الانتقال إلى المحتوى
TE-671
الأنسجة
العضلات
المرض
الساركوما العضلية الرهيبية
المرادفات
TE671, TE 671, TE671/RD

المستندات

TE-671

Cell line · رقم المنتج 300355

The original TE671 cell line was initiated by explant culture from biopsy fragments of a cerebellar medulloblastoma. The cell strain was isolated by picking ...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف
بدأ سلالة الخلايا الأصلية TE671 عن طريق الاستنبات الاستكشافي من أجزاء خزعة من ورم أرومي نخاعي مخيخي نخاعي. وقد تم عزل السلالة الخلوية عن طريق انتقاء عدد قليل من الخلايا الدائرية أو متعددة الطبقات أو متعددة الأضلاع التي تتخللها طبقات أحادية من الخلايا الدبقية اللحمية باستخدام ماصات باستور. شكّلت مستعمرات في وسط آجار طري. لم يتم ملاحظة العناصر العصبية أو الدبقية عند الفحص بالمجهر الإلكتروني ولم يتم اكتشاف أي فيروسات. تمتلك الخلايا مستقبلات أستيل كولين النيكوتين الوظيفية. لم يتم اكتشاف أي نشاطات لأسيتيل ترانسفيراز الكولين أو هيدروكسيلاز التيروزين. وقد كشفت الدراسات الوراثية الخلوية التي أجراها ستراتون وآخرون (1989) أن TE671 و RD هي مشتقات من نفس خط الخلايا من أصل الساركوما العضلية الرباعية.
الأنسجة
العضلات
المرض
الساركوما العضلية الرهيبية
المرادفات
  • TE671
  • TE 671
  • TE671/RD

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
النمط الكروموسومي
2ن=47، 42% منها تحتوي على 48 كروموسومًا

04المعرّفات

المرجع
TE-671 (كتالوج سيتيون رقم 300355)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1756

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
مستقبلات الأسيتيل كولين، مستقبلات البنزوديازيبين من النوع المحيطي
التعبير عن المستضد
فيمنتين+، ديسمين+، كيراتين+ (MNF-116)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم 50% من الوسط القاعدي + 40% من الحمض الأميني القاعدي + 10% من DMSO، أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناتج عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
7 سنوات