Skip to content
HK-CRISPR-mEGFP-Seh1
Tissue
Nội cổ tử cung
Disease
Ung thư biểu mô tuyến

Documents

HK-CRISPR-mEGFP-Seh1

Cell line · Product number 300669

The HK-CRISPR-mEGFP-Seh1 cell line is engineered for precise genomic editing using the CRISPR/Cas9 system, targeting the Seh1 gene. Seh1 is part of the nu...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào HK-CRISPR-mEGFP-Seh1 được thiết kế để chỉnh sửa gen chính xác bằng hệ thống CRISPR/Cas9, nhắm vào gen Seh1. Seh1 là một thành phần của phức hợp lỗ nhân, có vai trò quan trọng trong vận chuyển giữa nhân và chất tế bào. Việc tích hợp protein huỳnh quang xanh lá cây tăng cường dạng đơn thể (mEGFP) cho phép quan sát Seh1, hỗ trợ nghiên cứu về vị trí và chức năng của nó trong tế bào.

Dòng tế bào này có giá trị trong nghiên cứu về vai trò của Seh1 trong các quá trình tế bào như phân bào và biểu hiện gen. Việc gắn nhãn huỳnh quang bằng mEGFP cho phép quan sát tế bào sống, hỗ trợ nghiên cứu các bệnh liên quan đến rối loạn phức hợp lỗ nhân, bao gồm một số loại ung thư và rối loạn thoái hóa thần kinh. Dòng tế bào HK-CRISPR-mEGFP-Seh1 kết hợp giữa sửa đổi gen và công nghệ hình ảnh tiên tiến để phục vụ nghiên cứu y sinh toàn diện.

Tissue
Nội cổ tử cung
Disease
Ung thư biểu mô tuyến

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a CRISPR knock-in of mEGFP at the Seh1 locus, supporting live-cell analysis of Y-complex dynamics. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào có hình dạng giống biểu mô với cấu trúc dạng đá mozaic

04Identifiers

Citation
HK-CRISPR-mEGFP-Seh1 (Số catalog của Cytion: 300669)
NCBI TaxID
9606
Depositor
Phòng thí nghiệm Ellenberg (EMBL)

05Expression and susceptibility

Protein expression
Seh1, mEGFP-tag

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
30 năm
Ethnicity
Người Mỹ gốc Phi