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143B
Gewebe
Knochen, rechter Oberschenkelknochen
Krankheit
Osteosarkom
Synonyme
143b, 143 B, 143B TK-, 143B.TK-, 143BTK-, 143TK-, HOS-143B, HOS-143b, GM05887, GM05887A

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143B

Cell line · Artikelnummer 305232

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie 143B ist eine menschliche Osteosarkom-Zelllinie, die aus einem Knochentumor stammt. Aufgrund ihres hohen Metastasierungspotenzials und ihrer Fähigkeit, in vivo Osteosarkomtumore zu bilden, wird sie häufig in der Krebsforschung eingesetzt. Diese Zellen weisen mehrere Hauptmerkmale von Osteosarkomen auf, darunter die Expression von Osteoblastenmarkern und die Fähigkeit, Osteoid zu produzieren. Die 143B-Zelllinie ist besonders wertvoll für die Untersuchung der Mechanismen, die dem Fortschreiten und der Metastasierung von Knochenkrebs zugrunde liegen, sowie für die Prüfung potenzieller therapeutischer Wirkstoffe zur Behandlung von Osteosarkomen.

143B-Zellen sind für ihr schnelles Wachstum und ihre hohe Transfektionseffizienz bekannt, wodurch sie sich für genetische Manipulationen und verschiedene experimentelle Anwendungen eignen. Diese Zellen wurden in Studien eingesetzt, in denen die Rolle bestimmter Gene und Signalwege bei der Entwicklung von Osteosarkomen und der Resistenz gegen Chemotherapie untersucht wurde. Darüber hinaus dient die 143B-Zelllinie als Modell für die Erforschung der Wechselwirkungen zwischen Osteosarkomzellen und der Knochenmikroumgebung und ermöglicht so Einblicke in die komplexe Biologie von Knochentumoren.

Gewebe
Knochen, rechter Oberschenkelknochen
Krankheit
Osteosarkom
Synonyme
  • 143b
  • 143 B
  • 143B TK-
  • 143B.TK-
  • 143BTK-
  • 143TK-
  • HOS-143B
  • HOS-143b
  • GM05887
  • GM05887A

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Bezeichner

Quellenangabe
143B (Cytion Katalognummer 305232)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_2270

04Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
2 x 104 Zellen/cm²
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

06Spender

Alter des Spenders
13 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch