HK-CRISPR-NUP205-mEGFP

Dòng tế bào HK-CRISPR-NUP205-mEGFP là một dòng tế bào người được biến đổi gen nhằm nghiên cứu nucleoporin 205 (NUP205) và vai trò của nó trong phức hợp lỗ nhân. Được sửa đổi bằng CRISPR-Cas9 để gắn NUP205 với protein huỳnh quang xanh lá cây tăng cường dạng đơn phân (mEGFP), dòng tế bào này cho phép quan sát và theo dõi NUP205 trong tế bào sống, hỗ trợ nghiên cứu về cơ chế vận chuyển nhân và động học của phức hợp lỗ nhân.

NUP205 là thành phần quan trọng của phức hợp lỗ nhân, điều chỉnh vận chuyển phân tử giữa nhân và chất tế bào. Việc gắn mác NUP205 bằng mEGFP cho phép các nhà nghiên cứu quan sát vị trí và hành vi của nó theo thời gian thực dưới kính hiển vi huỳnh quang, làm cho dòng tế bào này đặc biệt hữu ích trong việc nghiên cứu các khía cạnh cấu trúc và chức năng của phức hợp lỗ nhân cũng như vai trò của chúng trong biểu hiện gen, xử lý RNA và chu kỳ tế bào.

Dòng tế bào HK-CRISPR-NUP205-mEGFP là công cụ mạnh mẽ để nghiên cứu các cơ chế vận chuyển nhân-chất tế bào và vai trò của phức hợp lỗ nhân trong sự cân bằng nội môi tế bào. Nó cũng có giá trị trong việc khám phá cách các rối loạn chức năng của phức hợp lỗ nhân góp phần vào các bệnh như ung thư và rối loạn thoái hóa thần kinh, cung cấp một mô hình mạnh mẽ để nâng cao hiểu biết của chúng ta về vận chuyển nhân và tác động của nó đối với sức khỏe con người.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.