Gå direkte til indholdet
B-LCL-HROC24
Væv
Perifert blod
Sygdom
Karcinom
Synonymer
B-LCL CO24, Bc HROC24

Dokumenter

B-LCL-HROC24

Cell line · Varenummer 300861

B-LCL-HROC24 er en Epstein-Barr-virus (EBV)-immortaliseret human B-lymfoblastoidcellelinje, der er etableret ud fra B-lymfocytter isoleret fra enten tumorvæv...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

B-LCL-HROC24 er en Epstein-Barr-virus (EBV)-immortaliseret human B-lymfoblastoidcellelinje etableret fra B-lymfocytter isoleret fra enten tumorvæv eller perifert blod fra en voksen patient. Cellerne blev genereret ved ex vivo-infektion med EBV-holdig supernatant afledt af B95/8-marmosetcellelinjen i tilstedeværelse af cyclosporin A for at undertrykke T- og NK-celleudvækst. Efter flere ugers dyrkning blev der opnået stabil lymfoblastoid udvækst, hvilket resulterede i en kontinuerligt prolifererende monoklonal eller oligoklonal B-cellepopulation, der er egnet til langvarig in vitro-ekspansion.

Immunofenotypisk udviser B-LCL-HROC24 et modent og aktiveret B-celleprofil karakteriseret ved ekspression af CD19 og CD20 sammen med høje niveauer af aktiverings- og modningsmarkører såsom CD23 og CD80. Stærk ekspression af MHC klasse I- og klasse II-molekyler indikerer bevaret antigenpræsenterende kapacitet. Afhængigt af den enkelte klon kan der observeres variabel ekspression af differentieringsassocierede markører såsom CD27, CD38 eller CD138, hvilket afspejler forskellige stadier af B-cellemodning. Cellerne er negative for T-cellemarkører, hvilket bekræfter linjespecificitet.

Funktionelt udskiller B-LCL-HROC24 immunoglobulin af en defineret isotype (f.eks. IgG, IgM eller IgA), som forbliver stabil under langvarig dyrkning. De udskilte antistoffer kan opsamles fra kultur-supernatanter og anvendes til downstream-applikationer, herunder antigenbindingsassays, tumorcellegenkendelsesstudier eller identifikation af sygdomsassocierede antigener. Som en EBV-immortaliseret B-cellemodel udgør B-LCL-HROC24 en robust in vitro-platform til undersøgelse af humorale immunresponser, B-celleaktivering og -differentiering samt antistofmedierede mekanismer i forbindelse med tumorimmunologi eller systemiske immunresponser.

Væv
Perifert blod
Sygdom
Karcinom
Synonymer
  • B-LCL CO24
  • Bc HROC24

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Runde celler
Celletype
B-lymfoblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
B-LCL-HROC24 (Cytion katalognummer 300861)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_YD57

05Udtryk og modtagelighed

Overfladeantigener
CD19
Vira
Transformant: EBV

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % varmeinaktiveret FBS
Oddyrkning
Homogeniser forsigtigt cellesuspensionen i kolben ved at pipettere op og ned, og tag derefter en repræsentativ prøve for at bestemme celletætheden pr. ml. Fortynd suspensionen til en cellekoncentration på 1 x 105 celler/ml med frisk dyrkningsmedium, og fordel den justerede suspension i nye kolber til videre dyrkning.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
98 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk