Mine otse sisu juurde
143B
Kude
Luu, parem reieluu
Haigus
Osteosarkoom
Sünonüümid
143b, 143 B, 143B TK-, 143B.TK-, 143BTK-, 143TK-, HOS-143B, HOS-143b, GM05887, GM05887A

Dokumendid

143B

Cell line · Toote number 305232

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Varud on väikesed
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

143B rakuliin on inimese osteosarkoomi rakuliin, mis on saadud luukasvajast. Seda kasutatakse sageli vähiuuringutes selle suure metastaatilise potentsiaali ja võime tõttu moodustada osteosarkoomi kasvajat in vivo. Nendel rakkudel on mitmeid osteosarkoomi põhilisi tunnuseid, sealhulgas osteoblastiliste markerite ekspressioon ja võime toota osteoidi. 143B rakuliin on eriti väärtuslik luuvähi progresseerumise ja metastaaside tekke aluseks olevate mehhanismide uurimiseks ning osteosarkoomi raviks mõeldud potentsiaalsete raviainete testimiseks.

143B rakud on tuntud oma kiire kasvu ja kõrge transfektsioonitõhususe poolest, mistõttu sobivad nad geneetiliseks manipulatsiooniks ja mitmesugusteks eksperimentaalseteks rakendusteks. Neid rakke on kasutatud uuringutes, millega uuritakse konkreetsete geenide ja signaaliradade rolli osteosarkoomi arengus ja resistentsuses keemiaravile. Lisaks on 143B rakuliin mudeliks osteosarkoomirakkude ja luu mikrokeskkonna vaheliste interaktsioonide uurimiseks, andes ülevaate luukasvajate keerulisest bioloogiast.

Kude
Luu, parem reieluu
Haigus
Osteosarkoom
Sünonüümid
  • 143b
  • 143 B
  • 143B TK-
  • 143B.TK-
  • 143BTK-
  • 143TK-
  • HOS-143B
  • HOS-143b
  • GM05887
  • GM05887A

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
143B (Cytioni katalooginumber 305232)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2270

04Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

06Annetaja

Doonori vanus
13 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia