- APC mutante, p53 mutante, K-Ras selvagem, N-Ras selvagem, H-Ras selvagem, B-RAF selvagem, PIK3CA mutante
- Viruses
- Isento de vírus patogênicos para o ser humano, como HBV, HCV e HIV.
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Split ratio
- 1 a 3
- Seeding density
- 2 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- A cada 3 a 5 dias
- Post-thaw recovery
- 1 a 2 semanas
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 65 anos
- Ethnicity
- caucasiano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Third-party agreements apply
- Yes