BT-20 细胞
Cell line · Product number 300130
The BT-20 cell line is a human breast adenocarcinoma cell line that was established in 1958 from the malignant tissue of a 74-year-old Caucasian female pa...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
BT-20 细胞系是一种人类乳腺腺癌细胞系，于 1958 年从一名 74 岁高加索女性患者的恶性组织中建立。该细胞系具有上皮样形态，常用于乳腺癌生物学研究，特别是探索激素对癌症生长的调控、基因表达以及乳腺癌治疗药物的疗效。
BT-20 细胞的特点是植入免疫功能低下的小鼠体内后能形成肿瘤，因此是一种有用的乳腺癌体内模型。这些细胞表达雌激素、孕激素和雄激素受体，因此与激素反应途径研究相关。此外，对 BT-20 细胞的基因分析还发现了乳腺癌中常见的 TP53 和 PIK3CA 等基因的突变，从而支持了它们在基因和药理学研究中的应用。
在体外，BT-20 细胞用于研究癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制。它们还被用来评估化疗药物的细胞毒性，因此对抗癌药物的临床前测试至关重要。BT-20 细胞对各种培养条件的适应性及其在体外的稳健生长使其成为癌症研究实验室研究乳腺癌潜在机制和开发新治疗策略的宝贵资源。
- Tissue
- 乳房、乳腺
- Disease
- 浸润性导管癌
- Synonyms
- BT 20
- BT20
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Tumourigenic
- 是，在裸鼠体内。形成二级腺癌
- Karyotype
- 模数=50，许多标记，以大的副中心为特征。(P87)超二倍体，异常包括染色体破碎、断裂、继发缢缩、易位、亚元中心和端中心标记
04Identifiers
- Citation
- BT-20（Cytion 目录号 300130）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0178
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- HLA A1、Bw16 (+/-)
- Isoenzymes
- PGM3，1，PGM1，1，ES-D，1，AK-1，1-2，G6PD，B，GLO-1，1-2，表型频率产品： 0.0115
- Oncogenes
- Wnt4 +, wnt7h +
- Mutational profile
- TP53 突变
- Reverse transcriptase
- 阴性
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12（1:1），w: 3.1 g/L 葡萄糖，w: 2.5 mM L-谷氨酰胺，w: 15 mM HEPES，w: 0.5 mM 丙酮酸钠，w: 1.2 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820400a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Seeding density
- 1×10⁴个细胞/平方厘米将在约6天内形成融合细胞层。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 74 年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes